SLC29A1在泛癌中的表达及其临床意义

目的 分析溶质载体家族1号基因(solute carrier family 29 member 1, SLC29A1, ENT1)在泛癌中的表达及其临床意义。方法 利用数据库分析SLC29A1在泛癌中的表达水平及其与肿瘤患者生存期、免疫浸润、免疫检查点、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性、趋化因子及趋化因子受体的关系,并分析SLC29A1在泛癌中的突变特征及SLC29A1与泛癌生物学行为的关系。结果 SLC29A1在急性成淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、胶质母细胞瘤(glioblastoma,GMBLGG)、脑低级别胶质瘤(lower-grade glioma, LGG)等13种肿瘤中呈显著高表达;而在子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma, UCEC)、宫颈鳞癌和腺癌(cervical squamous cell carcinoma and endocervical adenocarcinoma, CESC)、肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma, LUSC)等18种肿瘤中呈显著低表达。且SLC29A1表达水平与肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma, ACC)患者预后呈正相关,而与LGG患者预后呈负相关。SLC29A1在前列腺癌(prostate adenocarcinoma, PRAD)中的表达水平越高,免疫细胞浸润程度越高,基质评分、免疫评分和基质免疫评分越高。SLC29A1在PRAD中与大多数免疫检查点相关基因呈正相关,而在胸腺癌(thymoma, THYM)中与ENTPD1、TLR4等免疫激活因子呈负相关。SLC29A1在间皮瘤(mesothelioma,MESO)中与趋化因子CX3CL1呈显著正相关,而在多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)中与趋化因子受体CXCR2呈显著正相关。SLC29A1在GBMLGG、LGG中与肿瘤突变负荷显著正相关,而在胃腺癌(stomach adenocarcinoma, STAD)中与肿瘤突变负荷和微卫星不稳定性显著负相关。SLC29A1在食管腺癌患者突变频率最高,且在大多数肿瘤中SLC29A1均与DNA损伤呈正相关。结论 SLC29A1与多种肿瘤的预后、免疫浸润、免疫检查点、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性及肿瘤生物学行为等密切相关,提示其可能成为富有前景的肿瘤治疗靶点。

白藜芦醇通过EGFR/AKT/mTOR通路改善结直肠癌细胞伊立替康化疗耐药性

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)联合伊立替康(irinotecan,IRI)治疗结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的可能性及RES改善CRC细胞IRI化疗耐药性的相关分子机制。方法以CRC细胞HT-29和RKO为研究对象,通过MTT和克隆形成实验检测分析RES、IRI及两者联合对CRC细胞增殖能力的影响;划痕实验检测分析RES、IRI及两者联合对CRC细胞迁移能力的影响。在此基础上探究分析RES在CRC细胞IRI化疗耐药性调控中的作用及相关分子机制。结果RES与IRI联合处理组CRC细胞的增殖和迁移能力均明显低于IRI单药处理组细胞,即RES可明显增强IRI对CRC细胞增殖和迁移的抑制作用,表明RES能够改善CRC细胞的IRI化疗耐药性。相比于IRI单药处理组,RES与IRI联合处理组CRC细胞中EGFR/AKT/mTOR信号通路标志蛋白的表达水平均明显下调。而EGFR激活剂(NSC 228155)与AKT激活剂(SC79)均可逆转RES对CRC细胞IRI化疗耐药性的改善作用,反之,AKT抑制剂(MK2206)能够部分逆转NSC 228155的这种作用。结论RES可通过下调EGFR/AKT/mTOR信号通路来抑制CRC细胞增殖和迁移,进而改善CRC细胞IRI化疗耐药性,提示RES联合IRI可作为CRC临床治疗的一种可能方案。

HECW2通过被CREB1转录激活而增强KIRC细胞活力并促进细胞侵袭和迁移

目的:探究E3泛素连接酶HECW2(HECT,C2 and WW domain containing E3 ubiquitin protein ligase 2)在肾透明细胞癌(kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)细胞活力、凋亡、侵袭和迁移中的作用及其分子调控机制。方法:借助GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库分析HECW2在泛癌中的表达水平,同时利用SangerBox数据库分析HECW2表达水平与泛癌免疫浸润和预后的关系。在此基础上,进一步通过体外实验探究HECW2在KIRC中的调控作用及相关分子机制。首先,通过RT-qPCR和Western blot分析HECW2在KIRC细胞系中的表达水平;其次,通过CCK-8实验分析敲减HECW2对KIRC细胞活力的影响;再者,通过流式细胞术分析敲减HECW2对KIRC细胞凋亡的影响;最后,通过划痕实验和Transwell实验分析敲减HECW2对KIRC细胞迁移和侵袭的影响。此外,通过Western blot和ChIP-qPCR探究HECW2是否在转录因子cAMP反应元件结合蛋白1(cAMP response element-binding protein 1,CREB1)的转录激活作用下影响KIRC细胞。结果:泛癌分析结果显示,HECW2在KIRC和胰腺癌中显著高表达,而在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中显著低表达,且HECW2表达水平与这4种肿瘤的免疫浸润水平呈显著正相关;但HECW2高表达组和低表达组相比,仅KIRC患者生存期长短有显著差异,即HECW2表达水平越高,KIRC患者总生存期、疾病特异性生存期和无进展间期越长,预后越好。体外实验结果表明,HECW2在KIRC组织和细胞系中均呈显著高表达;敲减HECW2可显著抑制KIRC细胞活力、侵袭和迁移,并促进其凋亡。敲减CREB1可显著降低KIRC细胞中HECW2的mRNA和蛋白表达水平,而过表达CREB1则观察到相反的结果。ChIP-qPCR实验结果表明CREB1能够与HECW2的启动子区域结合,提示HECW2能够被CREB1转录激活。结论:HECW2可在CREB1的转录激活作用下增强KIRC细胞活力并促进细胞侵袭和迁移。