人脐血间质干细胞在脑创伤大鼠脑内移植后的迁移

目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)脑内移植后的分布和移行,为细胞移植治疗脑创伤奠定基础。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到人UCB-MSCs,并用Hoechst33258标记后备用。自由落体撞击法制作的大鼠脑创伤模型,将已标记的人UCB-MSCs移植到大鼠的脑损伤区。一段时间后处死大鼠,取脑组织切片,直接在荧光显微镜下观察移植细胞的存活和迁移。结果细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活,移植细胞与宿主细胞有很好的相容性,移植后3周细胞发出蓝白色光,沿移植道呈条带状分布,细胞在条带中央较为密集,在条带周围细胞分布逐渐稀疏。移植后6周,损伤组织中可见荧光标记的细胞,细胞分布较3周时稀疏。结论人UCB-MSCs脑内移植后,能够成活并向脑损伤区迁移,与宿主脑组织整合在一起。

不同术式治疗颅咽管瘤疗效分析

为探讨不同术式治疗颅咽管瘤的远期疗效，现将我院近１０年来经ＣＴ检查、手术及病理证实的５４例颅咽管瘤治疗及随访结果报告如下。１临床资料１．１一般情况共５４例，其中男３１例，女２３例。年龄４．５～６２岁，平均１８．１岁，其中１４岁以下儿童２７例。病程２个...

手术导航系统在神经外科临床应用的初步探讨

目的 应用神经导航系统进行显微外科手术 ,尽可能减少神经外科手术创伤 ,准确寻找颅内微小病灶 ,提高手术精确度 ,降低手术并发症 ,达到手术微创目的。方法 术前将病人的CT影像学数据资料装载于手术导航神经系统计算机工作站 ,进行三维建模 (包括头皮、病灶、重要功能区及标志点 )、靶点设定、手术切口入路设计 ,精确定位微小病灶位置 ,术中实时定位监测手术进程 ,随时纠正手术偏差。结果 术中导航对颅内病变、重要结构定位准确 ,定位误差均在 3mm以内。结论 手术导航系统能以最短、最安全的路径精确地寻找微小病灶的位置、术中标识病灶的范围 ,将寻找病灶的损伤降至最小 ,完全切除病灶 ,降低死亡率、病残率 ,增加肿瘤的控制时间 ,提高手术效果 。

蝶窦内非瘘性假性动脉瘤的治疗

报告海绵窦段颈内动脉损伤致非瘘性蝶窦内假性脉瘤2例,颅底骨折、延迟性鼻衄和单眼视力障碍三联征为其主要临床特征,经全脑血管造影证实并行血管内栓塞治疗,均治愈,本文着重就可脱性球囊和国产钨丝螺旋圈的优点进行阐述。

颅内蛛网膜囊肿32例分析

颅内蛛网膜囊肿发病率为颅内占位病变的0.4%～1.0%。其治疗方法不太复杂,但达到临床治愈并非容易。现将我院近10 a来收治的32例总结如下。

人羊膜来源间质干细胞的分离、培养及鉴定

目的：探讨来源于人羊膜间质干细胞（ amniotic-derived mesenchymal stem cells, AD-MSCs）的分离、培养及鉴定。方法：无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片，加入胰酶37℃消化30min，共2次，然后加入终浓度1．0g／L的胶原酶和0．1g／L的DNA酶，37℃消化60min，收集细胞，用含体积分数为10％胎牛血清（FBS）的DMEM／F12培养基进行培养和纯化。倒置显微镜观察细胞形态，取4～6代的细胞用流式细胞仪分析细胞表面标志，取扩增第3代后的AD-MSCs加人全反式维甲酸（RTRA）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）向神经元样细胞诱导分化。结果：来源于羊膜的细胞种植于DMEM／F12培养基中后，可在体外大量扩增并纯化；流式细胞检测显示：CD29、CD44、HLA-ABC阳性表达，CD34、CD45、HLA-DR阴性表达。免疫细胞化学显示AD-MSCs经RTRA和bFGF诱导后表达神经元特异性烯醇化酶，不表达胶质纤维性蛋白。结论：羊膜中存在问质干细胞，其可以在体外培养、扩增、纯化，并可在体外向神经元样细胞分化。

小脑顶核电刺激对脑外伤患者脑血流速度和颅内压的影响

目的 探讨小脑顶核电刺激对脑外伤患者脑血流速度和颅内压的影响。方法 选择 2 0例脑外伤患者 ,其中 7例行手术治疗。用小脑顶核电刺激方法对所有患者实施电刺激 ,应用经颅多普勒超声技术检测刺激前后大脑前、中、后动脉 (ACA ,MCA,PCA)血流速度。通过颅内压监护持续监测刺激前后颅内压的变化。结果 实施刺激后 10分钟 ,脑血流速度升高 ,2 0～ 30分钟达高峰。刺激前 ACA,MCA,PCA血流速度分别为 45 .5± 8.3cm/ s,5 3.6± 10 .2 cm / s和 36 .9± 8.4cm / s;刺激后分别为 6 0 .2± 9.6 cm/ s,6 7.2± 11.7cm/ s和 37.2± 8.6 cm/ s;ACA和MCA的血流速度在刺激后明显升高 (P <0 .0 5 )。 7例脑外伤患者小脑顶核电刺激前后颅内压无明显变化 (P>0 .0 5 )。结论 小脑顶核电刺激后可明显提高脑外伤患者颅内血流速度 ,改善脑循环 ,对颅内压变化无明显影响。

胚胎大鼠神经干细胞的培养及鉴定

目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测及姬姆萨染色进行细胞鉴定。结果:成功培养出了胚胎大鼠神经干细胞,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。结论:胚胎大鼠神经干细胞在体外适宜的培养条件下具有自我更新、增殖和多向分化潜能。

硬膜外切除前床突改善鞍区显露的定量研究

目的:探讨翼点入路开颅术中改善鞍区结构显露的有效方法。方法:10例经甲醛固定的成人头颅湿性 标本均采用右侧翼点入路开颅。硬膜外切除前床突前后分别测量视神经、颈内动脉、视神经-颈内动脉三角的长度以及该三角的最大宽度。结果:以上指标在前床突切除前和切除后的测量结果分别是:视神经长度为(10.28±2.30)mm和(22.83±2.54)mm;颈内动脉长度为(10.48±2.39)mm和(14.78±3.02)mm;视神经-颈内动脉三角长度为(10.38±2.84)mm和(23.55±2.79)mm,宽度为(3.93±1.16)mm和(12.95±2.61)mm。结论:鞍区病变手术治疗的过程中,前床突切除可使视神经和视神经-颈内动脉三角长度的显露增加1倍;视神经颈内动脉三角宽度的显露增加2～3倍。硬膜外切除前床突对改善鞍区手术中重要结构的显露有十分重要的意义。

脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化患者神经系统功能的影响

目的：探讨脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化（ALS）患者神经系统功能的影响。方法：移植脐血间质干细胞治疗8例ALS患者，选用“神经康复功能评定系统-V2003”软件对治疗前3d、治疗后2～3月ALS患者的肢体运动（Cart-Shephard评分）、构音障碍（Frenehay评分）、平衡能力（Berg评分）、功能独立性评定（FIM）各方面的功能进行评估。结果：移植治疗前ALS患者Cart-Shephard、Frenehay、Berg、FIM评分与治疗后比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：脐血间质干细胞移植治疗可以显著改善ALS患者的神经系统功能。

免疫磁珠法分离和纯化人胚胎神经干细胞

目的:建立有效的人类神经干细胞分离纯化系统和方法。方法:无菌取孕24周流产胎儿的室下区脑组织,制备细胞悬液,用磁性微珠标记的CD133单克隆抗体与细胞孵育,通过磁分选器分离出CD133(+)和CD133(-)细胞,通过体外培养并诱导分化,观察CD133阳性细胞和阴性细胞的增殖情况及分化能力。结果:经免疫磁珠分选的室下区脑组织中,CD133(+)细胞占胚胎脑组织细胞的2％左右,该细胞体外扩增能力强,细胞呈球形生长,并易聚集成团,培养5 d、10 d、15 d、20 d进行活细胞计数,细胞增长率分别为1.79％、4.82％、7.21％、14.66％,诱导分化后的细胞经染色鉴定可分化为神经元、神经胶质等多种神经细胞;阴性细胞扩增能力弱,活细胞计数以死细胞数量居多,大约70％,另外一些细胞贴壁分化。结论:免疫磁珠法简便、有效,经免疫磁珠分离的神经干细胞在体外能进一步培养扩增并分化。

过氧化物酶1,6和GFAP在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及临床意义

目的确定星形胶质细胞瘤中过氧化物酶1(Prx1)、过氧化物酶6(Prx6)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,探讨其表达水平与星形胶质细胞瘤恶性程度的关系。方法采用Western blot、RT-PCR和免疫组化检测52例星形胶质细胞瘤(Ⅱ级23例、Ⅲ级15例、Ⅳ级14例)和12例正常脑组织标本中Prx1、Prx6和GFAP的表达情况。结果 Prx1、Prx6在正常脑组织、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平逐渐升高,具有统计学意义(P<0.05);GFAP在Ⅲ、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平低于Ⅱ级星形胶质细胞瘤和正常脑组织(P<0.05)。结论 Prx1、Prx6和GFAP可能是临床评价星形胶质细胞瘤恶性程度和侵袭性的潜在生物标志物,可作为星形胶质细胞瘤生物治疗的潜在靶分子。

破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3 mRNA的表达与血管平滑肌细胞的凋亡测定

目的:检测破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3mRNA的表达及血管平滑肌细胞(VSMC)的凋亡。方法:采用透射电镜观察15例破裂颅内动脉瘤和6例正常脑血管组织中VSMC的凋亡。采用实时荧光定量RT-PCR方法检测上述2种组织中Caspase-3mRNA的表达。结果:颅内动脉瘤组织中VSMC呈明显的细胞凋亡改变,出现染色质边聚、胞核固缩、胞浆浓缩以及凋亡小体。破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3mRNA的ΔCt值为2.67±1.22,正常脑血管组织中为5.83±1.69,P<0.01,即破裂颅内动脉瘤组织中Caspase-3mRNA的表达是正常组织的8.94倍。结论:VSMC过度凋亡可能是颅内动脉瘤形成和破裂的重要机制;VSMC凋亡可能与Caspase-3基因表达水平的上调有关。

神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

目的:探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的新方法,为治疗脊髓功能障碍性疾病打下基础。方法:制作脊髓横断大鼠模型,造成大鼠下肢瘫痪,分别在损伤急性期和损伤3周后移植胎鼠脑组织神经干细胞,观察移植后的动物行为变化、脊髓神经电生理变化和脊髓组织形态学变化。结果:细胞移植后第8 d即可见瘫痪大鼠的后肢肌力开始恢复,2～3周后可出现爬行,4周后后肢活动活跃;对照组瘫痪的肢体无任何恢复。脊髓诱发电位部分出现,动作电位波幅较高;对照组未出现诱发电位,且动作电位波幅明显减低。脊髓移植区肉眼可见有增生的组织充填,镜下有大量新生的细胞,表现为神经元和神经胶质细胞阳性染色。结论:神经干细胞移植可使脊髓横断大鼠运动功能恢复,有望成为治疗脊髓损伤的有效手段。

人脐血间质干细胞移植对脑创伤大鼠行为学和学习、记忆评分的影响

目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)移植对脑创伤大鼠的行为学和学习、记忆评分的影响。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到的UCB-MSCs,移植于自由落体撞击法制作的脑创伤模型大鼠受损脑组织内。分别于移植后2d及7d进行大鼠行为学评分,2周和4周行Y迷宫试验。结果移植后2d、7d2组组内行为学评分比较差异有统计学意义(P<0.05);移植后2周学习评分和4周记忆评分2组间差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论UCB-MSCs移植治疗脑创伤大鼠可提高其学习和记忆能力。