短链脂肪酸通过抑制白细胞介素17A和NF-κB信号通路减轻γδT细胞介导的炎症反应

目的 探究短链脂肪酸减轻γδT细胞介导炎症反应的作用机制。方法 使用一定浓度的短链脂肪酸干预大鼠肠道来源的γδT细胞,CCK-8检测短链脂肪酸对γδT活性的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素17A(IL-17A)因子含量,实时荧光定量(RT-q PCR)检测IL-17A因子的表达水平,流式细胞仪分析IL-17+γδT细胞的比例,Western blot研究γδT细胞IL-17A和核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。结果 CCK-8结果提示乙酸钠的浓度≤0.5 mmol/L,丙酸钠、丁酸钠和混合短链脂肪酸的浓度≤0.25 mmol/L对γδT细胞的增殖无抑制作用(P> 0.05);ELISA和RT-q PCR结果显示,丙酸钠、丁酸钠及混合短链脂肪酸处理的γδT细胞IL-17A的含量较Control组均显著降低。流式细胞检测结果示IL-17+γδT细胞的比例在丙酸钠、丁酸钠、混合短链脂肪酸及TSA干预下均明显下降(P <0.001);Western blot检测发现丙酸钠、丁酸钠和混合短链脂肪酸可抑制IL-17A、IKK的表达及NF-κB磷酸化水平(P <0.05)。结论 短链脂肪酸能抑制γδT细胞IL-17A和NF-κB信号通路的激活,从而减轻机体的炎症反应。

铜死亡相关lncRNA预测骨肉瘤患者预后及免疫途径

目的:鉴定铜死亡相关的lncRNAs,并利用其构建模型预测骨肉瘤(OS)患者的生存状况。方法:从TARGET数据库下载OS患者的RNA-seq数据以及相关临床资料。从相关研究报告中获取铜死亡相关基因集。使用共表达分析以及单因素Cox回归,筛选出OS生存相关的铜死亡相关lncRNA。在LASSO-Cox回归构建OS预后模型,并通过受试者工作特征曲线(ROC)和Kaplan-Meier(K-M)生存分析评估模型效能。利用单样本基因集富集分析(ssGSEA),探讨铜死亡相关的lncRNAs模型评分与OS中信号通路的关系。通过基因本体(GO)和京都基因组百科全书(KEGG)进行不同风险组OS患者的功能与通路富集分析。通过ESTIMATE算法,推测OS患者肿瘤样本中免疫细胞浸润水平。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验验证4个铜死亡相关的lncRNAs在不同细胞系中的表达情况。结果:在85例OS患者中,与10个铜死亡相关RNA共表达的lncRNA共有374个。根据Cox回归分析结果,鉴定出62个与OS患者预后相关的铜死亡相关的lncRNAs。共识聚类分析发现OS患者具有2种铜死亡相关的lncRNAs表达模式,并且2种铜死亡相关的lncRNAs表达模式的患者预后有显著差异。采用LASSO-Cox回归分析构建铜死亡相关的lncRNAs预后模型。t-ROC曲线评估模型效能,结果显示,1年、3年和5年的AUC值分别为0.78、0.83和0.85,并且高、低风险组间的K-M生存分析结果具有显著差异(P<0.05)。GSEA功能富集分析显示,抗原受体介导的信号传导途径、B淋巴细胞活化以及阳性T淋巴细胞选择在高风险组中富集。GO与KEGG富集分析发现,不同风险组中肿瘤相关通路在呈现差异。在3种铜死亡相关的lncRNAs细胞系中验证了预后模型中的铜死亡相关的lncRNAs表达水平。结论:铜死亡相关lncRNA与OS患者预后密切相关;基于铜死亡相关的lncRNAs构建的预后模型能够准确预测OS患者的预后,进一步深入研究铜死亡相关的lncRNAs在OS中的作用可能有助于开发更可靠的个性化治疗方案。

番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响

目的:探索番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响。方法:采用双侧去卵巢(OVX)法建立绝经后骨质疏松模型,将60只12周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(sham组),OVX组,番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合干预低剂量(L)、中剂量(M)、高剂量(H)组,戊酸雌二醇组(E2组),每天1次灌胃给药,持续12周。Micro-CT扫描分析小鼠股骨骨密度(BMD)和骨微结构变化;苏木精—伊红(HE)染色观察各组股骨组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨中骨钙素(BGP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的表达;16S rDNA扩增子测序检测分析粪便中V3~V4区菌群基因。结果:HE结果显示,OVX组小鼠骨松质结构改变,骨小梁稀疏松散、粗细不匀,大量断裂,骨髓腔间距宽;M组、H组的骨结构改善,且H组接近于sham组;Micro-CT结果显示,与sham组相比,OVX组的BMD、小梁体积百分比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数(Tb.N)和连接密度(Conn.Dn)显著降低,骨表面积/组织体积(BS/TV)、骨小梁空隙(Tb.SP)、结构模型指数(SMI)显著增加;与OVX组相比,M组和H组BMD、BV/TV、BS/TV、Tb.N、Conn.Dn显著增加,H组Tb.Sp、SMI显著降低;ELISA结果显示,与OVX组相比,M组、H组的BGP显著升高,TRAP5b显著降低。16S r DNA扩增子测序结果显示,在门水平上,H组的疣微菌门相对丰度较OVX组明显增加,拟杆菌门相对丰度较OVX组降低;在属水平上,H组艾克曼菌属、毛螺菌科_NK4A136菌属、双歧杆菌属、回肠杆菌属和毛螺旋菌属的相对丰度较OVX组升高,杜氏杆菌属、乳酸杆菌属、螺杆菌属和另枝菌属的相对丰度较OVX组降低;线性判别分析效应(LEf Se)分析结果显示,H组中的放线菌门、放线菌门未确定菌纲、双歧杆菌目、双歧杆菌属、双歧杆菌科、Ileibacterium valens和回肠杆菌属丰度富集。结论:番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用可以明显改善OVX小鼠骨微结构,缓解骨丢失,其机制可能与调控肠道菌群结构和丰度相关。

成年斑马鱼脊髓损伤模型的制备和评估

目的:建立一种成年斑马鱼脊髓损伤(SCI)模型。方法:将成年斑马鱼随机分为正常组、假手术组和SCI组。SCI组进行脊髓完全横断手术,假手术组对斑马鱼的脊髓只暴露而不切断,正常组不做特殊处理。通过测试处理后斑马鱼的自由游泳能力和顺行轴突追踪来评估神经再生的情况。结果:假手术组与正常组斑马鱼5 min游泳路径的平均距离比较,差异无统计学意义(P>0.05),与第1周相比,SCI组斑马鱼第6周的5 min游泳路径的平均距离显著增加(P<0.05)。顺行神经示踪显示SCI组斑马鱼在损伤后2周出现可观察的轴突恢复。结论:成年斑马鱼具有显著的SCI恢复能力,本实验建立的成年斑马鱼SCI模型技术成熟、容易复制,可应用于SCI的相关研究。

牡荆素对脊髓损伤大鼠运动功能和炎症反应的影响

目的:探究牡荆素(VT)对脊髓损伤(SCI)大鼠和脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的影响。方法:体内实验:将SD大鼠分为假手术组(sham组)、模型SCI组(SCI组)和VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估大鼠的运动功能;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠炎症因子基因和蛋白表达;苏木精—伊红(HE)染色观察脊髓组织结构。体外实验:将BV2小胶质细胞分为正常对照组(control组)、LPS组、VT低、中、高、剂量组和VT高剂量单独给药组,LPS诱导BV2小胶质细胞活化构建体外神经炎症模型;细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选VT安全浓度范围;RT-qPCR和蛋白质免疫印迹法(western blotting)检测细胞炎症基因和蛋白表达水平。结果:体内实验:与SCI组比较,VT中、高剂量组的BBB评分明显升高,损伤第7天,VT中剂量组评分显著高于VT高剂量组(均P<0.05);VT中剂量组TNF-αmRNA表达较SCI组降低,VT中、高剂量组IL-10 mRNA表达较SCI组显著升高(均P<0.05);VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组的TNF-α蛋白水平显著降低(均P<0.05),VT各剂量组的IL-10蛋白水平显著升高(均P<0.05);HE结果显示,sham组脊髓组织结构完整,神经元数量较多、排列较为规则整齐;SCI组脊髓组织炎症细胞浸润,出现较多空洞,神经元减少萎缩且排列不整齐;与SCI组比较,VT治疗组损伤更小,炎症浸润减轻较为明显。体外实验:与LPS组相比,VT各剂量组的TNF-αm RNA表达显著降低(均P<0.05),且成剂量依赖性降低;VT各剂量组TNF-α蛋白表达量降低(均P<0.001)。结论:VT通过抑制大鼠炎症反应,减轻脊髓组织病理学损伤,改善损伤后脊髓局部微环境,从而保护受损脊髓神经元,达到促进运动功能恢复的作用。

膳食纤维摄入情况对骨质疏松症患者肠道菌群的影响

目的探讨骨质疏松症患者膳食纤维摄入量对肠道菌群组成和结构变化的影响。方法选取2022年9月至12月于广西医科大学第一附属医院72例初诊骨质疏松症的患者。通过半定量食物频率调查问卷和中国营养食物成分表第六版获取膳食纤维摄入量信息。根据膳食纤维中位摄入量分为:高膳食纤维组(≥11.92 g/d,n=36)及低膳食纤维组(<11.92 g/d,n=36)。使用Illumina MiSeq测序平台进行16S rRNA基因高通量测序,运用R语言和Qiime程序对测序结果进行物种注释和菌群结构差异分析。结果两组样本Beta多样性差异有统计学意义(P=0.007)。LefSe分析结果显示,变形菌门、γ-变形菌纲、肠杆菌目、肠杆菌科是低膳食纤维组相对丰度显著增加的菌群,Agathobacter和缠结真杆菌是高膳食纤维组相对丰度显著增加的菌群。广义线性回归模型结果显示,与膳食纤维摄入水平正相关的肠道菌群包括厚壁菌门、疣微菌门、梭杆菌门、疣微菌纲、疣微菌目、梭杆菌目、阿克曼氏菌科、乳酸乳球菌、Agathobacter、阿克曼氏菌属、脆弱类杆菌和梭杆菌属;与膳食纤维摄入水平负相关的属或种水平的肠道菌群包括变形菌门、γ-变形菌纲、乳杆菌目、鞘氨醇杆菌目、气球菌科和大肠埃希氏菌。肠道菌群与血清骨代谢标志物的相关性分析显示β-CTx与疣微菌门、疣微菌纲、疣微菌目、阿克曼氏菌科和阿克曼氏菌属呈显著负相关(P<0.05),与大肠杆菌呈显著正相关(P<0.05)。PINP与埃氏拟杆菌呈显著正相关(P=0.030)。结论较高的膳食纤维摄入量可能通过改变肠道菌群的结构组成从而对骨质疏松症的疾病进程产生积极影响,适量补充膳食纤维可能是未来营养干预防治骨质疏松的潜在途经之一。

帕罗西汀干预破骨细胞分化的作用机制

背景:破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节,探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物,是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段。目的:基于MAPK/核因子κB信号通路,分析帕罗西汀影响破骨细胞分化的作用机制。方法:①体外实验:采用CCK-8实验检测不同浓度帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞增殖的影响。在巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体的诱导下,使用不同浓度帕罗西汀干预破骨细胞分化,抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目;RT-qPCR检测帕罗西汀对破骨细胞分化相关细胞因子mRNA表达的影响;Western Blot检测帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞中核因子κB、MAPK信号通路及破骨细胞相关蛋白表达的影响。②体内实验:将40只C57BL/6小鼠按随机数字表分为空白对照组、脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组,每组10只。脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组每2 d颅骨矢状缝皮下注射脂多糖(构建小鼠颅骨骨溶解模型),帕罗西汀两组每次皮下注射脂多糖1 d后注射对应剂量的帕罗西汀,14 d后,分离颅骨进行Micro-CT扫描分析。结果与结论:①体外实验:当帕罗西汀浓度≤5μmol/L时对小鼠骨髓源性巨噬细胞的增殖无影响,浓度大于10μmol/L时抑制细胞的增殖;当帕罗西汀浓度≥0.5μmol/L时,可明显抑制破骨细胞分化的数量及形态,抑制破骨细胞分化c-Fos、Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Acp5、Atp6v0d2的mRNA表达水平;0.5μmol/L的帕罗西汀可通过抑制核因子κB、MAPK信号通路的激活,进而抑制破骨细胞相关蛋白c-Fos、Nfatc1、Ctsk的表达;②体内实验:Micro-CT扫描分析结果显示,与脂多糖组比较,帕罗西汀5 mg/kg组可以有效提高骨小梁数量、骨体积分数(P<0.05),降低骨表面积骨体积比、骨小梁分离度(P<0.05);③结果表明,帕罗西汀可以通过抑制破骨细胞分化减少骨的重吸收,具有潜在的治疗骨质疏松症作用。

山楂叶总黄酮抑制小胶质细胞活化对脊髓损伤的影响

目的:探究山楂叶总黄酮(TFHL)对脂多糖(LPS)活化后的BV2小胶质细胞和脊髓损伤(SCI)大鼠的作用。方法:LPS诱导BV2小胶质细胞活化建立神经炎症模型;实验分为正常对照组、LPS组及TFHL低、中、高剂量组。根据Allen’s法建立SCI模型;将大鼠随机分为假手术组、模型组和TFHL组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹检测TNF-α、IL-6的蛋白表达;Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估SCI大鼠的运动功能;苏木精—伊红(HE)染色观察脊髓组织结构完整性。结果:在细胞实验中,与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA相对表达水平均增高(P<0.0001);TFHL低剂量组的TNF-α、IL-6,TFHL中剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6以及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、COX-2的mRNA表达水平均较LPS组降低(P<0.05)。与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6的蛋白表达量增高(P<0.0001),而TFHL中剂量组的IL-6及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-6蛋白表达量均较LPS组降低(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组和TFHL各剂量组ROS水平均升高(P<0.0001),而TFHL各剂量组的ROS水平均较LPS组下降(P<0.0001)。在动物实验中,与假手术组相比,模型组和TFHL组BBB评分均降低(P<0.0001),TFHL组第5天和第7天BBB评分均较模型组增高(P<0.05)。与模型组相比,TFHL组脊髓病理结构较完整,空洞面积较少。结论:TFHL可通过抑制小胶质细胞的激活,改善炎症微环境,从而发挥保护受损脊髓神经运动功能的作用。

山楂叶总黄酮调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的分子机制

背景:星形胶质细胞对脊髓损伤后神经元的修复具有重要作用,有研究证明山楂叶总黄酮可促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复,山楂叶总黄酮是否影响星形胶质细胞促进神经元修复仍不清楚。目的:探索山楂叶总黄酮调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的分子机制。方法:构建脊髓星形胶质细胞与脊髓神经元transwell共培养模型,对照组为正常脊髓星形胶质细胞和正常脊髓神经元;损伤组为正常脊髓星形胶质细胞和损伤脊髓神经元;药物组为125μg/mL山楂叶总黄酮干预的正常脊髓星形胶质细胞和损伤脊髓神经元。荧光探针DCFH-DA检测脊髓神经元内活性氧的生成;实时荧光定量PCR检测脑源性神经营养因子、神经生长因子、转录因子4的表达;Western blot检测脑源性神经营养因子、神经生长因子、Wnt/β-catenin通路关键蛋白GSK-3β、phsopho-GSK-3β(ser9)、β-catenin及转录因子4的表达;免疫荧光观察Wnt/β-catenin通路关键蛋白β-catenin的表达。结果与结论:(1)损伤组活性氧生成远高于对照组(P<0.001);药物组活性氧生成低于损伤组(P<0.01),高于对照组(P<0.001);(2)药物组脑源性神经营养因子、神经生长因子基因及蛋白表达高于对照组与损伤组(P<0.01);(3)与对照组、损伤组相比,药物组phsopho-GSK-3β(ser9)蛋白表达增加(P<0.001),β-catenin蛋白表达增加(P<0.001),转录因子4基因及蛋白表达增加(P<0.01);(4)结果表明,山楂叶总黄酮可以减轻脊髓神经元的氧化损伤,激活星形胶质细胞Wnt/β-catenin通路,结合转录因子4启动转录,促进其分泌神经营养因子,实现对脊髓神经元的修复。

大鼠脊髓损伤模型Th17细胞分化中信号转导与转录激活因子3的作用

目的观察大鼠脊髓损伤模型中磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)及Th17相关因子的水平,初步探讨STAT3对脊髓损伤后Th17细胞的作用。方法成年健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组(n=15)和模型组(每个时点n=15)。模型组采用改良Allen氏打击法建立脊髓损伤模型,对照组仅行椎板全切除术。在建模后1、24、48和72 h获取模型组大鼠损伤段脊髓、脾脏及外周血,免疫组织化学染色法检测白细胞介素(IL)-17在损伤段脊髓组织中的分布及表达情况,蛋白免疫印迹法检测p-STAT3在损伤段脊髓和脾脏组织中的表达变化,ELISA法检测外周血IL-6、IL-21和IL-23的动态变化,并与对照组大鼠作比较。结果模型组各时点IL-17、p-STAT3、IL-6、IL-21和IL-23的表达明显高于对照组(P<0.05),相关性分析显示p-STAT3的表达均与IL-17、IL-6及IL-21的表达呈正相关性(P<0.05)。结论 STAT3的异常激活可能是造成脊髓损伤后Th17细胞过度表达的重要原因。

急性不完全脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子的表达

背景:研究提示脊髓损伤早期神经元和神经胶质细胞分泌产生的细胞因子可能是造成损伤后继发免疫损伤的重要因素。目的:分析白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素17等炎症因子在急性脊髓损伤后炎症反应过程中的作用。方法:雄性成年SD大鼠75只,随机分为对照组和脊髓损伤1,6,24和72 h组。采用改良Allen氏法建立脊髓不完全损伤模型,对照组仅行椎板全切除。在建模之后相应的时间点获取损伤段脊髓、脾脏组织,免疫组织化学染色法检测白细胞介素6和白细胞介素17在损伤段脊髓组织中的分布及表达情况,蛋白免疫印迹法检测p-STAT3在损伤段脊髓组织中的表达变化,采用RT-PCR法检测白细胞介素1βmRNA、白细胞介素6mRNA和白细胞介素17A mRNA在脾脏组织中的表达情况。结果与结论:脊髓损伤后p-STAT3、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素17的表达明显高于对照组(P<0.05)。损伤后炎症因子表达量立即升高,白细胞介素1β和白细胞介素6在损伤后6 h到达高峰,随后开始下降;p-STAT3和白细胞介素17在损伤后24 h到达高峰,随后开始下降,至损伤后72 h表达量仍高于对照组。结果表明损伤早期p-STAT3介导的促炎因子白细胞介素1β和白细胞介素6表达增加,提示可能导致损伤区域炎症级联放大,诱导继发性脊髓损伤;促炎因子白细胞介素17的异常升高,提示可能在继发性损伤炎症反应中起着重要作用。

α-玉米赤霉醇干预骨质疏松性骨折模型大鼠白细胞介素1、6的表达

背景:α-玉米赤霉醇是一种新的植物雌激素,可能具有动物雌激素的某些生理功能。目的:观察植物雌激素α-玉米赤霉醇对骨质疏松性骨折大鼠白细胞介素1和白细胞介素6表达的影响。方法:切除40只6月龄雌性SD大鼠双侧卵巢建立去卵巢骨质疏松模型,造模成功后锯断右侧胫骨建立骨折模型,骨折1周,分别灌胃0.066mg/kg雌二醇、10,5,1mg/kgα-玉米赤霉醇及二甲基亚砜;另取10只大鼠,不切除卵巢,制备骨折模型后灌胃二甲基亚砜。给药35d,ELISA法测定大鼠血清白细胞介素1和白细胞介素6的表达。结果与结论:去卵巢后,骨折大鼠血清白细胞介素1和白细胞介素6的表达明显升高,5,1mg/kgα-玉米赤霉醇及0.066mg/kg雌二醇均可明显降低骨质疏松性骨折大鼠血清白细胞介素1和白细胞介素6的表达,但10mg/kgα-玉米赤霉醇作用效果不显著。说明α-玉米赤霉醇可以剂量依赖性地降低骨质疏松性骨折大鼠血清白细胞介素1和白细胞介素6的表达。

α-玉米赤霉醇对骨质疏松性骨折大鼠骨代谢因子的影响

目的研究α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对骨质疏松性骨折大鼠骨代谢因子的影响。方法建立绝经后骨质疏松性骨折大鼠模型,给予雌激素及不同浓度的α-ZAL灌胃,并于灌胃给药治疗5周后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的表达。结果模型组大鼠的BGP、TRAP的阳性表达明显升高(P<0.05);中、低剂量的α-ZAL可使大鼠的BGP、TRAP的阳性表达明显下降(P<0.05),而高剂量α-ZAL的干预效果不显著(P>0.05)。结论α-ZAL对PMOP大鼠具有降低BGP、TRAP的阳性表达,促进骨折愈合的作用。

白介素-1受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤后BDNF表达的影响

目的:观察白介素-1受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤模型脊髓损伤后细胞因子BDNF表达的影响和脊髓组织病理变化。方法:SD大鼠90只,随机分为假手术组30只,生理盐水组30只和IL-1Ra治疗组30只。采用改良Allen氏打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型。在建模后1、48、72h获取损伤段脊髓标本,HE染色观察其组织病理变化。免疫组织化学染色检测BDNF。结果:脊髓组织病理变化方面,IL-1Ra治疗组明显优于生理盐水组。术后1、48、72h,IL-1Ra治疗组BDNF表达较生理盐水组和假手术组高,差异有显著性。结论:IL-1Ra对大鼠急性脊髓损伤模型损伤段脊髓有保护作用,可能与增强BDNF表达有关。

小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇对PⅠNP和BMP-2表达的影响

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α-ZAL诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基,阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇,高、中、低浓度α-ZAL诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度(10-5、10-6、10-7mol/L)的α-ZAL。采用ELISΑ法测定PⅠNP和BMP-2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较,各组PⅠNP表达量均明显升高(P<0.01),阳性诱导组及低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。与阳性诱导组比较,低浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显升高(P<0.01),而中、高浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显下降(P<0.01),低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。结论α-ZAL呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,低浓度(10-7mol/L)α-ZAL可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中PⅠNP和BMP-2的表达,随着剂量的升高,促进作用下降。

白介素-1受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤后神经元功能修复的影响

目的观察白介素-1(IL-1)受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤后神经元功能修复的影响。方法 SD大鼠110只,随机分为假手术组30只,生理盐水组40只和IL-1Ra治疗组40只。采用改良Allen氏打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型。在建模后1、48、72 h获取损伤段脊髓标本,免疫组织化学染色检测神经丝蛋白(NF)表达,运用改良Rivlin斜板实验和BBB评分对大鼠脊髓功能进行行为学评分。结果 IL-1Ra治疗组NF的表达及行为学评分方面明显优于生理盐水组,差异有显著性。结论 IL-1Ra对大鼠急性脊髓损伤模型损伤段脊髓有保护作用,可能与IL-1受体拮抗剂增加NF表达、抑制局部炎症效应有关。

单侧半椎板“开窗”显微手术切除颈椎椎管内肿瘤

目的探讨单侧半椎板'开窗'显微切除颈椎管内肿瘤的手术方式的优缺点. 方法 23例运用单侧半椎板'开窗'法,在不破坏椎板完整性的基础上,用磨钻或小的椎板咬骨钳咬开单侧椎板形成'小窗',经小窗显微切除颈椎管内肿瘤. 结果 23例肿瘤均获全切,没有出现新的神经功能损害的症状,术后随访3～16个月,平均8个月,未见肿瘤复发和脊柱畸形. 结论单侧半椎板'开窗'切除颈椎管内肿瘤创伤小,有利于维持脊柱的稳定性,但也有暴露局限的缺点.

腰椎管狭窄症伴腰椎退变性失稳患者的手术方式研究

目的:回顾性分析腰椎管狭窄症伴腰椎退变性失稳患者的手术方法及其疗效。方法:对我院2005年1月至2009年3月96例行手术治疗的腰椎管狭窄症伴腰椎退变性失稳的临床资料进行总结,根据是否辅以内固定分为内固定组及开窗组,评价两组之间的疗效。结果:内固定组优良率71.9%(46/64),开窗组优良率50.0%(16/32),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);内固定组的平均手术时间和平均失血量超过开窗组,差异有统计学意义(P<0.05);在术后并发症方面,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对于腰椎管狭窄症伴腰椎退变性失稳的患者采用全椎板切除、椎弓根螺钉内固定加椎体间融合的手术方式是较好的选择。

椎管内髓外硬膜下良性肿瘤不同手术方式临床效果比较的多中心研究

目的探讨手术治疗椎管内髓外硬膜下良性肿瘤的手术疗效和治疗策略。方法对151例椎管内髓外硬膜下良性肿瘤患者进行前瞻性多中心临床对照研究,手术方式分为:全椎板切除+肿瘤显微摘除术、半椎板切除+肿瘤摘除术、全椎板切除+肿瘤摘除+椎弓根螺钉内固定术、全椎板切除+肿瘤摘除术。以肿瘤所在部位:颈段、胸段、腰骶段分别对患者肿瘤全切除率、手术时间、术中出血量、手术并发症、住院时间、住院总费用、视觉模拟评分(VAS),日本矫形外科协会(JOA)评分进行评价。结果椎管内髓外硬膜下良性肿瘤的手术方式在颈段采取半椎板切除+肿瘤摘除术,在胸段采取全椎板切除+肿瘤显微摘除术,在腰骶段采用全椎板切除+肿瘤摘除+椎弓根螺钉内固定术较合适。结论进行椎管内髓外硬膜下良性肿瘤手术方式的选择时,应根据肿瘤所在部位的不同,采取不同的手术方式进行有效治疗。

椎管内肿瘤手术方式的研究进展

椎管内肿瘤是脊柱外科和神经外科的常见病,包含有神经纤维瘤、神经鞘瘤、脊膜瘤、胶质瘤、血管瘤、室管膜瘤等,其中纤维瘤和鞘瘤占40%-55%,脊膜瘤约占25%-30%,胶质瘤、血管瘤、室管膜瘤等约占10%,可见于颈、胸、腰、骶。椎管内肿瘤多为良性，目前唯一有效的治疗手段是手术切除，尽早手术，术中尽可能减少脊髓进一步损伤是取得良好效果的关键，手术目标是完全切除肿瘤，