异位妊娠患者行不同级别D3胚胎和D5囊胚新鲜移植后妊娠结局分析

目的分析体外受精-胚胎移植新鲜周期中有异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)病史患者移植不同级别D3胚胎和D5囊胚的妊娠结局。方法回顾性分析2010年6月~2020年5月在郑州大学第一附属医院生殖医学中心行辅助生殖助孕治疗后获得临床妊娠的3314例有EP病史的患者,根据胚胎发育天数和胚胎等级分为两组,即D3组(n=2830)和D5组(n=484),比较不同组间的妊娠结局。采用单因素和多因素Logistic回归分析评价影响重复性异位妊娠(recurrent ectopic pregnancy,REP)的因素。结果D5囊胚移植的REP率显著低于D3胚胎移植(P<0.05)。移植D3胚胎、移植日子宫内膜厚度<8mm及既往EP次数是发生REP的独立危险因素(P<0.05)。3期囊胚与4期囊胚、优质囊胚与非优质囊胚的REP发生率相似(P>0.05)。移植单枚优质D3胚胎与移植1枚优质和1枚非优质D3胚胎的REP率比较,差异无统计学意义(P>0.05);移植2枚优质D3胚胎与移植1枚优质和1枚非优质D3胚胎的REP率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在有EP病史的患者中,D5囊胚移植可显著降低新鲜周期REP率;D5囊胚整体形态学等级不影响REP率,移植1枚非优质胚胎不影响D3双胚胎移植时的REP率。

多囊卵巢综合征患者颗粒细胞蛋白质组学分析

目的应用定量蛋白质组学方法分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞蛋白质表达变化。方法收集2020年9月至2021年9月于我院生殖医学中心行IVF/ICSI助孕的患者取卵后废弃卵泡液标本24例,其中PCOS组12例和正常排卵对照组12例,从中提取颗粒细胞。采用液相色谱-串联质谱方法得到其蛋白质表达谱,生物信息学分析鉴定差异表达蛋白及其功能。采用Western Blot法验证质谱结果。结果共鉴定出329种差异表达蛋白,其中上调蛋白169个,下调蛋白160个。KEGG富集分析结果显示,差异蛋白在亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸分解,糖酵解/糖异生,谷胱甘肽代谢等通路显著富集。结论PCOS女性与正常排卵女性之间颗粒细胞蛋白质表达谱存在显著差异,进一步探索差异蛋白的功能或许可以为PCOS发病机制的研究提供线索。

三种促排卵方案对不同年龄子宫内膜异位症患者IVF-ET妊娠及出生结局的影响

目的:通过对比三种促排卵方案用于子宫内膜异位症(EMs)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠及出生结局,探讨不同年龄患者最佳促排卵方案。方法:回顾性分析行IVF-ET助孕治疗的165例EMs患者的203个周期的临床资料。按年龄及促排卵方案进行分组:年龄<35岁,分长方案组(n=51)、超长方案组(n=61)和改良超长方案组(n=24);年龄≥35岁,分长方案组(n=16)、超长方案组(n=33)和改良超长方案组(n=18)。统计各组实验室结果、妊娠结局及出生婴儿各项指标。结果:1年龄<35岁者超长方案组的正常卵裂率(99.3%vs96.0%,P=0.008)、优质胚胎率(75.7%vs 67.1%,P=0.021)、着床率(42.2%vs 27.1%,P=0.022)和临床妊娠率(63.3%vs 37.8%,P=0.011)均高于长方案组;2年龄≥35岁者改良超长方案组的可移植胚胎率(93.5%vs70.4%vs 75.5%,P=0.011)、优质胚胎率(91.9%vs 55.1%vs 65.5%,P<0.001)和胚胎利用率(95.1%vs 72.6%vs 79.4%,P=0.002)均高于长方案组和超长方案组。结论:年龄<35岁EMs患者采用长方案促排卵效果不佳,而采用超长方案促排卵临床结局相对较好;年龄≥35岁EMs患者采用改良超长方案促排卵实验室结果最佳。

卵子玻璃化冷冻在睾丸取精失败周期中的临床应用(附8例报告)

目的:探讨卵子玻璃化冷冻在睾丸取精失败周期中的临床应用价值。方法:回顾分析体外受精周期取卵日因男方无精子症行睾丸取精失败且无供精接受卵子冷冻的8例不孕症妇女。所有卵子经玻璃化冷冻保存2个月后解冻,存活的成熟卵子采用与其丈夫血型一致的精子库冷冻精子行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)受精,记录卵子的存活、受精、卵裂、优质胚胎、临床妊娠及分娩情况。结果:冷冻-解冻60枚卵子中存活47枚,存活率为78.3%(47/60);其中41枚成熟卵子行ICSI受精,正常受精率为80.5%(33/41),卵裂率为81.8%(27/33),优质胚胎率为59.3%(16/27);15枚胚胎移植给8例患者,移植周期率为100%(8/8),平均移植胚胎数为1.9±0.8。B超显示有5个孕囊形成,胚胎种植率为33.3%(5/15);5例患者获得了临床妊娠,临床妊娠率为62.5%(5/8),均为宫内单活胎。4例已顺利分娩3男婴1女婴,体重为(3 787.5±513.7)g,染色体及发育均正常。结论:卵子玻璃化冷冻是睾丸取精失败患者的有效保障,与精子库冷冻供精受精可以获得理想临床结局。

不同来源冻融精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局分析

目的:探讨不同来源冻融精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)的效果。方法:回顾性分析因无精症采用睾丸和附睾精子行ICSI的895个周期,其中诊断性附睾活检冻融精子7个周期(A组),诊断性睾丸活检组织冻融11个周期(B组),附睾穿刺取精(PESA)行ICSI后剩余精子冻融13个周期(C组),睾丸穿刺取精(TESA)行ICSI后剩余精子冻融12个周期(D组),PESA新鲜精子630个周期(E组),TESA新鲜精子222个周期(F组)。结果:6组的平均MⅡ卵子数、平均优质胚胎数比较,差异均无统计学意义(F=0.326、1.513,P>0.05),优质胚胎率、种植率、临床妊娠率差异亦没有统计学意义(χ2=4.874、2.766、1.617,P>0.05)。结论:不同来源冻融精子行ICSI可以获得与新鲜精子相似的临床结局。

冻融体外受精-胚胎移植周期人未成熟卵母细胞的体外成熟及纺锤体结局

目的:探讨冻融的不同状态人未成熟卵母细胞体外成熟后纺锤体状态与受精率的关系。方法:随机收集本中心108个体外受精-胚胎移植周期(IVF)中183枚不同状态废气的成熟卵母细胞,分为:卵丘-卵母细胞复合物组,48枚;裸卵组,135枚,其中第一次减数分裂中期(MI)65枚,生发泡期(GV)70枚。玻璃化冷冻保存,经解冻、体外培养成熟后,应用Polscope成像系统观察纺锤体,然后行卵胞浆内单精子显微注射受精,记录各指标情况。结果:①卵丘-卵母细胞复合物组与裸卵组的存活率、体外成熟率、纺锤体出现率、受精率比较,均无统计学差异(P>0.05);②GV组的存活率显著高于MI组(P<0.05),而前者的体外成熟率显著低于后者(P<0.05);③各组体外成熟后有纺锤体出现的卵母细胞受精率均显著高于无纺锤体组(P<0.05,P<0.01)。结论:冻融IVF周期不同状态的人未成熟卵母细胞都有一定发育潜能;有纺锤体出现的冻融人未成熟卵母细胞质量较高。

睾丸取精失败周期中冷冻卵子与新鲜卵子妊娠结局的比较

目前,附睾及睾丸精子结合卵胞浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）已成为辅助生殖技术中治疗男性无精子症的有效方法。但是对于诊断性睾丸活检有成熟精子的非梗阻性无精子症（nonobstructive azoospermia，NOV）患者，取卵日睾丸取精的失败率仍有15％～20％。

瘢痕子宫患者选择性单胚胎移植中胚胎级别对妊娠及新生儿结局的影响

目的探讨瘢痕子宫患者行选择性单胚胎移植(eSET)时胚胎级别对妊娠及新生儿结局的影响。方法采用回顾性队列研究分析2016年1月至2020年1月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心接受体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植助孕治疗且在新鲜周期行eSET的883例瘢痕子宫患者的资料。首先根据年龄,将其分为两组(Ⅰ组,年龄<35岁;Ⅱ组,35~38岁),再根据移植胚胎的发育天数(D3、D5)及评分,进一步分为四个亚组:D3优质与非优质卵裂期胚胎亚组(D3A亚组、D3B亚组)和D5优质与非优质囊胚亚组(D5A亚组、D5B亚组)。在两个年龄组中,分别比较各亚组的妊娠及新生儿结局。结果Ⅰ组中,D5A、D5B亚组的临床妊娠率和活产率高于D3A及D3B亚组(P<0.001)。Ⅱ组中,D5A亚组的临床妊娠率[63.2%(48/76)]及活产率[56.6%(43/76)]最高;而D5B亚组与D3A亚组的临床妊娠率和活产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两个年龄组中,D3B亚组的临床妊娠率及活产率最低。各亚组的新生儿结局,包括出生孕龄、早产率、新生儿体重、低体重儿率及巨大儿率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素logistic回归分析显示:Ⅰ组中各亚组与D3A亚组比较,D3B亚组的临床妊娠率降低(P=0.003),而D5A亚组和D5B亚组的临床妊娠率升高(P<0.001,P=0.018);Ⅱ组中,与D3A亚组比较,仅D3B、D5A亚组临床妊娠率的差异有统计学意义(P<0.001,P=0.004)。结论瘢痕子宫患者在新鲜周期行eSET时,D5囊胚的妊娠结局优于D3卵裂期胚胎,而不同级别胚胎的新生儿结局无明显差异。

ICSI联合IVM技术在卵巢低反应高龄患者中的应用

目的:探讨胞浆内单精子注射(ICSI)联合未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)技术在卵巢低反应高龄患者中的应用价值。方法:回顾性分析2016年1月—2018年9月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行ICSI助孕治疗81个周期,年龄≥35岁,获卵数≤3个,且卵母细胞均未成熟。按促排卵方案分为微刺激方案组(n=37)和拮抗剂方案组(n=44),统计2组患者基础情况、实验室结果及妊娠结局。结果:①2组患者年龄、不孕时间、基础内分泌、基础窦卵泡数及抗苗勒管激素(AMH)比较,差异均无统计学意义(P>0.05);②拮抗剂方案组Gn总量较微刺激方案组高,差异有统计学意义(P<0.05);③微刺激方案组与拮抗剂方案组体外培养成熟率、2PN率、卵裂率、可利用胚胎率及优胚率比较差异均无统计学意义(P>0.05);④微刺激方案组与拮抗剂方案组的胚胎存活率、种植率和临床妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对于卵巢低反应的高龄患者行ICSI联合IVM培养有利于提高卵母细胞成熟率及胚胎利用率,增加妊娠机会,微刺激方案Gn用量少对卵巢低反应患者是经济有效的选择。

不同冷冻方法对小鼠不同成熟时期卵母细胞纺锤体的影响

目的:探讨不同冷冻方法对小鼠成熟期(MⅡ期)及生发泡期(GV期)卵母细胞的纺锤体及胚胎发育的影响。方法:收集GV期和有纺锤体的MⅡ期小鼠卵母细胞,随机分为3组:慢速冷冻-快速复温组、超高速玻璃化冷冻组和对照组(未冷冻组)。Polscope观察解冻0、3、6h后存活的MⅡ期及体外培养成熟GV期卵母细胞的纺锤体,有明显纺锤体的行卵胞浆内单精子显微注射受精,评价胚胎发育。结果:(1)超高速玻璃化GV组的存活率、卵裂率均显著高于慢冻GV组(P<0.05);(2)两冷冻MⅡ组解冻后0、3及6h纺锤体出现率和优质胚胎率均显著低于对照MⅡ组(P<0.05);(3)超高速玻璃化GV组体外成熟后纺锤体的出现率、优质胚胎率均显著高于超高速玻璃化MⅡ组(P<0.05)。结论:慢速冷冻-快速复温法对小鼠不同成熟时期卵母细胞的纺锤体损伤较大;超高速玻璃化冷冻对小鼠生发泡期卵母细胞纺锤体的影响则较小,是一种简便、快捷、高效的冷冻方法。

体外受精-胚胎移植周期中空卵泡综合征4例诊治体会

辅助生殖过程中控制性超排卵后，B超监测卵泡发育正常，但穿刺取卵时取不到卵子，这种现象被称为空卵泡综合征（empty follicle syndrome，EFS）。虽然其在体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer，IVF—ET）周期中发病率较低，仅占1％-7％，但是可导致周期取消，

人卵母细胞发育的调控机制研究进展

卵母细胞是女性体内惟一经过减数分裂且包含母性遗传信息的稀有细胞。其在体内的成熟过程长达数十年。特殊基因和分子调控减数分裂的停滞和恢复,卵母细胞与卵泡细胞之间有复杂的信号转导网络。综述人卵母细胞各个发育阶段调控机制及临床应用进展。

国外现代节水灌溉技术应用综述

采用节水和节能的灌水方法是当今世界灌溉技术发展的总趋势。文章就几个典型的国家应用节水灌溉技术作了介绍并谈了对此的体会。

3种玻璃化冷冻小鼠生发泡期卵母细胞效果比较

目的:比较3种玻璃化冷冻对小鼠生发泡期卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响。方法:将小鼠生发泡期卵丘复合物(n=175、177、190)和裸卵(n=150、149、150)分别随机分为3组:采用一步乙二醇法、乙二醇加二甲基亚砜法、三步乙二醇法进行冷冻保存。解冻存活体外培养成熟后行卵胞浆内单精子显微注射受精,进一步评价胚胎发育潜能。结果:冻融小鼠生发泡期卵丘复合物,三步乙二醇法与一步乙二醇法的存活率、成熟率、受精率均高于乙二醇加二甲基亚砜组(P均<0.05);三步乙二醇法的优质胚胎和囊胚率均高于一步乙二醇法和乙二醇加二甲基亚砜法(P均<0.05)。冻融小鼠生发泡期裸卵,三步乙二醇法的存活率及三步乙二醇法、一步乙二醇法的受精率及卵裂率均高于乙二醇加二甲基亚砜法(P均<0.05)。三步乙二醇法中,卵丘复合物组的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及优质胚胎率均高于裸卵组(P均<0.05)。结论:3种玻璃化冷冻中,三步乙二醇法可以获得高质量的冻融小鼠生发泡期卵母细胞,是一种理想的冷冻方法;带完整卵丘颗粒细胞的生发泡期卵母细胞的冻融效果更佳。

冻存人类未成熟卵母细胞的研究进展

冻存人类未成熟卵母细胞体外成熟有广阔的应用前景.经过20多年的探索,研究主要集中在小鼠、牛等哺乳动物的未成熟卵母细胞,冷冻方法也不尽相同,解冻后卵母细胞的存活率及胚胎发育潜力低.虽然经不同冷冻方法保存的人未成熟卵母细胞出生的婴儿国外已有个别报道,但是获得妊娠的机率还非常有限.本文将从人类未成熟卵母细胞的冻存优势、冷冻方法及影响因素等方面综述如下.

引嫩工程沿线区域节水水平综合评价

依据神经网络用于区域节水水平评价,提出了基于B-P神经网络的区域节水水平评价方法,运用该方法对引嫩工程沿线的11个市县的节水现状作一个综合评价。

废弃胚胎继续囊胚培养研究

目的:探讨体外受精治疗周期中废弃胚胎的体外发育潜能。方法:通过囊胚序贯培养法将无原核(0PN)、单个原核(1PN)、多个原核(≥3PN)和卵裂期发育延缓的2原核(2PN)废弃胚胎培养至囊胚期。比较不同来源胚胎囊胚形成情况和d3胚胎的卵裂球数、质量分级等;并利用废弃胚胎囊胚形成情况对体外受精妊娠结局进行预测。结果:共收集801个废弃胚胎,经序贯培养,形成209个囊胚(26.09%),其中58个为优质囊胚(27.75%)。1PN胚胎、0PN胚胎、d3卵裂球数为7-9-细胞胚胎、d3评分为Ⅰ-Ⅱ级胚胎以及卵裂球数为偶数的胚胎囊胚形成率较高(P均<0.05)。废弃胚胎中有囊胚形成者的临床妊娠率明显高于无囊胚形成者(P<0.05)。结论:废弃胚胎有不同程度的发育潜能,部分可发育为囊胚;特别是:①0PN和1PN胚胎;②d3的4-9-细胞胚胎,偶数卵裂球者更佳;③I级和Ⅱ级胚胎。

卵母细胞玻璃化冻融21例临床分析

目的:探讨玻璃化冷冻方法在冷冻保存卵母细胞中的临床应用。方法:选择2007年10月～2009年1月在我中心行卵母细胞玻璃化冷冻,并于2008年1月～2009年4月行卵母细胞玻璃化解冻的21例移植周期,对其复苏率、受精率及临床妊娠率进行统计。结果:共冷冻203枚卵母细胞,解冻后存活137枚(67.5%,137/203),对其中98枚成熟卵母细胞行单精子卵浆内显微注射,76枚(77.6%,76/98)正常受精,8例(38.1%,8/21)获得临床妊娠,其中6例单胎妊娠,2例3胎妊娠,并进行了减胎术。目前,1例已成功分娩,1例早期流产,6例正在妊娠中。结论:玻璃化冻融卵母细胞是一种方便可行的方法,可以获得较高的临床妊娠率。

短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响

目的:探讨短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响。方法:2008年1月至2010年12月因女性输卵管因素或盆腔炎症在本中心接受短时IVF与长时IVF。短时IVF共1095周期,长时IVF共1008周期,比较短时受精与长时受精两组患者的基本情况、受精、胚胎及临床妊娠情况。结果:两组患者正常受精(2PN)率的差异无统计学意义(P>0.05)。长时受精的0PN率(18.1%vs 13.5%)、1PN率(3.8%vs1.6%)明显高于短时受精组,3PN率比较,结果相反(4.5%vs 7.8%)。短时受精的卵子利用率(58.4%vs 53.7%)、优质胚胎率(70.6%vs 65.5%)、胚胎利用率(85.2%vs80.1%)明显高于长时受精组,两组临床妊娠率无统计学差异(44.6%vs 41.5%,P>0.05)。结论:短时IVF的多PN率比长时IVF高,但是0PN、1PN率显著降低,卵子利用率提高。短时IVF的优质胚胎率、胚胎利用率明显高于长时IVF。短时受精在一定程度上能提高卵子利用率,改善胚胎质量从而提高胚胎利用率。