NLRP3基因敲减对高脂高糖饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的影响

目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)基因敲减对高脂高糖诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型的影响。方法将44只小鼠随机分为正常饮食组(CON)20只,高脂高糖造模组(HFHC)24只。造模14周末,随机选取4只HFHC组小鼠进行腺相关病毒9(AAV9)尾静脉注射预实验,4周后验证NLRP3敲减模型是否成功。18周末确认敲减成功后,对剩余40只小鼠进行AAV9一次性尾静脉注射,分为CON+NLRP3敲减阴性对照组(CON+NLRP3-NC)、CON+NLRP3敲减组(CON+NLRP3-KD)、HFHC+NLRP3-NC及HHFHC+NLRP3-KD组,每组10只,继续造模6周。24周末取材观察炎症小体活化效应,检测小鼠体质量、肝质量、肝指数及糖代谢(空腹血糖、空腹胰岛素及HOMA-IR指数)指标;检测小鼠肝脂质含量(肝组织TG及油红O染色)、肝脏炎症(血清ALT活性、HE染色及炎症相关基因)及肝纤维化(天狼星红染色及纤维化相关基因)指标。计量资料多组间比较使用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与CON+NLRP3-NC组相比,Western Blot结果提示,HFHC+NLRP3-NC组的NLRP3、pro-Caspase1、Caspase1、ASC及IL-1β蛋白水平均升高,HFHC+NLRP3-KD组均降低(P值均<0.05);HFHC+NLRP3-NC组小鼠体质量、肝质量、肝指数及糖代谢指标均有不同程度升高,HFHC+NLRP3-KD组均显著改善(P值均<0.05);在肝脂肪沉积方面,与CON+NLRP3-NC组相比,HFHC+NLRP3-NC组肝脏TG明显增高,油红O染色显示大量红色脂滴,HFHC+NLRP3-KD组肝脏TG及肝脂滴数量显著减少(P值均<0.01);在肝脏炎症方面,HFHC+NLRP3-NC组血清ALT,非酒精性脂肪性肝病活动度(NAS)评分及炎症相关基因均较CON+NLRP3-NC组明显升高,HFHC+NLRP3-KD组均明显降低(P值均<0.01);在肝纤维化方面,HFHC+NLRP3-NC组肝胶原纤维面积以及纤维化相关基因均较CON+NLRP3-NC组明显升高,HFHC+NLRP3-KD组纤维化相关基因均明显降低(P值均<0.05),胶原纤维面积虽有降低趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。结论NLRP3基因敲减可显著改善高脂高糖饮食诱导的NASH小鼠模型肝脂肪沉积及炎症。

联合检测血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ水平早期诊断和判断原发性肝癌患者预后临床价值探讨

目的 探讨联合检测血清甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体3比率(AFP-L3%)和维生素K拮抗剂诱导蛋白-Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)早期诊断和判断原发性肝癌(PLC)患者预后的临床价值。方法 2016年1月~2018年12月我院收治的PLC患者87例、乙型肝炎肝硬化患者79例、慢性乙型肝炎患者73例和健康体检者65例,所有PLC患者均接受经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗,随访3年。采用化学发光免疫分析法检测血清AFP和PIVKA-Ⅱ水平,采用免疫荧光法检测血清AFP-L3。应用Logistic回归分析影响PLC患者3 a生存率的独立危险因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估血清指标预测PLC患者预后的价值。结果 PLC组血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ水平分别为(402.5±95.3)μg/L、(12.9±3.1)和(824.5±82.1) mAU/mL,显著高于乙型肝炎肝硬化组【分别为(17.9±2.6)μg/L、(8.6±1.2)和(30.4±3.2)mAU/mL,P<0.05】或慢性乙型肝炎组【分别为(20.3±6.4)μg/L、(5.4±0.9)和(29.8±3.0)mAU/mL,P<0.05】或健康体检组【分别为(2.2±0.1)μg/L、(2.7±0.4)和(26.3±3.4)mAU/mL,P<0.05】;52例死亡组血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ水平分别为(447.1±71.2)μg/L、(14.1±2.2)和(883.9±50.8)mAU/mL,显著高于35例生存组【分别为(336.2±58.4)μg/L、(11.0±1.8)和(736.2±37.0)mAU/mL,P<0.05】;单因素分析显示,TNM分期、Child分级、肝外转移、血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ水平均会影响PLC患者预后(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,TNMⅢ/Ⅳ期、Child C级、肝外转移、血清AFP≥410.5μg/L、AFP-L3%≥12.1和PIVKA-Ⅱ≥807.2 mAU/mL是影响PLC患者预后的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ联合预测PLC患者3 a预后的AUC为0.908,显著高于三者单独预测的0.763、0.830和0.792(P<0.05)。结论 联合检测血清AFP、AFP-L3%和PIVKA-Ⅱ水平可以帮助诊断PLC,并可能据此判断TACE治疗患者的预后,具有很大的临床意义。

整体式平面三自由度全柔顺并联机构构型拓扑优化设计

基于平面三自由度全柔顺并联机构与传统并联机构的微分运动学矢量连续映射关系,建立整体式平面三自由度全柔顺并联机构构型拓扑优化模型-固体各向同性材料插值(Solid isotropic material with penalization,SIMP)模型,运用优化准则(Optimization criterion,OC)算法对所建立模型求解,采用Heaviside过滤技术处理优化过程中棋盘格和网格依赖问题。基于曲线拟合方法对优化后整体构型轮廓进行拟合,在Solid Works软件中建立其三维模型,进而应用有限元软件进行静力学仿真分析与对比,结果表明:以微分运动学矢量连续映射关系为拓扑优化设计条件,所得出的平面三自由度全柔顺并联机构与传统并联机构具有相同的微分运动特性,定性验证了基于拓扑方法对平面全柔顺并联机构设计的有效性。

基于3-RPS型并联机器人模糊PID控制研究

基于SolidWorks和MATlAb软件关联接口技术,将3-RPS型并联机器人的SolidWorks三维模型转换为SimMechanics机构仿真分析模型;并分别进行传统PID和模糊PID控制系统设计,通过系统仿真实验与对比。得出模糊PID控制在并联机器人控制精度方面优于传统PID控制,且系统稳定性良好。

整体式平面两自由度全柔顺并联机构构型拓扑优化设计

基于平面两自由度并联机构微分运动学矢量连续映射关系,建立整体式平面两自由度全柔顺并联机构构型拓扑优化模型-各向同性材料插值模型(SIMP模型),运用优化准则(OC)算法对所建模型进行求解,并采用Heaviside过滤技术处理优化过程中棋盘格和网格依赖问题。基于曲线拟合方法对优化后整体构型轮廓进行拟合,在Solid Works软件中建立其三维模型,进而应用有限元软件对其进行静力学仿真分析与对比。结果表明:以微分运动学矢量连续映射关系为拓扑优化设计条件,所得出的平面两自由度全柔顺并联机构与传统同构型并联机构具有相同的微分运动特性。

磁共振质子密度脂肪分数——一种具有潜力的非酒精性脂肪性肝炎临床试验替代终点

磁共振质子密度脂肪分数(MRI-PDFF)是一种运用磁共振技术对整个肝脏中的脂肪进行客观定量无创评估的成像方法。主要分析了MRI-PDFF值与“金指标”——非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝组织学评价之间的相关性,探讨其作为NASH临床试验无创性评价指标的优劣。研究表明,MRI-PDFF作为一种新兴的无创技术,适用于定量肝脂肪含量,评价肝脂肪变性程度,但不能替代肝活检作为NASH诊断的工具。同时,药物干预后MRI-PDFF的相对下降不仅与脂肪沉积改善高度相关,而且与炎症和气球样变的改善具有相关性,可以一定程度预测肝组织学的整体改善情况。MRI-PDFF被认为具有作为NASH临床试验替代终点的潜力。

成纤维细胞生长因子21治疗非酒精性脂肪性肝病的临床研究进展及相关机制

成纤维细胞生长因子21(FGF21)是成纤维细胞生长因子家族(FGF)中的一员,在维持机体能量代谢平衡等过程中发挥重要作用。近期两项FGF21类似物治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的临床试验均达到各自的主要疗效评价终点。FGF21可以调控NAFLD相关的发病因素如糖脂代谢异常,还能改善炎症、抗应激损伤、抗纤维化和抑制NASH相关的HCC的发生。本文通过对FGF21类似物治疗NAFLD临床研究进展及相关机制研究进展进行综述,以全面介绍FGF21在NAFLD研究领域的进展。

磁共振质子密度脂肪分数——诊断和评估脂肪肝的新方法

门诊上经常会有患者拿着自己的B超检查结果咨询医生时,问到:"医生,为什么我最近饮食控制和运动坚持的都蛮好的,体重也有下降结果,可B超还是显示中度脂肪肝,我到底有没有好转呢,脂肪肝程度到底有没有减轻呢?"答案当然是"不一定"!辛辛苦苦坚持了好久,做检查却看不到什么改善,总会让患者心里感到淡淡的失落。仔细分析下,除了一些特殊情况患者脂肪肝确实没有改善外,可能还会因为检查做的不够精准!

单幅彩色运动模糊图像的参数估计

提出一种基于单幅彩色模糊图像的运动参数估计方法。首先分析运动模糊图像的傅里叶频谱,揭示图像蕴含运动估计所需要的信息;其次对彩色图像采用分通道估计,避免图像转化带来的信息损失。针对参数估计中误差叠加,对运动方向和尺度分开估计。根据Gabor滤波器对模糊图像频谱图的响应关系得到运动角度;用倒谱法分离出模糊图像中的运动信息求得运动尺度。实验结果表明,该方法可以更精确地从单幅图像中估计运动参数。

3-RPC型并联机器人模糊滑模轨迹跟踪控制研究

分析了直流伺服电机驱动的3-RPC并联机器人的运动学反解,并对其进行了轨迹规划;设计了传统滑模控制及模糊滑模控制,建立了仿真模型,并完成了各支路的期望运动的轨迹跟踪。仿真结果表明:模糊自适应增益滑模控制比传统滑模控制精度更高,响应时间明显更快,更能有效地消弱控制中带来的抖振现象。

祛湿化瘀方治疗小鼠实验性非酒精性脂肪性肝炎合并肝纤维化的疗效

目的:明确祛湿化瘀方对实验性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)合并肝纤维化的疗效。方法:运用高反式脂肪酸高糖饮食诱导29周构建小鼠NASH合并肝纤维化模型,并予祛湿化瘀方灌胃给药4周,设奥贝胆酸为阳性对照药。观察各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平,肝组织甘油三酯(TG)与羟脯胺酸(HYP)含量,肝组织病理,肝纤维化相关指标:肝组织Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA及蛋白的表达。结果:祛湿化瘀方可显著降低NASH肝纤维化小鼠血清ALT、AST活性及FBG、INS和HOMA-IR(P<0.01,P<0.05),降低肝组织TG及HYP含量(P<0.05,P<0.01);显著改善肝组织脂肪变性、炎症及气球样变、降低纤维化分期,显著降低肝组织Col-Ⅰ、α-SMA和TGF-β的mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:祛湿化瘀方可改善实验性NASH肝纤维化,为其治疗NASH肝纤维化的临床应用及药物研发提供依据。

不同证型非酒精性脂肪性肝病患者的血清胆汁酸谱特征研究

目的:在血清胆汁酸谱层面探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者中医证型肝胆湿热证、肝郁脾虚证的物质基础。方法:182例NAFLD患者辨证分为无证可辨(36例)、肝胆湿热(92例)和肝郁脾虚(54例)3组;收集受试者各项指标及血清总胆汁酸(TBA)水平;通过液相色谱/串联质谱分析15种血清胆汁酸水平;比较NAFLD各证型间代谢相关指标及胆汁酸谱特征。结果:肝胆湿热组的TBA显著高于无证可辨组、牛磺石胆酸(TLCA)显著低于无证可辨组(P<0.05);肝郁脾虚组的TBA、石胆酸(LCA)、甘氨石胆酸(GLCA)均显著高于无证可辨组(P<0.05,P<0.01);肝郁脾虚组的甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)显著高于肝胆湿热组(P<0.05)。结论:肝郁脾虚证的NAFLD患者表现出相对更加紊乱的血清胆汁酸代谢异常,血清胆汁酸的代谢紊乱是NAFLD不同证型的物质基础之一。

平面3-RRR全柔顺并联机构的微分运动分析

通过建立平面3-RRR型全柔顺并联机构"伪刚体模型",采用微动近似算法得到输入和输出之间的位移雅可比矩阵,研究其微动情况下输入与输出之间位移矢量微分映射关系,并进行数值验证,利用ANSYS软件对其进行仿真,为此类平面并联机构及具有多输入多输出特性的空间并联机构微分运动分析提供理论参考依据。

平面3-PRP型并联机构运动学及奇异性分析

平面3-PRP型并联机构在平面上具有3个结构对称的支链形式,每个支链由一个移动副(P)连接基座、1个移动副(P)与动平台相连接,2个移动副通过转动副(R)所连接。采用矢量分析方法对3-PRP型并联机构运动学正/反解进行求解,并基于雅克比矩阵对其速度和奇异性各向同性配置进行分析。仿真结果表明,3-PRP型并联机构在工作区域内无奇异位形,并可通过运动参数的调节提高运动精度。

扶正化瘀胶囊对非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠的影响

目的:探讨扶正化瘀胶囊对高反式脂肪酸高糖饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化的治疗作用。方法:采用40只SPF级雄性C57/B6小鼠随机分成4组,分别为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊组、扶正化瘀胶囊组,每组10只,除正常组10只外,余30只用高脂高糖饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型24周。在造模第25周起,4组分别灌胃给药4周,1次/d,扶正化瘀胶囊组4.8 g·kg^(-1);奥贝胆酸组10 mg·kg^(-1);模型组、正常组同体积生理盐水灌胃。第28周结束后收集肝组织和血清样本。分别采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠肝组织病理变化、天狼猩红染色观察肝纤维化程度、油红O染色观察脂质沉积程度,碱水解法测定肝组织羟脯胺酸(Hyp)含量,酶法检测肝组织甘油三酯(TG)含量的变化,试剂盒法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及空腹血糖(FBG),酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测空腹胰岛素(INS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组化检测肝纤维化相关mRNA与蛋白水平的变化。结果:与正常组比较,模型组肝组织出现显著的胶原纤维沉积、纤维化分期大多为F2-F3期,肝组织炎性灶数目增多、肝细胞气球样变和肝细胞脂肪变性明显,肝组织Hyp,TG含量显著升高(P<0.01),血清ALT,AST活性及FBG,INS,HOMA-IR水平显著升高(P<0.01),肝组织Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ),Col-Ⅳ,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),转化生长因子-β(TGF-β)蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组小鼠肝组织胶原纤维沉积显著减轻,纤维化分期大多为F0-F1期,肝细胞气球样变显著改善,小叶内炎性灶数目明显减少(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,扶正化瘀胶囊可显著降低小鼠肝组织Hyp含量、血清ALT,AST水平及Col-Ⅰ,Col-Ⅳ,α-SMA,TGF-βmRNA与蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:扶正化瘀胶囊对高反式脂肪酸高糖饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化具有良好的治疗作用。

平面3-RPR全柔顺并联机构的构型拓扑优化设计

基于并联机构的微分运动学输入与输出之间位移矢量微分映射关系,通过建立平面3-RPR型全柔顺并联机构的拓扑优化模型(SIMP插值模型),运用优化准则法(OC算法)进行优化求解,并采用Heaviside过滤技术对棋盘格现象进行抑制和处理。结合二次插值法对拓扑优化后得到的模型进行曲线拟合,并在Solid Works中三维建模,将模型导入Hyperworks中二次网格划分并进行静力学分析与对比,结果表明:基于映射关系所得出的拓扑优化构型与传统并联机构构型具有相同的运动特性,结构更加简洁、轻便,该方法为此类平面全柔顺并联机构构型综合方面提供理论参考依据。

补肾柔肝方抑制血管新生的抗小鼠肝纤维化作用机制

目的:从血管新生角度探讨补肾柔肝方抗小鼠肝纤维化作用机制。方法:雄性C57小鼠按体质量分层随机分为正常组、模型组、补肾柔肝方组、索拉非尼(Sorafenib)组。模型组、补肾柔肝方组、索拉非尼组以0.4%二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射,1次/d,每周3次,共8周,诱导肝纤维化模型。造模第5周开始给药,8周后处死留取血清、肝组织样本。记录小鼠体质量变化及死亡情况;取材后检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及白蛋白(ALB)含量。以天狼猩红胶原染色和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量评估肝纤维化程度;以肝组织血小板内皮细胞粘附分子-1(CD31)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达情况评价肝脏血管新生情况。结果:模型组小鼠死亡率为15.4%(2/13),补肾柔肝方组无小鼠死亡,索拉非尼组小鼠死亡率7.7%(1/13)。补肾柔肝方组及索拉非尼组小鼠血清ALT、AST含量较模型组降低(P<0.05),血清ALB含量升高(P<0.05);补肾柔肝方组和索拉非尼组小鼠肝组织Hyp含量较模型组显著降低(P<0.05)。天狼星红染色显示,补肾柔肝方组和索拉非尼组纤维化程度较模型组明显减轻;Western blot及肝组织免疫组化实验显示,补肾柔肝方组和索拉菲尼组小鼠肝组织CD31和VEGFR2蛋白表达较模型组均显著下调(P<0.05)。结论:补肾柔肝方可有效改善DMN诱导小鼠模型肝纤维化,其作用机制可能与抑制血管新生有关。

经方治疗非酒精性脂肪性肝病研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤,已成为我国最主要的慢性肝病,但 NAFLD 尚缺乏特效的治疗西药。近年来,中医经方被应用于治疗 NAFLD,取得了较好的疗效。本文按照治则治法分类,对近些年运用经方(大柴胡汤、小柴胡汤、苓桂术甘汤、大黄■虫丸、鳖甲煎丸、茵陈蒿汤等)治疗 NAFLD 的相关临床及基础研究进行综述。

“护蛋”行动

上个星期，老师给我们布置了一项特殊的任务——“护蛋”，并说：“每位同学都必须准备一个鸡蛋，像鸡妈妈一样寸步不离地保护鸡蛋7天。7天后，如果鸡蛋没破的话，就成功了；如果鸡蛋破的话，那就失败了。”教室里顿时炸开了锅，同学们叽叽喳喳地讨论起来，我暗想：这可不容易，真希望我的鸡蛋平平安安地度过这漫长的7天。

非酒精性脂肪性肝病患者进食夜宵情况的横断面调查

目的:采用横断面调查方法,探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者进食夜宵情况。方法:以上海中医药大学附属曙光医院体检人群为对象,抽样调查NAFLD组及非NAFLD组人群体重、BMI、血糖、血脂、肝功能、尿酸等机体代谢相关指标以及进食夜宵频率、进食量、进食种类情况。结果:①NAFLD组人群体重、腰围、BMI显著高于非NAFLD组人群(P<0.05)。②NAFLD组人群血清ALT、AST、γ-GT活性、FBG、LDL指标与非NAFLD组人群相比已出现升高趋势(P<0.05)。③NAFLD组人群血清TG、TC、UA含量均显著高于非NAFLD组人群(P<0.05)。④NAFLD组人群进食夜宵的比例显著高于非NAFLD组人群(χ^(2)=10.058,P=0.002)。⑤与非NAFLD组人群比较,NAFLD组人群每周进食夜宵频次差异具有统计学意义(χ^(2)=6.112,P=0.013)。⑥进食夜宵的种类,NAFLD组人群以海鲜烧烤类、甜点类、含糖饮料类为主,非NAFLD组人群则以水果蔬菜类、牛奶乳制品类、坚果类为主。结论:NAFLD人群进食夜宵比例、每周进食夜宵次数均高于非NAFLD组人群,且两组人群进食夜宵种类不同;进食夜宵可能是导致NAFLD的重要危险因素。