基础医学硕士研究生招生困难现状分析

以延边大学2001—2008年医学专业硕士研究生招生情况为例,探讨目前基础医学硕士研究生招生困难的现状及原因,并提出解决办法。希望对学生树立积极的择业观念提供帮助。

重症肌无力单链抗体融合蛋白的酵母菌表达及特异性鉴定

目的:真核表达抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,以提高融合蛋白的产量和增强其生物学活性。方法:将携带有重组质粒的毕赤酵母菌GS115用G-418筛选高拷贝重组转化子克隆,诱导表达目的蛋白,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量(Mr),应用间接免疫荧光技术确定融合蛋白与人肋间肌乙酰胆碱受体(AChR)的亲和性。结果:斑点杂交试验显示成功表达出目的蛋白,其Mr约为97400,在人肋间肌细胞膜之间有荧光出现。结论:在毕赤酵母菌GS115中成功表达出scFv637-HSA融合蛋白,并且融合蛋白可以与人肋间肌AChR结合,这为进一步研究融合蛋白的功能和应用奠定了基础。

微生物学探索性实验教学的尝试

在高等教育面临着素质教育、培养创新人才的新形式下,以提高学生的综合素质、培养学生的创新精神、创新能力为出发点,在微生物学实验教学中开设探索性实验。实践表明,探索性实验的开展充分调动了学生的学习热情,增强了学生独立动手能力、综合分析能力和创新意识,提高了微生物学实验教学质量。

重症肌无力转基因小鼠模型的建立

[目的]建立人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．[方法]用电鳐电器官分离纯化的乙酰胆碱受体免疫人免疫球蛋白转基因小鼠，以肌肉收缩力判定病情，以放射免疫测定法测定动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度及动物全身肌肉乙酰胆碱受体浓度．[结果]实验动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度为6～296nmol，全身肌肉乙酰胆碱受体损失率最高达65％，部分动物出现肌肉收缩无力表现．[结论]成功地建立了人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．

医学微生物学设计性实验教学初探

探讨医学微生物学实验课程进行开放实验室及开展设计性实验的教学方式,为今后实验教学方法的改革积累经验.

临床医学四年级学生考研调查分析

了解临床医学专业四年级学生关于报考硕士研究生的认知和行为情况,为指导医学生的就业方向提供依据。采用问卷调查的方法,对延边大学临床医学四年级学生161人调查,回收154份。91.3%的学生想报考研究生,并且其中89.7%的学生报考临床医学专业。目前考研已经成为学生毕业后的首选出路,因此需要对学生进行正确的毕业指导,以适应时代的要求。

卡那霉素在体外对A.healyi的杀伤作用

[目的]观察卡那霉素在体外对棘阿米巴A.healyi的杀伤作用.[方法]用1.0,10.0,100.0g/L卡那霉素和0.2,2.0g/L甲硝唑在体外培养棘阿米巴3,8,24,48h,观察用药前及不同培养时间的生长情况.[结果]1.0g/L卡那霉素对棘阿米巴无抑制作用,10.0g/L卡那霉素在培养48h时及100.0g/L卡那霉素培养24h时抑制棘阿米巴生长,100.0g/L卡那霉素在培养48h时杀伤棘阿米巴.2.0g/L甲硝唑作用48h时仍无明显的杀伤作用.[结论]在体外卡那霉素质量浓度为10.0g/L时对棘阿米巴有抑制作用,100.0g/L时具有杀伤作用.

重症肌无力特异性免疫吸附剂的制备及对患者血清的动态吸附实验

[目的]制备对重症肌无力致病性抗乙酰胆碱受体抗体具有特异性吸附作用的免疫吸附剂.[方法]采用悬浮再生法合成纤维素，以环氧氯丙烷对其进行活化，将人工合成的人乙酰胆碱受体α亚单位67-76位氨基酸为配基，固定于环氧氯丙烷活化后的球型纤维素上，制备出重症肌无力特异性免疫吸附剂，并与乙酰胆碱受体抗体阳性患者的血清进行动态吸附实验，应用酶联免疫吸附法检测反应前后抗体的吸光度，计算抗体吸附率.[结果]以球型纤维素为载体及多肽为配基制备的免疫吸附剂在血清动态吸附实验中对血清中致病性乙酰胆碱受体抗体的吸附率随吸附时间延长而上升，并在吸附开始后2 h时达到高峰，吸附率为26.59%.[结论]以球型纤维素为载体及多肽为配基制备的免疫吸附剂与致病性乙酰胆碱受体抗体吸附性较好，是治疗重症肌无力较理想的免疫吸附剂.

重症肌无力治疗性单价IgG抗体基因的构建

目的:构建一株对重症肌无力(MG)具有特异性免疫治疗作用的单价IgG类抗体基因。方法:应用定点突变技术,将致病性抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体IgG637的重(H)链第322位氨基酸进行K322A突变,获得的突变型抗体IgG637/K322A基因再进行H链互补决定区3(CDR3)缺失突变,获得突变型抗体IgG637/K322A/CDR3ΔPLKP基因。经转化大肠杆菌XL1-Blue进行增殖后,转染哺乳类细胞CHO-k1进行表达,表达产物经ELIAS检测与补体C3的结合活性,经RIA检测与特异性抗原人AChR的结合活性。突变抗体H链再经杵(T366Y)臼(Y407T)突变,以利于异源H链的配对。结果:突变型抗体IgG637/K322A丧失了与补体C3结合的能力,突变型抗体IgG637/K322A/CDR3ΔPLKP丧失了与人AChR结合的能力。测序证实已经获得了预想的杵臼突变序列。结论:已经成功的制备了无补体激活能力的单价IgG类抗AChR抗体基因。

人源性抗乙酰胆碱受体自身抗体的构建及特异性鉴定

目的用人抗乙酰胆碱受体(AchR)自身抗体的抗原结合片段(Fab)构建完整的抗人AchR自身抗体,为重症肌无力(MG)的实验研究提供人源性抗体材料。方法应用PCR技术从分离自MG患者胸腺的Fab637扩增重链Fd片段基因和轻链基因,并克隆至含有免疫球蛋白(IgG1)基因的载体pIgG1上,构建人源性抗AchR自身抗体哺乳类细胞表达的重组载体pIgG1-637。将pIgG1-637转染CHO-k1细胞,细胞培养上清液经斑点杂交试验检测抗体的表达,以放射免疫测定法测定表达的抗体与特异性人AchR结合的活性。结果细胞培养24h后能检测到抗体的分泌,表达的抗体能特异性地与抗原结合,且结合活性很高。结论已成功地构建了具有与抗原特异性结合的人源性IgG1类抗人AchR自身抗体IgG1-637。

电鳐乙酰胆碱受体诱导转基因小鼠重症肌无力的机制

[目的]探讨电鳐乙酰胆碱受体诱导人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力的机制．[方法]将电鳐电器官分离并纯化的乙酰胆碱受体作为免疫原，免疫人免疫球蛋白转基因小鼠，以放射免疫方法测定小鼠血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度，以免疫荧光技术观察小鼠骨骼肌中抗乙酰胆碱受体抗体的结合性．[结果]小鼠血清中的抗乙酰胆碱受体抗体滴度为155～539pmol，小鼠肌肉中具有人抗乙酰胆碱受体抗体．[结论]电鳐乙酰胆碱受体刺激人免疫球蛋白转基因小鼠产生的人抗乙酰胆碱受体抗体，可与肌肉组织中的乙酰胆碱受体结合，导致肌肉收缩无力，可诱导重症肌无力．

重组乙酰胆碱受体α亚单位-BirA识别多肽序列基因的构建与表达

[目的]构建重组乙酰胆碱受体亚单位-BirA识别多肽序列基因(pcDNA 3.1-AChR-αBirA),并对其进行真核基因表达.[方法]设计引物生物素蛋白连接酶(BirA)识别多肽序列基因,将载体pcDNA3.1-AChR-αBirA识别多肽序列基因连接,并用EcoRⅤ单酶切检查BirA识别多肽序列基因插入的正确性,并测定序列进行验证.将构建成功的载体在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上进行表达,经激光扫描共聚焦显微镜验证其产物.[结果]电泳检查可见大小为63 bp的条带,经测定序列验证了插入的基因序列为BirA识别多肽序列基因;转染后经激光扫描共聚焦显微镜观察到CHO细胞膜上的绿色荧光.[结论]成功构建了AChR-αBirA识别多肽序列基因重组载体,并可在CHO细胞中较好地表达.

叉车类产品的电磁兼容性

一、问题的提出 伴随中国的改革开放，中国的叉车生产厂与世界叉车厂的交流增多，叉车的制造技术水平亦不断提高，尤其中国的叉车出口能力逐年加强，加入WTO后全球经济一体化的步伐也加快了，为了保护自己的贸易市场，欧盟、美国等大的贸易经济体系将贸易壁垒逐渐更换为技术壁垒，欧盟的CE安全认证、美国的UL认证等均属于技术壁垒。在CE认证要求中，出台了89／336／EEC电磁兼容指令，对进入欧盟市场的机电产品的电磁兼容性提出了法律要求。出口欧盟市场的叉车属于自我认证产品，认证模式遵从B＋C模式，即产品的“EC型式检验十企业一致性声明”，但不管是哪一种模式，产品都必须满足相关的欧盟指令。89／336／EEC及其修定版是产品电磁兼容的指令。如何提高我国叉车类产品的电磁兼容性，是整个叉车行业面临的又一个重要课题。

叉车行业配套件现状分析

一、叉车行业发展现状 “十一”五期间，随着国民经济迅速稳定的增长，物流运输行业的不断发展，我国叉车行业也呈现出前所未有的繁荣与发展。我国叉车产销量2001年为25，602台（含电动堆垛车），2007年底更是突破了15万台大关。

单链抗体融合人血白蛋白对重症肌无力患者血清与乙酰胆碱受体结合的抑制

目的:研究抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(ScFv637)融合人血白蛋白(HSA-ScFv637)在体外对重症肌无力(MG)的治疗作用。方法:构建出HSA-ScFv637基因,利用甲醇诱导表达出HSA-ScFv637蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹试验分析融合蛋白的分子量及特异性;应用竞争性ELISA测定法对HSA-ScFv637抑制MG患者血清与人AChR结合率及表达产物稳定性进行测定。结果:HSA-ScFv637对MG患者血清与人AChR结合的抑制率最高可达77.4%,对AChR的这种保护能力可持续3天,随着样品的衰变HSA-ScFv637保护作用减弱至消失。结论:HSA-ScFv637在体外能抑制MG患者血清与AChR的结合,对AChR具有保护作用。

乙酰胆碱受体四聚体前体α亚单位在人胚肾293细胞膜上的表达

[目的]将乙酰胆碱受体四聚体前体!亚单位重组质粒(pcDNA3.1-AchRα-BirA)转染至人胚肾293(HEK293)细胞,并在其细胞膜上获得稳定表达.[方法]提取重组质粒pcDNA3.1-AchRα-BirA,经限制性核酸内切酶Eco RⅤ单酶切后,行低熔点琼脂糖凝胶电泳检测.采用脂质体转染法,将pcDNA3.1-AchRα-BirA转染至HEK293细胞,经抗生素G418筛选后形成集落状抗性克隆细胞.将表达产物扩大培养,应用免疫荧光技术,以异硫氰酸荧光素标记,经荧光显微镜查看表达情况.[结果]电泳检查发现了大小约为6.964 kb的条带.转染后G418筛选获得抗性克隆细胞,经荧光显微镜观察到HEK293细胞膜上的绿色荧光.[结论]成功地将AchRα-BirA基因转染至HEK293细胞膜上且有表达,为下一步构建AchRα四聚体奠定了基础.

叉车产品能耗试验与评价方法研究

本文针对内燃平衡重式叉车的能耗,从现行的能耗试验方法入手,对典型数据进行分析研究,提出有用功比油耗的概念,详细阐述其试验方法和评价方法并论证其可行性,同时给出限值和评价方法。

看车先看“型” 国内叉车门架异型材使用现状及发展趋势

我国在叉车门架专用型材研制方面，无论是在产品的数量规格上，还是在机械性能、表面质量及制造精度上，与国外都有很大差距。2004年，国内仅生产了2～3t叉车使用的14号和16号2种规格的叉车门架专用型材，而日本、欧美等发达国家叉车专用型材多达16种型号，覆盖20t以下所有吨位叉车。时至今日，我国也仅有12种型号，覆盖12t以下的叉车用材。