土壤溶磷微生物及其对植物促生作用研究进展

溶磷微生物可使土壤中难溶性或不溶性磷转化成易于被植物吸收利用的磷,从而提高土壤供磷水平,此过程是农田磷源可再生利用的有效途径之一。对溶磷微生物的种类、在土壤中的生态分布特征、溶磷机制、对植物的促生作用及其机制进行了综述,并根据目前溶磷微生物的利用现状,对今后该领域的研究方向进行了展望。

番木瓜炭疽病生防木霉菌株的初步筛选

为利用生物防治的方法抑制番木瓜炭疽病,通过测定并综合分析比较各木霉菌株的抗生作用、产孢量、不同培养基下的抑菌率、生长速度以及耐药性,从90株木霉菌株中初步筛选出拮抗番木瓜炭疽菌的优良木霉菌(Trichodermaspp.)T05-049、T8-R、T05-035和T05-044等4株菌株,其产孢量分别为1.42×109、5.45×108、4.16×108、1.38×109;在1.01 mg/L特可多的条件下,均生长良好;该4个菌株在25、20、15和10℃下生长正常,耐温性较好,对炭疽菌(Colletotrichumspp.)的抗生作用分别为3、1、1、5;分别在PDA和番木瓜培养基上于25、20和15℃下培养,木霉对胶孢炭疽菌(C.gleosporioides)的抑制率在57.05%以上,对辣椒炭疽菌(C.capcisi)的抵制率在47.87%以上.

盐碱胁迫下不同水稻品种渗透调节物质及相关基因的变化

【目的】分析盐碱浓度、胁迫时间对不同水稻品种各龄苗有机渗透调节物质的影响及不同品种对盐碱胁迫响应的差异,为盐碱地改良水稻品种的选择及其敏感期防护提供理论依据。【方法】选择耐盐碱水稻品种长白9号和普通栽培品种吉粳78为材料,研究3个盐碱浓度(10,40,80mmol/L)、4个处理时间(24,48,72,84h)对3种苗龄(30,45,70d)水稻叶片脯氨酸、甜菜碱、肌醇含量及Δ1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)、甜菜碱醛脱氢酶(BADH1、BADH2)、肌醇单磷酸酶(IMP)基因表达量的影响,以正常水培的水稻为对照。【结果】正常水培条件下长白9号叶片脯氨酸、甜菜碱含量高于吉粳78。盐碱胁迫条件下,长白9号和吉粳78叶片的脯氨酸、甜菜碱和肌醇含量均上升,P5CS、BADH1、BADH2、IMP基因表达量也高于对照。40mmol/L NaCO3-NaHCO3处理较10和80mmol/L处理更有利于植株积累渗透调节物质及上调相关基因的表达。长白9号渗透调节物质含量及其基因表达量的变化远大于吉粳78。盐碱胁迫24和48h能使长白9号及时做出响应,并随着胁迫时间的延长甜菜碱、肌醇含量及BADH1、BADH2、IMP表达量持续升高,而吉粳78对盐碱胁迫响应较晚。2种水稻30,45d龄苗渗透调节物质含量的变化及相关基因表达量的变化均比70d明显。【结论】长白9号耐盐碱的特性与其植株体内渗透调节物质丰富且对盐碱胁迫响应快的生理现象有关。2种水稻对盐碱胁迫具有一致的生理响应敏感阈值,在耐受条件下,盐碱地种植水稻更适宜大苗移栽。

改善速冻水饺品质的研究

针对速冻水饺生产和流通中常见的质量问题水饺皮裂纹及色泽褐变等,运用正交实验的方法考察了淀粉添加剂、面粉中面筋含量、速冻速度等因素对饺子质量的影响程度,并阐述了通过添加适量的面制品改良剂、淀粉和加快速冻速度等来改善速冻水饺质量的方法。

水稻根际土壤溶磷菌的分离、鉴定及对水稻的促生作用

【目的】为明确水稻根际溶磷菌株溶磷能力及其对水稻植株及根际土壤磷含量的影响。【方法】利用溶磷圈法从水稻根际土壤中分离获得具有较强溶解Ca3(PO4)2能力的2株细菌NDW1和NDW3,根据16S r DNA对菌株进行鉴定。以NBRIP为基础培养基,通过正交试验对2株菌株利用氮源、碳源及初始p H进行优化,鉴定菌株的吲哚乙酸(IAA)分泌量,研究溶磷菌对水稻的促生作用,以及对土壤速效磷和水稻幼苗全磷含量的影响。【结果】菌株NDW1和菌株NDW3分别被鉴定为Enterobacter sp.和Serratia sp.,2株菌株溶磷的最佳条件组合均为葡萄糖、蛋白胨及初始p H 6。2株菌株24 h内最高溶磷量分别为294.95和312.93μg·m L-1,且都可分泌IAA。土培和沙培条件下,溶磷菌NDW3对水稻株高、根长、最大叶长及地上干质量都有明显的促进作用,并且NDW3在2种种植条件下均显著增加了根际土壤速效磷及水稻植株全磷含量。【结论】从水稻根际土壤分离获得2株溶磷能力较好的细菌菌株Enterobacter sp.NDW1和Serratia sp.NDW3,菌株NDW3对水稻的促生作用强于菌株NDW1。

大豆根际溶无机磷细菌Klebsiella sp.wj6的分离鉴定与溶磷特性分析

[目的]为了明确黑土种植的大豆根际溶磷菌的种类及不同溶磷菌溶无机磷的特性,并有效利用溶磷菌,增加黑土的可持续利用能力。[方法]以NBRIP为分离培养基从大豆根际土壤中分离到1株溶磷菌(命名为wj6),采用Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法对其进行鉴定;以NBRIP分离培养基为基础,利用L25(53)正交设计试验,从碳源、氮源及pH值3个方面对菌株wj6溶磷培养基进行优化;利用优化后的NBRIP培养基测定wj6溶解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4的特点以及溶磷过程中磷酸酶活性和葡萄糖脱氢酶活性。[结果]经Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法鉴定菌株wj6为Klebsiella sp.。菌株wj6以葡萄糖和蛋白胨为碳源和氮源,pH值为8时溶磷量最高;对Ca3(PO4)2、FePO4、AlPO4均有较强的溶解能力,最高溶磷量分别为409.28、60.59和32.90μg·m L-1。菌株wj6在溶解FePO4和AlPO4时受环境pH值的影响较大,当接种到pH值为8的溶磷培养基中,能溶解FePO4和AlPO4,而在培养基原液(pH3)中不具有溶磷能力;以Ca3(PO4)2为唯一磷源,在溶磷过程中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和葡萄糖脱氢酶活性先增加后减小,36 h内葡萄糖脱氢酶活性较大,与其他时间内酶活差异显著。[结论]从大豆根际分离到的溶磷菌Klebsiella sp.wj6在不同难溶性磷酸盐中溶磷能力差异较大,且溶磷受环境pH值的影响。磷酸酶和葡萄糖脱氢酶在溶磷过程中起重要作用。

大豆根际溶磷菌分离鉴定及溶磷过程中有机酸的分泌

【目的】明确吉林省地区大豆Glycine max根际溶磷菌的种类及溶磷特点。【方法】利用溶磷圈法筛选溶磷菌,16S rDNA序列测定和Vitek2生理生化系统对菌株进行分析鉴定。测定菌株生长量、溶磷量、培养基pH变化与有机酸的产生。【结果】从大豆根际土壤中分离获得4株溶磷菌株WJ1、WJ3、WJ5和WJ6。4个菌株分别属于假单胞菌属Pseudomonas sp.、肠杆菌属Enterobacter sp.、苍白杆菌属Ochrobacterum sp.和克雷伯菌属Klebsiella sp.。4株溶磷菌96 h内最大溶磷量分别为558、478、596和586μg·m L-1。甲基红试验和培养物p H测定结果表明:4个菌株在溶磷过程中可使培养物的pH下降,当p H小于4时,会明显阻碍菌株的生长。p H为5时,WJ1和WJ3的生长受到轻微的影响,WJ5和WJ6能正常生长。GC-MS对菌株在溶磷过程中产生的有机化合物的分析表明,4菌株均分泌多种有机酸,其中α-酮戊二酸在WJ1、WJ3和WJ6菌株溶磷过程中大量产生。【结论】4菌株具有较好的溶磷能力,溶磷过程中分泌有机酸种类不完全相同,有机酸的分泌造成培养基的p H降低,影响菌体生长,而菌体数量决定各菌株的溶磷量。

乳酸菌―芽孢菌发酵黄芪对小鼠免疫功能作用的研究

试验旨在探讨乳酸菌―芽孢菌发酵黄芪对小鼠免疫功能的影响。将84只小鼠分成6组,每组14只,分别为生理盐水组(阴性对照组)、未发酵黄芪组(阳性对照组,黄芪生药浓度为150mg/mL)、试验Ⅰ组(黄芪生药浓度为60mg/mL)、试验Ⅱ组(黄芪生药浓度为90mg/mL)、试验Ⅲ组(黄芪生药浓度为120mg/mL)、试验Ⅳ组(黄芪生药浓度为150mg/mL)。小鼠采用灌胃方式给药30d,最后处死小鼠测定其体重、免疫器官(胸腺和脾脏)系数、免疫因子(IgG、IL-6、sIgA)。结果显示,给药30d后,试验组小鼠体重明显升高;试验Ⅰ组免疫器官系数极显著高于对照组(P<0.01);试验Ⅲ、Ⅳ组免疫因子IgG和sIgA均极显著高于对照组(P<0.01)。由此可知,乳酸菌―芽孢菌发酵黄芪对小鼠的免疫功能有很好的促进作用。

枯草芽孢杆菌B7对肉鸡生长性能及免疫性能的影响

试验旨在研究肉鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌B7对其生长性能及免疫功能的影响。将200只1日龄健康爱拔益加肉雏鸡随机分成5组,每组4个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加2×105、5×105、8×105和1×106 CFU/g枯草芽孢杆菌B7。试验期42d。结果表明:①在整个试验阶段,除29～35日龄外,试验Ⅱ组肉鸡的日增重均高于对照组,料重比均低于对照组;36～42日龄时,与对照组相比,试验Ⅱ组肉鸡的日增重显著提高了10.25%(P<0.05),料重比显著降低了14.83%(P<0.05)。②28日龄时,试验Ⅱ组脾脏指数高于对照组31.96%,差异显著(P<0.05);除14和28日龄外,试验Ⅱ组法氏囊指数均显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ组新城疫抗体效价处于较高水平,28和35日龄时,试验Ⅱ组新城疫抗体效价分别高于对照组16.04%和18.09%,差异显著(P<0.05);21、35和42日龄时,试验Ⅱ组血清中IgG含量分别高于对照组81.94%、46.67%和15.63%,差异显著(P<0.05)。由此可知,添加5×105 CFU/g枯草芽孢杆菌B7能够提高肉鸡的生长性能,增强肉鸡的免疫功能,综合比较,试验Ⅱ组的5×105 CFU/g为枯草芽孢杆菌B7的最佳添加量。

盐碱土添加外源溶磷菌液对水稻渗透调节能力及光合指标的影响

【目的】探讨添加外源溶磷菌液后不同程度盐碱土壤种稻的可行性,为盐碱地改良提供参考与借鉴。【方法】以长白9号水稻品种为试验材料,设置黑土、盐碱土(V(黑土)∶V(原状盐碱土)=3∶1)、盐碱土加菌、半改良盐碱土、半改良盐碱土加菌5个土壤处理,采用盆栽试验研究盐碱土和半改良盐碱土添加溶磷菌液对水稻整个生育期根茎叶渗透调节物质、叶片Δ1-吡咯啉-5-羧基合成酶(P5CS)、甜菜碱醛脱氢酶Ⅰ(BADHⅠ)、高钾离子通道(HKT)相关基因表达量、光合作用及产量的影响。【结果】盐碱土种植的长白9号根茎可溶性糖含量、根叶可溶性蛋白含量和叶片脯氨酸含量均低于黑土。除根中甜菜碱含量外,盐碱土加菌后水稻根、茎和叶中4种渗透调节物质在各时期均有所增加。盐碱土和半改良盐碱土接菌前后,叶中P5CS和BADHⅠ基因表达变化规律一致,盐碱土加菌可提高基因表达量,半改良盐碱土加菌可降低基因表达量。HKT1;1和HKT1;3基因在盐碱土、半改良盐碱土及加菌各处理间表现出相同的变化规律,加菌处理均可降低其表达量。加菌土壤水稻植株的净光合速率高于相对应的未加菌土壤,叶片光合作用明显改善,水稻产量增加。【结论】溶磷菌液的添加对半改良盐碱土种植水稻的影响要弱于盐碱土壤,溶磷菌液配合黑土与原状盐碱土混合种稻是一条行之有效的改良盐碱土的方法。

大豆卵磷脂和乐果有机磷降解菌的分离鉴定及酶活性比较

【目的】明确2株有机磷降解菌Yj2和Yj3对大豆卵磷脂和乐果有机磷的降解特性及酶活性。【方法】利用16S r DNA鉴定从大豆土壤中分离得到的Yj2和Yj3菌株,在菌株最佳生长条件下,测定了不同磷源时菌体的酶活性并分级纯化了有机磷降解酶。【结果】Yj2为醋酸钙不动杆菌Acinetobacter sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为硫酸铵,p H为8;Yj3为芽孢杆菌Bacillus sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,p H为9。大豆卵磷脂为磷源时,Yj3的菌体生长情况稍优于Yj2。乐果为磷源时,Yj2的菌体生长情况稍优于Yj3;72 h内Yj2酸性和碱性磷酸酶活性整体高于Yj3,而有机磷降解酶活性低于Yj3。硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析分别从Yj2和Yj3菌体中成功分离纯化了有机磷降解酶,SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白均为单一条带。Yj2硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的7.77倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.35倍。Yj3硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的5.07倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.53倍。【结论】菌株Acinetobacter sp.Yj2和Bacillus sp.Yj3都具有降解大豆卵磷脂及乐果有机磷的特性,对有机磷降解起主要作用的是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及有机磷降解酶,它们在2株菌株对大豆卵磷脂和乐果降解过程中所起的作用有明显差异。可从Yj2和Yj3菌体分离纯化获得提纯倍数较高的有机磷降解酶蛋白。

不同溶磷菌菌液对盛花期大豆生长的影响

溶磷菌能将土壤中难溶性无机磷酸盐转化为植株能吸收利用的可溶性磷,从而提高土壤中有效磷含量,促进植株生长发育。分别采用从大豆根际土壤中分离的溶磷菌wj1、wj3及其wj1+wj3混合菌液施入土壤中,研究溶磷菌株对吉林省地区主推大豆品种吉育47、吉育99和吉育406盛花期的光合作用、抗逆作用、生长量以及含磷量的影响。结果表明:溶磷菌菌液处理对3个品种大豆有不同程度的促生作用。wj1和wj3单菌种菌液处理增加了3个品种大豆盛花期的光合作用,混合菌可显著降低盛花期3个品种的蒸腾速率,从而提高植株水分利用率。wj3菌液对大豆盛花期生长量的影响较为显著,对根瘤的生长也有良好的促进作用,wj1和混合菌明显增强3个大豆品种植株的抗性。wj3和混合菌液对吉育406叶片中全磷量影响不显著,其它大豆根茎叶的全磷含量均高于对照。其中,wj1处理的根茎叶中全磷含量与对照相比达到显著水平。因此,wj1的综合促生能力优于wj3,更适合应用于农业生产中。

2014年饲料及饲料原料中黄曲霉毒素B_1污染状况的分析

为了解我国饲料及原料中黄曲霉毒素B1的污染情况,于2014年对来自全国的602份送检样品进行了黄曲霉毒素B1的ELISA检测,并对检测结果进行分析。结果表明,黄曲霉毒素B1污染主要存在于玉米副产物和蛋白原料中,小麦及加工副产物污染较轻。

不同酶酶解鸡胚蛋白工艺比较研究

以鸡胚蛋白为底物,通过单因素及正交试验,确定菠萝蛋白酶和胰蛋白酶对鸡胚蛋白水解的最佳工艺。结果表明:菠萝蛋白酶酶解鸡胚蛋白最佳工艺条件为底物质量分数6%、酶解温度55℃、pH5、酶解时间6h、酶与底物质量比([E/S])为1.5%,水解度可达45.53%;胰蛋白酶酶解鸡胚蛋白最佳工艺条件为底物质量分数6%、酶解温度55℃、pH5、酶解时间6h、酶与底物质量比([E/S])为1.5%,水解度可达38.17%。菠萝蛋白酶和胰蛋白酶在最佳水解条件下水解度分别为45.53%、38.17%,可溶性蛋白含量分别为20.15、22.69mg/mL,多肽含量分别为62.55、50.26mg/mL。菠萝蛋白酶比胰蛋白酶更适宜酶解鸡胚蛋白。

益生菌发酵中草药复方防治鸡球虫病研究

研究旨在探讨益生菌发酵中草药防治鸡球虫病的效果。将210只鸡分成7组,分别为不感染不给药组(阳性对照组)、感染不给药组(阴性对照组)、西药组、中药复方组、乳酸菌发酵复方组、芽孢菌发酵复方组、酵母菌发酵复方组7组。结果显示,攻毒后,7组平均血便值依次为0、1.667、0.333、1、1.667、1、1.667,相对增重率依次为100%、54.2%、80.2%、76.3%、60.4%、74.8%、74.2%,死亡率依次为0、40%、10%、30%、30%、50%、20%,抗球虫指数依次为200、48.2、115.2、78.3、63.4、54.8、109.2。试验结果表明,酵母发酵复方组防治鸡球虫效果优于其余各给药组,略低于西药组。

复合菌株发酵中药复方对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效研究

探讨复合菌株发酵中药复方防治鸡球虫病的研究。将240只肉鸡分成8组,分别为不感染不给药组、感染不给药组、西药组、中药复方组、酵母乳酸发酵组、酵母芽孢发酵组、乳酸芽孢发酵组、酵母乳酸芽孢发酵组。依据抗球虫指数对各给药组治疗鸡柔嫩艾美尔球虫病的效果进行评价。结果表明,酵母乳酸发酵组存活率为90%,ACI为102.6,西药组存活率为60%,ACI为115.2。由此可知,酵母乳酸发酵组防治鸡球虫效果优于其余各给药组,略低于西药组。

生物可乐在蛋鸡生产中的应用效果

研究利用发酵罐生产生物可乐后,供给2万只蛋鸡自由饮用,并设定同批次同数量蛋鸡作为对照,进行蛋鸡生产效果研究。结果表明,试验期内饮用生物可乐组试验4周产蛋率分别提高0.85%、2.20%、3.68%、4.70%,后3周差异显著(P<0.05),料蛋比各周均有降低,从第2周开始差异显著(P<0.05),平均蛋重无显著差异(P>0.05)。说明给蛋鸡饮用生物可乐可以显著提高鸡产蛋率,降低料蛋比。

Serratia sp. NDW3 GADH小亚基基因ga2dh的克隆及表达分析

【目的】克隆葡萄糖酸脱氢酶(GADH)小亚基基因ga2dh并进行鉴定。【方法】研究水稻根际细菌Serratia sp.NDW3溶磷过程中菌株溶磷量、GADH活性与ga2dh基因表达量的变化,对ga2dh基因进行克隆和生物信息学分析,并检测ga2dh基因在大肠埃希菌BL21中的表达。【结果】Serratia sp.NDW3溶磷过程中ga2dh基因的相对表达量在12 h最大,GADH活性在24 h达到最大值,NDW3溶磷量在36 h后趋于稳定。从Serratia sp.NDW3菌株中克隆获得了781 bp的ga2dh基因序列,生物信息学分析发现该序列与Serratia sp.SCBI菌株的基因相似性为99.62%,编码的蛋白属于葡萄糖酸脱氢酶亚基3超家族,主要由3个α-螺旋构成,且氨基酸序列中包含有位于胞内、胞外和跨膜的区域。ga2dh基因在大肠埃希菌BL21体内表达,能够使得菌体GADH的活性显著增加。【结论】Serratia sp.NDW3菌株溶磷的主要机制依赖于直接氧化途径,ga2dh基因编码的小亚基不仅对GADH活性起重要作用,也是介导GADH跨膜结构的重要组成部分。

野生大豆根瘤GmGS1γ基因序列分析及原核表达

旨在明确大豆谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)基因家族各成员的结构特点及功能。利用同源克隆的方法从野生大豆根瘤克隆Gm GS1γ基因。生物信息学分析表明,ORF为1 071 bp,与大豆GS1γ(AF363022.1)部分序列的相似性为100%,与序列号为X81700.1相似性为99%。该序列具备植物GS的两个保守结构域,GS beta-Grasp功能区(17-97 aa)和GS催化功能区(103-350 aa)。系统发生树表明该基因编码的GS可能属于胞质2型同工酶。该基因可以在大肠杆菌DE3.0中表达,蛋白分子量为44 k D。

肉鸡腹泻的原因及防治

腹泻是肉鸡的常见病,导致饲料转化效率降低,机体免疫力下降,影响了肉鸡饲养的经济效益,是饲养户最为头痛的问题之一。本文就肉鸡腹泻的原因及防治措施作一综述。