基于多方位综合素质培养的研究生教育模式探索与实践—以湖南中医药大学中医诊断研究所为例

医学研究生是医学研究的重要力量,同时也是培养高层次创新医学人才的重要储备。医学教育的根本任务是加强医学相关学科的建设布局和支持力度,培养高层次的、具有国际视野的复合型医学人才。在此背景下,探索如何提升中医学术型研究生的综合素质是高层次医学创新型人才培养的关键课题。文章以湖南中医药大学中医诊断研究所为例,在培养中医诊断学学术型研究生过程中,通过实验室结合可共享数字化学术资源为主的开放式共享平台,联合产学研合作、学科竞赛及人文素质教育的培养模式,探讨了提升中医诊断学学术型研究生综合素质的可行性,旨在为该教育模式的推广提供依据和参考。

多元化教学模式下提升中医学专业本科学生《中医诊断实训》课程教学质量探索

《中医诊断学》是中医学专业本科学生的核心基础课程之一。《中医诊断实训》是《中医诊断学》的分支课程,以加强学生临床实践能力为教学目标,是《中医诊断学》的重要组成部分。传统的实训课程教学模式往往较为单一,无法满足学生对于临床技能学习的需求。随着中医药教育理念和教学方法的不断更新发展,多元化、多途径教学模式逐渐成为提升中医学本科生教学质量的重要手段。本文结合湖南中医药大学中医诊断学科本科教学实际情况,探讨了如何通过多元化教学模式提升《中医诊断实训》课程的教学质量,加强学生将理论应用于临床实践的能力。

黄芪建中汤干预胃溃疡的药理实验及分子生物学作用机制

目的:基于生物信息学分析黄芪建中汤治疗胃溃疡(GU)的作用机制,并结合动物实验进一步验证。方法:在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、成分靶点预测数据库(Swiss Target Prediction)中收集黄芪建中汤的活性成分和作用靶点;利用基因数据库(GeneCards)、药物数据库(Drug Bank)等提取GU疾病靶点;在Cytoscape 3.7.2软件中获取黄芪建中汤防治GU的“活性成分-潜在治疗靶点”图,借助STRING和DAVID数据库依次获取蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、基因本体(GO)和基因组百科全书(KEGG)富集分析;并通过分子对接和动物实验验证黄芪建中汤防治GU的可能机制。结果:黄芪建中汤治疗GU有131个潜在靶点,其中核心靶点为磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、蛋白激酶B1(AKT1)等,KEGG分析提示磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)等信号通路发挥着重要作用。分子对接提示核心靶点与核心成分对接良好。动物实验显示,与正常组比较,模型组溃疡指数增高、胃组织出现炎性浸润,白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达显著升高(P<0.01),胃组织PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,给药组大鼠胃损伤明显减轻,IL-6、IL-β、TNF-α表达显著下调(P<0.01),PI3K、p-AKT蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:黄芪建中汤对GU的干预作用具有多途径、多靶点的特性,可能是通过激活PI3K/AKT信号通路来加速胃黏膜修复,并降低炎症而减轻胃损伤。

原发性开角型青光眼发病机制的文献计量学研究

目的:通过对近30 a原发性开角型青光眼(POAG)发病机制的相关文献进行计量学分析,了解该领域的发文情况、研究趋势及研究前沿和热点。方法:检索1993-09-01/2023-09-01在中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)核心数据库已发表的关于POAG发病机制的相关文献986篇,运用CiteSpace(6.2.R.4)和VOSviewer(1.6.18)软件对检索到的文献进行知识图谱分析,分析内容包括发文量、作者、研究机构、国家/地区及关键词。结果:美国发文量最多(243篇),其次是中国(121篇)。发文量最多的国外研究机构是哈佛大学(37篇),国内研究机构中山医科大学中山眼科中心、首都医科大学宣武医院眼科、北京医科大学第一医院眼科发文量并列第一。Louis R. Pasquale(21篇)是最高产的英文作者,王宁利是该领域最活跃的中国研究者。该领域研究的关键词包括小梁网、眼压、房水、糖皮质激素、血液流变学等。结论:POAG发病机制的研究正处于蓬勃发展期,美国在该领域发文量最大,哈佛大学为该领域的领先研究机构。POAG研究领域的研究重点已经从结构方面转移到了基因层面,基因研究与中医治疗在该领域具有广泛的应用前景。

基于PERK/ATF4/CHOP信号通路研究滋阴明目方含药血清对衣霉素诱导的ARPE-19细胞的作用机制

目的研究滋阴明目方含药血清对衣霉素诱导ARPE-19细胞的影响及其可能机制。方法构建细胞内质网应激损伤模型,将ARPE-19细胞分为空白组、模型组、空白血清组、滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组。对细胞进行形态观察,CCK-8检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达。结果选用浓度50μmol/L衣霉素干预ARPE-19细胞造模。观察细胞形态发现,滋阴明目方含药血清组和牛磺熊去氧胆酸组ARPE-19细胞较模型组细胞数量增多,生长较均匀,漂浮的死亡ARPE-19细胞及碎片减少。与空白组相比,模型组和空白血清组的细胞存活率下降(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP蛋白表达上调(P<0.01)。与模型组相比,滋阴明目方含药血清组细胞存活率上升(P<0.01),凋亡率明显下降(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP蛋白表达下调(P<0.01)。结论滋阴明目方含药血清可以减少ARPE-19细胞内质网应激损伤模型的凋亡,其分子机制与调控PERK-ATF4-CHOP信号通路有关。

滋阴明目方对视网膜色素变性rd10小鼠PERK-ATF4信号通路的影响

目的研究滋阴明目方对视网膜色素变性小鼠的影响及其可能机制。方法将60只rd10小鼠随机分为模型组(等量生理盐水)、维生素A(Vitamin A,VitA)组[VitA 750 IU/(kg·d)]及滋阴明目方低、中、高剂量组[滋阴明目方水煎液13.5、27、54 g/(kg·d)],12只C57BL/6小鼠作为空白组(等量生理盐水),均灌胃干预28 d。HE染色观察视网膜组织病理改变,TUNEL法检测视网膜组织凋亡,微滴式数字PCR和免疫荧光双染检测视网膜组织蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠视网膜明显萎缩、变薄,视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞不可见,外核层消失,视网膜厚度减小(P<0.01),小鼠视网膜细胞数量明显减少,存在大量凋亡细胞;PERK、ATF4 mRNA和蛋白表达量升高(P<0.01)。与模型组比较,VitA组和滋阴明目方各剂量组视网膜状况改善,厚度均增加(P<0.01);细胞数量增多,凋亡细胞减少;PERK、ATF4 mRNA表达量降低(P<0.01)。与模型组比较,VitA组和滋阴明目方中、高剂量组PERK、ATF4蛋白表达量降低(P<0.01);滋阴明目方低剂量组ATF4蛋白表达量降低(P<0.01)。与滋阴明目方低剂量组比较,滋阴明目方高剂量组视网膜厚度增加(P<0.05),滋阴明目方中、高剂量组ATF4蛋白表达量及PERK mRNA表达量降低(P<0.01)。与VitA组相比,滋阴明目方高剂量组ATF4蛋白表达量降低(P<0.05),滋阴明目方中、高剂量组PERK mRNA表达量降低(P<0.01)。结论滋阴明目方可改善小鼠视网膜的形态,减少视网膜组织的凋亡,其分子机制可能与调控PERK-ATF4信号通路有关。

基于Citespace的视网膜色素变性的文献计量学分析

目的基于文献计量学探究近20年国内外关于视网膜色素变性(RP)的研究现状和热点前沿。方法分别检索中国知网数据库(CNKI)和Web of Science核心数据库(WoSCC)有关RP实验研究和临床研究的文献,利用Citespace进行可视化分析。结果共筛选出2277篇文献,CNKI和WoSCC中分别检索出354篇中文文献和1923篇英文文献,年度发文量总体呈上升趋势。湖南中医药大学第一附属医院和伦敦大学分别是CNKI和WoSCC中发文量最大的机构。彭清华和彭俊是CNKI中发文量最大的作者,Tsang Stephen H是WoSCC中发文量最大的作者。由关键词分析可知WoSCC文献的研究重点是遗传学和基因组学研究,而CNKI文献的研究重点是中医药治疗。结论本研究利用Citespace软件对RP研究领域的现状进行分析,明确当前的研究热点和前沿,为关注该领域的研究者提供了新思路和理论参考。

《中医学概论》课程教学改革的思考

《中医学概论》是中医药高等院校非中医专业本科学生必修的一门中医学基础课程,是中医药人才培养的重要载体课程。随着社会的发展和医学领域的不断进步,《中医学概论》教育需要不断更新和改进,以适应现代医学教育的需求。本文通过研究与分析传统的《中医学概论》教学模式所面临的挑战,提出相应的改革建议,例如更新教材内容、利用现代教育技术、开展实验实训教学、重视学生反馈和教学评估、加强教师专业素质培养、加强政策支持等,旨在提高《中医学概论》教育质量,培养更多的复合型中医学人才。

中医临床基础学科学术型研究生科研能力培养方法的探索与实践

研究生是国家高层次人才,是国家科技发展的关键力量。新的时代背景下,如何培养中医学专业研究生是社会广泛关注的问题。当前我国中医基础学科学术型研究生培养面临诸多问题,包括科研基础薄弱,院校培养机制有待加强和完善,科研思维和意识有待提升,基础设施建设滞后等。为改善这一现状,现提出以下应对措施:改革课程设置、优化教学资源,加强学科建设、创新培养机制,加强自我管理、建立考核制度,加强规范培训、强调入室安全。旨在为深入推进我国中医研究生培养机制改革、进一步提高学术型研究生科研能力和综合素质提供参考。

滋阴明目丸通过激活音猬因子信号通路对小鼠视网膜色素变性的改善作用

目的探究滋阴明目丸对小鼠视网膜色素变性(RP)的改善作用及其可能机制。方法将RP转基因小鼠(rd10)随机分为模型组、乐盯组(0.15 g/kg)和滋阴明目丸低、高剂量组(4.50、9.00 g/kg),以C57BL/6小鼠为正常组,每组12只。HE染色检测小鼠视网膜组织病理改变,视网膜电图(ERG)检测视功能,光学相干断层扫描(OCT)观察小鼠眼底表现并检测视网膜厚度,激光散斑血流技术检测小鼠视网膜血液灌注量,数字PCR检测Shh信号通路信号分子Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA表达,免疫荧光染色检测Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin蛋白表达。结果与正常组比较,模型小鼠眼底和视网膜组织均发生病理性改变,ERG a波和b波振幅降低(P<0.01),视网膜厚度减少(P<0.01),视网膜血液灌注量降低(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均降低(P<0.01)。与模型组比较,滋阴明目丸各剂量组和乐盯组小鼠眼底和视网膜组织病理性改变均得到改善,视网膜厚度增加(P<0.01),视网膜血流量升高(P<0.01),ERG a波和b波振幅增加(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.01)。结论滋阴明目丸可增加视网膜厚度和血流量,改善眼底病理改变和视功能,呈现出较好的延缓RP的作用,其机制可能与激活Shh信号通路有关。

滋阴明目丸干预视网膜色素变性小鼠效应及机制研究

目的探讨滋阴明目丸干预视网膜色素变性(RP)模型小鼠的效应及分子机制。方法将12只C57BL/6J小鼠作为正常对照组,48只rd10小鼠随机分为模型组、乐盯组和滋阴明目丸低、高剂量组,分别予相应药物灌胃,连续30 d。HE染色观察视网膜病理形态,测定外核层厚度和层数;视网膜电图检测视网膜功能,测量A波振幅和B波振幅;光学相干断层扫描检测视网膜全层厚度;数字PCR检测穆勒细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达;免疫荧光染色检测GFAP蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠视网膜明显损伤,外核层厚度和层数明显降低,视网膜电图A波振幅和B波振幅明显减小,视网膜全层厚度明显变薄,视网膜GFAP mRNA和蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,滋阴明目丸低、高剂量组小鼠视网膜形态明显改善,外核层厚度和层数明显增加,视网膜电图A波振幅和B波振幅明显增加,视网膜GFAP mRNA和蛋白表达明显降低,滋阴明目丸高剂量组小鼠视网膜全层厚度明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论滋阴明目丸可通过阻断穆勒细胞胶质化修复RP小鼠视网膜组织损伤,增加视网膜厚度,改善视网膜功能。

基于现代文献分析的糖尿病视网膜病变中医证型及证素分布探讨

【目的】基于文献计量分析探讨我国糖尿病视网膜病变(DR)患者的中医证型及证素分布规律。【方法】检索中国知网(CNKI)数据库1995年1月至2022年2月有关DR临床研究的文献,筛选文献后,利用Excel软件对文献数据进行统计分析。【结果】共纳入36篇文献,涉及DR病例5 429例,男性病例多于女性。DR病例分布于全国各地,DR的患病率正逐年提高;其中医证型主要为气阴两虚、络脉瘀阻证(40.47%),肝肾亏虚、目络失养证(14.50%),阴阳两虚、血瘀痰凝证(14.16%),阴虚内热证(8.76%),瘀血阻滞证(8.14%)及脾肾两虚证(3.15%)。病位证素中,络脉、肾、肝、目、脾合计占比99.70%;病性证素中,瘀、阴虚、气虚、痰、阳虚5种证素约占比91.48%。来自广东的DR病例的证型主要为气阴两虚、络脉瘀阻证(35.00%),阴阳两虚、血瘀痰凝证(16.91%),阴虚内热证(12.00%),瘀血阻滞证(10.52%),湿热困脾证(7.96%)和肝肾亏虚、目络失养证(7.47%);病位证素出现频率由高到低依次为络脉、肾、肝、目、脾;病性证素出现频率由高到低依次为瘀、阴虚、气虚、热、痰、阳虚、湿、气郁。【结论】DR中医证候分型标准尚未统一且存在一定的地域差异。研究结果所揭示的证型和证素分布规律对DR中医分型的规范化有一定促进作用,可为DR的中医临床辨治提供参考。

黄芪建中汤下调TLR-2、p-NF-κB表达治疗消化性溃疡的效应及机制研究

本研究结合网络药理学、生物信息学与动物实验探究黄芪建中汤(HQJZD)治疗消化性溃疡(PU)的疗效与机制。运用中药系统药理学数据库和分析平台检索出HQJZD主要活性成分110个,预测靶点943个;基于疾病数据库TTD、OMIM、GAD、DrugBank、Pharm GKB共检索到与PU发病密切相关的靶点157个。运用Cytoscape筛选出HQJZD治疗PU的特异性靶点417个,GO和KEGG结果显示HQJZD可能通过调控Toll样受体、NF-κB、JAK-STAT、MAPK等信号通路介导的炎性反应发挥治疗效应。PU脾胃虚寒证大鼠胃黏膜的HE染色、酶联免疫吸附试验和免疫荧光染色结果表明,HQJZD低、高剂量组均能有效修复PU脾胃虚寒证大鼠的胃黏膜组织病理学损伤,显著升高PGE 2及NO含量(P<0.01),显著降低TLR2和p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.05)。综上所述,HQJZD治疗PU具有多成分、多途径、多靶点的特点,其机制可能与调节PGE 2、NO等炎症因子水平,调控NF-κB信号通路和Toll样受体信号通路有关。

基于CiteSpace的中医药治疗肠梗阻近十年相关研究的知识图谱分析

目的基于CiteSpace对“中医治疗肠梗阻”近10年的参考文献开展文献计量及可视化分析,了解中医药领域内肠梗阻研究较活跃的作者和单位、肠梗阻研究的关键词,为未来中医药治疗肠梗阻的基础和临床研究提供参考。方法以中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)为数据源,检索2011-2021年发表的中医治疗肠梗阻领域的中文文献,并应用CiteSpace 5.8.R1版软件对机构、作者、关键词等进行可视化分析。结果共纳入文献872篇,近10年来,发文量整体趋势为逐年减少,表明在中医治疗肠梗阻方面的研究日趋完善。中医治疗肠梗阻领域的研究内容集中于探讨各种中医相关治疗方法的临床效果,通过临床治疗经验不断完善中医治疗肠梗阻的体系;中医治疗肠梗阻研究领域热点词有肠梗阻、粘连性肠梗阻、中药灌肠、中西医结合治疗、大承气汤、不完全性肠梗阻、保留灌肠治疗、中医药治疗;中医治疗肠梗阻大多联合西医治疗,主要起调理作用,大承气汤是中医治疗肠梗阻的经典方。机构间合作关系较独立,缺乏跨省交流合作,地域性较明显。结论中医治疗肠梗阻领域的研究逐步趋向完善,尤其在肠梗阻的中医学病因病机、中医药诊治方面已较为成熟,本文研究结果可为开展中医药或中西医结合治疗肠梗阻的基础和临床研究提供科学依据和参考。

甲状腺癌关键致病基因筛选与预后分析及治疗中药的预测研究

运用生物信息学方法,分析甲状腺癌的核心致病基因和关键预后基因,并预测可用于甲状腺癌靶向治疗的中药及活性成分。从GEO数据库下载甲状腺癌和健康人的基因芯片数据,用GEO2R工具,分析甲状腺癌和正常甲状腺组织间的显著性差异表达基因(DEGs);利用Metascape和GSEA数据库,分别对显著性DEGs进行GO和信号通路分析;采用GEPIA数据库,对显著性DEGs进行生存分析,筛选并验证甲状腺癌关键致病基因;运用TIMER数据库,探究关键致病基因表达与免疫浸润的关系;将关键基因导入Coremine数据库,挖掘可用于甲状腺癌靶向治疗的中药;通过CTD数据库,预测可用于甲状腺癌靶向治疗的中药活性成分。共筛选出393个显著性DEGs。显著性DEGs主要集中于肌肉收缩、对激素的反应、炎症反应等生物学过程,参与组成收缩纤维、肌质网、细胞间连接等细胞成分,影响免疫受体活性、信号素受体活性、趋化因子受体结合等分子功能。信号通路集中于细胞粘附分子、趋化因子信号通路、细胞因子受体相互作用、FcγR介导的吞噬作用等信号通路。对甲状腺癌预后有显著影响的DEGs为CLDN1、CXCL10、APOC1、CDH3、MYOT和AKR1C3,这些基因的表达与免疫浸润均显著相关。预测可用于甲状腺癌治疗的中药有黄芪、黄芩、半枝莲、野菊花、杜仲等。中药活性成分主要包括阿魏酸、小檗碱、芹菜素、木犀草素、山萘酚、黄芩素、人参皂苷等。本研究探寻到影响甲状腺癌发病及预后的关键基因,并进一步预测了可用于甲状腺癌治疗的中药,结果可为甲状腺癌的诊治提供新的分子生物标志物,并为甲状腺癌的临床治疗提供新思路。

白术、黄芪、党参促进IEC-6细胞损伤后的快速修复

目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表皮生长因子(EGF)及其阻断剂AG1478对迁移模型进行评价;最后考察三味中药对IEC-6细胞迁移的作用效果。结果 (1)细胞的最佳接种密度为1×105个/m L;(2)宜在划痕后8 h计算细胞迁移率;(3)1%血清浓度为最适宜浓度;(4)EGF明显促进了IEC-6细胞迁移,AG1478明显抑制了细胞迁移;(5)白术、黄芪、党参提取物均可促进IEC-6细胞迁移。结论益气健脾中药可促进胃肠黏膜损伤后的快速修复过程,其机制是否与影响EGFR信号通路有关有待进一步研究。

四君子汤激活TLR-2/MyD88信号通路促进小肠黏膜上皮细胞损伤修复

目的:探讨四君子汤促进胃肠黏膜损伤修复的作用及机制。方法:采用血清药理学方法制备四君子汤含药血清;tips划痕法建立IEC-6细胞迁移模型,观察四君子汤含药血清对ICE-6细胞迁移的影响;实时细胞分析仪(RTCA)检测四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖的影响;荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TLR-2和My D88 mRNA表达;Western blot法检测TLR-2与My D88蛋白表达。结果:中(10%)、高(20%)浓度四君子汤含药血清可促进IEC-6细胞迁移(P<0.01);细胞损伤后12 h,中(10%)、高(20%)浓度四君子汤含药血清可促进IEC-6细胞增殖(P<0.01);细胞损伤后24 h和36 h,低(5%)、中(10%)、高(20%)浓度四君子汤含药血清均可促进IEC-6细胞增殖(P<0.05,P<0.01);中(10%)、高(20%)浓度四君子汤含药血清可上调TLR-2及My D88 mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论:四君子汤可加速胃肠黏膜损伤修复过程,其机制可能与激活TLR-2/My D88信号通路,促进黏膜上皮细胞迁移和增殖有关。

基于CiteSpace的脾虚证研究热点及趋势的文献计量与可视化分析

目的运用CiteSpace对脾虚证的研究现状、趋势及热点进行可视化分析。方法收集中国知网及Web of Science数据库建库以来至2021年12月31日所发表的脾虚证相关文献,采用CiteSpace软件对作者、机构、关键词共现及突现、关键词、时间线图、时区图谱进行可视化分析。结果共纳入中文文献2474篇,英文文献61篇。中英文文献发表总体呈上升状态。中文文献中发文量最多的作者是单德红,英文文献作者为GUANG JI。中文文献发文机构以辽宁中医药大学发文量最多,英文文献以上海中医药大学发文量最多。除主题词外中文关键词前3位为动物模型、四君子汤、胃脘痛,英文关键词前3位为traditional Chinese medicine、sijunzi decoction、gut microbiota;对关键词进行聚类分析,中文文献得到15个聚类,英文文献为8个聚类,主要围绕脾虚证治疗、模型制备、脾虚证致病机制等方面展开。结论脾虚证的研究以国内研究为主,各团体间合作有待加强,脾虚证的致病机制、动物模型制备、中医药治疗为该领域的研究热点,代谢组学、脾虚型胃癌和胃溃疡等疾病的治疗为未来研究趋势。

黄芪建中汤对大鼠十二指肠溃疡及TLR-2介导的肠黏膜免疫屏障的影响

目的 研究黄芪建中汤(Huangqi Jianzhong decoction,HQJZ)对大鼠十二指肠溃疡(duodenal ulcer,DU)的治疗效应及其对TLR-2介导的肠黏膜免疫屏障功能的影响。方法将大鼠分为正常组、模型组、阳性药组和HQJZ组,采用复合病因法构建DU模型。观测大鼠整体状态;对DU损伤进行评分;HE染色观察十二指肠病理改变;ELISA法检测细胞因子含量;荧光定量PCR和免疫组化法分别检测mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型大鼠十二指肠黏膜发生明显溃疡病变;血清IL-4、IL-10含量明显下降,TNF-α含量明显升高;黏膜TLR-2、MyD88 mRNA及蛋白表达明显上调。给予HQJZ治疗后,大鼠体质量、进食量、肛温明显回升;溃疡指数明显降低;十二指肠黏膜形态恢复正常,绒毛高度和隐窝深度明显增加;IL-4、IL-10含量明显增加,TNF-α含量明显下降;黏膜TLR-2、MyD88 mRNA及蛋白表达明显下调。结论 HQJZ可促进DU愈合,其机制可能与干预TLR-2介导的肠黏膜免疫屏障功能有关。

小肠上皮细胞迁移过程中膜电位检测方法的建立及应用

目的用流式细胞仪建立检测小肠上皮细胞(IEC-6)膜电位(membrane potential,Em)的方法,为细胞迁移过程病理生理及药理研究检测膜电位提供参考。方法在划痕法细胞迁移模型上,采用细胞膜电位荧光探针DiBAC4(3)预先负载到IEC-6细胞,应用流式细胞仪测定细胞膜电位。结果①细胞迁移实验显示,外源性多胺(精脒,SPD)可促进细胞迁移,多胺合成抑制剂DFMO可抑制细胞迁移;②当负载到细胞的DiBAC4(3)浓度为1μmol·L-1,孵育时间为10min时,IEC-6细胞在流式细胞仪上呈现最大荧光强度;③空白组细胞平均荧光强度为712.05±19.73,SPD组和DFMO组平均荧光强度分别为406.07±46.54和1030.15±87.63,与空白组比较差异均有显著性,表明SPD组Em增加,DFMO组Em降低。结论建立的流式细胞仪检测细胞膜电位方法,适用于多胺介导的IEC-6细胞迁移过程细胞膜电位的检测,也可为其它单层贴壁细胞在生理和病理状态下检测细胞膜电位变化提供参考。