克氏原螯虾虾青蛋白A2基因克隆、组织分布及原核表达

虾青蛋白对甲壳类水产品色泽的形成和调控具有重要作用。为探究克氏原螯虾虾青蛋白A2(PcCRA2)的基因结构及原核表达,作者通过基因克隆获得PcCRA2基因编码序列(cra2),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测cra2基因在克氏原螯虾9种组织中的表达模式,并以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,进行PcCRA2异源重组表达。结果表明,克氏原螯虾cra2基因cDNA全长573 bp,编码190个氨基酸。生物信息学分析显示,虾青蛋白A2相对分子质量为21 158.9,理论等电点为5.59。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾cra2编码蛋白质序列与红螯螯虾相似度最高,为91.58%。RT-qPCR结果显示,cra2在所检组织中均有表达,在表皮的表达量最高(P<0.05)。构建了pET28a-cra2原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。其最佳诱导表达条件为:接种4 h后加入0.5 mmol/L IPTG于30℃诱导6 h;UV-vis结果表明重组蛋白质能与虾青素特异性结合,最大吸收峰为505 nm。该研究结果为进一步研究虾青蛋白质的生物功能奠定基础。

肌肽对叔丁基过氧化氢诱导肝细胞损伤的修复作用

肌肽是一种新型的食品补充剂,具有多种生物活性功能,已广泛应用于保健品、功能饮料、美容等领域,但肌肽对肝损伤修复的研究与应用鲜有报道。该文旨在研究肌肽对肝损伤的修复作用并探究其作用机制。肌肽预处理正常人肝细胞(normal human hepatocyte,L-02)12 h,400 mmol/mL叔丁基过氧化氢(tert butyl hydrogen peroxide,TBHP)处理L-02细胞4 h,细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,试剂盒检测谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,流氏细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹定量分析氧化信号通路与凋亡信号通路的相关蛋白表达。结果表明,肌肽预处理显著降低了L-02细胞外液ALT、AST活性,抑制ROS形成,提高细胞内GSH含量,显著抑制L-02细胞凋亡,上调核红细胞2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的蛋白表达,下调Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)、磷酸化氨基末端激酶(amino-terminal kinases phosphorylation,p-JNK)、胱天蛋白酶3(caspase-3,Cas-3)的蛋白表达。肌肽通过调控Keap1-Nrf2与JNK-Cas-3信号通路有效修复TBHP诱导的肝细胞损伤。

扁舵鲣鱼低聚肽对HT-22细胞的神经保护和抗氧化作用

为了评价扁舵鲣鱼低聚肽(Auxis thazard peptides,ATP)的神经保护作用和抗氧化作用,以皮质酮和谷氨酸为诱导剂构建HT-22细胞损伤模型,以细胞形态学、细胞活力、细胞功能和生化指标等指标探究扁舵鲣鱼低聚肽对HT-22损伤细胞的保护作用。结果表明,0.9 mmol/L的皮质酮和15.0 mmol/L的谷氨酸诱导HT-22细胞24 h,细胞存活率为50%左右。在该条件下,10、20、40μg/mL的扁舵鲣鱼低聚肽均能显著抑制皮质酮和谷氨酸引起的HT-22细胞存活率下降,可提高血清素、乙酰胆碱酯酶和胆碱浓度,降低乙酰胆碱活性,抑制皮质酮诱导的细胞损伤,抑制谷氨酸诱导细胞产生的氧化应激,增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活性,减少氧化产物丙二醛和活性氧的产生。

高压静电场解冻对凡纳滨对虾肌球蛋白结构特征的影响

该研究以去头凡纳滨对虾为材料,以羰基与总巯基含量、表面疏水性与粒径大小、内源荧光光谱与傅里叶变换红外光谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳的特征等作为考察指标,以自然解冻(nature thawing,NT)作为对照,研究了高压静电场解冻(high voltage electrostatic field thawing,HVEFT)的场强(1.8、3.8、4.3 kV)和温度(5、15、25℃)对去头虾肌球蛋白结构的影响。结果表明,当场强为3.8 kV时,随着温度的升高,总巯基、粒径、α-螺旋的含量呈先增后减的趋势,表面疏水性呈先下降后上升的趋势,羰基和内源荧光强度逐渐增加。当温度在15℃时,随着场强的增加,总巯基、α-螺旋表现为先增后减的趋势,羰基逐渐增加,表面疏水性则呈现出先下降后上升的趋势。综上所述,当场强为3.8 kV,温度为15℃时,高压静电场解冻对去头肌球蛋白结构影响最小。在此条件下,与NT处理组相比,HVEFT处理组样品的总巯基(3.35 mol/104g)和α-螺旋的占比(30.7%)分别是NT的1.15倍和1.17倍,表面疏水性是NT(22.54μg/mL)的0.42倍。结果表明,HVEFT能较好地维持虾肌球蛋白结构稳定性,有利于去头虾解冻后品质的保持。研究结果为高压静电场技术在水产制品解冻中的应用提供科学依据。

常压浸渍与脉冲真空浸渍麻辣凤尾虾的风味特性及其风味成分分析

为了研究常压浸渍和脉冲真空浸渍调味技术对麻辣凤尾虾风味特性与风味成分的影响,采用HPLC、原子吸收分光光度法、GC-MS等分析麻辣凤尾虾的羟基-α-山椒素、辣椒素、无机盐离子、呈味核苷酸、游离氨基酸及挥发性风味成分,采用偏最小二乘回归(partial least squares regression,PLSR)对其感官特性与主要风味成分进行相关性分析。结果表明,脉冲真空浸渍麻辣凤尾虾的羟基-α-山椒素含量(146.59μg/mg)显著高于常压浸渍的麻辣凤尾虾的含量(129.29μg/mg)(P<0.05),但常压浸渍的凤尾虾中呈味核苷酸与鲜味氨基酸的鲜味叠加效应更好;GC-MS分析显示,麻辣凤尾虾中共检出72种挥发性化合物,其中含16种香气活性化合物。与常压浸渍处理相比,脉冲真空浸渍处理的挥发性成分和香气活性化合物种类更丰富。常压浸渍调味组有4种(芳樟醇、D-柠檬烯、草蒿脑、月桂烯),脉冲真空浸渍组有7种(芳樟醇、D-柠檬烯、草蒿脑、乙酸芳樟酯、2-酰基-噻唑、β-月桂烯、(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯)。感官特性与主要风味成分PLSR相关分析结果与其风味成分含量一致,脉冲真空浸渍调味组花椒味、辣椒味与香气活性化合物相关性较好,常压浸渍调味组鲜味、甜味与Glu、Ala、IMP相关性较好。研究结果为脉冲真空浸渍技术在水产预制食品品调味上的应用提供了理论基础。

鲣鱼蒸煮液营养品质与风味价值评价

该研究以鲣鱼加工过程中的蒸煮液为研究对象,对其中的主要营养成分及挥发性成分组成进行分析,评价鲣鱼蒸煮液的营养品质与风味价值。结果表明,鲣鱼蒸煮液蛋白质含量为(55.69±0.38)%、灰分(32.42±0.02)%与少量的脂肪(0.58±0.04)%;总氨基酸中半必需氨基酸甘氨酸含量最高占(28.81±0.84)%,赖氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和苏氨酸7种必需氨基酸占(22.07±0.37)%;饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸分别占脂肪酸总量的(38.31±0.65)%、(30.83±0.77)%、(30.86±1.42)%;功能性成分肌肽含量为(10.43±2.74)mg/g,鹅肌肽含量为(19.24±1.78)mg/g;GC-MS检测的挥发性物质38种,最多的是醛类15种,其次为烷烃类10种、酮类6种、杂环类3种、醇类3种、芳香族1种。鲣鱼蒸煮液不仅营养品质高,而且富含风味物质与风味前体物质,是功能活性与良好风味物质提取的优质原料。该研究能够为鲣鱼蒸煮液在营养保健与调味品方面的高值化利用提供科学的理论依据。

虾青素对热风干制凡纳滨对虾香气特性的影响

【目的】研究虾青素对热风干制凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)香气特征的影响。【方法】采用电子鼻和感官评定表征虾青素与虾干制品的感官特性,运用GC-MS分析虾青素对虾干制品挥发性化合物的影响,以气味活性值(IOAV)为依据筛选香气活性化合物,采用偏最小二乘回归法(PLSR)分析香气活性化合物与感官属性之间的相关性。【结果】虾青素对虾干整体香气的形成有重要影响,可促进虾干肉香味、烤香味与焦糖味的形成,但对腥味形成具有抑制作用。虾青素可促进虾干挥发性化合物的形成,其中吡嗪类化合物增加最为显著。实验结果表明,添加虾青素标准品和添加虾青素提取物的虾干中吡嗪类化合物的I_(OAV)分别增加50.00%和40.09%,其中2,5-二甲基吡嗪的IOAV增长最快,分别增加42.44%和48.99%,但对三甲胺的产生有明显的抑制作用,三甲胺的IOAV分别减少43.21%和52.89%。PLSR结果表明,香气活性化合物与感官属性之间存在良好的相关性。【结论】虾青素能改进热风干制凡纳滨对虾的香气特性,研究结果可为解析虾青素在虾干制品中香气形成机制提供参考。

家庭体育文化对幼儿体育行为的影响研究

幼儿时期是发展人潜能的第一个重要时期,幼儿期的健康发展是人生的基础,此时期的幼儿身体、心理以及智力等方面的问题都应该被重视。发展幼儿体育,不但能增强幼儿体质,还有助于培养幼儿勇敢顽强的精神,对幼儿从身体到精神具有多方面的好处,中华武术,源远流长,武术是中华民族传统文化之魂,既能强身健体、增强体质,同时也能修身养性,培养道德情操、锻炼意志品质。家庭是幼儿生活的第一场所,家庭体育文化对发展幼儿武术运动和尚武精神具有直接且重要的影响。本研究对107个幼儿的家庭进行问卷调查。研究发现,家庭月收入与愿意为幼儿体育行为付费程度并非线性关系,中等家庭可能更乐意为幼儿付费。幼儿在运动时受到长辈的赞许,会影响其对体育运动的喜欢程度,父母运动将有助于鼓励幼儿主动参与体育行为。家庭体育文化影响幼儿的尚武精神。

凡纳滨对虾热风干制过程中内源性三甲胺的形成规律研究

该研究以凡纳滨对虾为原料,置于不同热风干制温度干制至水分含量约为20%,分别测定三甲胺(trimethylamine,TMA)、氧化三甲胺(trimetlylamine oxide,TMAO)、二甲胺(dimethylamine,DMA)和甲醛(formaldehyde,FA)等指标的含量变化。进一步探究了对虾在85℃下热风干制过程的水分含量、挥发性盐基氮(total volatile base nitrogen,TVB-N)、总还原力值、pH值、TMA、TMAO、FA和DMA等指标的变化情况。同时,为验证虾肉上清液中TMA的形成规律与整体的相似性,对不同反应时间、温度和pH条件下虾肉上清液中TMAO分解产生TMA的反应特性进行研究。结果表明,热风干制温度越高,TMAO通过非酶热分解形成的内源性TMA、DMA和FA含量越大。随着干制时间延长,对虾水分含量的降低,TVB-N值、总还原力和pH值增大,TMAO含量呈现显著下降趋势,内源性TMA、DMA和FA含量在干制后期显著上升,内源性TMA从开始的29.36 mg/kg显著上升至565.11 mg/kg(P<0.01)。虾肉上清液中包含了产生TMA的物质,同时其TMA的形成与热风干制过程虾干TMA的形成规律相一致,温度越高,加热时间越长,TMA产生越多。研究结果揭示了凡纳滨对虾在热风干制中内源性TMA的形成规律和产生机制,为虾干制品的加工和生产提供理论依据,以期为控制虾干TMA含量提供参考。

远东拟沙丁鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其降尿酸活性的研究

为了从远东拟沙丁鱼肉酶解物中制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)抑制肽并研究其降尿酸活性,该研究以远东拟沙丁鱼肉为原料,XO抑制率为考察指标,采用碱性蛋白酶水解远东拟沙丁鱼肉,产生的酶解物通过超滤与凝胶色谱、反相高效液相色谱(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离纯化,从中分离出2个XO抑制肽,它们的氨基酸序列采用超高效液相四级杆飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography quadrupole time of flight tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定为苯丙氨酸-亮氨酸-精氨酸(Phe-Leu-Arg,FLR)与精氨酸-脯氨酸-赖氨酸(Arg-Pro-Lys,RPK)。采用腺苷及XO联合诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)构建高尿酸细胞模型,对2个肽的降尿酸功效进行评价,结果显示FLR、RPK具有显著降尿酸作用。

扁舵鲣抗氧化肽分离纯化及结构鉴定

【目的】从扁舵鲣(Auxis thazard)的木瓜蛋白酶酶解产物中分离鉴定具有较高1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率的抗氧化肽。【方法】用木瓜蛋白酶水解扁舵鲣,以DPPH自由基清除能力为检测指标,通过超滤、凝胶过滤层析和反向高效液相色谱分离抗氧化肽,再经过超高效液相/三重四级杆飞行时间质谱(UPLC/Xevo G2-XS QTOF)进行结构鉴定。【结果】从酶解产物中获得3种抗氧化肽,其氨基酸序列分别为β-丙氨酸-1-甲基-L-组氨酸(241 u)、Gly-Ala-Gly-Gly-Pro(357 u)和Val-Glu(246 u)。【结论】扁舵鲣的木瓜蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性的肽类,可为其抗氧化肽的开发提供理论依据。

工程教育专业认证背景下《食品加工机械设备》教学改革探讨

在高等教育机构积极推进工程教育专业认证的背景下,融合专业认证的理念、标准和食品科学与工程专业的培养目标,优化设计了《食品加工机械设备》的课程目标;并以1个学年6个班的课程考核成绩为例,分析课程目标达成情况及存在问题,然后从课程目标、教学内容、教学方式和考核成效等方面并提出本课程的教学改革建议,从而提高课程目标达成度,保障教学效果。

基于模糊数学评价法优化凡纳滨对虾真空微波干燥工艺

【目的】探求真空微波干燥凡纳滨对虾的最佳工艺条件,以期为开发凡纳滨对虾即食食品提供技术参考。【方法】以新鲜凡纳滨对虾为原料,模糊数学感官评分为主要考察指标,在单因素试验基础上,选择载装量A、功率B、真空度C为自变量,利用响应面法和模糊数学评价法对真空微波干燥工艺进行优化。【结果】以感官评定为基础对真空微波干燥凡纳滨对虾的品质进行权重分析,得到权重集K=(色泽0.335,滋味0.305,香气0.215,组织质地0.145)。建立二次多项回归方程:Y=84.588+1.084A+1.409B+1.700C-7.353A^(2)-8.793B^(2)-13.860C^(2),显示载装量A、功率B、真空度C对感官评分有极显著影响(P<0.01)。通过响应面分析,得到真空微波干燥凡纳滨对虾的最佳工艺条件:载装量75 g,加热功率400 W,真空度0.08 MPa。在此条件下,真空微波干燥凡纳滨对虾品质良好,感官评分为(85.6±0.07)分,与预测值85.92分误差较小。【结论】响应面法优化凡纳滨对虾真空微波干燥工艺具有操作简单、优化条件精确、结果显示直观等优点;建立的回归方程能反映装载量等三个因素对指标的影响规律,并可进行实际预测。

热风干制前后凡纳滨对虾中脂质及其脂肪酸组成变化

为了研究凡纳滨对虾在热风干制前后脂质及其脂肪酸组成变化,通过硅胶柱层析法分离对虾脂质中的各个组分,采用气相色谱-质谱联用分析总脂、甘油三酯、脑磷脂与卵磷脂中脂肪酸组成在干制前后的变化。结果表明:干制后对虾总脂含量发生极显著下降(P<0.01),由6.46 g/100 g(以干基计)下降至4.28 g/100 g,甘油三酯、脑磷脂与卵磷脂3种主要脂质含量分别降低28.4%、34.1%、37.9%,其它脂质组分变化不大。干制后对虾总脂肪酸含量由1368.53 mg/100 g下降至1143.60 mg/100 g,减少最多的脂肪酸主要是C16:0、C18:1、C18:2、C18:3;甘油三酯的总脂肪酸含量下降68.25%,其中C16:0、 C18:1与C18:2分别下降82.06%、 86.07%与80.83%;脑磷脂的总脂肪酸含量下降47.92%,其中C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C20:5与C22:6分别下降50.27%、41.80%、68.72%、52.91%、39.63%与53.76%;卵磷脂的总脂肪酸含量下降19.5%,其中C18:1与C18:2分别下降35.85%、34.12%。脂质是虾干制品特征香气的主要前体物质,研究其脂质及其脂肪酸组成的变化规律为解析脂质热降解对虾干制品特征香气的形成机制提供了参考。

浅谈小学语文教学中情感教育的实施

在小学语文教学中,情感是灵魂,是学生智力的催化剂和学习的原动力。在小学语文教学中,培养学生的情感,引导学生体会文章感情,让学生与作者同喜同悲,教会学生敢爱敢恨,是语文教学的重要任务。

PBL结合超星学习通在食品工厂设计与环境保护线上线下混合教学模式中的探索与实践

如何结合食品工厂设计与环境保护的特点进行教学模式的改革,提升教学质量,一直是从事该课教学教师面临的重要问题。本文从教学内容设计、教学过程、教学评价三个方面构建了基于PBL结合超星学习通的线上线下混合教学模式。采用该模式既结合了线上和线下的教学优势,又结合了PBL教学方法和超星学习通学习平台的优势,特别适合食品工厂设计与环境保护等实践性和应用性强的课程。“食品工厂设计与环境保护”课程采用该种教学模式,能有效调动学生的学习积极性,提高教学质量。

基于“超星学习通+腾讯会议”的“食品工厂设计与环境保护”线上教学应用研究

“食品工厂设计与环境保护”是广东海洋大学食品科技学院的一门专业必修课。受2020年初新冠疫情的影响,广东海洋大学响应教育部提出的“停课不停学”号召,将该课程由传统的课堂教学改为线上教学。针对学校和学院提出的网络教学要求,以超星学习通、腾讯会议等网络平台为教学手段,开展了“食品工厂设计与环境保护”的线上教学模式新探索,探索出了超星学习通与腾讯会议相结合的线上教学新方法。相比传统教学,这种新的教学方法能够显著提高学生的学习效果。

吉利3824法推进质量提升

质量是生命线并不是一个新的说法。但是怎么像重视生命一样重视质量,仍然是一个需要思考的问题。而吉利集团对于质量管理,不仅总结了一套办法,而且不断丰富完善,吉利汽车的销量攀升所昭示的道理不难理解。2007年,吉利公开宣布进入战略转型期,从“低价战略”向“技术领先、质量可靠、服务满意、

906型核电汽轮机低压转子轴向变形跳机阈值调整研究

上海汽轮机厂906型核电汽轮机在冬季额定负荷运行时低压转子轴向变形量(d_a)接近跳机阈值,部分核电厂曾因此降负荷。分析表明,该型汽轮机稳定运行期间影响d_a监测值的主要因素包括低压转子轴向热膨胀和由汽轮机基础热胀冷缩,停机后d_a在泊松效应影响下正向增大是正常现象。通过调节汽轮机低压进汽温度和进行凝汽器真空试验,获得了低压进汽温度和凝汽器真空对d_a的影响结果。根据设计文件和安装实测数据,低压轴向通流最小间隙位于2号低压汽缸近发电机端的第1级动叶和第2级静叶之间。根据低压轴向通流间隙最小实测值和停机后低压轴系的轴向伸长量的经验值,分析得出该型汽轮机的d_a跳机阈值应不超过+19.50 mm。最终将d_a跳机阈值由+18.10 mm调整为+19.10 mm。该型汽轮机大修期间未发现低压通流部件存在摩擦问题,调整后的d_a跳机阈值满足汽轮机运行安全需求。