汉防己甲素抑制翼状胬肉成纤维细胞增殖的研究

目的:观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖抑制作用并探讨其机制,寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物。方法:(1)倒置相差显微镜下观察不同浓度的Tet作用下,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞形态的变化,并与丝裂霉素(Mitomycin,MMC)进行比较。(2)MTT比色法测定不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用,并与MMC进行比较。(3)流式细胞仪检测不同浓度的Tet作用48h,体外培养的翼状胬肉成纤维细胞细胞周期的变化。结果:(1)Tet作用下,细胞胞体收缩,变圆,间隙增宽,药物浓度高时,细胞碎裂,浮起。0.1,0.2g/LMMC作用下大量细胞碎裂,溶解。(2)不同浓度的Tet作用48h对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.01);0.1g/L与0.2g/LMMC、4×10-5mol/LTet与0.2g/LMMC对翼状胬肉成纤维细胞活性的影响无显著性差异(P>0.05)。Tet的IC50接近10-5mol/L(为0.848×10-5mol/L)。(3)Tet作用下,翼状胬肉成纤维细胞周期中S期细胞增多,浓度越高,作用越明显。结论:汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,细胞分裂被阻止在S期(DNA合成期)。可望用于对翼状胬肉的治疗。

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的实验研究

目的观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用,寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物。方法用MTT比色法测定不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增生的抑制作用,并与丝裂霉素C(MMC)进行比较;用荧光定量PCR检测10-5mol/L的汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)MMP-3 mRNA的表达的影响。结果不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增生均有明显的抑制作用(P<0.01);10-5mol/L的汉防己甲素作用24 h其MMP-3 mRNA的表达量下降了27.12%。结论汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞具有明显的抑制作用,可望用于对翼状胬肉的治疗。

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞相关因子分泌的影响

目的观察翼状胬肉组织块分泌的相关因子变化,了解汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对翼状胬肉病变的作用。方法收集初发翼状胬肉(实验组)和正常球结膜组织块(对照组)体外培养上清液,ELISA检测上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量及10-5mol.L-1Tet作用48h实验组中各因子含量的变化。结果实验组上清液中VEGF含量较对照组高(P<0.01);加入Tet作用48h后明显下降(P<0.01),与对照组上清液中VEGF含量无差异(P>0.05)。2组上清液中IL-1β的含量相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论VEGF在翼状胬肉新生血管形成中发挥着重要作用。汉防己甲素对翼状胬肉组织中VEGF的分泌有明显抑制作用,有良好的应用前景,但IL-1β在翼状胬肉中的作用仍需进一步研究。

SDF-1β和瘦素在2型糖尿病患者血中的变化及相关性

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清中基质细胞衍生因子-1β(SDF-1β)和瘦素(leptin)的变化及意义。方法:用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)测定28例T2DM患者和14例健康对照者血清中SDF-1β和瘦素的水平。糖尿病患者分单纯糖尿病组和血管病变组。结果:SDF-1β和瘦素水平在对照组、单纯糖尿病组、血管病变组中依次下降,但除血管病变组中SDF-1β水平与正常对照组差异有显著性外,其余各组间皆无统计学差异;血中SDF-1β水平与瘦素呈正相关(rs=0.524,P<0.01)。结论:T2DM患者血中SDF-1β的水平下降,可能通过进入周围组织促进血管病变的产生和发展,可作为临床治疗调整的靶点之一。而瘦素的作用需进一步研究。

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的:观察汉防己甲素(Tet)对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)分泌及表达的影响。方法:收集正常球结膜与初发翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液,ELISA法检测两种细胞培养上清液中MMP-1,MMP-3,MMP-9的含量及10-5mol/L的Tet作用48h翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液中含量的变化。荧光定量PCR检测10-5mol/L的Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-3mRNA表达的影响。结果:培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1,MMP-3含量较正常成纤维细胞上清中含量高[MMP-1:26928±1135→3148±74(ng/L),MMP-3:52593±1031→12490±3126(ng/L),P<0.01],加入10-5mol/LTet作用48h后明显下降[MMP-1:26928±1135→15064±533(ng/L),MMP-3:52593±1031→29943±561(ng/L),P<0.01]。培养的正常结膜及初发翼状胬肉成纤维细胞上清中未检测到MMP-9。初发翼状胬肉成纤维细胞MMP-3mRNA是正常结膜组织成纤维细胞的3倍,10-5mol/L的Tet作用24h后表达量下降了27.1%。结论:Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-1,MMP-3的分泌有明显的抑制作用,并能抑制其细胞MMP-3mRNA表达量。

初发和复发翼状胬肉成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶的比较及汉防己甲素对其的影响

目的检测培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的情况,并作为观察指标了解汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对其的抑制作用。方法相同的条件下培养初、复发翼状胬肉与正常球结膜成纤维细胞,酶联免疫吸附试验检测培养的细胞上清液中MMP-1、MMP-3、MMP-9的含量,同时应用10-5mol·L-1Tet作用于培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞,48h后分析培养液中上述MMPs含量的变化。结果培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1含量均较正常球结膜高(均为P<0.05),加入10-5mol·L-1Tet后均明显下降(均为P<0.05),但初发翼状胬肉上清中MMP-1含量仍高于正常球结膜(P<0.05),而复发翼状胬肉上清中MMP-1含量与正常球结膜相比差异无统计学意义(P>0.05);初发翼状胬肉上清中MMP-1含量明显高于复发翼状胬肉,加入Tet后仍较复发翼状胬肉高(均为P<0.05)。培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-3含量较正常球结膜高(P<0.05),加入10-5mol·L-1Tet后明显下降(P<0.05),但仍高于正常球结膜(P<0.05);复发翼状胬肉上清中MMP-3含量低于正常球结膜(P<0.05)。培养的初、复发翼状胬肉和正常球结膜成纤维细胞上清中均未检测到MMP-9。结论初、复发翼状胬肉成纤维细胞MMP-1、MMP-3的分泌有明显的差异,Tet对初、复发翼状胬肉成纤维细胞MMP-1及初发翼状胬肉MMP-3的分泌有明显的抑制作用。

汉防己甲素体外对正常结膜与翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的比较

目的:观察汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对正常结膜和翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的异同。方法:在相同的培养条件下,传第3代的正常结膜与翼状胬肉成纤维细胞皆加入不同浓度的Tet,分别于加药后1和3d行MTT检测细胞的存活率。结果:用药后1d,4×10-5和2×10-5mol/LTet对正常结膜与翼状胬肉成纤维细胞存活率无显著性差异(P>0.05),其余各浓度的Tet对翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用大于正常结膜成纤维细胞,正常结膜成纤维细胞的存活率大于翼状胬肉成纤维细胞(P<0.01)。用药后3d,4×10-5mol/LTet组翼状胬肉成纤维细胞的存活率大于正常结膜成纤维细胞(P<0.01);其余各浓度的Tet对两种成纤维细胞存活率无显著性差异(P>0.05)。结论:用药后3d,2×10-5mol/L及半数抑制量(10-5mol/L)以下浓度的Tet对翼状胬肉成纤维细胞起抑制作用,而对正常结膜成纤维细胞的影响较小。

白内障超声乳化吸出术简化操作的效果评价

目的 评价白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术简化操作的临床效果。方法 对行简化操作手术的 74例 (80眼 )术后眼部情况行临床观察分析。结果 术后第 1天 ,所有病人的结膜瓣原位贴附良好 ,瞳孔恢复至正常大小 ,未见明显并发症发生。结论 超声乳化吸出术简化操作可行、有效。

初复发翼状胬肉相关因子检测及汉防己甲素作用观察

目的通过检测初、复发翼状胬肉组织块分泌的相关因子并作为观察指标,了解汉防己甲素(Te-trandrine,Tet)对翼状胬肉病变的作用。方法收集初、复发翼状胬肉和正常球结膜组织块进行体外培养,并将初、复发翼状胬肉组织各分为无药组和药物干预组,后者加10-5 mol.L-1的Tet作用48 h。ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth Factor,VEGF)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的含量。结果 (1)初发翼状胬肉无药组的组织上清夜VEGF含量较初发翼状胬肉药物干预组及正常结膜组高(P<0.05),而初发翼状胬肉药物干预组与正常结膜组的VEGF含量相当(P>0.05)。复发翼状胬肉组织无药组的VEGF含量低于正常结膜组织。(2)初、复发翼状胬肉无药组上清液中IL-1β的含量与正常结膜组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Tet对初发翼状胬肉组织中VEGF的分泌有抑制作用,而VEGF可能与初发翼状胬肉血管的形成及病情进展密切相关。VEGF在复发翼状胬肉中的作用及IL-1β在翼状胬肉中的作用尚需进一步研究。

糖尿病视网膜病变患者血清Gas6和SDF-1的检测及意义

背景 糖尿病视网膜病变（DR）是常见的糖尿病微血管并发症之一,发病机制复杂.研究表明生长停滞特异性基因产物6（Gas6）/TAM系统参与了糖尿病及其并发症的发生,而2型糖尿病患者基质细胞衍生因子1（SDF-1）表达水平发生改变,但血清Gas6/TAM系统和SDF-1是否参与DR的发生尚不明确.目的 比较正常人和糖尿病患者血清Gas6和SDF-1水平的变化,探讨其在DR发病过程中的作用.方法 采用前瞻性队列研究方法,于2013年1-8月收集在南方医科大学第三附属医院诊治的糖尿病患者90例,按1987年中华医学会糖尿病视网膜病变分期标准将患者分为增生型DR（PDR）组、单纯型DR（BDR）组、糖尿病无视网膜病变（NDR）组,每组30例,另纳入同期在医院进行健康体检的正常志愿者30名.收集正常志愿者和糖尿病患者外周血2 ml,检测受试者白细胞和中性粒细胞计数及血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（CHOL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平.采用ELISA法检测受试者血清中Gas6、SDF-1α和SDF-1β水平,比较正常志愿者与DR患者上述检测指标的差异,并分析患者血清中Gas6、SDF-1α和SDF-1β质量浓度与血细胞及血脂水平的关系. 结果 正常对照组、NDR组、BDR组和PDR组血清中CHOL分另为4.93 （4.14,5.44）、5.02（4.35,5.69）、4.54（3.85,5.93）和5.99（5.11,6.89） mmol/L,其中PDR组血清中CHOL浓度明显高于正常对照组、NDR组和BDR组,差异均有统计学意义（P=0.002、0.007、0.006）.正常对照组、BDR组白细胞计数高于PDR组（P=0.034、0.015）,BDR组中性粒细胞计数高于PDR组（P=0.024）,NDR组HDL-C高于PDR组（P=0.032）.PDR组LDL-C水平高于正常对照组（P=0.032）.与正常对照组相比,NDR组和BDR组患者血清Gas6水平明显下降,差异均有统计学意义（P=0.048,P=0.006）,而PDR组患者血清Gas6水平高于BDR组,但差异无统计学意义（P=0.297）.PDR组患者血清中SDF-1α水平明显高于BDR组（P=0.033）;PDR组、BDR组患者血清中SDF-1β水平明显高于NDR组（P=0.011、0.008）和正常对照组（P=0.030、0.002）.患者血清中Gas6质量浓度与血清中CHOL、TG、LDL-C浓度间均呈微弱正相关（r=0.285、0.200、0.241,P＜0.05）,血清中SDF-1α水平与SDF-1β水平间呈微弱正相关（r=0.190,P=0.038）;血清中SDF-1β质量浓度与白细胞计数呈微弱正相关（r=0.183,P=0.045）.以血清Gas6为因变量,以白细胞、中性粒细胞、CHOL、TG、HDL-C、LDL-C、SDF-1α、SDF-1β为自变量进行多元逐步回归分析,得到回归方程：Gas6=170.791 ＋5.283CHOL（F=5.021,P=0.027）. 结论 2型糖尿病导致的DR患者血清中Gas6、SDF-1α、SDF-1β水平在DR的发生和发展过程中可能发挥一定的作用,其作用机制可能与血糖水平、炎性细胞和脂质代谢紊乱或新生血管形成有关.

别把“老眼昏花”不当回事

不少人对老年人玩手机引发的健康问题开始关注,可对视力下降这件事,大家却觉得老人“眼花”是自然规律,不算个事。但是,老年人视物不清不一定就是“老花”,常见的眼病不重视也会致盲!玩手机引起眼疲劳、黑暗里看手机诱发青光眼,更是值得老年朋友重视。“老眼昏花”不一定是“老花”经常会听到一些老年朋友感叹“老了,眼睛看不见了”,但感叹归感叹,很多老年人和家属都觉得这是正常现象,不需要治疗。

外伤所致真菌性角膜溃疡的病原学及治疗分析

目的 研究外伤所致真菌性角膜溃疡的发病情况及疗效与病程的关系。方法 对 1 999～ 2 0 0 2年收治的主要由眼外伤所致的 57例真菌性角膜溃疡病例 ,分析发病与季节的关系 ,总结用碘酊烧灼 +局部二性霉素B、氟康唑滴眼液治疗的效果。结果 9～ 1 1月份发病最多 ;眼外伤是其主要致病原因 ,治愈 2 4例占 42 .1 1 % ,发病 1 0日内就诊者治愈率61 .9% ,2 1天后就诊者仅 1 1 ,1 1 % ,说明疗效与病程密切相关。结论 男性农民为真菌性角膜溃疡高危人群 ,应早发现。

荧光定量聚合酶链反应法检测光感受器细胞凋亡大鼠视网膜中半胱氨酸蛋白酶3 mRNA的表达

目的:检测半胱氨酸蛋白酶3mRNA在光感受器凋亡大鼠视网膜中的表达,探讨其在光感受器细胞凋亡的发生、发展中的意义。方法:实验于2004-03/12在中山眼科中心眼科学教育部重点实验室完成。选择雌性SD大鼠36只,随机数字表法分为正常对照组6只,N-甲基-N-亚硝脲组30只,后者又分为造模后12h,1,2,3,5d5个时相点,每个时相点6只。正常对照组大鼠经腹腔注射生理盐水;N-甲基-N-亚硝脲组大鼠按体质量一次性腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲40mg/kg,分别于造模后12h,1,2,3,5d处死动物,摘除右眼球,立即分离视网膜,提取总RNA,用荧光定量聚合酶链反应法检测视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA的含量。结果:纳入动物36只,均进入结果分析。正常对照组、N-甲基-N-亚硝脲组造模后12h,1,2,3,5d5个时相点视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量分别为1.52×105,18.35×105,25.14×105,29.25×105,13.72×105,12.24×105。N-甲基-N-亚硝脲腹腔注射后12h视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量上升,第2天时最高,达正常对照组表达量的19倍,此后渐下降,第5天表达量仍为正常对照组的8倍。结论:视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达与光感受器细胞的存亡有关,可作为光感受器细胞凋亡发生、发展的预测指标之一。

翼状胬肉中核糖体S6蛋白磷酸化、细胞周期蛋白D1的表达及意义

目的研究核糖体S6蛋白磷酸化(ribosomal S6 protein phosphorylation,P-S6)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在翼状胬肉中的表达及相关性,探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路在翼状胬肉发病机制中的作用。方法收集翼状胬肉组织31例,正常结膜组织17例,利用免疫组织化学和Western blot进行P-S6和CyclinD1的检测及比较。结果 Western blot检测6例翼状胬肉组织中P-S6蛋白/S6蛋白表达(1.196±0.101)显著高于正常结膜组织(0.295±0.056),差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示:翼状胬肉中P-S6、CyclinD1的阳性表达率均为100%(25/25),正常结膜组织中P-S6阳性表达率为18.2%(2/11)、CyclinD1阳性表达率为9.1%(1/11),正常结膜组织与翼状胬肉组织中P-S6与CyclinD1表达差异均有统计学意义(均为P<.05)。翼状胬肉组织中P-S6与CyclinD1的表达呈正相关(r=0.752,P<0.05)。结论 mTORC1信号通路在翼状胬肉发病过程中起重要作用,并可能通过调控CyclinD1的表达来实现。

β-catenin在翼状胬肉成纤维细胞中的表达

目的:β-catenin在正常的细胞粘附和wnt信号通路中发挥重要功能,本文探讨其在翼状胬肉组织及成纤维细胞中的表达及TGF-β1对其的影响。方法:通过组织块培养获取正常球结膜和翼状胬肉成纤维细胞并传至第4代,用10μg/LTGF-β1作用于细胞。抗β-catenin抗体对体内取出组织和培养的细胞行免疫组化染色;免疫印迹法检测培养成纤维细胞中β-catenin的表达情况。结果:免疫组化显示翼状胬肉成纤维细胞中β-catenin阳性着色强于正常结膜成纤维细胞。β-catenin在胬肉组织中较多,且多分布于上皮下纤维血管组织,上皮染色较少。体外培养见翼状胬肉成纤维细胞的生长较正常结膜成纤维细胞快、增殖能力强。免疫印迹法显示在翼状胬肉成纤维细胞蛋白中β-catenin的特异性阳性条带灰度值高于正常球结膜成纤维细胞蛋白。TGF-β1能促进翼状胬肉成纤维细胞中的β-catenin蛋白表达。结论:β-catenin在翼状胬肉组织及其成纤维细胞中的表达增高,提示β-catenin与翼状胬肉的发病有关。

眼外肌外伤11例临床分析

目的 观察眼外肌外伤的治疗效果。方法 眼外肌外伤 1 1例早期行抗炎、营养神经药物治疗及功能训练 ,6例兼行超短波治疗 ,1例行眶壁修复手术 ,后期血管扩张剂治疗。结果 半年后 8例复视患者中 6例复视症状消退或明显减轻 (包括行眶壁修复术 1例 )。