穿山龙体外给药对T淋巴细胞增殖的抑制作用

应用ＭＴＴ比色法观察了穿山龙水煎醇提剂体外给药对ＣｏｎＡ刺激小鼠脾细胞增殖的影响。结果表明，此药可抑制ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应，此种抑制作用只有在培养早期加入药物才能发生，并证明此种作用并非穿山龙的细胞毒作用引起。

医学免疫学实验教学情况的调查

通过对 33所高等医学院校医学免疫学实验教学的情况调查 ,结果是实验开设项目平均为 1 3.55项 ,其中学生独立操作项目为 7.97项 ,学生人均经费仅 2 2 .0 3元 ;所开项目以传统的实验项目为主 ,新项目不多 ,更缺少综合性和设计性项目。

肺炎衣原体与冠心病关系的研究进展

衣原体是一类具有独特生物学特点的微生物，包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。后者是本属中一个新种。最早是１９６５年在台湾一名儿童眼部分离到的ＴＷ—１３８（Ｔａｉｗａｎ－１３８）株和１９８３年自美国一名急性呼吸道感染者咽部分离到的ＡＲ—３９（Ａｃ...

自然流产病人血液标本检测人类微小病毒B19的结果分析

目的：分析自然流产与人工流产者血液标本人类微小病毒B19病毒（BV19V）感染情况，探讨V19V感染与人类自然流产之间的关系。方法：自然流产病人和人工流产者各68人组成研究对象，采集静脉血液为检测标本，应用聚合酶链反应（PCR）方法检测B19V。结果：血液中B19V的检出率，自然流产病人为20.6%(14/68)、人工流产者为2.9%(2/68)，两组检测结果的差别具有统计学差别（X^ztest,P<0.01）。结论：自然流产病人B19V感染情况显著性高于人工流产者，提示B19V感染可能是导致人类自然流产的重要原因之一。

人类微小病毒B_(19)在流产组织中的检测情况及临床意义初探

目的 :通过分析自然流产组和人工流产组流产组织检测人类微小病毒 B19(B19V)的结果 ,探讨 B19V感染与人类自然流产之间的关系。方法 :自然流产和人工流产的流产组织各 34份 ,应用聚合酶链反应(PCR)方法检测 B19V。结果 :自然流产组和人工流产组的 B19V检出率分别为 2 9.4 % (10 / 34 )和 0 ,两组PCR— B19V结果的差别具有极显著性 (卡方检验 ,P<0 .0 0 1)。结论 :自然流产病人流产组织 B19V的检出率显著性高于人工流产者 ,提示 B19V感染可能是导致人类自然流产的重要原因之一。

自然流产与感染人类微小病毒B19的相关性分析

目的：通过分析人类微小病毒B19(B19V)在自然流产组和正常分娩组的分布情况，探讨B19V感染与人类自然流产之间的关系。方法：自然流产组92人，采集血液及流产组织为检测标本；正常分娩组42人，采集产妇血液及新生儿脐带血为检测标本。用聚合酶链反应(PCR)方法检测B19V。结果：自然流产病人血液中B19V的检出率为20．6％(19／92)，其流产组织中B19V的检出率为27．2％(25／92)。正常产妇血液及其新生儿脐血B19V的检出率均为4．8％(2／42)。经卡方检验，B19V在流产组和对照组的分布情况的差别有显著性(P<0．05，P<0．01)。结论：B19V在流产组的分布情况显著高于对照组，提示B19V感染可能是导致孕妇流产的较重要的因素之一，在临床实践中应引起注意。

CD4^+ T细胞亚群在类风湿性关节炎中的研究进展

类风湿性关节炎(RA)是一种病因尚未明确的慢性、全身炎症性自身免疫性疾病,发病机制非常复杂,遗传、环境和免疫因素可能共同发挥作用。免疫功能失衡尤其是CD4+T细胞中的辅助T细胞亚群Th1、Th2、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)免疫功能失衡被认为是诱导RA发病的中心环节,进而导致关节滑膜细胞增生、血管翳的形成、炎性细胞浸润并伴有不同程度的软骨及骨质的侵蚀。因此,及时矫正Th1/Th2、Th17/Treg比例、功能及相关因子网络的免疫紊乱,可能是RA治疗新的有效靶点。虽然目前越来越多的研究证明Treg、Th1、Th2、Th17细胞参与RA各个发展进程,但报道的结果却不尽相同,现就目前发现的与RA相关的CD4+T细胞亚群的研究进行综述。

穿山龙总皂苷含药血清对IL-17和TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364NF-κB p65活性、STAT3及VEGF mRNA表达的影响

目的观察穿山龙总皂苷含药血清对IL-17和TNF-α联合诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364 NF-κB p65活性、STAT3表达及VEGF mRNA表达水平的影响,探讨穿山龙总皂苷抑制类风湿性关节炎血管新生的作用机制。方法制备穿山龙总皂苷和雷公藤(阳性对照)含药血清;取大鼠滑膜细胞株RSC-364经IL-17(10μg/L)和TNF-α(10μg/L)、穿山龙总皂苷含药血清、雷公藤多甙片含药血清单独或联合应用孵育,孵育24 h,提取各组细胞核蛋白用于TransAMTMNF-κB p65活性检测试剂盒检测NF-κB p65的DNA结合活性;提取各组细胞总蛋白后应用Western blot方法观察STAT3蛋白的表达;采用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞VEGF mRNA的表达情况。结果 IL-17+TNF-α诱导的细胞模型组中NF-κB p65的DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGFmRNA表达水平均显著高于空白对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.05);与细胞模型组相比,雷公藤含药血清组、穿山龙总皂苷含药血清组的NF-κB p65 DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGF mRNA表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05),且2组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论本研究证实穿山龙总皂苷含药血清可以抑制NF-κB p65的DNA结合活性及STAT3蛋白的表达,考虑穿山龙总皂苷通过上述信号转导途径来调控血管新生关键因子VEGF的产生,进而抑制RA血管新生。

穿山龙总皂苷对大鼠T淋巴细胞功能影响的血清药理学研究

目的用血清药理学方法研究穿山龙总皂苷对大鼠脾淋巴细胞增殖及其分泌IL-2的影响,探讨其可能的作用机理。方法用MTT法测定不同浓度穿山龙含药血清(分别在培养系中加入20%,10%,5%含药血清)对Con A诱导脾淋巴细胞增殖的影响;用双抗体夹心ELISA法测定不同浓度穿山龙总苷含药血清对Con A诱导脾淋巴细胞分泌IL-2影响。结果20%和10%穿山龙总皂苷含药血清可抑制Con A诱导的脾淋巴细胞增殖(P<0.01,P<0.05),20%和10%穿山龙总皂苷含药血清可抑制Con A诱导的脾淋巴细胞分泌IL-2(P<0.01,P<0.05)。结论穿山龙总皂苷含药血清可抑制Con A诱导的大鼠脾淋巴细胞增殖及IL-2的产生。

CIA小鼠血清中IL-27、IL-10、IL-17的动态分析

目的:观察鸡Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠血清中IL-27、IL-17、IL-10的动态变化。方法:54只DBA1/J小鼠随机分为对照组(每组6只)和模型组(每组12只),分别在CIA小鼠病程进展的早、中、晚期无菌摘眼球取血,常规分离血清,应用流式细胞术检测各组小鼠在疾病病程的早、中、晚期血清中细胞因子IL-27、IL-17、IL-10的动态变化情况。结果:模型组IL-27在疾病早期、中期显著下降(P<0.05;P<0.01),疾病晚期与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组IL-17在疾病的早期及晚期与对照组比较无明显区别(P>0.05),而在病程中期显著高于对照组(P<0.05)。IL-10在CIA小鼠的病程进展中,模型组与对照组相比差异无明显区别(P>0.05)。结论:细胞因子IL-27和IL-17、IL-10可能参与CIA发病,可能与胶原诱导型关节炎的炎症进展有一定关系。

黄芩茎叶提取物与生脉饮抗柯萨奇病毒B3的体外研究

目的:探讨黄芩茎叶提取物及生脉饮体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用。方法:应用细胞感染模型按照药物对Hela细胞及CVB3不同作用方式设直接抗病毒作用组、增强细胞抗病毒作用组、对感染细胞保护作用组及正交设计组。采用光镜观察并结合MTT测定的方法进行综合判断。结果:与病毒对照组比较黄芩茎叶提取物、生脉饮对细胞病变有抑制作用(P<0.05)。结论:黄芩茎叶提取物、生脉饮均有直接抗病毒作用以及对未感染或已感染Hela细胞的保护作用。生脉饮与黄芩茎叶提取物之间有交互作用。

穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜组织NF-κB p65活性及STAT3表达的影响

目的通过观察穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织核转录因子κB(NF-κB)及信号转导子和转录激活因子3(STAT3)表达的影响,探讨穿山龙总皂苷抑制类风湿性关节炎血管新生可能的信号转导通路作用机制。方法将造模成功的60只CIA大鼠随机分为CIA模型组、雷公藤组(阳性对照组)、穿山龙总皂苷组、薯蓣皂苷元组、穿山龙水溶性皂苷片组,另设正常对照组,每组12只。造模成功后分别给予相应的药物灌胃,连续治疗35 d。应用TransAMTMNF-κB p65活性检测试剂盒检测滑膜组织中NF-κB p65的DNA结合活性。应用免疫组织化学染色的方法观察滑膜组织中STAT3蛋白的表达。结果与正常对照组相比,CIA模型组大鼠滑膜细胞核蛋白提取物中NF-κB p65的DNA结合活性和滑膜组织中STAT3蛋白的表达显著增高,有统计学意义(P<0.01);与CIA模型组相比,穿山龙总皂苷组、雷公藤组、薯蓣皂苷元组、穿山龙水溶性皂苷片组的NF-κB p65的DNA结合活性和STAT3蛋白的表达均显著降低,有统计学意义(P<0.01);各治疗组之间两两比较均无统计学意义(P>0.05)。结论穿山龙总皂苷可能通过抑制NF-κB信号转导通路中NF-κB p65的活性和JAK-STAT信号转导通路中重要底物STAT3蛋白的表达,起到抑制类风湿性关节炎血管新生的作用。

Th1型细胞因子在胶原蛋白诱导性关节炎小鼠血清中的动态变化

目的研究鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的动态变化。方法 72只DBA1/J小鼠随机分为正常对照组(每组6只)和模型组(每组12只),分别在加强免疫后第7、14、21、35天,无菌摘眼球取血清,应用流式细胞术检测各组小鼠血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α在关节炎不同时期的动态变化情况。结果模型组IFN-γ在加强免疫后第7天和第14天显著升高(P<0.05),加强免疫后第21天、第35天开始下降,与正常组比较无区别(P>0.05);模型组IL-2和TNF-α在加强免疫后第7天上升明显,与正常组比较有统计学意义(P<0.05),加强免疫后第14、21、35天IL-2和TNF-α逐渐下降,与正常组比较无统计学意义(P>0.05)。结论 CD4+Th1型细胞因子参与CIA发病全过程,而且在不同的发病阶段其相关细胞因子的变化与关节炎的炎症进展有一定关系。

卡介苗含量对成功建立C57BL/6小鼠CIA模型的影响

目的:明确佐剂中卡介苗含量对成功建立C57BL/6小鼠胶原性关节炎(Collagen in-duced arthritis,CIA)模型的影响,为开展类风湿关节炎(RA)的有关动物实验研究提供参考。方法:四个模型组以鸡Ⅱ型胶原(TypeⅡcollagen,CⅡ)与含不同浓度高毒卡介苗的完全弗氏佐剂(Completed Freund’s adjuvant,CFA)免疫C57BL/6小鼠诱导CIA,以关节炎指数为评价造模成功率,并对免疫成功模型进行一般状态观察、关节炎指数评分、脾脏指数计算、组织病理学和关节影像学检查。另设正常对照组。结果:四模型组小鼠踝关节分别于加强免疫后d4、d3、d3、d2天开始出现红肿,d14肿胀厚度达到高峰,小鼠死亡率分别为0%、5%、6%、80%,小鼠的CIA发生率分别为15%、60%、55%、死亡率高无数据;关节炎指数、脾脏指数均显著高于正常对照组(P<0.01);病理学结果显示:造模成功小鼠患病关节表现出周围炎性细胞浸润、滑膜增生、软骨和骨骼破坏等较为典型的变化;足爪X线摄片显示:关节间隙变窄,关节面不光滑,周围软组织影增厚;关节强直、畸形;正常对照组小鼠则无上述表现。结论:含2.5 mg/ml高毒卡介苗的完全弗氏佐剂,与鸡Ⅱ型胶原充分乳化,可成功诱导C57BL/6小鼠关节炎模型,免疫模型在临床发病特点、组织病理学改变等方面,较充分模拟了人类RA的病变特征,可适用于开展RA防治药物或其机制的实验研究模型。

老年类风湿关节炎患者血清MMP-13、sICAM-1、IL-10的检测

目的探讨老年类风湿关节炎患者血清基质金属蛋白酶(MMP)-13、可溶性细胞黏附分子(s ICAM)-1和白细胞介素(IL)-10检测的临床意义。方法选择2013年9月至2014年9月来该院治疗的类风湿关节炎老年患者48例为观察组,同期选择48例健康人员作为对照组。观察两组人员血清MMP-13、s ICAM-1、IL-10的情况。结果观察组血清MMP-13、s ICAM-1、IL-10水平高于对照组(P<0.01或P<0.05)。类风湿关节炎患者活动期组也均高于对照组和缓解期组(P<0.01或P<0.05)。类风湿关节炎患者MMP-13、s ICAM-1、IL-10水平与血沉(ESR)、高敏C-反应蛋白(hsCRP)呈显著正相关(P<0.05),与病程相关性较小(P>0.05)。结论血清MMP-13、s ICAM-1、IL-10水平与类风湿关节炎的发病及病情进展有关,可作为类风湿关节病情判断的指标,具有较高的临床应用价值。

穿山龙水溶性总皂苷对类风湿患者成纤维样滑膜细胞核因子κB p65的抑制作用

【目的】观察穿山龙水溶性总皂苷对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞核因子κB(NF-κB)p65及其抑制因子IκB-α蛋白水平和mRNA含量的影响。【方法】培养类风湿患者成纤维样滑膜细胞,分为穿山龙水溶性总皂苷低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组,10、20、30 mg/L),模型组,同时设立空白对照组;经药物干预后,采用Western blot法测定NF-κB和IκB-α蛋白水平,采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测成纤维细胞中NF-κB和IκB-αmRNA的表达。【结果】经穿山龙干预后的关节炎患者成纤维样滑膜细胞的NF-κB活化受到显著抑制,蛋白及基因表达水平较模型组显著下降(P<0.05),IκB-α蛋白及基因表达显著提升(P<0.05)。【结论】穿山龙水溶性总皂苷可以抑制类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞的核转录因子的表达,这可能是穿山龙治疗类风湿关节炎的机理之一。

常见抗菌中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用

目的探讨金银花、黄连、黄芩等10种常见中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌作用。方法从临床标本中分离MRSA,采用水提法制备抗菌中草药无菌药液,通过打孔法测定中草药提取液对MRSA的抑菌圈大小,通过两倍稀释法测定中草药提取液对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果 10种常见中草药对耐MRSA均有不同程度的抑制作用,以黄连的抑菌效果最好,其次依次为金银花、大黄、黄芩、马齿苋、紫草、苦参、射干、黄柏、艾叶。结论抗菌中草药对MRSA临床株具有一定的抗菌作用,有望成为抗MRSA的候选药物。

薯蓣皂苷片含药血清对IL-17和TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364NF-κB p65、STAT3及VEGF影响的实验研究

目的观察薯蓣皂苷片含药血清对白细胞介素-17(interieukin-17,IL-17)联合肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导大鼠滑膜细胞株(rat synovial cell-364,RSC-364)核转录因子-κB(nuclear factor of kappaB,NF-κB)、信号转导子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨薯蓣皂苷片抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)血管新生可能的作用机制。方法实验设空白对照组、细胞模型组、薯蓣皂苷片含药血清组、雷公藤多苷片(阳性对照)含药血清组。制备薯蓣皂苷片和雷公藤多苷片含药血清;用IL-17和TNF-α联合刺激RSC-364建立RA细胞模型,薯蓣皂苷片与雷公藤多苷片含药血清分别进行干预,应用TransAMTMNF-κB p65活性检测试剂盒检测NF-κB p65的DNA结合活性,应用Western blot方法观察STAT3蛋白的表达及应用实时荧光定量PCR方法观察VEGF mRNA表达。结果与空白对照组比较,IL-17和TNF-α联合诱导的细胞模型组核蛋白提取物中NF-κB p65DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGF mRNA表达均显著增高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,薯蓣皂苷片含药血清组、雷公藤多苷片含药血清组NF-κB p65的DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGF mRNA表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。薯蓣皂苷片含药血清组与雷公藤多苷片含药血清组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论薯蓣皂苷片可能通过抑制NF-κB信号转导通路中NF-κB p65的活性和酪氨酸蛋白激酶家族Janus kinase(JAK)-信号转导子和转录激活因子信号转导通路中STAT3蛋白表达来抑制VEGF mRNA表达,从而起到抑制RA血管新生的作用。