液相色谱-串联质谱法检测维生素A、25羟维生素D_(3)和维生素E方法的建立

目的:基于临床实验室建立一种高特异性液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)技术方法,以快速准确检测不同年龄人群的血清维生素A、25羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]和维生素E水平。方法:采用液-液萃取前处理,建立LC-MS/MS法检测血清中维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的方法,并通过基质效应、线性、精密度测定、加样回收率等对此方法进行评价。收集健康体检人群标本542例,分析不同年龄组即青少年(1~18岁组)、中年(19~59岁组)和(老年≥60岁组)血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E水平,并依据卫生行业标准(WS/T553-2017和WS/T677-2020)判断不同年龄段维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E营养状况。结果:采用LC-MS/MS技术同时检测血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的总检测时间为6.5 min,未见明显干扰因素。标准曲线相关系数r^(2)>0.99。维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E批内不精密度均<6.0%,批间不精密度<7.5%。加标回收率均在100.5%~112.9%。不同年龄组中1~18岁组未见到维生素A缺乏;7~18岁组维生素A不足占8.96%;25(OH)D_(3)缺乏和不足分别占10.12%和38.10%;维生素E不足占5.06%;19~59岁组维生素A和E较少见到缺乏,25(OH)D_(3)缺乏和不足分别占20.90%和46.33%;≥60岁组维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E缺乏和不足总和分别占16.36%、87.3%和12.72%。结论:建立的LC-MS/MS技术方法能够快速准确地检测血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E水平。在1~18岁和≥60岁人群中存在一定程度的维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的缺乏,各年龄段均显示25(OH)D_(3)缺乏和不足。

建立血清叶酸及代谢物和甲氨蝶呤血药浓度同时检测的方法

目的基于超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,建立同时检测血清叶酸及代谢物5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸和甲氨蝶呤浓度的分析方法。方法通过固相萃取将样品中目标分析物浓缩富集,经Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,使用超高效液相色谱-串联四极杆质谱联用仪(UPLC I-Class Xevo TQ-S micro IVD)建立检测方法,并依据CLSI C62-A等文件对该方法的定量限、线性范围、精密度、准确度、稀释效应、携带污染以及特异度和干扰试验等进行性能评价。结果该方法中叶酸检测定量限为1 ng/mL,5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸和甲氨蝶呤定量限为5 ng/mL。叶酸在1~200 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好(R^(2)>0.99),5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸和甲氨蝶呤线性范围为5~2000 ng/mL(R^(2)>0.99)。4种目标分析物日内精密度为1.7%~13.9%,日间精密度为2.7%~14.6%,样品加标回收率为93.6%~108.9%,精密度和准确度良好。稀释效应、携带污染以及特异度等其他考察结果均符合评价要求。结论建立了一种准确高效的UPLC-MS/MS方法,一针进样可以同时完成血清中叶酸及代谢物和甲氨蝶呤血药浓度的检测。该方法不仅帮助临床实现了对甲氨蝶呤血药浓度和解救药物甲酰四氢叶酸钙浓度的同步监测,还可动态观察治疗过程中患者体内总叶酸和活性叶酸的水平变化,为制订合理的甲酰四氢叶酸钙解救方案,进一步提升甲氨蝶呤治疗的安全性和有效性奠定了基础。

基于排队论的门诊化验服务效率评估与改进

目的应用排队论理论和方法分析门诊化验服务效率,提出优化资源配置方案。方法(1)利用Microsoft Excel软件分别对周一、周三、周五上下午门诊采血窗口患者到达情况及工作人员服务时间分布进行分析;(2)建立排队模型,用Queuing ToolPark4.0软件分析流程效率;(3)按原卫生部"三好一满意"活动对门诊排队量化指标的要求,提出流程再造和资源配置方案。结果(1)门诊化验采血窗口患者到达情况服从Poisson分布。其λ(患者平均每分钟到达率)为3.09人次/分钟、1.80人次/分钟、2.91人次/分钟、1.70人次/分钟、2.40人次/分钟、1.73人次/分钟;(2)采血服务时间服从负指数分布,窗口平均服务率μ为0.91人/分钟;(3)排队模型对流程效率的分析,除周一上午化验采血窗口劳动强度大(ρ=87%)、服务效率低(系统空闲率为2%,等待概率为72%)外,其他时间均能满足原卫生部对门诊排队量化指标的要求。结论(1)应根据不同时段,调整和配置相应的资源,周一上午采血窗口应增加1个服务台;(2)采用排队论的理论和方法评价门诊流程效率,提出优化门诊流程绩效是可行的,值得推广。

全自动血凝仪分析过程质量管理与评价的研究

目的通过对临床血液实验室全自动血凝仪检测项目分析过程的质量管理与评价。设计和选择质量控制方法,使之最大限度地符合成本-效率质量控制原则并为质量的持续改进奠定基础。方法用2个水平的质控品定量检测纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)指标。采用美国CLIA′88的PT质量要求确定各项目的允许总误差(TEa),评价方法性能(方法的不精密度和不准确度)。用操作过程规范(OPSpecs)图设计和选择质控方法,用6西格玛(σ)管理方法对分析过程的质量水平进行评价,并进一步分析实验室的质量成本。结果评价结果显示:FIB检测的σ值>5,且只需采用13 s单规则N=2,既可达到90%误差检出概率。同时将假失控概率控制在5%以下,满足分析质量保证水平(AQA)的要求。而APTT和PT的高值质控品检测因不精密度和不准确度较高,σ值只达到>3的水平,均需要使用13s/22s/R4s/41s/10xWestgard多规则N=4才能达到应有的AQA;APTT和PT的低值质控品检测的σ值为5.18和4.19,分别采用13s/22s及13s/22s/R4s/41s多规则N=2能达到应有的AQA。结论实验室需在考虑检测项目分析方法和质量控制方法性能特征的基础上合理地选择质控规则,以达到符合成本-效率质量控制原则和持续改进的目的。

全血细胞分析测定值和计算值的质量管理与评价

目的通过对全自动血细胞分析仪测定值和计算值检测项目分析过程的质量管理和评价，设计和选择质控方法，使检测结果更加准确并为质量的持续改进奠定基础。方法采用3水平质控品（H，M，L）检测白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）指标。采用美国CLIA’88的PT质量要求确定各项目的允许总误差（TEa），评价方法性能[方法的不精密度（CV％）和不准确度（Bias％）]，用0PSpecs图设计和选择质控方法，用美国学者Westgard 6σ管理方法及Coskun A．提出的对计算值的σ评价方法分别对分析项目的测定值和计算值的质量水平进行评价。结果评价结果显示：测定值WBC，Hb及PLT σ值均〉6，只需采用13s N=1或N=2最简单的质控方法；RBC的σ值为4．22，采用13s／22s／R4s／41s N=2或2of32sN=3的质控方法；HCT的σ值是3．55，需采用Westgard多规则13s／22s／R4s／41s／10x N=2。而对于计算值，在考虑各构成成分的变异度（用Coskun A．方法）计算后，由于CV值的改变，三种计算值（MCV，MCHC，MCH）的。值分别由5．29，5．50，4．42下降到3．06，4．16，3．32；且质控方法也分别由13s N=2，13s N=2和13s／22s／R4s N=2或2of32，N=3改变为13s／22s／R4s／41s／10x Westgard多规则（N=3，N=2，N=2），才能保证90％测定结果能达到且不超过允许总误差（7％）的分析质量保证水平（AQA），同时假失控率又控制在〈5％以下的质控性能要求。结论实验室需在考虑检测项目分析方法和质量控制方法性能特征的基础上合理地选择质控规则，尤其是在对计算值进行质量控制管理和评价时，要考虑到各构成成分的变异度，以使检测结果更加准确。

中老年高知教师肥胖与血脂、血糖、血压的相关研究

目的 探讨中老年高知教师超重、肥胖与血脂、血糖、血压水平变化的关系。方法 对安大 5 5 7名高知教师 (≥ 4 0岁 )进行全面体检 ,并对结果进行统计分析。结果 超重现患率为 2 6 93% ,肥胖现患率为 37 88% ;胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、血压 (SBP/DBP)数值随着年龄的增加而上升 ;超重、肥胖组的TG明显高于对照组 (P <0 0 1) ;肥胖Ⅱ°组合并糖尿病 (DM )明显高于对照组 (P <0 0 1) ;超重、肥胖组合并 2、3级高血压明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论 中老年教师是肥胖的高发人群。肥胖与脂代谢、糖代谢紊乱密切相关。中老年肥胖是导致高TG症、糖尿病、高血压的主要因素。

血清β-羟丁酸测定在小儿I型糖尿病并发酮症及酮症酸中毒中的应用

目的 通过对I型糖尿病并发酮症 (DK)、酮症酸中毒 (DKA)的住院患儿进行血清 β 羟丁酸及其他生化指标的检测 ,确立血清 β 羟丁酸测定在该并发症临床诊断及疗效观察中的重要性及意义。 方法 对 4 4例I型糖尿病并发DK、DKA住院患儿采用全自动酶分析法测定血清 β 羟丁酸等项目。 结果 I型糖尿病并发DK及DKA患儿发病初血清β 羟丁酸 10 0 %增高。其中DK组测定值 0 .4 1～ 5 .6 9mmol/L ;中位数为 1.92mmol/L。DKA组测定值 0 .5 2～ 6 .5mmol/L ,中位数为 4 .12mmol/L ,两组间差异有显著意义。病人在接受胰岛素及其他相应治疗后血清 β 羟丁酸在 3～ 8d内迅速降到正常水平。 结论 血清 β 羟丁酸检测在I型糖尿病并发DK及DKA的临床诊断及疗效观察中显示出其特有的灵敏度和特异性 。

高级知识分子肥胖与血脂、脂肪肝关系探讨

目的 :探讨肥胖与血脂、脂肪肝的关系。方法 :对合肥地区几所学校的 1674名高级知识分子进行全面体检 ,根据体重指数分为肥胖组 (BMI >2 4 )和非肥胖组 ,进行血脂测定、腹部B超检查 ,并对结果进行统计分析。结果 :受检者中肥胖症发病率为 4 3.73% ;肥胖组的总胆固醇 (TC)、三酰甘油 (TG)明显高于非肥胖组 ;肥胖组高TG、混合性高脂血症、脂肪肝发病人数及发病率明显高于非肥胖组 (P <0 .0 1) ;肥胖组的高脂血症并发脂肪肝的发病率为 4 6.93%。结论 :肥胖是导致高TC、高TG、脂肪肝的主要因素。肥胖伴高脂血症是引发脂肪肝的重要因素 。

基于Chambolle-Pock算法的TV重建方法研究

为实现CT稀疏视角下的投影图像重建,Sidky等设计了基于Chambolle-Pock(CP)算法,论文在此基础上实现了CP算法。仿真实验表明,与传统的滤波反投影算法相比,CP算法不存在伪影,在含噪情况下,CP算法具有较好的性能,可以实现稀疏角度下的高精度图像重建。同时,探讨了平衡因子的选取对重建精度的影响。

甲氨蝶呤在白血病治疗中血药浓度动态监测

目的 :探讨甲氨蝶呤在小儿白血病治疗中的药代动力学改变。方法 :2 6例急性淋巴性白血病患儿 ,为预防中枢神经系统白血病应用大剂量甲氨蝶呤 3.0g·m-2 ,治疗 3个疗程 ,每疗程进行 6次血药浓度监测。结果 :2 6例患儿于投药后 2 4h血药浓度出现峰值 ,48h回复到投药前水平。结论 :根据所提供的血药浓度水平结合临床 ,可适当缩短给药间期或增加药物剂量。

实验诊断技术的进展与医学伦理——论聚合酶链反应实验诊断技术的临床应用与伦理道德

通过对聚合酶链反应实验诊断技术(PCR技术)在临床应用中所存在的技术问题和伦理道德问题的分析,提出了规范应用此项技术的重要性及解决问题的几点对策。

试论道家养生思想

老子提出“摄生”、庄子提出“养生”，《黄帝内经》以老子的“道”为基础，吸收了阴阳、五行、天人感应等学说，使道家养生思想第一次系统化。道家养生思想突出自然养生，形养就是科学地生活，神养重于形养。

检验医学专业实习生的实习情况调查与思考

目的:通过对检验医学应届毕业生就业实习情况的调查,发现就业实习存在的问题,探讨解决问题的办法。方法:通过对60名检验医学专业实习学生进行问卷调查,了解就业实习医院的教学安排情况、学校教改情况、带教老师素质、学生本身对岗位的适应情况等方面的现状,及时发现问题。结果:医院就业实习安排存在着对实习生生物安全培训考核、手工操作实验、形态学知识和实验室质量控制等教学工作不同程度的忽略。结论:各医院应加强对检验医学生就业实习教学工作的重视,提高带教老师素质,加强对就业实习学生的管理,注重培养学生的沟通能力、质量管理的概念和敬岗爱业的精神。

2009-2015年北京儿童医院临床分离细菌的分布及耐药性监测

目的了解2009—2015年儿科专科医院临床分离细菌种类分布及对抗菌药物的耐药性变化。方法对北京儿童医院住院患儿所有标本初次分离的菌株进行分析,药敏试验使用纸片扩散法和Phoenix 100微生物分析仪检测,按照临床和实验室标准化协会(CLSI)2014年的标准进行检测和结果报告。使用WHONET5.6软件进行数据的统计分析。结果共分离细菌26 630株,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌(金葡菌)、肺炎链球菌和凝固酶阴性葡萄球菌为主。革兰阴性菌以克雷伯菌属、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌为主。肺炎链球菌在呼吸道标本中分离率最高,占25.7%。肺炎链球菌对青霉素不敏感率50.2%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)平均检出率分别是各自菌种的20.6%和87.8%,MRSA检出率由2009年11.1%上升到2015年的29.8%。未发现对万古霉素和利奈唑胺不敏感的肺炎链球菌和葡萄球菌。肠球菌对万古霉素和利奈唑胺呈高度敏感,屎肠球菌对万古霉素耐药率为0.3%,未检出粪肠球菌耐万古霉素菌株。革兰阴性菌中,大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶(ESBL)检出率71.4%~78.1%;肺炎克雷伯菌为65.1%~76.9%。自2010年开始出现对亚胺培南和美罗培南耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,大肠埃希菌对碳青霉烯类的耐药率至2014年上升到7%以上,肺炎克雷伯菌已超过20%。2009—2015年,铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南耐药率分别上升到27.7%和25.7%,鲍曼不动杆菌对两者的耐药率均升到59.9%。流感嗜血杆菌β内酰胺酶检出率46.3%。结论监测期间,儿科分离多重耐药菌株MRSA、碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的检出率高,均呈现增多趋势,对临床抗感染治疗构成严重威胁,需加强儿科临床耐药监测和及时采取有效感染控制措施。

北京地区儿童感染性腹泻病原学和耐药性分析

目的研究北京地区儿童急性感染性腹泻的病原学变化、流行病学特征及耐药性变迁情况。方法对2008年肠道门诊临床初步诊断为急性细菌性腹泻病儿童的新鲜粪便标本进行细菌分离培养和血清分型鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验,并以免疫层析双抗体夹心法定性检测A群轮状病毒抗原。结果 301份粪便培养共检出病原菌4种70株(有1份同时检出2种细菌),检出率为22.9%(69/301)、其中男孩检出48例,女孩21例,男女检出比为2.29∶1;2岁以下患儿检出56例(81.2%)。检出沙门菌32株(45.7%),志贺菌13株(18.6%),致泻性大肠杆菌6株(8.6%),金黄色葡萄球菌19株(27.1%)。13株志贺菌中检出B群9株(69.2%),19株金黄色葡萄球菌中有16株发生于<1岁组婴儿。沙门菌和志贺菌的耐药率分别为氨苄西林(61.3%、92.3%)、复方新诺明(16.1%、61.5%)、环丙沙星(9.7%、30.8%)、头孢曲松(16.1%、23.1%)。301份标本中A群轮状病毒阳性30份,其中同时粪便培养阳性者10份。结论 2008年北京地区儿童细菌性腹泻的病原菌以沙门菌为主,志贺菌属中以B群为主要流行株,两者的易感人群以2岁以下婴幼儿为主,而金黄色葡萄球菌感染以1岁以下婴儿为主;多重耐药仍以志贺菌明显,沙门菌的耐药率有所上升;儿童感染性腹泻中细菌与轮状病毒混合感染的比例上升。

儿童患者中分离350株流感嗜血杆菌的分布和耐药性分析

目的研究儿童流感嗜血杆菌临床分布及耐药性,指导临床合理用药。方法对2014-2015年北京儿童医院住院患儿临床送检标本分离出350株流感嗜血杆菌的分布、产β内酰胺酶情况和药敏结果进行回顾性分析。药敏试验采用纸片扩散法,头孢硝噻吩纸片法测定β内酰胺酶,按照临床和实验室标准化协会(CLSI)2014年的标准进行药敏检测和结果判断。使用WHONET 5.6和SPSS15.0软件进行数据统计分析。结果流感嗜血杆菌感染多见于婴幼儿,常见合并其他病原感染。β内酰胺酶阳性率为53.1%,对甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率最高,为76.9%,对环丙沙星、头孢唑肟、氯霉素、四环素、阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛、阿奇霉素、头孢克洛、氨苄西林敏感率分别为99.1%、98.9%、95.4%、88.3%、87.7%、74.9%、65.4%、56.6%、46.0%,未检出对头孢曲松、美罗培南不敏感的流感嗜血杆菌。结论儿童分离的流感嗜血杆菌产β内酰胺酶阳性率很高,是流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药的主要机制,其高产酶特点使氨苄西林不能作为临床一线用药。流感嗜血杆菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率最高,对β内酰胺类以外抗菌药物,最敏感的是环丙沙星,其次为氯霉素。

对碳青霉烯类抗生素不敏感肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶基因型研究

目的研究儿科临床分离对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌所产碳青霉烯酶的基因型。方法收集2008年1月至2010年12月北京儿童医院住院患儿中分离出的46株对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌。使用改良Hodge试验和双纸片协同试验,进行产碳青霉烯酶的表型确证。PCR技术检测碳青霉烯酶的KPC、GES、IMI/NMC-A、SME、IMP、VIM、GIM、SPM、SIM、NDM-1和OXA基因型。对PCR反应产物进行纯化后,使用双脱氧末端终止法进行DNA测序。将得到的拼接序列,与GenBank中Blast进行同源分析,确定其基因亚型。结果 46株对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌,26株为肺炎克雷伯菌,占56.5%,13株为阴沟肠杆菌,占28.3%,7株为大肠埃希菌,占15.2%。改良Hodge试验阳性40株(87.0%),双纸片协同试验阳性41株(89.1%)。IMP基因阳性38株(82.6%),其余8株均未扩增出特异性条带,检测均为阴性。测序结果显示,IMP型34株为IMP-4亚型,占89.5%;4株为IMP-8亚型,占10.5%。结论产金属酶是儿科临床分离对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌的重要耐药机制。且产生的金属酶均为IMP基因型,同时存在IMP-4和IMP-8两种基因亚型,其中以IMP-4亚型为主,少数为IMP-8亚型。在儿科临床进行对碳青霉烯类抗生素不敏感的肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的监测十分重要。

产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性分析

目的研究产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2011年1月-2014年8月住院患儿血培养分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKp);用微量肉汤稀释法测定15种抗菌药物的MIC值;采用PCR法确定产NDM-1菌株;回顾分析病历资料了解感染产NDM-1菌株患儿的临床特征,并与感染非产NDM-1菌株患儿进行比较。结果 52株CRKp中共检出28株产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组均为多重耐药菌,对青霉素、头孢菌素和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率达100%(28/28),对氨曲南、甲氧苄啶-磺胺甲唑及庆大霉素的耐药率均>75%,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100%(28/28)、92.9%(26/28)。产NDM-1菌株中碳青霉烯类高MIC值的菌株比例高于非产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组的患儿中,82.1%(23/28)来自血液病房,常见基础疾病为血液系统恶性肿瘤(78.6%,22/28),20例(76.4%)患儿存在中性粒细胞缺乏伴发热;产与非产NDM-1肺炎克雷伯菌血流感染患儿相比,反复住院(P=0.202)、近期使用抗菌药物(P=0.615)、常见基础疾病(P=0.856)以及深静脉置管(P=0.099)方面差异无统计学意义。明确肺炎克雷伯菌感染后,37例患儿接受了碳青霉烯类药物联合敏感药物治疗。产NDM-1菌株组病死率与非产NDM-1菌株组相比无明显差异(2/28对3/24;P=0.625)。结论该院已出现产NDM-1肺炎克雷伯菌株,呈逐年增长趋势,此类细菌呈多重耐药,碳青霉烯类高MIC值的菌株所占比例高,临床特征上与非产NDM-1菌无明显区别。