杭州市临平区2013—2023年诺如病毒感染性腹泻监测分析

目的了解杭州市临平区2013—2023年腹泻散发病例中诺如病毒感染状况,为制定相关防治策略提供依据。方法收集临平区哨点医院2013年1月至2023年12月上报的5448例腹泻散发病例的流行病学资料,留存患者粪便样本检测诺如病毒核酸,并进行基因型别分析。结果腹泻患者中诺如病毒阳性率为11.3%(613/5448)。30~<40岁年龄组阳性率最高为13.7%(125/910),其次<10岁年龄组为12.3%(217/1769),40~<50岁年龄组阳性率最低为6.7%(31/464);第一、四季度[19.7%(147/747),18.0%(210/1165)]诺如病毒阳性率高于二、三季度[8.6%(139/1623),6.1%(117/1913)]。离退休人员阳性率最高为21.8%(27/124),其次为学生15.2%(61/402)、托幼儿童12.9%(1214/1658)和干部职员12.5%(194/752)。基因型以GⅡ型为主,占84.83%(520/613)。结论哨点医院腹泻病例诺如病毒感染率较高,冬春季节高发,离退休人员、学生和托幼儿童为高发群体,优势基因型为GⅡ型,应根据诺如病毒流行特征开展防控工作,并针对重点人群进行主动监测。

鞘氨醇对人结肠癌细胞的抑制作用

目的 研究鞘氨醇对人结肠癌细胞的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐法 (MTT)、细胞核分裂指数和3 H -TdR掺入试验方法 ,所设剂量鞘氨醇分别为 0 ,0 82 ,1 6 3,3 12 5 ,6 2 5 ,12 5 μmol/L ,以二甲基亚砜 (DMSO)为溶剂对照。结果 鞘氨醇对HT - 2 9细胞的生长有明显抑制作用。在MTT试验中 ,不同浓度鞘氨醇对HT - 2 9细胞的7d抑制率分别为 18% ,4 5 % ,72 % ,87%和 89% ;在核分裂指数试验中 ,随着鞘氨醇剂量的增高 ,其核分裂指数明显降低 ;在3 H -TdR掺入试验中 ,可见随着鞘氨醇剂量的增高 ,3 H -TdR掺入到HT - 2 9细胞中明显的减少 ,与阴性对照组相比有显著性差异。结论 鞘氨醇对HT - 2 9细胞的生长增殖有明显抑制作用 ,这可能是鞘磷脂抑制结肠癌的机制之一。

膳食钙降低饮食诱导肥胖大鼠体重的机制

目的 研究膳食钙对饮食诱导肥胖大鼠的治疗作用及其机制。方法 以雄性Wistar大鼠为实验对象 ,用高脂饮食诱导大鼠肥胖模型。将肥胖大鼠按体重随机分为 4组 :A组为基础饲料组 ,B组为高脂低钙组 (含 0 2 5 %钙 ) ,C组为高脂正常钙组 (含 0 5 %钙 ) ,D组为高脂高钙组 (含 1%钙 )。于第 10周末处死动物 ,计算脂 /体比 ,测定血糖、血脂和激素水平。结果 高钙膳食降低饮食诱导肥胖大鼠的体重和体脂含量 ,改善血脂代谢紊乱状态和胰岛素抵抗 ;膳食高钙通过促进瘦素分泌 ,降低神经肽Y分泌 ,升高血中游离T3和生长激素水平 ,起到降低饮食诱导肥胖大鼠体重和体脂含量的作用。结论 高钙膳食可以影响血中瘦素、神经肽Y、T3和生长激的水平 。

钙对饮食诱导肥胖大鼠抵抗素基因表达的影响

目的 探讨膳食钙对饮食诱导肥胖大鼠白色脂肪组织中抵抗素 (resistin)基因表达的影响。方法 以雄性Wistar大鼠为实验对象 ,用高脂饮食诱导大鼠肥胖模型。将肥胖大鼠按体重随机分为 4组 :A组为基础饲料组 ,B组为高脂低钙组 (含 0 2 5 %钙 ) ,C组为高脂正常钙组 (含 0 5 %钙 ) ,D组为高脂高钙组 (含 1%钙 )。于第 10周末处死动物 ,腹主动脉取血测定血糖、血清胰岛素、瘦素和肿瘤坏死因子α的水平 ,应用RT -PCR法测定白色脂肪组织中re sistinmRNA的水平。结果 D组体重和体脂含量显著低于C组 (P <0 0 5 ) ,与A组相近 ;各组血糖差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,D组胰岛素水平显著低于C组 (P <0 0 5 ) ,而胰岛素敏感指数显著高于C组 (P <0 0 5 ) ,与A组相近 ;A组、B组和D组的瘦素水平均显著低于C组 (P <0 0 5 ) ,校正了体重影响后 ,只有A组显著低于C组 (P <0 0 5 ) ;D组肿瘤坏死因子α水平显著低于C组 (P <0 0 5 ) ,与A组相近 ;C组与A组相比 ,白色脂肪组织中resistinmRNA表达增强 ,D组resistinmRNA表达比C组明显降低 ,B组resistinmRNA表达比C组增强。结论 高钙膳食不仅可以降低饮食诱导肥胖大鼠的体重 ,而且可以通过促进瘦素分泌 。

2006年杭州余杭区甲1亚型流感疫情的应急检测及基因特性分析

目的:对6起流感样疫情进行应急检测并对分离到的流行株的基因特征进行分析。方法:应用荧光RT-PCR的方法对6起流感样疫情进行检测并进行病毒分离,挑选H1N1亚型流感病毒的代表株进行血凝素基因(HA1)片断的核苷酸序列测定,分析基因和氨基酸变异情况。结果:应用荧光PCR检出甲1型流感阳性样本12例;与当前疫苗株A/Newcaledonia/20/1999相比,新分离到的流感株氨基酸序列有较大的差异,两者为不同性状的毒株。结论:H1N1亚型流感病毒重新引起流行并成为优势株,与其抗原性的变异及人群中针对这一病毒的免疫力下降有关。

2016-2019年杭州市余杭区973例严重急性呼吸道感染病例呼吸道合胞病毒检测结果

收集2016年1月至2019年12月杭州市余杭区第一人民医院的严重急性呼吸道感染病例鼻咽分泌物标本,采用荧光定量PCR方法进行RSV病毒核酸检测;检测后分析不同年龄组、不同月份RSV阳性检出情况。结果显示,共收集并检测973份鼻咽拭子标本中,63份标本RSV核酸检测阳性,阳性检出率为6.47%;核酸检出率男性大于女性,但两者差异无统计学意义( P=0.230);RSV检出率与年龄呈负相关,0~1岁婴幼儿和1~2岁婴幼儿年龄组检出率最高,分别为15.2%和12%;RSV的流行有明显的季节性差异,每年冬季和春季是RSV流行高峰期。

2006-2007年杭州市余杭区诺如病毒性腹泻分子流行病学研究

目的研究杭州市余杭区群发性腹泻中诺如病毒的分子流行病学特点。方法采集2006-2007年6起余杭区群发性腹泻疫情患者的粪便和肛拭子标本,采用荧光定量PCR技术进行诺如病毒检测,然后对病毒的N/S区域进行序列测定。结果6起群发性腹泻疫情都是由诺如病毒引起的,基因分析显示这些病毒都属基因Ⅱ型4组。结论诺如病毒是余杭区群发性非细菌性胃肠炎的重要病原体之一,在现阶段存在优势毒株是GII.4型,正在发生变异。

GⅡ型诺如病毒装甲RNA质控品研制

目的采用MS2噬菌体装甲RNA技术构建内含GⅡ型诺如病毒RNA的装甲RNA质控品,为诺如病毒核酸检测提供安全稳定的标准品。方法将MS2噬菌体成熟酶蛋白、包膜蛋白和调节位点基因(PAC基因)及GⅡ型诺如病毒520 bp片段克隆到表达质粒pET30b中,构建重组质粒p ET-PAC,pET-PAC转入大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞进行原核表达,表达产物纯化后鉴定并进行定量及稳定性分析。结果研究成功构建和表达了耐RNA酶、内含GⅡ型诺如病毒片段的装甲RNA——AR-GⅡ。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示AR-GⅡ病毒颗粒的蛋白分子量约为14.4 kD,纯化后的AR-GⅡ无宿主菌DNA、RNA等杂质残留,每1 m L LB培养基可诱导约1.5×10^(12)copies的AR-GⅡ。AR-GⅡ在37℃、4℃条件下可以稳定8周以上,-20℃反复冻融8次RNA病毒浓度也无明显衰减,稳定性良好。结论基于MS2噬菌体制备的AR-GⅡ拷贝数高,稳定性好且能耐受RNA酶攻击,可以作为标准样品用于监控诺如病毒核酸提取、反转录和扩增等全过程。

某社区一起诺如病毒感染性腹泻爆发疫情调查

诺如病毒是引起病毒性腹泻最常见的病原体之一。由于诺如病毒存在多种传播途径，感染剂量低，感染后缺乏持续的免疫力且人群普遍易感等，导致诺如病毒感染极易形成爆发性疫情。诺如病毒胃肠炎爆发主要发生在人群集中、半封闭的地方，学校、

牡蛎和粪便中GⅠ、GⅡ型诺如病毒实时聚合酶链反应检测方法的建立

目的 建立适用于牡蛎和粪便中快速、特异、灵敏的GⅠ、GⅡ型诺如病毒（NV）定量分型诊断方法。方法 通过对GⅠ、GⅡ型NV基因组保守序列的比对分析，设计高度特异的引物和探针，建立以TaqMan探针为基础的实时聚合酶链反应方法（TaqMan Real—time RT—PCR）。结果 该方法对NV核酸检测高度特异，且GI和GⅡ型之间无交叉反应，最低检出限达10^2 copies／ul。对90份新鲜牡蛎样品和37份腹泻粪便标本分别用常规RT—PCR和笔者建立的TaqManReal—time RT—PCR进行NV检测，发现牡蛎样品中后者的检出率明显高于前者，而粪便标本中两者无明显差别。同时对阳性标本的测序分析证实结果准确可靠。结论 研究中建立的TaqMan Real—time RT—PCR方法可用于海产品标本及粪便中NV定量及分型检测，可作为应对NV胃肠炎暴发的有效诊断方法。

某福利院一起肠炎沙门菌食源性疾病的调查分析

目的对某福利院一起肠炎沙门菌食源性疾病进行调查和溯源,为研究相关食源性疾病提供参考。方法采用流行病学、食品卫生学和脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性分析等方法,分析本次食源性疾病事件。结果确认本次事件中病例23名,患病率5.65%(23/407);现场采集病例肛拭子15份和厨房工作人员肛拭子3份、留样菜品3份、水果2份以及冰棒1份,其中从11份病例肛拭子中检出肠炎沙门菌,PFGE结果显示11株肠炎沙门菌的DNA条带图谱相似性为96.4%,聚类分析为同一型,结合流行病学调查,初步判断菌株来自同一克隆系。结论综合流行病学、食品卫生学和实验室检测结果,确定为一起肠炎沙门菌引起的食源性疾病,福利院应加强对特殊人群的饮食安全管理,制定相应的食源性疾病突发事件应急处理预案,防止此类事故再发生。

某学校一起轮状病毒感染性腹泻暴发疫情调查

2012年12月18-26日,杭州市余杭区某学校发生一起感染性腹泻暴发疫情,共报告病例74例,罹患率5.32%,病原学检测为A组轮状病毒。经采取控制传染源、切断传播途径和健康宣教等综合防控措施,疫情很快得到控制。

180份流感样病例标本中腺病毒的感染特征分析

目的了解急性呼吸道感染患者人类腺病毒(HAdV)感染及型别分布特点。方法收集2011年7月-2012年6月间杭州市余杭区第一人民医院儿科收集的急性呼吸道感染患儿咽拭子标本180份,采用巢氏RT-PCR法扩增Hexon区域,阳性PCR产物通过测序确定HAdV型别。结果 180例咽拭子标本中共检出HAdV阳性标本为25份,阳性率为13.8%。其中阳性标本型别构成为HAdV-3型15份,HAdV-7型3份,HAdV-4型1份,HAdV-6型2份,HAdV-2型4份。患者感染年龄均集中于11个月～9岁间,男女感染患儿性别构成比为2∶3。结论 HAdV是余杭区儿童急性呼吸道感染的重要病原体之一,发病以9岁以下幼儿及儿童为主,型别分布主要以3型为主,同时有多种型别散发存在。

腹泻患者粪便标本中A组轮状病毒感染特征分析

目的:分析病毒性腹泻患者中人轮状病毒(Human Rotavirus,HRV)的感染情况及毒株流行特点。方法:收集杭州市239份疑似病毒性腹泻患者粪便标本分别应用酶联免疫吸附法及RT-PCR法进行HRV抗原及核酸检测。。其中HRV阳性核酸应用巢式RT-PCR进行轮状病毒分型检测。结果:239份粪便标本中HRV抗原阳性为44份(18.4%),HRV核酸阳性为55份(23.0%),其中G血清分型:G3型15份(27.3%),G1型9份(16.4%),G2型为7份(12.7%),G9型为1份(1.8%),G2+G3混合感染1份(1.8%),未分型22份(40%)。结论:A组轮状病毒是婴幼儿病毒性腹泻的重要病原体,同时也可引起成人腹泻散发流行,成人A组轮状病毒流行季节和流行株与婴幼儿一致,G3为主要流行株,且同时存在多种血清型流行,未分型标本的比例较大有待深入研究。

一起不明原因发热肺炎疫情的实验室病原学检测

目的:确定不明原因发热疫情的病原体,为制定防治措施提供实验室依据。方法:采集病人和密切接触者的静脉血液、咽拭子等样品,运用ELISA、PCR、real-time荧光定量PCR等方法进行各种呼吸道病原体检测。结果:共采集7份标本,其中1份血清和4份咽拭子标本中检出肺炎支原体。结论:这是一起肺炎支原体引起的儿童肺炎疫情。