太子参化学成分及生物活性研究进展

太子参为石竹科植物孩儿参的干燥块根,味甘、微苦,性平,归脾肺经,具有益气健脾、生津润肺之功效,常用于气虚津伤的肺虚燥咳,被国家卫生健康委员会批准用于保健食品。现代药理和临床研究表明,太子参中特征性化学成分多糖和环肽具有免疫调节、抗炎、改善记忆等作用。近年来对太子参的化学成分、结构和药理作用的综述仅局限于特征成分,对其他成分还鲜有系统梳理报道。因此本文系统梳理了太子参的化学成分及生物活性研究进展,以期为太子参的开发利用提供参考和依据。

二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸及其组合对斑马鱼阿尔茨海默病模型认知障碍的改善作用和机制

目的omega-3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)能够抑制M1型小胶质细胞的过度激活促炎细胞因子的释放和细胞凋亡,而EPA具有抗抑郁的作用。与EPA比较,DHA似对记忆的改善作用更强。由于两者在食物、衰老和疾病中的比值多变,其单一和最佳组合的功效不明,本实验拟利用AD模型比较研究EPA、DHA及最佳组合改善认知障碍及神经炎症的机制。方法Al 3+诱导斑马鱼AD模型,饲予EPA、DHA或EPA+DHA(1∶2),评估新物体识别和T迷宫奖赏的记忆,GC-MS检测躯体PUFAs浓度变化,qPCR检测脑内AChE、Axl、APP、Bace1、IL-6、TNF-α、CD11b、CD206、VDAC1、Caspase-3、Caspase-9和Bax的变化,ELISA试剂盒检测脑内Aβ的浓度。结果与模型组相比,EPA仅明显改善了斑马鱼的新物体识别能力,而DHA与EPA+DHA均恢复了新物体识别和T迷宫中的记忆。给予EPA、DHA和EPA+DHA均明显抑制了Aβ的蛋白浓度变化以及IL-6、CD206、Caspase-3、Caspase-9、Bax和AChE的mRNA表达,EPA和DHA均明显抑制了Bace1、APP和TNF-α的mRNA表达。DHA和EPA+DHA还明显降低了Axl和VDAC1的mRNA表达。结论EPA+DHA的组合对Al 3+诱导斑马鱼AD模型的记忆和认知障碍具有更好的改善作用,其作用机制可能通过抑制脑内细胞凋亡情况来改善记忆和认知障碍。

DHA对慢性应激诱导的抑郁行为及外周巨噬细胞功能的影响

以慢性应激诱导的抑郁症为模型,通过测定大鼠蔗糖水偏好度、强迫游泳静止时间、肾上腺指数、血清皮质酮水平、巨噬细胞活性和吞噬能力,研究DHA的抗抑郁效果。结果表明:应激组与对照组相比,蔗糖水偏好度显著下降(P<0.05),强迫游泳静止时间显著延长(P<0.01),肾上腺指数、巨噬细胞活性和吞噬能力均显著增强(P<0.05);长期喂食DHA可以改善蔗糖水偏好度和静止时间(P<0.01),降低肾上腺指数、血清皮质酮水平、巨噬细胞活性和吞噬能力(P<0.05)。慢性应激可引起外周炎症反应增强和应激激素水平升高,DHA可在一定程度上调节外周炎症反应和激素水平,改善慢性应激诱导的抑郁症状。

大鼠实验性甲状旁腺功能减退的研究——Ⅲ.脑突触膜流动性的改变

本实验采用荧光偏振和差示扫描量热(DSC)技术,测定了实验性甲状旁腺功能减退的大鼠模型脑突触膜流动性的改变。结果表明,2个月持续低血钙状态,使火鼠的大脑皮层、海马、纹状体和中脑的突触膜平均微粘度减小,其中大脑皮层和海马与对照组呈显著性差异(P<0.001),提示低钙鼠突触膜流动性上升。此外,低钙还使海马突触膜脂质的棚变温度Tc提前,提示膜的流动性和通透性均增加。

Fat-1转基因模型小鼠对脂多糖诱导的抑郁样行为和中枢炎症反应的改善作用

以Fat-1转基因小鼠和野生型C57BL/6小鼠为研究对象,经侧脑室注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导中枢炎症模型,测定抑郁样行为糖水偏好度和悬尾实验、腹腔巨噬细胞活性及其吞噬能力、脑炎症小胶质细胞的标记物CD11b基因与蛋白的表达水平,用以研究Fat-1对LPS诱发的炎症和抑郁样行为的作用。结果表明:在野生型小鼠中,LPS降低小鼠糖水偏好度,延长悬尾静止不动时间,增加腹腔巨噬细胞的活性和吞噬能力,上调CD11b基因和蛋白表达水平;而LPS不能引起Fat-1转基因小鼠出现上述类似变化。侧脑室注射LPS可引起野生型小鼠炎症反应和抑郁样行为,而Fat-1转基因小鼠可通过脑内和体内合成n-3 PUFAs抵抗LPS诱发的上述抑郁样变化。

线纹海马乙醇提取物对脂多糖诱导BV2小胶质细胞炎症反应的作用

【目的】研究线纹海马乙醇提取物对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导BV2小胶质细胞神经炎症和氧化反应的抑制作用。【方法】利用LPS诱导BV2小胶质细胞建立炎症反应模型,根据对BV2细胞不同的处理方法将其分为对照组、模型组、线纹海马乙醇提取物组(0.1～1 000 ng/mL)和模型组+线纹海马乙醇提取物组(1ng/m L)。用CCK8法检测BV2细胞存活率,显微镜下观察细胞形态的变化,Greiss法测定细胞释放的一氧化NO含量,ELISA法检测BV2细胞上清液中促炎症因子如白细胞介素(interleukin,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF-α)的表达量。【结果】与对照组相比,线纹海马乙醇提取物对BV2细胞的增殖无显著影响,而LPS刺激显著促进BV2细胞的增殖,细胞呈典型的阿米巴状,同时大量释放氧自由基NO和促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α。线纹海马乙醇提取物显著抑制LPS诱导的BV2细胞增殖,改善LPS诱导的细胞阿米巴状形态,并抑制LPS激活BV2细胞释放的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6和氧自由基NO(P <0.05)。【结论】线纹海马乙醇提取物可明显抑制LPS诱导的BV2细胞的增殖、细胞形态的改变及其所产生的炎症因子和氧自由基的增加。

不同ω-3多不饱和脂肪酸对斑马鱼阿尔茨海默病模型记忆损伤和神经病理学变化影响

【目的】研究ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对铝致斑马鱼认知、记忆损伤和病理变化的影响。【方法】利用共聚焦显微镜观察斑马鱼幼鱼脑内荧光强度。以100μg/L铝诱导斑马鱼阿尔茨海默病(AD)模型,给予EPA、DPA和DHA后,进行新物体识别和T迷宫奖赏测试,Elisa检测β-Amyloid(Aβ)、p-tau、乙酰胆碱酯酶(AChE)和白细胞介素(IL)-1β的含量,qPCR检测小胶质细胞标志物Hexb与星形胶质细胞标志物GFAP及脑源性神经营养因子(BDNF)的变化。【结果】与对照组相比,铝显著激活斑马鱼幼鱼脑内的小胶质细胞。在行为实验中,与对照组相比,铝显著延长到达新臂、奖励臂潜伏期,减少在新臂、奖励臂时间;EPA、DPA和DHA均显著增加在新臂、奖励臂时间;EPA和DHA显著减少到达奖励臂的潜伏期;与对照组相比,模型组显著增加Aβ、p-tau、AChE和IL-1β的蛋白浓度以及Hexb和GFAP的mRNA表达。EPA、DPA和DHA均显著降低Aβ蛋白浓度和GFAP的mRNA表达。EPA显著降低p-tau、AChE和IL-1β的蛋白浓度,并抑制Hexb及上调BDNF的mRNA表达;DPA亦显著降低p-tau蛋白浓度;DHA显著降低AChE浓度。【结论】三种ω-3PUFAs对斑马鱼AD样变化作用各不相同,EPA的效果最佳。

海红米米糠对慢性应激诱导小鼠抑郁样行为和异常肠道微生物及神经递质的改善作用

“微生物-肠-脑轴”失常在抑郁症的发病中发挥着重要作用,调节肠道菌群失衡成为最新的治疗方向。海红米米糠可发挥益生元作用调控肠道微生物。为探究海红米米糠改善慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导的小鼠抑郁样行为的作用。对照和暴露于CUMS的小鼠接受正常或含5%海红米米糠饮食喂养9周,通过糖水偏好实验和悬尾实验分析小鼠的抑郁样行为,实时荧光定量PCR法检测结肠内容物菌群的数量,HPLC测定前额皮层中单胺类神经递质的含量。应激使小鼠糖水偏好度、乳杆菌属和双歧杆菌属的数量、去甲肾上腺素(NE)与其代谢产物、五羟色胺(5-HT)与其代谢产物、多巴胺(DA)与其代谢产物的含量都显著下降,悬尾不动时间和梭菌属的数量都显著升高;海红米米糠干预后提高了小鼠的糖水偏好度、乳杆菌属和双歧杆菌属的数量、5-HT与其代谢产物和NE的含量,降低了悬尾不动时间。海红米米糠改善CUMS诱导的小鼠抑郁样行为可能与改善肠道菌群失衡及神经递质有关。

海参酶解液对角叉菜胶所致小鼠血栓形成的抑制作用

【目的】探讨海参酶解液对角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓模型的改善作用。【方法】将实验小鼠分对照组、模型组、以及低、中、高(350、700、1 400 mg/kg)剂量组,采用海参酶解液和生理盐水连续30 d灌胃处理,以角叉菜胶制备小鼠尾部血栓模型,计算24 h和48 h时黑尾长度占尾部总长度的百分比即黑尾比率(%),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆纤维蛋白原(FIB)、纤维蛋白原降解产物(FDP)和组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的含量。【结果】各组小鼠灌胃海参酶解液前后与对照组比体质量无显著性差异(P>0.05);海参酶解液中剂量组与高剂量组小鼠的黑尾比率明显小于模型组(P<0.05),海参酶解液低剂量组小鼠黑尾比率与模型组相比无显著性差异;灌胃海参酶解液组小鼠血浆中的FIB含量显著低于模型组(P<0.05);高剂量组与中剂量组小鼠血浆中的FDP及t-PA的含量显著高于模型组(P<0.05)。【结论】海参酶解液对模型小鼠体内血栓的形成具有改善和溶解作用。

海参酶解液对斑马鱼糖尿病并发抑郁样行为的改善作用

【目的】探究海参酶解液对高糖高脂所致的斑马鱼抑郁样行为的改善作用。【方法】将斑马鱼随机分为对照组、模型组各1组,和海参酶解液高剂量(1.0m L/L)治疗组、低剂量(0.5m L/L)治疗组各1组。每天利用高浓度葡萄糖(质量分数2%)系统浸泡及高胆固醇(质量分数10%)饲料饲喂诱导斑马鱼高糖高脂模型,高低浓度海参酶解液浸泡治疗。14 d后进行新鱼缸潜水行为实验,取鱼体匀浆进行组织各生化指标的检测,包括葡萄糖(Glucose, Glu)、总胆固醇(Total cholesterol, TC)、皮质醇(Cortisol, Cor)浓度。【结果】新鱼缸行为实验中,与对照组相比较,模型组斑马鱼的行为学实验都有明显差异,其中焦虑型行为潜伏期、冻结次数和冻结时间等抑郁型行为增加,探究型行为顶部转移和顶部时间减少,而1.0 mL/L高剂量海参酶解液可以逆转这些变化。模型组葡萄糖、总胆固醇、皮质醇浓度相比对照组显著升高,而给予海参酶解液治疗后,高剂量治疗组对模型组的葡萄糖、总胆固醇及皮质醇浓度均有显著降低的作用。【结论】海参酶解液可以通过改善高糖高脂诱导的糖尿病模型中糖脂水平来改善抑郁样行为和应激激素。

DHA和EPA对慢性应激诱导大鼠抑郁样行为和杏仁核相关基因表达影响比较

【目的】比较二十二碳六稀酸(DHA)和二十碳五稀酸(EPA)改善慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导的大鼠抑郁样行为的作用机制。【方法】应用糖水偏好实验测定糖水偏好度,强迫游泳实验测定不动时间,荧光定量PCR检测杏仁核脑源性神经营养因子(BDNF)、其受体酪氨酸激酶受体(TrKB)和神经营养素(p75NTR)基因表达。【结果】与对照组相比,CUMS组大鼠糖水偏好度、BDNF和TrKB基因表达显著降低(P﹤0.05),而不动时间和p75NTR基因表达显著升高(P﹤0.05);给予DHA和EPA喂食治疗,可显著改善CUMS诱发的大鼠快感缺乏,绝望行为以及BDNF和TrKB的表达(P﹤0.05);DHA提高BDNF的表达作用显著优于EPA,而EPA对降低不动时间和p75NTR的表达作用显著优于DHA(P﹤0.05)。【结论】DHA和EPA通过调控不同基因表达改善CUMS诱导的抑郁样行为变化。

EPA对慢性应激诱导的外周巨噬细胞功能及细胞膜不饱和脂肪酸组成变化的影响

利用慢性不可预知轻度应激诱导大鼠抑郁模型,以体质量、糖水偏好和旷场实验作为抑郁样行为评价指标,以腹腔巨噬细胞吞噬能力、皮质酮激素水平为外周免疫和应激激素指标,测定脑内多不饱和脂肪酸(PUFAs)探讨脑内细胞膜组成的变化。结果表明:与对照组相比,应激组大鼠在体质量、糖水偏好及旷场实验中穿越格数和站立次数均有明显下降,而皮质酮激素和腹腔巨噬细胞吞噬能力均显著增加,脑内n-3 PUFAs、n-3/n-6 PUFAs减少,喂饲EPA可显著改善应激引起的变化。

雌、雄海马抗疲劳和改善记忆障碍比较

【目的】比较雌、雄海马对小鼠抗疲劳和改善记忆障碍的不同作用。【方法】转棒实验检测小鼠抗疲劳能力,将小鼠分3组,1组喂食普通饲料,另外2组分别喂食含有质量分数0.22%雌、雄海马的饲料,共喂食6周。跳台实验检测小鼠记忆能力,将小鼠为4组,正常组与乙醇组喂食普通饲料,另外2组分别喂食含有质量分数0.22%雌、雄海马的饲料,共喂食6周。体积分数30%乙醇灌胃乙醇组和雌、雄海马组诱导小鼠记忆损伤模型。【结果】抗疲劳实验中,与对照组相比,喂食雄海马的小鼠在棒时间显著延长(P<0.05),其血清中乳酸含量显著降低(P<0.05);而喂食雌海马的小鼠在棒时间和血清乳酸含量均无明显改变。乙醇记忆损伤实验中,与对照组相比,模型组小鼠跳下平台的潜伏期显著下降(P<0.01),错误数(次)显著升高(P<0.01);与模型组相比,喂食雄海马的小鼠跳下平台的潜伏期显著升高(P<0.05),错误数(次)显著减少(P<0.05),脑组织中的乙酰胆碱酯酶活性显著降低(P<0.05);而喂食雌海马的小鼠上述指标均无改变。【结论】在增强小鼠抗疲劳能力和改善记忆方面,雄海马的功效显著而雌海马无效。

糖尿病斑马鱼模型的建立与南极磷虾酶解物降血糖活性评价

采用联合20g/L葡萄糖溶液浸泡和10%胆固醇喂养20d快速建立了稳定的糖尿病斑马鱼模型,并用该模型对3 000~100Da南极磷虾酶解物(AKEH)的体内降血糖效果进行评价,具体考察AKEH对糖尿病斑马鱼DPP-IV的活性、理化指标(葡萄糖、甘油三酯、胆固醇)和与血糖水平相关基因(Insa、Glucagon、Pck1)表达水平的影响。结果表明:与阴性对照组相比,低剂量的3 000~100Da AKEH组分(1.35,2.70g/L)对糖尿病斑马鱼的理化指标与血糖相关基因表达水平影响不显著,而高剂量的3 000~100Da AKEH(5.40g/L)能降低其血糖的理化指标水平,显著抑制糖尿病斑马鱼DPP-IV活性与Glucagon基因和Pck1基因的表达水平、提高Insa基因表达水平。因此,3 000~100Da AKEH组分具有一定的降血糖功效。

海马对慢性应激模型小鼠抑郁行为及神经递质含量的影响

【目的】探索中药材海马改善慢性应激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)诱导的小鼠抑郁样行为的作用及可能机制。【方法】利用慢性轻度不可预测性应激建立小鼠抑郁模型,通过糖水偏好度、强迫游泳实验和旷场实验评价动物抑郁样行为,利用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清中皮质酮含量(Glucocorticoid,GC)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,高效液相色谱法测定海马脑区中去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺的含量。【结果】与对照组相比,模型组小鼠糖水偏好度显著下降,强迫游泳不动时间显著延长,旷场中运动总格数和中心格进入次数显著降低,血中皮质酮和IL-1β含量明显升高,而去甲肾上腺素、5-羟色胺和多巴胺水平显著下降;应激同时饲喂海马可显著改善应激小鼠以上指标的异常(P<0.05)。【结论】中药材海马可通过调节炎症和神经递质的变化而改善抑郁样症状的效果。

岩藻多糖对Aβ25-35诱导神经元凋亡和突起萎缩的抑制作用

【目的】研究海带岩藻多糖(Fucoidan)对Aβ25-35(Amyloidβ)诱导原代皮层神经突起萎缩和神经元凋亡的抑制作用。【方法】以Aβ25-35诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)和原代小鼠皮层神经元损伤为模型,采用CCK8法测定细胞存活率,免疫细胞化学法测定岩藻多糖对神经突起再生和神经元的保护作用。【结果】CCK8结果表明,岩藻多糖在0.1~1000μg/mL时对SH-SY5Y细胞无明显毒性作用(P>0.05),在10~1000μg/mL时可显著降低Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡(P<0.05),且呈现浓度依赖性;对该结果在原代小鼠皮层神经元上进行验证,发现岩藻多糖在0.1~1.0 mg/mL浓度时显著降低Aβ25-35诱导的神经元凋亡(P<0.01),同时极显著抑制Aβ25-35造成的神经突起萎缩并促进突起再伸长(P<0.001)。【结论】海带岩藻多糖可显著抑制Aβ25-35诱导的神经突起萎缩和神经元凋亡,促进突起再生,提示其可作为阿尔茨海默病药物开发的先导化合物。

IL－1β诱导的中枢神经炎症对外周免疫的影响

目的：研究慢性中枢炎症对大鼠机体健康-外周免疫系统的影响。方法将20只雄性SD大鼠分为2组：对照（ normal saline，NS）组、白细胞介素－1β（ IL－1β）诱导的模型组。大鼠接受侧脑室注射IL－1β14天，高架、旷场实验检测动物的焦虑和应激行为，MTT法测定淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的活性，酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子（ TNF－α）、过氧化氢（ H2 O2）和糖皮质激素（ GC）的含量。结果与对照比较，IL－1β致使：①大鼠在旷场实验中的自主运动降低，高架实验中的焦虑行为增加（P＜0．05）；②淋巴细胞的增殖能力和巨噬细胞的吞噬功能降低（P＜0．05）；③血清中H2O2和GC的含量（P＜0．05）升高，TNF－α含量降低（P＜0．05）。结论慢性中枢炎症可引起机体外周免疫水平降低和氧化应激损伤。

海马改善斑马鱼慢性应激所致抑郁样行为和病理变化的机制

目的探究海洋中药海马对慢性不可预测温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)诱导的斑马鱼抑郁样模型的影响。方法将成年斑马鱼分为对照组、Stress组、Stress+低剂量(Stress+0.044%SH)、Stress+高剂量(Stress+0.22%SH)海马干预组,采用新环境水槽(novel tank test,NTT)鉴定抑郁样行为,Elisa检测皮质酮(cortisol)、白介素(interleukin,IL)-6和干扰素(interferon,IFN)-γ水平,高效液相色谱检测多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及代谢产物含量,荧光定量PCR检测色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)-2、5-HT2A受体的mRNA表达水平。结果与对照组相比,Stress组在NTT中达到顶部的潜伏期明显延长,转移至顶部区域次数和顶部停留时间明显减少,cortisol和IL-6、IFN-γ蛋白水平明显上升,脑内DA和5-HT含量明显减少以及5-HT代谢率增加,同时5-HT2A mRNA表达上调,TPH2的mRNA表达下调;而低剂量的海马干预有效降低CUMS斑马鱼焦虑程度、减少cortisol和IL-6、IFN-γ浓度、增加单胺类神经递质水平和逆转5-HT能系统失调。结论海马可能通过抗炎和调节单胺类神经递质水平发挥抗抑郁效果。

衰老时的脑内5-羟色胺与痛和镇痛

痛和镇痛是一个被广泛研究的领域,但衰老与痛和镇痛的领域却很少有人涉足。也许由于这个领域有关的研究工作存在许多相互矛盾的结论,以致无法正确或圆满地解释老年人痛和镇痛的变化。围绕衰老脑内痛和镇痛的工作主要有二个方面:一是物理的测痛方法,二是通过衰老脑内5-羟色胺(5-HT)和其他与镇痛有关的递质来研究脑内痛和镇痛机制的变化。