奶山羊短链脂肪酸受体GPR41基因的克隆及组织表达分析

旨在克隆奶山羊GPR41(G protein-coupled receptor 41)基因并分析其组织表达谱,为进一步探讨其功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人和鼠的GPR41基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR41基因,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR41mRNA表达的组织特异性。测序结果表明奶山羊GPR41基因的CDS区为978bp,共编码325个氨基酸。奶山羊GPR41基因序列同源性分析表明:其与牛、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为96%、78%和74%,与牛、人和鼠的氨基酸序列同源性分别为97%、76%和74%。实时荧光定量PCR分析结果表明:奶山羊GPR41基因在小肠组织中表达量最高,其次是乳腺组织,在心脏和肾脏中表达量极低。试验结果表明GPR41可能在小肠和乳腺组织中发挥着重要的生理作用。

心梗后心衰大鼠模型中SIRT1/PGC-1α信号通路及葡萄糖代谢酶表达变化

目的基于SIRT1/PGC-1α信号通路研究冠状动脉结扎所致大鼠心肌梗死(MI)后心力衰竭(HF)动物模型中葡萄糖代谢酶表达的变化。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=10)和模型组(Model,n=10)。采用小动物超声检测仪检测大鼠左心功能,观察射血分数(EF)、短轴缩窄率(FS)、左心室收缩末期前壁厚度(LVAWs)、左心室收缩末期后壁厚度(LVPWs)、心输出量(CO)、心搏量(SV)、左心室收缩末期容积(LVESV)以及左心室收缩末期内径(LVIDs)的变化。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠左心室组织病理变化。采用Western blot检测大鼠左心室组织中β-肌球蛋白重链(β-MHC)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、沉默信息调节因子3(SIRT3)及己糖激酶2(HK2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)、异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)和琥珀酸脱氢酶A(SDHA)的表达。采用比色法检测大鼠血清中L-乳酸的含量。结果大鼠MI后HF模型中EF、FS、CO、SV、LVAWs和LVPWs降低,LVESV和LVIDs增加(P<0.05);左心室间质纤维化和炎性细胞浸润;β-MHC蛋白表达上调(P<0.001);SIRT1、PGC-1α、SIRT3、HK2、LDHA、PDH E1、IDH2及SDHA糖代谢相关蛋白表达下调(P<0.05);血清中L-乳酸含量增加(P<0.001)。结论大鼠MI后HF模型中SIRT1、PGC-1α、SIRT3、HK2、LDHA、PDH E1、IDH2及SDHA蛋白表达下调,引起心肌葡萄糖的能量利用发生障碍,促进心功能降低和心室重构发生。

网格环境中资源发现机制的研究

随着高性能应用需求的迅猛发展,单台高性能计算机已经不能胜任一些超大规模应用问题的解决。这就需要将地理上分布、系统异构的多种计算资源通过高速网络连接起来,共同解决大型应用问题,从而产生了网格(Grid)。但是在网格这种共享资源的集合中,由于资源共享的广泛性,资源的异构性等等都使得资源发现更具有挑战性。目前存在的一些分布式环境中的资源发现大多是基于集中获分布的,由于集中式资源发现不能很好地满足系统的扩充,而分布式资源发现又会产生大量的网络通讯,因此这两种机制将不可避免地结合在一起,即形成分层式资源发现机制。

南疆枣树茎流变化规律研究

利用热扩散式茎流仪以及HOBO小气候仪,研究南疆不同径级、不同天气条件下的枣树(jujube)茎流变化规律以及茎流量与不同天气条件下气象因子的关系。结果表明:(1)枣树茎流速率的日变化呈单峰型曲线。(2)枣树日累计茎流量、日均茎流速率为7月>6月>8月>5月;枣树茎流速率峰值为7月>8月>6月>5月。(3)随着枣树径级的增大,枣树茎流量峰值、日均茎流量以及日累计茎流量随之增大,但枣树茎流速率峰值、日均茎流速率随之降低。(4)枣树茎流量峰值、日均茎流量以及茎流日累计量均呈现出晴天>阴天>雨天的规律。(5)气象因子与茎流量相关性从强到弱排序如下:晴天,太阳辐射强度>空气温度>土壤温度>空气相对湿度>风速;阴天,空气温度>土壤温度>太阳辐射强度>空气相对湿度>风速;雨天,太阳辐射强度>土壤温度>空气温度>空气相对湿度>风速。

基于农户意愿角度的农村宅基地退出机制探究——以山东省禹城市4个空心村为例

基于禹城市调研数据,运用Logistic分析方法,对宅基地退出意愿的动力因素与阻力因素进行了基本描述与分析,对影响因素因子采用了加权平均值法,对其影响程度进行排序,针对禹城市农村宅基地退出存在的问题,提出一些对策建议。

“自来水传播”路径与网络表达的价值取向

当今社会，信息在新媒体助推下传播速度更快、影响力更广，不少传播形式出现新的变化，“自来水传播”就是网络口碑传播的新形式。

从网络表情包看视觉化语言及情绪表达

表情包作为传统网络表情符号的变体,俨然已经成为了网络社会的一种新的表达方式和文化现象。本文从传统表情的演变及分类、表情包及其特征和关于表情包的思考等几个方面,找出表情包与使用群体文化心理的联系,从中透视出一些当今网络文化趋势与特点。

值机与行李运输课程项目化建设研究

课程项目化建设对于全面提升课程合理性及科学性具有重要意义,是高职院校进行课程建设的重要内容。目前,许多高职院校对课程进行项目化建设研究的微观层面研究较少,尤其关于航空服务专业相关课程研究仍处于起步阶段。以值机与行李运输课程为例进行研究,总结分析该课程建设目前存在的问题及成因,根据课程项目化建设原则对该课程对应岗位的工作领域、工作任务及职业能力进行分析,完成以工作任务为导向的项目化课程设计,并提出课程项目化建设实施的一些建议,力求全面提升课程教学效果。

基于生成对抗网络的植物景观生成设计——以花境平面图生成为例

【目的】植物景观设计需要科学性和技术性兼备。探索人工智能,特别是生成对抗网络(generative adversarial network,GAN)在植物景观设计中的应用,能够帮助设计师提高设计过程的效率。【方法】以花境平面图生成设计为例,建立了基于细致筛选优化的植物平面数据集。数据集标注基于植物分类,考虑了植物的种类、搭配原则及空间布局规律。引入循环生成对抗网络(cycle generative adversarial network,CycleGAN)模型对数据集进行学习,实现花境平面设计的自动生成。【结果】CycleGAN模型在以花境为代表的植物景观设计中具有独特的优势,花境平面图生成模型能够准确识别条形场地边界,并在色彩再现方面表现出较高的精度和可识别性。生成平面图的空间布局中,色块大小、平面布局形态和位置展示了各种植物的空间分布特点,并能够复现部分潜在搭配组合,生成了符合美学和生态原则的设计方案。然而,模型在部分场地边框的准确识别和设计结果的多样性方面仍存在局限。【结论】证明了CycleGAN在植物景观设计领域的应用潜力,并为实践中的植物景观设计提供了创新和有效的解决方案。

灌水量对阿克苏地区枣树茎流影响研究

利用热扩散技术,结合枣树根系地下20~160cm深度土壤含水率,分析了不同灌水量下枣树(jujube)土壤含水率变化规律和不同灌水量对枣树茎流变化的影响,并对枣树茎流速率与土壤含水率的关系进行研究。结果表明:不同灌水处理下,不同深度的土壤含水率均呈现出1200m3/hm^2<1800m^3/hm^2<2400m^3/hm^2的规律;枣树茎流指标均随着灌水量的增加而增大,在灌水量为1800m^3/hm^2时达到最大值,灌水量2400m^3/hm^2时,开始下降;在20~160cm土壤范围内,枣树茎流速率峰值均与土壤深度在40cm与60cm处的土壤含水率呈三次曲线关系,且相关性最大。

校企合作模式下高职院校旅游管理专业学生专业素养的培养

随着旅游业受到越来越多人的追捧，如何培养出具有良好专业素养的旅游专业管理人才成为学校与企业关注的焦点。通过对校企合作的模式进行分析，提出了根据市场需求设置课程、加强师资力量建设、建设校企合作新校区和加强学校在合作中的作用等提高高职院校旅游专业学生专业素养的措施，以期对促使学生专业素养的提高提供理论依据。

西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达

【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。

山羊脂肪酸合酶基因(FASN)启动子结构与功能的初步分析

本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase,FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨。采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF-7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性。结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATA-box和E-box,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74bp处。报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293～-79bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子结合位点。结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控。

蒙古黄芪总黄酮通过下调NF-κB和p38 MAPK信号通路改善急性心肌梗死小鼠炎症反应

目的 探讨蒙古黄芪总黄酮(total flavonoids of astragalus, TFA)通过下调NF-κB和p38 MAPK信号通路改善急性心肌梗死小鼠心肌炎症。方法 采用随机数字表法将40只C57 BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、蒙古黄芪总黄酮组、美托洛尔阳性药组,冠状动脉左前降支结扎建立急性心肌梗死模型,小鼠连续灌胃给药10 d后,进行小鼠心电图、血清生化和HE染色;Western blotting检测小鼠心肌组织中NF-κB p65、p38 MAPK/p-p38 MAPK、TNF-α和JAK1/STAT1的蛋白表达。结果 急性心肌梗死小鼠经TFA治疗后,小鼠心电图PR区间波动正常,QT区间ST段微压低,T波并未倒置、血清肌酸激酶MB型同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(MYO/MB)表达水平下调、心肌组织损伤程度明显减轻,细胞破裂减少,只有局部散在的炎性细胞浸润。Western blotting结果表明,通过TFA药物治疗后,JAK1、STAT1、NF-κB p65、TNF-α和p38 MAPK/p-p38 MAPK的蛋白表达量呈明显下降趋势。结论 TFA可减轻小鼠急性心肌梗死损伤,其作用可能是通过抑制NF-κB和p38 MAPK信号通路,减轻心肌炎症,进而改善心肌梗死。

房地产市场运行与国民幸福感

根据我国2005~2013年的有关数据,通过基尼系数调整法估算我国国民幸福指数,并根据数据可得性适当选取房地产运行相关指标,引入加权灰色关联模型,分析各指标对我国国民幸福指数的影响。结果表明,经济适用房销售面积对国民幸福指数影响最大,增加经济适用房销售面积与经济适用房投资额有助于提升国民幸福指数。

稀土Eu掺杂ZnO纳米棒的水热合成及其光学性质

采用水热法合成了稀土Eu掺杂ZnO纳米棒材料(ZnO/Eu_x),研究了稀土Eu的掺杂比x对ZnO材料的结构、形貌和光学性质的影响.结果表明:Eu^(3+)被成功掺入到ZnO中,材料呈纳米棒状结构且直径为15~25 nm.Eu的掺杂对ZnO材料的结晶度和光学性质有明显的影响.随着Eu掺杂比x的增加,ZnO材料的结晶度明显下降,这是因杂质Eu的引入导致材料缺陷增加所致.缺陷的增加引起ZnO材料中Eu3+的红色特征发光峰增强.另外,随着Eu掺入到ZnO中,紫外发射峰位置发生明显的红移现象,这与引入Eu杂质能级有关.

西农萨能羊乙酰/丙二酸单酰基转移酶基因重组腺病毒载体的构建

本研究旨在通过构建西农萨能羊脂肪酸合酶(FASN)基因乙酰/丙二酸单酰基转移酶(MAT)区域的重组腺病毒载体,为研究其在奶山羊乳腺上皮细胞中过表达以及功能和作用机制做准备。根据GenBank收录的西农萨能羊MAT序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上并线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasyⅠ的E.coli Bj5183感受态细胞进行同源重组,得到重组腺病毒质粒pAd-MAT-HIS,并用PacⅠ酶切鉴定,将经过PacⅠ线性化的pAd-MAT-HIS转染HEK 293细胞进行病毒包装和扩增,用LaSRT法测定病毒滴度。将本次克隆的MAT序列与GenBank收录的山羊序列对比发现,在601bp处碱基由G转变为A,导致氨基酸序列由丙氨酸(Ala)201转变为苏氨酸(Thr)201。酶切鉴定、绿色荧光蛋白观察、PCR及Western blot检测均证明,重组腺病毒质粒构建成功,病毒滴度为2×109 PFU.mL-1。本研究成功构建了重组腺病毒pAdEasy-MAT-HIS。

奶山羊LXRα基因shRNA序列的筛选及腺病毒载体的构建与鉴定

【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK 293细胞,培养7～10d后收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液,反复扩增3次后,获得高滴度的重组腺病毒,测定其病毒滴度。【结果】①设计出了shRNA-490、shRNA-496、shRNA-509和shRNA-923 4条shRNA序列;②得到shRNA-490和shRNA-923 2条具有明显干扰效应的shRNA;③获得pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-490和pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-923 2个重组腺病毒载体,ScaⅠ酶切及测序结果均正确,2个腺病毒重组载体滴度均为5×108 PFU/mL。【结论】奶山羊LXRα基因重组shRNA腺病毒载体构建成功,为利用RNA干扰技术研究LXRα基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定了基础。

循环经济会计基本理论构建

中国的循环经济才刚刚开始,笔者对与中国国情相契合的循环会计进行了初步探索,在传统会计体系内引进循环经济重点关注的环境因素,会计核算基础变身为循环经济,对循环经济会计的未来发展,笔者提出了相关看法。