Caco-2细胞单层模型的建立与验证

目的研究建立Caco-2细胞模型的方法,并确认Caco-2细胞模型的正常生长特性,以在日常培养中进行监控。方法常规培养条件下,Caco-2细胞以每1 mL含8×104个的接种密度接种于Millicell插入式培养皿中,培养21 d后用光镜、电镜、细胞密度测定等方法检查细胞的形态学及生长特点,测定碱性磷酸酶活性、跨膜电阻、荧光素钠透过量以检验细胞单层的极化现象和致密程度。结果Caco-2细胞单层在生长10 d以后均匀、致密,21 d后微绒毛、碱性磷酸酶、紧密连接等呈不对称分布,跨膜电阻达到600Ω.cm2,荧光素钠透过量为4.16μg.h-1.cm-2,而同样条件下空白膜的透过量大于240μg.h-1.cm-2。结论本培养条件下,Caco-2细胞单层形态与小肠上皮细胞类似,跨膜电阻、标志物透过量均达到要求,可以作为研究小肠药物转运过程的体外模型。

长春碱PCL-PEG-PCL纳米粒的制备及质量评价

目的:制备负载长春碱的PCL-PEG6000-PCL纳米粒,并研究其理化性质及体外抗肿瘤活性。方法:采用开环聚合法制备PCL-PEG6000-PCL三嵌段元共聚物,通过共沉淀法制备了长春碱的PCL-PEG6000-PCL纳米粒,并测定其形态、粒径及多分散度、粒子产率、载药率和包封率、体外释放度,采用MTT法考察长春碱纳米粒对人白血病细胞耐药株K562/A02的细胞毒性。结果:透射电镜结果表明:得到了具有核-壳结构的球形粒子,并且纳米粒的平均粒径为(185±2.7)nm,载药率和包封率分别为28.83%和86.52%,体外释放研究表明:长春碱从纳米粒中的释放量(9h)达70%以上,24h释放基本完全。负载长春碱的纳米粒对K562/A02的抑制率比同浓度下长春碱溶液组显著增加。结论:PCL-PEG-PCL纳米粒可以作为长春碱的载体,所得粒子形状规则,包封率高,性质稳定,药物释放缓慢。长春碱经过PCL-PEG-PCL纳米粒的包裹后,对K562/A02的细胞毒性显著增强。

抵当汤及其加味方体外抗肿瘤活性研究

目的探讨抵当汤及分别加入柴胡、桂枝、黄芪3个加味方汤剂对人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌HCT-28细胞、人肝癌HepG-2细胞的体外抗肿瘤活性的影响。方法用MTT法研究抵当汤及3个加味方制剂对MCF-7细胞、HCT-28细胞、HepG-2细胞的生长抑制作用。结果抵当汤对MCF-7、HepG-2细胞有明显的生长抑制作用(P<0.01),分别加入柴胡、桂枝、黄芪3个加味方汤剂对3种癌细胞生长抑制作用有明显提高(P<0.01);4种汤剂在72 h内对MCF-7、HCT-28细胞的毒性呈时间依赖性,IC50值在加味方后显著降低,加入柴胡、桂枝方IC50值可减少至原方的0.79倍至0.25倍。结论抵当汤对体外肿瘤细胞有活性作用,而加入柴胡、桂枝、黄芪的3个加味方活性作用均大于原方抵当汤活性作用,其中加入柴胡、桂枝的活性作用强于黄芪,抵当汤及加味方对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制最为明显。

壳聚糖包覆左旋多巴脂质体冻干制剂的制备及大鼠口服药动学

目的:制备壳聚糖包覆的左旋多巴脂质体以增加左旋多巴生物利用度,减少血药浓度波动;研究冻干的最佳处方及工艺。方法:逆相蒸发法制备左旋多巴脂质体并以壳聚糖包覆,采用冷冻干燥法制备脂质体冻干制剂,单因素实验考察不同因素对冻干后包封率的影响;高效液相色谱法研究大鼠口服壳聚糖包覆的左旋多巴脂质体的药动学。结果:最佳冻干处方为:磷脂浓度50mg/mL,药脂比1∶10,壳聚糖浓度0.17%,冻干保护剂蔗糖用量2%。其包封率为(34.34±0.65)%(n=6)。与溶液组相比,大鼠口服壳聚糖包覆的左旋多巴脂质体后血药浓度达峰时间后延,且长时间维持在较高水平,生物利用度提高到溶液组的400%以上。结论:选用合适冻干工艺可以得到包封率大于30%的左旋多巴脂质体冻干制剂。壳聚糖包覆脂质体能够提高左旋多巴生物利用度,减少血药浓度波动。

海藻酸钠包覆的降钙素脂质体的制备和体内外黏附性质

制备海藻酸钠包覆的脂质体,并对其黏膜黏附性质进行研究。采用薄膜水化法制备了包封率为(86.2±2.3)%的带正电荷的降钙素脂质体,并用不同黏度的海藻酸钠对脂质体进行包覆,包覆后的脂质体实现了电荷反转。通过黏蛋白-颗粒结合法、组织匀浆法和激光共聚焦显微镜法分别对海藻酸钠包覆脂质体的体内外黏附性质进行研究,黏蛋白-颗粒结合法研究结果表明:海藻酸钠可以与黏蛋白颗粒结合使其电位发生变化,组织匀浆法研究结果表明:海藻酸钠包覆脂质体能够增加肠道中荧光标记物的含量,并且随着海藻酸钠黏度的增加,肠道中荧光标记物的含量增大。激光共聚焦显微镜法研究表明:高黏度的海藻酸钠包覆脂质体与未包覆脂质体相比表现出了更强的荧光强度,海藻酸钠包覆脂质体与未包覆脂质体相比具有良好的黏膜黏附特性,且这一特性随着海藻酸钠黏度的增加而增大。

针对骨肿瘤的二级靶向盐酸米托蒽醌纳米粒的制备及体内外性质评价

薄膜分散法制备了阿伦磷酸(ALN)配基和叶酸(FOL)配基共同修饰的二级靶向盐酸米托蒽醌(MTO)纳米粒(ALN-FOL-MTO-NLCs)。ALN-FOL-MTO-NLCs经原子力显微镜观察呈较规则类球体,平均粒径为(45.9±2.7)nm,Zeta电位为-(16.78±2.17)mV,包封率为(99.7±0.1)%。体外研究中ALN-FOL-MTO-NLCs显示出良好的骨盐吸附能力和K562细胞主动靶向能力,1 h内72.4%的纳米粒能吸附于羟基磷灰石,其K562细胞摄取量是普通纳米粒(MTO-NLCs)的3.19倍。高效液相色谱法研究了ALN-FOL-MTO-NLCs大鼠体内药代动力学及小鼠体内组织分布行为,其大鼠血浆AUC分别为MTO-NLCs和药物水溶液(MTO-INJ)的5.0和63.1倍,小鼠股骨AUC是叶酸单靶向制剂(FOL-MTO-NLCs)和药物水溶液(MTO-INJ)的3.7和5.0倍,且与FOL-MTO-NLCs相比,有效降低了药物在肝、脾、心、肾的分布,进一步降低了药物毒性。因此,与MTO-INJ和MTO-NLCs相比,ALN-FOL-MTO-NLCs具备良好的长循环效果,靶向骨组织的能力增加,且具备良好的肿瘤细胞靶向能力。

研究型药学本科毕业实习及对前期教学的思考

人才的核心竞争力是创新能力,而创新能力的培养需要重构新的教学模式。这种能力的获得不仅仅体现在实践教学环节,同样体现在课堂教学之中,应该融贯于人才培养的全过程。该文就如何开展研究型药学专业本科毕业实习提出重点环节,对药学专业前期教学工作提出三个转变,为研究型药学专业毕业实习工作提供一条可借鉴的思路。

热熔挤出法制备吲哚美辛共晶及其溶出度研究

为提高吲哚美辛的溶出度,采用热熔挤出法制备吲哚美辛-烟酰胺共晶。以温度和转速为变量考察最佳制备条件,联合热重分析(TGA)、含量测定和有关物质测定评价制备中的热稳定性,通过差示扫描量热法(DSC)、傅里叶红外变换光谱法(FTIR)和粉末X射线衍射法(PXRD)进行物相分析,并评价共晶的溶解度和溶出度优势。结果表明:热熔挤出法在115℃下能成功制备吲哚美辛-烟酰胺共晶,在热熔挤出过程中存在低共熔现象,该共晶明显提高了吲哚美辛在各介质中的溶解度、溶出速率和溶出度。通过热熔挤出法制备难溶性药物共晶能明显改善其溶解性,为难溶性药物的开发和共晶技术的发展提供新的思路。

羟基红花黄色素A磷脂复合物的制备及理化性质研究

目的:确定羟基红花黄色素A与大豆磷脂形成复合物的最佳工艺,并对其理化性质进行研究。方法:以羟基红花黄色素A与大豆磷脂的复合率为评估标准,采用单因素考察进行系统研究,对所制得的复合物进行UV、DSC、IR等分析,并考察其在正辛醇中的溶解性能。结果:该制备方法的复合率达98.7%,研究表明羟基红花黄色素A磷脂复合物是以非共价键结合;羟基红花黄色素A磷脂复合物明显改善羟基红花黄色素A在正辛醇中的溶解性能。结论:羟基红花黄色素A磷脂复合物的形成受反应溶剂和反应物料比例的影响较大;复合物的脂溶性有较大提高。

京尼平苷透皮制剂抗炎镇痛作用的研究

目的:考察京尼平苷乳膏和京尼平苷微乳的抗炎镇痛作用。方法:乳化法制备京尼平苷乳膏和京尼平苷微乳;热板测痛法和醋酸诱导的扭体法考察制剂的镇痛效果;采用二甲苯致炎和角叉菜胶致脚趾肿胀法考察制剂的抗炎效果,并与市售的抗炎和镇痛的制剂进行了比较。结果:京尼平苷乳膏和京尼平苷微乳具有抗炎镇痛的作用,乳膏剂型的效果更为显著,和市售产品的效果接近或者是更强。结论:将京尼平苷制成透皮制剂具有抗炎和镇痛的作用,其中乳膏的效果更好,为临床应用提供了实验依据。

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液改善脂多糖-高糖腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞损伤的实验研究

目的评估丹参酮ⅡA磺酸钠注射液(STS)减轻脂多糖-高糖腹膜透析液(LPS-PDS)诱导的人腹膜间皮细胞(HPMCs)损伤以及抑制腹膜纤维化的作用。方法HPMCs来自腹腔外科手术患者腹膜细胞的原代培养。以LPS-PDS诱导的HPMCs损伤为模型,通过观察STS对HPMCs增殖活性、转化生长因子-β(TGF-β1)分泌、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP1)等的影响,阐明STS对HPMCs的保护作用及抗腹膜纤维化的机理。结果 LPS-PDS可造成HPMCs损伤,表现为活性下降,STS可明显减轻LPS-PDS对HPMCs的毒性,改善其造成的细胞活性下降,减轻LPSPDS诱导的TGF-β1、TIMP1mRNA上调和MMP-9mRNA表达下降。结论 STS可以减轻LPS-PDS诱导的HPMCs损伤,可能是通过调节TGF-β1、TIMP1、MMP-9等蛋白的表达,发挥保护腹膜细胞和拮抗腹膜纤维化的作用。

奥曲肽靶向阿霉素脂质体的制备及其体外性质

探讨奥曲肽靶向脂质体的制备方法。首先采用乙醇注入法和硫酸铵梯度载药法制备阿霉素普通脂质体(P-L),单因素研究多种处方组成及工艺参数对脂质体性质的影响。随后在阿霉素脂质体表面插入奥曲肽-聚乙二醇4000-氢化磷脂酰乙醇胺(Octreotide-PEG4000-HSPE),获得奥曲肽靶向阿霉素脂质体(Oct-L)。采用柱分离法和粒径仪考察脂质体包封率、粒径分布、稳定性,透射电镜观察脂质体形态,透析法测定其释放性质。所制备的奥曲肽靶向脂质体外形圆整,粒径略小于100 nm,药物包封率约100%,48 h释放约20%;与阿霉素普通脂质体相比,提高了对生长抑素受体表达阳性的NC IH-446细胞的毒性及其阿霉素摄取量。本实验表明,乙醇注入、硫酸铵梯度及后插入法可应用于阿霉素脂质体的制备及脂质体奥曲肽靶向的修饰。

蜡质骨架片的研究进展

蜡质骨架片是药物缓控释制剂中较为特殊的一类制剂,目前还未得到充分的研究和应用。本文综述了近年来用于制备蜡质骨架片的载体材料(山嵛酸甘油酯、氢化蓖麻油、巴西棕榈蜡、十六醇、硬脂酸等)和制备方法(湿法制粒、溶剂法、熔融法、热熔挤出等)的研究进展,并分析比较了它们的优势与不足,对蜡质骨架片的研究与应用具有一定的指导意义。

粒径差异化的纳米脂质载体的制备和表征

利用特色化的中心复合设计,以香豆素-6为模型药物,通过控制特定的因素和指标,制备粒径不同而其他性质相同的纳米脂质载体(NLCs),并对其形态、Zeta电位和包封率等理化性质进行研究。通过体外稳定性实验考察NLCs在K-R液和PBS缓冲液中的稳定性,同时以透析法研究制剂的体外释药行为特性。采用MTT法研究空白NLCs和载药NLCs的细胞毒性,活体成像技术考察NLCs在小鼠胃肠道中的滞留时间。结果显示:制备所得的粒径分别为100,200及300 nm的香豆素-6纳米脂质载体,分散性良好,在K-R液和PBS缓冲液中可以稳定存在,并且体外24 h香豆素-6的累积释放量均不超过总量的7%。MTT实验表明:空白NLCs和载药NLCs对Caco-2毒性较小。小鼠肠内滞留试验显示:NLCs在灌胃给药6 h后仍然能够在胃肠道中检测到。因此,制备得到的不同粒径NLCs可以作为模型制剂,用于细胞水平和动物水平上研究NLCs粒径对口服吸收的影响。

琥珀酸美托洛尔缓释微丸的制备及大鼠体内药代动力学

采用空白丸芯上药制备含药丸芯,以乙基纤维素为缓释材料,采用流化床包衣法制备了琥珀酸美托洛尔缓释微丸。以美国药典为标准对比,分析了自制品和市售品在pH 6.8 PBS、0.1 mol/L盐酸(pH 1.0)和水3种介质中的释放曲线,计算出相似因子(f2),并进一步对比分析了自制品和市售品在大鼠体内药代动力学行为差异。结果显示,采用60～88目空白丸芯,上药增重为100%,缓释层增重为22.7%～25.46%的缓释微丸与市售品在3种介质中的释放曲线的f2均大于50,相似性良好,同时方差分析显示两种制剂在大鼠体内的主要药代动力学参数没有显著性差异。

5-氨基水杨酸结肠定位黏附微丸的制备及评价

制备5-氨基水杨酸结肠定位黏附微丸。以CP940和HPC为黏附性材料，挤出滚圆工艺制备载药丸芯。考察丸芯最大载药量、赋形剂以及挤出滚圆工艺对成型性的影响。采用体外黏附性实验考察两种黏附性材料的比例对黏附性的影响。制备好的黏附性丸芯采用流化床包衣，乙基纤维素作为缓释防水内层，EudragitR S100作为pH敏感外层，在不同pH释放介质中进行溶出研究，评价微丸在结肠环境的释药性能。实验表明：丸芯最大载药量为70％，使用PH301作为赋形剂，CP940与HPC质量比为1：1时，黏附效果最佳；EC增重为16％-20％，S100增重为28％时，在盐酸溶液中有良好的耐酸性，在pH6．0磷酸盐缓冲液中5h的释放量小于10％，而在pH7．4结肠液中迅速释放药物和发挥黏附作用。实验结果表明，5-氨基水杨结肠定位黏附微丸是一种良好的结肠定位黏附给药系统。

不同链长聚乙二醇修饰的香豆素6脂质纳米粒对口服吸收的影响

通过制备不同链长聚乙二醇(PEG)修饰的纳米脂质载体(NLCs)考察PEG链长对其口服吸收的影响。使用聚乙二醇(100)单硬脂酸酯(S100)、聚乙二醇(55)单硬脂酸酯(S55)、聚乙二醇(40)单硬脂酸酯(S40)3种不同链长的PEG通过薄膜分散法制备NLCs,以香豆素6(coumarin 6)作为荧光探针,对修饰不同链长PEG的NLCs进行理化性质表征。考察了不同链长PEG修饰的NLCs在模拟缓冲液中的稳定性以及体外释药行为。同时对NLCs的细胞毒性、细胞摄取动力学以及摄取机制进行了考察。结果表明,随着PEG链段长度的增加,其水化层厚度不断增大。与其他NLCs相比,S100修饰的NLCs(pNLC-EG100)具有更好的细胞摄取效率,证明S100的链段长度是用于口服NLCs给药的最佳长度。

抵当汤及加味方对S180荷瘤小鼠外周血IL-8、TNF-α的影响

目的探讨抵当汤及分别加入柴胡、桂枝、黄芪3个加味方对S180荷瘤小鼠外周血IL-8、TNF-α的影响。方法小鼠造模后随机分为模型组、抵当汤组(4 g/kg)、抵当汤加黄芪组(5.67 g/kg)、抵当汤加桂枝组(5.5 g/kg)、抵当汤加柴胡组(5 g/kg),每组15只,另取正常小鼠10只作正常对照组。各用药组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组给等体积0.9%NaCl溶液,每日1次,连续10 d。末次给药后1 h于小鼠眶后静脉取血,离心取血清,采用ELISA方法检测IL-8、TNF-α。结果与正常对照组比较,模型组小鼠血清IL-8水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,抵当汤可明显降低S180荷瘤小鼠血清IL-8水平(P<0.05),抵当汤加柴胡组、抵当汤加黄芪组、抵当汤加桂枝组均可明显降低S180荷瘤小鼠血清IL-8水平(P<0.05,P<0.01),其中以抵当汤加柴胡组血清IL-8水平降低最显著(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组小鼠血清TNF-α水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,抵当汤可明显升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平(P<0.05),抵当汤加柴胡组、加黄芪组、加桂枝组均可明显升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平(P<0.05,P<0.01),其中以抵当汤加柴胡组血清TNF-α水平升高最显著(P<0.01)。结论抵当汤及抵当汤加味方能升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平和降低血清IL-8的表达,其中又以抵当汤加柴胡组效果最为显著。

海藻酸钠在生物医药领域的应用与研究进展

海藻酸钠是由β-D-甘露糖醛酸(M)和α-L-古洛糖醛酸(G)2种结构单元组成的线性聚阴离子型多聚糖,具有来源广泛、生物相容性好、可降解性等优点,被广泛应用于细胞工程、3D生物打印、药物缓释、医用敷料等生物医药领域。本文阐述了近几年海藻酸钠在生物医药领域的最新应用,并展望了其前景。

汽车音响语音合成器设计分析

汽车音响语音合成器设计框架是一个系统化工程。在这个实现中,我们要将我们对于各种协议和设计的理解逐渐的模型化、层次化、清晰化。而对于模型、框架设计的讨论也能够加深我们对于协议中诸多细节的理解。首先,从协议的抽象概念设计来入手。通过解释了协议间的关系,现在我们要在设计中来体现出这种关系,还要来解释说明他们的应用关系模型。