固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定鸡粪中37种抗菌药物的含量

建立了固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(SPE-UPLC-MS/MS)快速测定鸡粪中37种抗菌药物含量的方法。鸡粪经冻干制备,80%乙腈(含0.1%甲酸)提取,Oasis PRiME HLB通过式固相萃取净化后,利用UPLC-MS/MS测定抗菌药物含量。结果表明,37种抗菌药物浓度在0.40~200.0ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))大于0.996,检出限(LOD)为1μg/kg,定量限(LOQ)为4μg/kg。37种抗菌药物在3个浓度添加标水平(LOQ、5倍LOQ、10倍LOQ)下的回收率为63.5%~104.2%,批内相对标准偏差为1.47%~10.5%,批间相对标准偏差为2.39%~14.2%。所建立方法准确、快速、灵敏、稳定,可实现鸡粪中37种抗菌药物的同时快速测定。

提高母牛繁殖率和犊牛成活率的技术措施

母牛的繁殖效率是养牛业的关键指标之一,繁殖率越高,经济效益越大。母牛繁殖率包含配种率(即配种覆盖率和成功率)、妊娠成功率、分娩率、犊牛存活率等。同时,提高犊牛存活率不仅有助于养牛场的可持续发展,也能在养殖实践中为农场主创造更大的经济效益。本文初步探讨提升母牛繁殖效率及犊牛存活率的饲养技术,为养牛场提供技术参考。

刺五加多糖对雏鸡脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的影响

为了研究雏鸡注射不同浓度刺五加多糖(ASPS)后脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的变化情况,将60只1日龄雏鸡随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,10日龄起对低、高剂量组雏鸡分别皮下注射免疫50和200 mg/m L的ASPS 0.2 m L,对照组雏鸡以相同方式注射等体积的生理盐水,连续注射4 d。于末次免疫后第7天和第14天,从每组中分别随机选取5只雏鸡,取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的定位分布。结果显示,与对照组比较,低、高剂量组在注射后的7 d和14 d ASPS均能增加脾脏中CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的数量,由CD3+T淋巴细胞构成的脾脏特征性结构-动脉周围淋巴鞘(PALS)的面积也显著增加,红髓中CD3+T淋巴细胞也明显增多,分布范围逐渐增加;同时,由Bu-1+B淋巴细胞构成的椭球周围淋巴鞘(EALS)的面积也明显增加,红髓和白髓中的浆细胞数量显著增多,并在注射后14 d时出现生发中心。与对照组比较,高剂量组和注射后14 d时上述变化趋势更为明显。结果表明,ASPS能够增加脾脏中T、B淋巴细胞的数量,并且能够影响其在PALS、EALS等脾脏特征性结构中的定位分布,从而从组织学角度进一步证明ASPS对鸡免疫功能具有显著的增强作用。

热应激对鹅小肠形态结构及肥大细胞影响的研究

采用肥大细胞研究的一些常规组织化学技术与形态学方法,对吉林白鹅小肠各段形态结构及小肠中肥大细胞数量、分布变化进行观察,进而探讨热应激对鹅小肠发育的影响。结果显示,对照组白鹅小肠形态结构完整,肠绒毛排列整齐;十二指肠中肥大细胞多于空肠和回肠;随日龄增加,肥大细胞数量随之增加。热应激组小肠各段肠黏膜结构不完整,肠绒毛断裂,十二指肠损伤最严重;小肠各段肥大细胞的数目明显多于对照组的小肠各段。表明热应激在一定程度上抑制了吉林白鹅小肠黏膜结构和免疫功能的正常发育。

液质联用法测定饲料原料乳清粉中的喹烯酮含量

建立了液质联用法测定饲料原料乳清粉中喹烯酮含量的方法。饲料原料乳清粉经20%乙腈溶液(含0.2%甲酸)超声提取,PRiME HLB固相萃取柱净化,0.22μm滤膜过滤,经液质联用仪基质加标外标法定量测定。试验结果表明,喹烯酮浓度在20～1 000 ng/ml范围内呈良好的线性关系(R^2=0.999 1)。向空白乳清蛋白粉中添加喹烯酮含量为20、50、100、500μg/kg时,回收率在79.9%～90.8%之间,定量限为10μg/kg。本检测方法具有较高的准确度、灵敏度、稳定性,可满足饲料原料乳清粉中喹烯酮的含量检测。

MicroRNAs对巨噬细胞的调节作用

巨噬细胞是一种抗原递呈细胞,同时具有很强的吞噬和消化异物抗原的能力,是固有免疫系统的主要效应细胞之一。巨噬细胞存在于机体的各个组织内,几乎参与机体的每一个生物过程,从发育、稳态到对病原体的免疫应答[1],在抗炎、抗纤维化、抗癌的治疗方面起着重要的作用。miRNA一种微小的未编码的RNA,可以对基因表达进行调控,直接抑制目的基因mRNA的表达,参与各种生物功能的调节,

饲料中尼卡巴嗪含量高效液相色谱检测方法的建立

为了建立快速、准确检测饲料中尼卡巴嗪含量的方法,试验采用高效液相色谱法,以N,N-二甲基甲酰胺为提取试剂,将饲料样品经过简易提取后上机检测,以外标法计算含量,检测该方法的精密度、线性、准确度、耐用性、稳定性、检测限与定量限。结果表明:该检测方法精密度良好,尼卡巴嗪上机液浓度在1.25~20μg/mL时呈良好的线性关系(R^(2)=0.9999);添加浓度范围在12.5~50μg/g时,平均回收率为99.0%。耐用性试验平均回收率为99.9%和99.6%,RSD值分别为0.47%和1.25%;120 h内样品检测结果稳定,RSD值为0.27%;检测限为1 mg/kg,定量限为3 mg/kg。说明该方法精准度高,重现性及仪器适用性好,适用于成品饲料、自配饲料或饲料药物添加剂中尼卡巴嗪含量的检测。

沙门氏菌诱导鸡生殖道产生免疫反应的研究进展

沙门氏菌可以通过鸡蛋(胚)造成垂直传播,给家禽养殖带来严重的经济损失,同时沙门氏菌还是引起人类食源性疾病的主要病原菌之一,许多国家出现了由沙门氏菌污染的禽蛋、禽肉等禽类产品造成的食品安全问题[1]。有些血清型的沙门氏菌还是人畜共患性沙门氏菌,可以使人类出现某些疾病。

不同日龄蛋鸡气管黏膜中免疫细胞分布的变化规律

为了解蛋鸡气管黏膜不同时期的免疫状态,选择不同日龄海兰白蛋鸡的气管组织,利用免疫组织化学方法研究不同免疫细胞的出现、定位分布及数量变化。结果显示,气管黏膜中免疫细胞出现较晚,直至出壳后7日龄,气管黏膜中才有部分免疫细胞出现。从7日龄开始一直持续到35日龄,除MHC-Ⅱ^+细胞外,气管黏膜中的所有免疫细胞数量和分布都无显著变化,此阶段CD3^+T淋巴细胞以CD8+T淋巴细胞为主,B淋巴细胞以IgM^+细胞为主。56日龄至90日龄时,气管黏膜中各种免疫细胞显著增多,形成了许多淋巴聚集物,特别是在黏膜固有层底端开始形成生发中心,CD3^+T淋巴细胞分布在生发中心周围的滤泡间区域,形成了典型的黏膜相关性淋巴组织结构特征,即形成气管相关性淋巴组织,此阶段CD3^+T淋巴细胞显著高于Bu-1^+B淋巴细胞,而且CD3^+T淋巴细胞以CD8^+细胞为主,B淋巴细胞此时以IgA^+细胞为主,巨噬细胞不断迁移,黏膜固有层及上皮中巨噬细胞继续增多,而黏膜下层及软骨纤维膜中却减少。结果表明,蛋鸡气管黏膜中免疫细胞的分布和数量都呈现日龄相关性变化,并且在56日龄时形成气管相关性淋巴组织。

蛋鸡输卵管中肥大细胞发育情况的观察

采用甲苯胺蓝染色,观察蛋鸡输卵管中肥大细胞的形态和分布,探究输卵管中肥大细胞的发育规律。结果显示,在56日龄首次观察到输卵管中肥大细胞;随着日龄的增长肥大细胞数目增加,210日龄时达到最大值。肥大细胞主要分布于输卵管的上皮下、黏膜固有层、肌层等部位,具有围绕血管分布的特点。漏斗部中肥大细胞数目最多,峡部最少。结果表明,输卵管中肥大细胞210日龄时达到最大值,较肠道发育晚,这一结果为预防蛋鸡生殖道疾病奠定了理论基础。

乳酸菌协同新城疫疫苗对雏鸡肺脏树突状细胞的影响

将1d雏鸡随机分为4组,A,B组分别于1-7d喷雾免疫乳酸菌菌液,7d时对A,C组滴鼻点眼免疫新城疫弱毒苗。分别于1,4,7,14,21和35d取肺脏制作冰冻切片,通过使用CD11c单克隆抗体进行免疫组织化学染色检测雏鸡肺脏中树突状细胞变化情况。结果显示：树突状细胞数量随着天数增长其不断增多,主要分布于支气管相关性淋巴组织与三级支气管气道内壁;乳酸菌与新城疫疫苗均能刺激雏鸡肺脏相关淋巴组织发育,促进树突状细胞增殖;乳酸菌与新城疫疫苗协同作用效果更显著。

口服黄芪多糖对雏鸡十二指肠IgA^+细胞分布的影响

为探讨雏鸡口服不同浓度黄芪多糖(APS)后肠道分泌型IgA+抗体生成细胞(IgA+细胞)的分布情况,将80只1日龄雏鸡随机分为4组:3组试验组和1组对照组,每组20只,10日龄起对3个试验组雏鸡分别定时口服免疫1、2、4 mg/m L的APS 0.5 m L,对照组雏鸡以相同方式口服相同剂量的生理盐水,连续免疫4 d。于末次免疫后第1、7、14、21、28天,从每组中分别随机选取4只雏鸡,取其相同部位的十二指肠肠段,采用免疫组织化学双重染色方法分析十二指肠内IgA+细胞的变化情况。结果显示,试验组雏鸡十二指肠IgA+细胞表达率明显高于对照组,具有显著差异或极显著差异(P<0.05或P<0.01);不同剂量黄芪多糖免疫雏鸡后三者间的结果差异显著(P<0.05)。本试验结果表明,口服黄芪多糖可增强雏鸡十二指肠黏膜的免疫功能。