残根残冠根管治疗术后引发急性炎症的研究

目的探讨残根残冠根管治疗术后急性炎症的发病情况及其相关因素。方法83例患者随机分为2组,分别采用根管治疗术一次法和二次法,分析急性炎症的发生率及其相关因素。结果两种根管治疗术急性炎症发生率无显著性差异,但二次法急性蜂窝织炎发生率明显高于一次法(P<0.05),而且,封药后出现急性炎症的患牙根管充填后很少出现急性炎症反应;急性炎症与根管预备、根管充填、根尖周区骨质破坏程度有关。结论根管治疗术应严格遵守操作规程,一次法可以应用于残根残冠的治疗。

骨形成蛋白-2基因促进犬牙周组织再生的体内研究

目的:观察重组入骨形成蛋白-2(rhBMP-2)质粒对犬牙周骨缺损再生作用的影响。方法:选用6只成年bea犬,将其下颌两侧的第2、3、4前磨牙(P2、P3、P4)作为实验牙。在每颗实验牙的近中根颊侧制作“U”型骨缺损,并随设计为3组,即pIRES-rhBMP-2组、rhBMP-2组(阳性对照组)和PBS组(空白对照组)。术后第4与第8周分别处动物。光镜下观察组织学变化,采用Image-Pro-Express系统测量新生牙槽骨和牙骨质的高度、新生结缔组织的附量。测量结果以SAS 6．12软件包进行Newman-Keuls q检验。结果:实验第8周时,组织学观察可见2个实验组新牙槽骨接近于正常骨结构,新生牙周纤维稠密,富含血管;空白对照组胶原纤维稀疏,排列不规则。新生组织测量果显示:2个实验组新生牙槽骨和牙骨质的高度、新生结缔组织的附着量较空白对照组显著增加(P<0．05,P<0．01) 2个实验组间相比无显著性差异(P>0．05)。结论:pIRES-rhBMP-2有较强的骨诱导活性,能有效促进犬牙周骨缺的组织再生。

高迁移率族蛋白B1对牙周膜成纤维细胞表达细胞因子影响的研究

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人牙周膜成纤维细胞表达白细胞介素-6(IL-6)、破骨细胞核因子κB受体活化因子(RANKL)、骨保护因子(OPG)的影响,初步探讨HMGB1在牙周疾病的作用。方法采用原代组织块培养法,培养人牙周膜成纤维细胞,用第4～6代的细胞进行实验。分别用10、30、100ng·mL-1质量浓度的HMGB1孵育牙周膜成纤维细胞24h后,RT-PCR检测IL-6、RANKL、OPG的mRNA表达;Westernblot法检测RANKL、OPG的蛋白表达。均以0ng·mL-1质量浓度组为对照,所得数据用单因素方差分析处理。结果 HMGB1在10、30、100ng·mL-1质量浓度时,细胞中的RANKL/OPGmRNA的比值增高(P<0.05),100ng·mL-1质量浓度时细胞中的IL-6mRNA的表达量增高(P<0.05)。Westernblot检测结果显示10ng·mL-1质量浓度组的RANKL/OPG的比值有明显增高。结论一定浓度的HMGB1可使牙周膜细胞中的RANKL/OPG比值增高,还会诱导炎症因子IL-6mRNA表达上调。提示HMGB1可能会在牙周炎的发病以及炎症进展中发挥作用。

超声微泡破裂法促进骨形态发生蛋白-2在小鼠骨骼肌表达的研究

目的探讨超声微泡破裂法对基因重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)质粒pIRES-rhBMP2-EGFP在小鼠骨骼肌的转染、表达的促进作用。方法24只BALB/c小鼠随机分为4组,每组6只。A组和B组选择右侧胫前肌为注射点,其中A组注射质粒,B组注射质粒与微泡造影剂混合物后用超声辐照,质粒注射量为30μg;C组和D组选择右侧股四头肌为注射点,其中C组注射质粒,D组注射质粒和微泡造影剂混合物后用超声辐照,质粒注射量为100μg。7d后处死A组和B组小鼠,取胫前肌在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况;14d后处死C组和D组小鼠,取股四头肌行免疫组化检测rhBMP-2表达情况。结果7d后B组阳性肌纤维百分率高于A组(P<0.05);14d后,C组和D组都可检测到rhBMP-2的表达,但D组rhBMP-2表达量比C组多。结论超声介导微泡破裂法能增加外源性rhBMP-2基因在小鼠体内骨骼肌转染率和表达水平,有望为牙周病的基因治疗提供一种新型方法。

超声介导微泡破裂法促进外源性基因在小鼠NIH3T3细胞中的表达

目的观察超声介导微泡破裂法对目的基因重组人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)转染靶细胞NIH3T3效率的影响。方法复苏NIH3T3细胞并传至3～4代,待细胞生长状态良好后接种至六孔培养板;将六孔板中细胞随机分为2组,分别采用质粒DNA和脂质体法(脂质体组),质粒DNA、超声和微泡法(超声介导微泡破裂组)转染目的基因;转染24～48h后在荧光倒置显微镜下对各组细胞分别计数以计算转染效率,并采用ELISA实验测定转染后hBMP-2蛋白质量浓度;使用SPSS11.5软件包分析实验结果。结果脂质体组的转染效率为(7.30±1.58)%,超声介导微泡破裂组为(11.77±3.16)%(P<0.05);脂质体组转染后hBMP-2蛋白质量浓度为(1164.35±724.67)pg/mL,超声介导微泡破裂组为(2932.70±656.27)pg/mL(P<0.05)。结论超声介导微泡破裂法可以明显提高外源性基因hBMP-2在体外NIH3T3细胞中的转染效率和蛋白质量浓度,可以为牙周再生基因治疗提供一种新型基因转移系统。

半导体激光和Gluma脱敏剂联合治疗重症牙本质过敏临床观察

为评价半导体激光和 Gluma脱敏剂联合治疗重症牙本质过敏 (DH)的临床效果 ,将同一患者的 DH牙随机分为三组 ,分别用半导体激光 (A组 )、 Gluma脱敏剂 (B组 )及半导体激光 +Gluma脱敏剂 (C组 )治疗 ,并观察各组的疗效。结果显示 ,治疗后即刻和 1个月三组的临床治愈率分别为 71.43%、 6 6 .6 7% ,72 %、 6 6 % ,90 %、90 % ,C组治愈率显著高于 A、 B组。表明半导体激光 +Gluma脱敏剂联合应用是治疗重度

壳聚糖膜促进牙周新附着的实验研究

为了探讨壳聚糖膜对牙周新附着的作用，在６只健康成年杂种犬的上、下颌前磨牙近中根的颊侧形成深５ｍｍ，宽４ｍｍ的Ｕ形骨缺损。实验组在缺损区周围牙槽骨放置壳聚糖膜，对照组不放膜。术后８周、１２周分别处死动物３只，取标本行组织学观察和定量分析。结果表明，壳聚糖膜具有阻止长结合上皮根向迁移和促进牙周新附着的作用。

碱性成纤维细胞生长因子对犬牙周组织再生的影响

目的 :了解碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对犬牙周组织再生的影响。方法 :选用 4只成年杂种犬 ,其上颌两侧的前磨牙 (P1、P2 、P3)、第 1磨牙 (M1)和下颌两侧的前磨牙 (P2 、P3、P4 )、第 1磨牙 (M1)作为实验区牙。在每个象限 4个牙位的近中根颊侧人工制备“U”形骨缺损 ,并设计为 4组 :①对照组 ;②bFGF组 ;③ePTFE组 ;④bFGF +ePTFE组。每次手术做 1个象限的牙位 ,每周 1次 ,连续 4次完成。所有动物 4w处死 ,标本作组织学分析。结果 :3、4w各处理组较空白对照组均有更多的新骨和牙骨质形成。结论 :bFGF单独或与屏障膜联合体内应用时 ,均能促进牙周组织的再生。

米诺环素对人牙周韧带细胞矿化能力的影响

目的探讨米诺环素对人牙周韧带细胞(periodontal Iigament cells,PDLCs)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及矿化结节形成能力的影响。方法将不同浓度的米诺环素(0,1,5,20,100,200mg/L)加入体外培养的第4代HPDLcs中,孵育4天后,检测其对细胞ALP活性的影响;将第4代的PDLCs在体外进行长期培养,实验组加入矿化液和米诺环素(20mg/L或100mg/L),对照组只加矿化液。28天后用茜素红与VonKossa染色检测矿化结节的形成。结果20mg/L和100mg/L的米诺环素能显提高PDLCsS的ALP活性,其中20mg/L具有最大的促进效应,对体外矿化结节的形成,亦有一定程度的促进作用。结论米诺环素有促进牙周韧带细胞向成骨细胞方向转化的趋势,从而有助于牙周新附着的形成。

碱性成纤维细胞生长因子对犬牙周成纤维细胞样细胞增殖影响的体内研究

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对犬牙周成纤维细胞样细胞增殖的影响。方法 选用 4只成年杂种犬 ,将其上颌两侧的前磨牙 (P1_3)、第一磨牙 (M1 )、下颌两侧的前磨牙 (P2_4 )、第一磨牙 (M1 )作为实验牙。在每个象限 4个实验牙的近中根颊侧人工制备“U”形骨缺损 ,并设计为 4组 ,即对照组、bFGF组、ePTFE组、bFGF +ePTFE组。每周手术 1次 ,每次手术做 1个象限的 4个牙位 ,连续 4次。完成 4次手术后 1周处死动物。动物处死前 1h注射尿嘧啶脱氧核苷 (BrdU) ,标本行免疫组化染色 ,显微镜下计数BrdU标记的成纤维细胞样细胞。结果 各组中BrdU+ 细胞数均于术后 2周最多 ,术后 3、4周显著减少。术后 1、2周 ,bFGF组和bFGF +ePTFE组的BrdU+ 细胞明显多于对照组和ePTFE组。结论 牙周术后 2周是牙周功能细胞增殖的活跃期 ,bFGF的局部应用可明显促进牙周愈合早期牙周功能细胞的增殖 。

四环素对人牙周膜成纤维细胞的生物学作用

目的 探讨四环素对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)的生物学作用。方法 将不同浓度的四环素(1、5、20、100、500、2 500 μg/ml)加入体外培养的HPDLFs中,孵育2 d后,在倒置显微镜下观察其对细胞形态的影响,并用MTT法、考马司亮蓝法及3H-TdR掺入法,分别检测四环素对细胞的增殖活性、蛋白合成及DNA合成的影响。结果在1-100μg／ml的浓度范围内,细胞形态呈正常的梭形或纺锤形。在20-100μg/ml的浓度范围内,四环素可促进HPDLFs的增殖及生物合成(P<0.01)。当四环素的浓度增至2 500μg／ml,不仅使细胞的镜下形态发生了明显改变,而且严重抑制了细胞的生物学活性。结论 在合适的浓度范围内,四环素能促进HPDLFs的增殖及生物合成,而浓度过高则具有细胞毒性。

高迁移率族蛋白1在慢性牙周炎病变牙龈组织中的表达

目的研究慢性牙周炎病变牙龈组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达。方法提取健康志愿者外周血单核细胞(PBMC),以1μg.mL-1的细菌脂多糖(LPS)刺激细胞,24 h后用免疫荧光染色法检测HMGB1的表达,48 h后用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中HMGB1的表达;分别以50 ng.mL-1肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和100 ng.mL-1HMGB1刺激PBMC,48 h后检测细胞上清液中HMGB1和TNF-α的表达。另外收集健康者和慢性牙周炎患者的牙龈组织和龈沟液,分别检测牙龈组织和龈沟液内HMGB1的表达。结果 LPS刺激PBMC 24 h后,HMGB1自细胞核移出至细胞质中;刺激48 h后,细胞上清液中HMGB1的表达量明显高于对照组(P<0.01)。TNF-α和HMGB1分别刺激PBMC 48 h后,上清液中HMGB1和TNF-α的表达水平较对照组亦有明显增强(P<0.01)。在慢性牙周炎牙龈组织上皮钉突下方浸润的细胞中,HMGB1自细胞核转移至细胞质和细胞外;其龈沟液内HMGB1的表达量也明显高于健康对照组(P<0.01)。结论 HMGB1可能在牙周炎病理进程中有重要作用。

侵袭性牙周炎与慢性牙周炎病变位点中人巨细胞病毒的定量检测

目的应用实时荧光定量PCR方法检测侵袭性牙周炎(AgP)及慢性牙周炎(CP)患者龈下样本中人巨细胞病毒(HCMV)的DNA载量,探讨HCMV感染与牙周炎之间的关系。方法选择18例AgP患者、24例CP患者及15例牙周健康对照者,收集龈下样本114例。构建含有HCMV高保守片段的重组质粒,制备标准品DNA模板,建立并应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测样本中HCMV的DNA载量。结果 AgP病变位点、CP病变位点以及牙周健康位点中HCMV的阳性检出率分别为58.3%、41.7%和6.7%。AgP和CP病变位点中HCMV的阳性检出率显著高于牙周健康位点(P<0.01)。在AgP病变位点中,病毒载量在104以上的位点占33.3%,明显高于CP病变位点的10.4%,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HCMV感染与牙周炎的发生发展密切相关,其活动性感染可能与AgP组织破坏的迅速进展有关。

根管封闭剂iRoot SP根尖封闭性能的体外研究

目的探讨两组种根管封闭剂AH-Plus、i Root SP根尖封闭性能的差异。方法将80颗离体单根管牙以Protaper镍钛机用锉冠向下法根管预备至F2,随机分为A、B、C、D组,每组20颗。A、B组分别使用AH-Plus、i Root SP根管封闭剂以热牙胶连续波垂直加压技术进行根管充填,C组使用i Root SP根管封闭剂以单尖法进行根管充填,D组不做任何充填。用染料渗入法和透明牙法对标本进行处理后,测量染料渗入根管的长度。结果 A、B、C、D组染料渗入长度分别为(0.81±0.27)、(0.75±0.23)、(0.97±0.12)、(11.32±0.45)mm。A、B、C组染料渗入长度与D组比较差异有统计学意义(P均<0.05);A、B、C三组比较染料渗入长度差异无统计学意义(P>0.05)。结论根管封闭剂i Root SP的根尖封闭性能与AH-Plus相似,单尖法根管充填i Root SP的根尖封闭性能有待进一步研究。

牙周非手术治疗对牙髓和根面牙本质敏感的影响

目的 :研究由牙周非手术治疗引起的牙髓和根面牙本质敏感 (RDS)的改变。方法 :2 0例患者共 30 6个患中到重度牙周炎的牙齿 ,接受口腔卫生宣教 (OH) 2周以及洁刮治和根面平整 (S/RP) 1、2、4和 8周后 ,用电活力测试仪测定牙髓的敏感性 ,用探诊和吹气两种方法 ,并用VAS量表评估根面敏感性。结果 :在整个实验期内 ,牙髓活力无显著性改变 (P >0 .0 5 )。在 2周的观察期内 ,经良好的菌斑控制后 ,RDS由 4 .18降至 2 .4 5(P <0 .0 1) ,但经S/RP后 ,根面敏感显著增加 ,治疗后 1周 ,根面敏感最为严重 ,达 6 .6 8(P <0 .0 1) ,在随后 3次的复诊中 ,根面敏感度逐渐下降 ,至 8周时 ,与治疗前已无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :良好的菌斑控制会减少RDS的发生 ;牙周非手术治疗对牙髓的敏感性无影响 。

口腔内科学实验教学手段改革的探索和实践

口腔内科学的实验教学是深化理论课的重要手段,是由课堂进入临床的桥梁,也是把医学生转化为医生的必经阶段,学生在实验课中获益多少,直接影响到临床工作的质量和水平,为此,我们对实验教学手段的改革做了一些探索:研制、发明了硅橡胶牙颌模型,制作了多部视听教材并应用于实验教学中,改革措施富有针对性和实效性,取得了显著的教学效果。

套筒冠义齿对中重度牙周病伴牙列缺损修复的临床效果

目的:观察中重度牙周病伴牙列缺损病人采用圆锥型套筒冠义齿修复治疗前后基牙牙周组织变化情况,了解其临床疗效。方法:选择20例中重度牙周病伴牙列缺损的病例,患牙经过牙周基础治疗和根管治疗后,采用圆锥型套筒冠义齿修复,共制作26副圆锥型套筒冠义齿。基牙共149个,其中Ⅰ度松动25个,Ⅱ度松动113个,Ⅲ度松动11个。平均随访3.5年,观察基牙菌斑指数、牙龈指数、牙周袋深度、牙松动度以及影像学改变,并通过问卷调查义齿戴入后病人的主观感受。结果:20例中重度牙周病伴牙列缺损的病例,基牙松动度降低,牙周袋变浅,牙周组织的健康情况得到显著改善,病人主观感觉满意。结论:采用圆锥型套筒冠义齿修复治疗中重度牙周病伴牙列缺损是一种较理想的方法。

冠心病伴牙周炎病人血脂、CRP和IL-6水平检测的研究

目的:探讨慢性牙周炎与冠心病病人血清中血脂、CRP和IL-6水平变化及相关关系。方法:选取经冠状动脉造影确诊并伴牙周炎的冠心病病人[(C+P)组]66例,单纯慢性牙周炎病人(P组)56例,冠心病病人(C组)44例和健康志愿者(H组)43例。记录简化牙石指数、探诊岀血阳性率、探诊深度和附着水平丧失,检测血清中血脂、白介素6及C-反应蛋白的含量。结果:各组间牙周病指数有显著性差异。(C+P)组与P组、C组、H组相比,血脂中HDL-C的含量显著降低,CRP、IL-6水平明显升高,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:HDL-C、IL-6、和CRP可能与冠心病和牙周炎病理机制相关,牙周炎和冠心病之间存在一定的关联。