染色体3p区抑癌基因在非小细胞肺癌中的甲基化状况与临床意义

背景与目的 DNA甲基化是表观遗传学的一种调控机制,染色体3p区等位基因缺失是肺癌发生中较频繁和早期的事件之一。检测染色体3p区5个典型抑癌基因DLEC1、RASSF1A、hMLH1、RARβ和FHIT在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的甲基化状况,分析其临床意义。方法取78例NSCLC患者术中癌组织及相应正常肺组织标本,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测基因启动子区甲基化状况,RT-PCR和免疫组化检测DLEC1基因表达。结果 78例NSCLC组织中,DLEC1、RASSF1A、RARβ和hMLH1甲基化频率分别为41.03%、39.74%、30.77%和16.67%,与正常组织相比差异均具有统计学意义。FHIT基因在癌组织和正常组织均无甲基化。DLEC1甲基化与患者临床分期(P=0.011)和淋巴结转移相关(P=0.019),而RASSF1A、RARβ、hMLH1基因甲基化以及平均甲基化指数与临床病理特征无关联。56.41%(44/78)的NSCLC组织中发现DLEC1基因表达下调或缺失,且与启动子甲基化有关。结论 3p区抑癌基因甲基化是NSCLC发生中的重要分子事件,可能作为NSCLC早期诊断的潜在生物标记,新型抑癌基因DLEC1失活与启动子高甲基化有关。

人肺腺癌细胞基因表型与尼妥珠单抗疗效的关系

目的分子靶向治疗是目前肺腺癌治疗的热点,靶向于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单抗可提高化疗效果,但肺癌基因表型与疗效的关系尚不明确。文中研究尼妥珠单抗联合化疗的疗效与人肺腺癌细胞表面EGFR表达强度,以及EGFR、KRAS和PI3KCA基因突变的关系。方法免疫组化法测定A549、SPC-A1和SPC-A1/DTX肺腺癌细胞表面EGFR的表达强度,突变富集-液相芯片法及测序法检测3种细胞EGFR、KRAS和PI3KCA基因的突变情况,绘制细胞生长曲线测定细胞倍增时间。流式细胞仪检测尼妥珠单抗对细胞周期的影响,MTT法检测尼妥珠单抗联合补体依存性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)作用,与顺铂/多西紫杉醇的联合指数(combination index,CI)。结果 EGFR表达强度:A549(-),SPC-A1(+),SPC-A1/DTX(3+);基因突变:A549的KRAS基因13号密码子和PI3KCA基因的外显子9及20位点突变,SPC-A1/DTX的PI3KCA基因外显子20突变,其余均无突变;SPC-A1/DTX倍增时间最长,为(35.0±2.1)h。尼妥珠单抗(10μg/ml)作用24 h后,进入G0/G1期细胞均增多,但SPC-A1细胞(P=0.018)和SPC-A1/DTX细胞(P=0.0002)差异有统计学意义,A549细胞差异无统计学意义(P=0.24)。低剂量尼妥珠单抗(10μg/ml)联合补体的CDC效应与细胞表面EGFR的表达强度和作用时间呈正相关。尼妥珠单抗(100μg/ml)与顺铂或多西紫杉醇联合时,A549细胞均为相加作用,SPC-A1均为协同作用,SPC-A1/DTX中,多西紫杉醇与尼妥珠单抗为协同作用(CI=0.40),而顺铂与尼妥珠单抗为相加作用(CI=0.93)。结论尼妥珠单抗单药对于EGFR表达阴性,KRAS和PI3KCA基因突变的A549细胞无明显细胞毒性作用和CDC作用,与化疗无协同作用。尼妥珠单抗单药作用于EGFR表达阳性的细胞有G0/G1期阻滞效应和CDC效应,EGFR表达强度越大,化疗增敏作用越强,而与PI3KCA基因突变的影响不显著。

激素抵抗型前列腺癌的研究进展

在我国，前列腺癌发病率逐年上升，晚期前列腺癌首选内分泌治疗，但相当一部分患者在内分泌治疗2-5年后病情进展为激素抵抗型前列腺癌（HRPC）。现就HRPC的分子生物学特点诊断标准、预测指标和治疗方法的研究进展作一综述，并展望HRPC的研究方向。

内生场热疗联合腔内化疗治疗恶性胸腹腔积液的临床研究

目的:观察腔内化疗联合内生场热疗治疗恶性胸腹腔积液的近期疗效和不良反应,评价热化疗前后机体免疫功能的变化,初步探讨热化疗的作用机制。方法:治疗组52例,腔内化疗每周1次,联合局部内生场热疗,每周2次;对照组50例,单纯腔内化疗,每周1次。连续治疗2周后休息1周,观察近期疗效和不良反应。检测治疗组患者治疗前后外周血和胸腹腔积液中T细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞和血管内皮生长因子(VEGF)的含量。结果:治疗组中胸腔积液患者有效率为86.9%,对照组为60.0%,两组间差异有极显著性意义(P<0.05);治疗组腹腔积液患者有效率为79.3%,对照组为46.7%,两组间差异有显著性意义(P<0.01)。治疗组骨髓抑制发生率明显少于对照组(P<0.05)。治疗组患者治疗后胸腹腔积液中CD4/CD8值较治疗前明显升高(P<0.01),NK细胞明显下降(P<0.05);外周血中CD3、CD4、CD8、CD4/CD8值及NK细胞均较治疗前显著升高(P<0.05);胸腹腔积液和外周血中的VEGF较治疗前均显著下降(P<0.05)。结论:内生场热疗联合腔内化疗能有效地控制恶性胸腹腔积液,减轻不良反应。热化疗能提高局部及全身的细胞免疫功能,并可能具有抑制肿瘤新生血管形成的作用。

尼妥珠单抗对耐多西紫杉醇人肺腺癌细胞株化疗敏感性的调变作用

目的通过体内外实验研究人源化抗表皮生长因子受体(EGFR)单抗尼妥珠(h-R3)对耐多西紫杉醇(DTX)人肺腺癌细胞株(SPC-A1/DTX)化疗敏感性的调变作用。方法免疫组化法及流式细胞仪测定人肺腺癌细胞株SPC-A1和SPC-A1/DTX肺腺癌细胞株表面EGFR的表达强度,突变富集-液相芯片法检测其EGFR、K-Ras和PI3KCA基因的突变情况,流式细胞仪检测h-R3对细胞周期的影响以及h-R3联合DTX对细胞凋亡的影响,MTT法检测h-R3与DTX的联合指数(CI),裸鼠SPC-A1/DTX移植瘤模型观察联合组及单药组对裸鼠抑制瘤模型肿瘤的增殖情况并计算瘤重抑制率(TWI)。结果 SPC-A1细胞株EGFR表达强度为(+,21.53%),SPC-A1/DTX细胞株为(+++,92.47%);SPC-A1/DTX细胞株的PI3KCA基因外显子20突变,SPC-A1细胞株无突变。h-R3作用24h后,SPC-A1/DTX细胞G1期阻滞较SPC-A1细胞更显著(P=0.0002);h-R3及DTX联合用药后SPC-A1/DTX细胞株的凋亡率为(24.7±0.5)%,明显高于h-R3单药组的(14.5±0.1)%,而单用DTX后的凋亡率无显著升高,SPC-A1细胞株单药组及联合组凋亡率均有升高(P<0.05);100μg/ml及200μg/ml h-R3与DTX联合对SPC-A1或SPC-A1/DTX细胞株的增殖抑制具有协同作用;联合组对SPC-A1/DTX肺腺癌荷瘤裸鼠的TWI为71.7%,高于DTX组的52.6%和h-R3组的36.9%。结论 h-R3能明显增加耐DTX的人肺腺癌细胞株化疗的敏感性,其机制可能为h-R3具有G1期阻滞和逆转耐药细胞凋亡抵抗的作用,并且其疗效与耐药细胞较亲本细胞的EGFR表达增强有关,而耐药细胞的PI3KCA基因突变对疗效的影响不显著。

Herceptin治疗转移性乳腺癌的研究进展

Herceptin是一种针对HER-2/neu原癌基因产物的人源化单克隆抗体,能特异的作用于HER-2受体过度表达的乳腺癌细胞。临床研究已评价了其药代动力学、临床治疗转移性乳腺癌的客观疗效和安全性问题。具有较大的临床应用及推广价值。

激素抵抗型前列腺癌分子靶向治疗的进展

前列腺癌是中老年男性最常见的恶性肿瘤之一,初期内分泌治疗有效,但几乎都会转变为激素抵抗型前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer,HRPC)。多西紫杉醇联合强的松是HRPC标准的一线治疗,但目前尚无公认的二线治疗方案,本文拟着眼于HRPC形成的分子机制,介绍以肿瘤新生血管、细胞信号传导通路、凋亡、增殖及免疫调节为靶点治疗方法的最新进展。

外周原始神经外胚叶肿瘤23例临床分析

目的:探讨外周原始神经外胚叶肿瘤(pPNET)的临床特征,以指导诊疗和评估预后。方法:收集我院23例pPNET患者的临床资料进行回顾总结,分析其临床表现、诊断和治疗的方法,并随访其生存期。结果:男性13例,女性10例,平均年龄为27.3岁,好发于躯干、四肢和中轴软组织包括胸壁、脊柱旁和腹腔等,多以出现进行性增大的局部包块起病。实验室和影像学检查无特异性指标,依据病理学明确诊断,治疗以手术为主,辅以全身化疗及局部放疗。平均生存期为15.9个月,年龄<16岁、原发于腹腔、不规范治疗的患者预后差。结论:pPNET是一种多发于青少年的高度恶性肿瘤,依靠病理学诊断,尽早发现,及时手术,辅以放化疗可延长生存期。

非小细胞肺癌SFRP1基因甲基化的研究

目的检测SFRP1基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和血浆中的甲基化状态,分析其临床意义。方法留取78例NSCLC患者术中癌组织、正常肺组织及术前血浆标本,25例肺部良性病变组织及50例肺部良性病变患者或健康志愿者血浆标本为对照,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测SFRP1基因启动子区甲基化情况,并分析与临床病理特征之间的相关性。结果78例NSCLC组织中,SFRP1基因启动子甲基化比例为32.1%,高于正常组织的7.7%和25例肺部良性病变组织的0(P<0.01);SFRP1基因启动子甲基化与患者淋巴结转移相关(P=0.039)。NSCLC术前血浆DNA中SFRP1甲基化比例为28.2%,高于对照组的4.0%(P<0.01),且血浆DNA甲基化状况与组织中具有良好的一致性。结论血浆DNA中SFRP1甲基化检测可能对NSCLC早期诊断有益。

HER2表达与乳腺癌预后的相关性研究

为了研究乳腺癌HER2表达与预后的关系 ,探讨其作为乳腺癌预后指标的可行性 ,采用免疫组化法 (IHC)检测 185例乳腺癌标本的HER2表达 ,并随访其生存时间。 185例中失访 6 5例 ;12 0例有 10年预后随访资料 ,其中死亡 2 8例。所有检测标本的HER2的阳性率为 37 3%;不同HER2表达级别生存曲线比较差异有统计学意义 ,各生存曲线之间比较差异有统计学意义 ,P值均小于 0 0 1;HER2阴性者 40和 6 0个月生存率比高表达患者高 ;HER2过度表达与生存期呈负相关(P <0 0 5 )。结果说明 ,乳腺癌患者HER2高表达预示生存时间缩短 ,HER2是乳腺癌预后不良的一项独立指标。

正电子发射型计算机断层扫描/计算机体层扫描在恶性淋巴瘤临床分期中的初步应用

目的:观察氟去氧葡萄糖(FDG)正电子发射型计算机断层扫描/计算机体层扫描(PET/CT)显像和传统分期检查方法对恶性淋巴瘤分期和治疗后再分期的影响,以探讨其临床应用价值。方法:采用视觉分析和半定量分析相结合的方法,比较42例病理确诊为恶性淋巴瘤患者传统分期检查和PET/CT对分期和治疗后再分期的符合率,以及对淋巴结区和结外病灶检出率的差异。结果:PET/CT检查与传统分期手段对分期判断的符合率分别为95.2%(40/42)和78.6%(33/42)。对淋巴结内病灶传统分期检查的检出率为88.2%(60/68),PET/CT为97.1%(66/68),两者间差异有显著性意义(P<0.05);对淋巴结外病灶传统分期检查的检出率为58.3%(14/24),PET/CT为91.7%(22/24),两者间差异有极显著性意义(P<0.01)。PET/CT检查使TNM分期改变者9例,达21.4%,其中分期升高7例,下降2例,8例(19.0%)的治疗计划发生改变。结论:FDG PET/CT可提高恶性淋巴瘤的分期和再分期的准确率,并可提高淋巴结内外病变的检出率,这有利于更准确地制订治疗方案和预测预后。

自噬在调控抗肿瘤药物耐药中的研究进展

恶性肿瘤通过多种机制产生肿瘤耐药。细胞自噬是在生理条件和病理条件下普遍存在的生理机制,不仅能参与维持细胞稳态,还与肿瘤的发生发展和肿瘤耐药密切相关。化疗药物通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol 3-kinase/Akt/mammalian target of rapamycin,PI3K-Akt-mTOR)信号通路、活化单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)抑制mTOR激酶活性、诱导Beclin 1/Bcl-2复合物解耦联等途径,诱导肿瘤细胞自噬,影响肿瘤细胞对化疗药物敏感性。因此,抑制细胞自噬是对抗肿瘤耐药的潜在途径,抑制肿瘤细胞自噬联合化疗药物的应用,有望成为有效的肿瘤治疗策略。

经皮穿刺微波凝固活体肺的实验研究

目的:探讨经皮微波凝固动物活体肺组织的范围、病理变化及安全性,为进一步应用于临床治疗提供依据。方法:CT引导下将微波辐射天线插入猪肺的不同位置,采用不同的辐射功率／时间组合进行凝固,观察凝同后CT表现。术后1周处死动物,取出肺组织,测量凝固灶的范围(最大径×垂直径),光镜下观察凝固灶病理变化。结果:60 W／5 min凝固灶均值为31．2 mm×22．3 mm,60 W／10 min为35．4 mm×25．2 mm;80 W／5 min为40．2 mm× 32．4mm,80W／10min为45．2mm×40．5mm。光镜下见凝固区出血性坏死,坏死区外围有水肿带、炎性细胞浸润等改变;术后CT扫描及处死动物中未见有气胸、血胸等并发症。结论:微波加热可使活体肺组织凝固达一定范围, 并发症轻微。

Herceptin治疗Her-2过度表达的转移性乳腺癌7例报告

为探讨抗Her-2受体单克隆抗体Herceptin对Her-2阳性的转移性乳腺癌的治疗作用,观察了7例接受Herceptin联合TAX或NVB治疗的Her-2/neu阳性的转移性乳腺癌患者的疗效和毒副反应。结果7例中完全缓解（CR）2例,部分缓解（PR）3例,稳定（SD）1例,进展（PD）1例,有效率为71.4％（CR+PR）,且未发现有任何与Herceptin有关的毒副反应出现。初步分析近期缓解率与Her-2/neu表达状况明显相关。

乳腺癌HER2、EGFR表达与生存期的相关性

目的研究乳腺癌人表皮生长因子受体2(Her2)和表皮生长因子受体(EGFR)高表达与生存期的关系,探讨其单独或联合作为预后指标的可行性。方法采用免疫组化检测185例乳腺癌标本的HER2和EGFR表达,并随访其生存时间。结果HER2、EGFR的阳性总表达率分别为57.8%和40.5%;HER2或EGFR过度表达均与生存时间呈负相关(P<0.05和P<0.01);HER2联合EGFR过度表达均与生存期呈负相关(P<0.05和P<0.01)。结论HER2、EGFR无论是单独或者联合高表达都降低乳腺癌患者的生存时间,可作为乳腺癌预后不良的指标。

非小细胞肺癌相关抑癌基因甲基化谱的研究

目的抑癌基因5′-CpG岛甲基化是非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)中常见的表观遗传学改变,相关研究报道多为单基因位点且结果不一致。为了解我国NSCLC患者相关抑癌基因的甲基化状况,本文中筛选一组NSCLC候选甲基化谱,探讨其在NSCLC发生发展中的意义及用于早期诊断的价值。方法留取78例NSCLC患者术中癌组织,相应正常肺组织及110例I/II期NSCLC、50例肺部良性病变或健康志愿者血浆标本,用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specificPCR,MSP)检测20个肺癌相关抑癌基因甲基化状况。结果 12个基因(APC、CDH13、KLK10、DLEC1、RASSF1A、EFEMP1、SFRP1、RARβ、p16INK4A、RUNX3、hMLH1和DAPK)在肿瘤组织中的甲基化高于相应正常组织,尤其是前9个基因(P≤0.001),8个基因(BRCA1、p14ARF、MGMT、NORE1A、FHIT、CMTM3、LSAMP和OPCML)甲基化程度较低或肿瘤特异性较低。多基因甲基化常见于肿瘤组织,CpG岛甲基子表型(CpGislandmethylatorphenotype,CIMP)阳性见于65.38%(51/78)的NSCLC癌组织而仅见于1.28%(1/78)的正常组织(P<0.001)。CIMP阳性与临床分期和淋巴结转移(P分别为0.007和0.031)相关。在早期NSCLC患者血浆样本中也检测出癌组织中初步筛选的9个抑癌基因的高甲基化。将APC、RASSF1A、CDH13、KLK10和DLEC15个基因联合检测,对肿瘤诊断的敏感性为83.64%,特异性为74.0%。结论 CIMP阳性是NSCLC肿瘤组织区别于正常组织的重要特征,且与临床分期和淋巴结转移相关。APC、RASSF1A、CDH13、KLK10和DLEC15个抑癌基因甲基化的联合检测可用于NSCLC的辅助诊断。

PET/CT显像在肺癌临床分期中的初步应用

目的:观察18F-FDG PET/CT显像和传统分期检查方法对肺癌分期和治疗后再分期的影响,以探讨其临床应用价值。方法:采用视觉分析和半定量分析相结合的方法,比较56例经病理检查确诊为肺癌患者的传统方法分期和PET/CT分期及治疗后再分期的符合率,以及对T、N和M分期准确性的差异。结果:PET/CT检查与传统方法对分期判断的符合率分别为92.9%(52/56)和75%(42/56)。对于T亚分期,PET/CT检查准确率为94.6%(53/56),CT检查准确率为82.1%(46/56),两者间无显著性差异(P>0.05);对N亚分期,PET/CT检查的准确率为92.9%(52/56),CT为73.2%(41/56),两者间有显著性差异(P<0.05);对M亚分期,PET/CT的准确率为96.4%(54/56),传统方法分期为89.3%(50/56),两者间无显著性差异(P>0.05)。PET/CT检查使TNM分期改变者13例,达23.2%,其中分期升高9例,下降4例,7例肺癌患者的治疗计划发生改变。结论:18F-FDG PET/CT可提高肺癌的分期和再分期的准确率,这有利于更准确地制订治疗方案,预测预后。

中药对放疗后副反应及患者生活质量的影响

为观察中医药配合腹部放疗对放疗毒副作用和患者生活质量的影响。将 86例腹部放疗患者随机分为治疗组 (5 3例 )和对照组 (33例 ) ,治疗组放疗加中药治疗 ,对照组单纯放疗治疗。结果 :治疗组比对照组患者放疗副反应发生率低 ,生存质量评分提高 ,二者比较具有显著差异 (P <0 0 1)。提示对腹部放疗患者进行中医药治疗能降低毒副反应发生率、提高生活质量。