胸腺基质淋巴生成素对增塑剂DEHP诱导性哮喘的介导作用(综述)

胸腺基质淋巴生成素(Thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一种新型的细胞因子,也是过敏反应起始的重要因子,能通过诱导树突细胞表达协同刺激分子CD40、CD80,促进树突细胞招募Th2细胞的趋化因子,进而诱导Th2炎症细胞的大量生成,在哮喘发生过程中发挥重要的作用.增塑剂邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ehtylhexyl)phthalate,DEHP)在过敏性哮喘的发生过程中具有"佐剂作用",并与气道炎症的关系密不可分.研究表明,在成功构建的小鼠过敏性哮喘模型中,TSLP在DEHP致哮喘作用过程中也发挥着重要的介导作用.

纳米Fe_3O_4对小鼠肺细胞的氧化损伤

纳米Fe3O4作为一种功能材料,在生物医药、生物靶向材料、微波吸收材料和高梯度磁分离器等方面应用前景广阔,其潜在的生物毒性也备受关注。为研究纳米Fe3O4对生物体可能造成的氧化损伤,以昆明小鼠为受试体,设置5、10、20和40mg·kg-14个染毒组,腹腔注射染毒7d后,测定小鼠肺组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果显示,随着纳米Fe3O4染毒剂量的升高,肺组织ROS和MDA含量逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标均呈一定的剂量-效应关系。剂量≥10mg·kg-1,肺组织ROS含量与对照组相比有显著差异(p<0.05);剂量≥20mg·kg-1,肺组织MDA含量与对照组相比有显著差异(p<0.05);剂量≥40mg·kg-1,肺组织GSH含量与对照组相比有显著差异(p<0.05)。研究表明,较高剂量(≥20mg·kg-1)的纳米Fe3O4颗粒材料会引起小鼠肺细胞的氧化损伤。

甲醛经口染毒致小鼠脏器损伤和炎症反应的研究

为探讨在单独染毒和卵清蛋白(OVA)联合致敏的条件下,甲醛灌胃染毒对小鼠造成的毒性效应,将雄性Balb/c小鼠随机分为7组:对照组(蒸馏水组);OVA致敏组;2mg/(kg?d)FA(甲醛)组;20mg/(kg?d)FA组;200mg/(kg?d)FA组;200mg/(kg?d)FA+OVA组;200mg/(kg?d)FA+OVA+MT(褪黑素)组,以蒸馏水和不同浓度甲醛溶液灌胃,连续21d.OVA致敏组,200mg/(kg?d)FA+OVA组,200mg/(kg?d)FA+OVA+MT组在第6,13,20d进行腹腔注射OVA致敏;此外,200mg/(kg?d)FA+OVA+MT组,每天用1.0mg/m L褪黑素灌胃小鼠(小鼠灌胃剂量10mg/(kg?d)),连续21d.检测肝,肾和肺组织中活性氧自由基(ROS),丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,并采用ELISA法检测肝组织中IL-4和IFN-γ的水平.结果表明,与对照组相比,甲醛浓度为200mg/(kg?d),小鼠肝脏ROS含量增加(P<0.05),MDA含量增加以及小鼠肾脏GSH含量降低,均有显著性差异(P<0.05).OVA作为致敏剂,甲醛浓度为200mg/(kg?d)时,肝组织中IL-4(Interleukin-4)含量增加(P<0.01),10mg/(kg?d)褪黑素能够降低200mg/(kg?d)甲醛+OVA染毒小鼠肝脏内ROS含量(P<0.05).综上,200mg/(kg?d)甲醛灌胃染毒能使小鼠产生氧化损伤和炎症反应,ROS,MDA水平上升(P<0.05),GSH水平下降(P<0.05),肝脏中细胞因子IL-4水平上升(P<0.01),IFN-γ水平下降(P<0.05).

邻苯二甲酸二丁酯(DBP)与卵清白蛋白(OVA)联合染毒对小鼠肺脏和脾脏组织的氧化应激

为研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate,DBP)单独染毒及与卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)联合染毒对小鼠肺脏和脾脏组织氧化应激的作用,将BALB/c小鼠随机分为8组:(1)未处理对照组(生理盐水组);(2)0.5mg·kg-1DBP染毒组;(3)5.0mg·kg-1DBP染毒组;(4)50mg·kg-1DBP染毒组;(5)1.67mg·kg-1OVA单独染毒组;(6)0.5mg·kg-1DBP与1.67mg·kg-1OVA联合染毒组;(7)5.0mg·kg-1DBP与1.67mg·kg-1OVA联合染毒组;(8)50mg·kg-1DBP与1.67mg·kg-1OVA联合染毒组。未处理对照组和DBP染毒组每天按体质量给予生理盐水和DBP灌胃。2周后,测定肺脏组织活性氧物种(ROS)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量以及脾脏组织ROS、GSH含量。结果显示,联合染毒组相较于其他组的肺脏组织各指标均有不同的显著性差异(P<0.05),联合染毒组的脾脏组织中ROS含量较其他组有显著差异(P<0.05),而GSH含量无统计学意义(P>0.05)。结果说明,DBP与OVA联合染毒能够增强肺脏组织的氧化应激作用,对于脾脏组织的氧化应激作用不明显;DBP在联合染毒中显示一定免疫佐剂效应。

烟嘧磺隆人工抗原的合成与鼠源多克隆抗体的制备

为了制备烟嘧磺隆的多克隆抗体、建立烟嘧磺隆残留的免疫分析方法,以2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺（ASDM）和琥珀酸酐为原料合成半抗原,采用活泼酯法制备人工抗原并免疫小鼠。结果表明：经紫外可见吸收光谱扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定,人工抗原合成成功,半抗原与卵清蛋白（OVA）、牛血清白蛋白（BSA）的偶联比分别为10.5∶1和26.9∶1。5次免疫后小鼠抗血清的效价均达到1∶16 000以上,以ASDM-BSA为免疫原的小鼠产生了抑制烟嘧磺隆的多克隆抗体,建立的间接竞争ELISA方法对烟嘧磺隆的检测范围是1ng·mL-1-10μg·mL-1。为进一步建立更为高效、灵敏和方便的烟嘧磺隆ELISA检测方法提供了参考。

DEHP与OVA联合染毒对小鼠肺功能和肺部IL-17表达的作用

为探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(di-(2-ehtylhexyl)phthalate,DEHP)在单独染毒和与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)联合染毒条件下对小鼠气道的影响及其相关机制,将Balb/c小鼠随机分为:未处理对照组(生理盐水组)、DEHP染毒组、OVA染毒组、DEHP+OVA联合染毒组(DEHP+OVA),每组雄性Balb/c小鼠6只.用OVA致敏加激发的方式制作小鼠哮喘模型.DEHP染毒组每天给予10mg·kg-1DEHP灌胃,连续54d.OVA染毒组、DEHP+OVA染毒组小鼠均在第54～60d(共计1周)进行1%OVA雾化(30min·d-1),每日1次,诱发哮喘.第60d进行以下操作:肺功能测试,肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)样品收集和肺组织中的Interleukin-17A(IL-17A)含量的测定.结果显示,与DEHP染毒组相比,DEHP与OVA联合染毒组小鼠BALF的IL-17A显著增加(p<0.05),肺功能降低(p<0.05),气道重塑,肺部细胞浸润明显.提示DEHP对小鼠哮喘模型佐剂作用的分子机制可能涉及IL-17的介导作用.

高效氯氰菊酯对小鼠肝细胞的氧化损伤

为了探讨高效氯氰菊酯对生物体的氧化损伤,以昆明小鼠为受试体,高效氯氰菊酯按10、和40mg·kg20-13个剂量水平,灌胃染毒小鼠7d,并以肝匀浆测定活性氧自由基(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,以肝细胞测定DNA-蛋白质交联(DPC)系数.实验结果表明,随着高效氯氰菊酯染毒剂量的升高,ROS和MDA含量及DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系.染毒剂量≥20mg·kg-1时,处理组的ROS含量和DPC系数与对照组有显著差异(p<0.05);染毒剂量≥40mg·kg-1时,GSH和MDA含量与对照组有显著差异(p<0.05),DPC系数有极显著差异(p<0.01).说明较高剂量的高效氯氰菊酯可造成小鼠肝脏的氧化损伤和DNA-蛋白质交联作用增强.

农药毒死蜱对小鼠脑细胞氧化损伤的研究

毒死蜱是一种高效、低毒、广谱的有机磷杀虫杀螨剂.为研究其对生物体的氧化损伤,以昆明小鼠为受试体,毒死蜱按3、6和12 mg.kg-13个剂量水平灌胃染毒小鼠7 d,以脑组织匀浆测定活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量,以脑细胞测定DNA-蛋白质交联(DNA-protein Crosslink,DPC)系数.实验结果表明,随着毒死蜱染毒剂量的升高,ROS和MDA含量及DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系.染毒剂量为6 mg.kg-1时,与对照组相比,DPC有显著差异(p<0.05),MDA有极显著差异(p<0.01);染毒剂量为12 mg.kg-1时,与对照组相比,ROS和DPC有显著差异(p<0.05),GSH和MDA有极显著差异(p<0.01).说明较高剂量的毒死蜱可造成小鼠脑组织的氧化损伤和DNA-蛋白质交联作用增强.

甲醛对小鼠不同脑区的神经毒性作用

本研究旨在探讨甲醛导致机体神经系统病变的具体机制。选用雄性Balb/c小鼠为研究对象,动态吸入甲醛方式染毒7天,每天8 h,甲醛浓度分别为0、0.5、3.0 mg/m3,同时设置一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)拮抗剂(NG-monomethylL-arginine,L-NMMA)组,该组小鼠同时进行3.0 mg/m3甲醛染毒。染毒结束后,用试剂盒检测小鼠大脑皮层、海马和脑干中环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanine monophosphate,cGMP)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量和NOS活性的变化。结果显示,与对照组相比,小鼠大脑皮层和脑干中cAMP含量在0.5 mg/m3染毒组显著升高(均P<0.05),但是在3.0 mg/m3染毒组显著降低(P<0.05),海马中cAMP含量仅在3.0 mg/m3染毒组出现显著降低(P<0.05);与对照组相比,L-NMMA拮抗组小鼠cGMP和NO含量分别在海马和大脑皮层中显著上升(均P<0.01),而cAMP含量和NOS活性在不同脑区中无显著变化。与3.0 mg/m3染毒组相比,L-NMMA拮抗组不同脑区中cAMP含量均显著上升(均P<0.05),NOS活性显著下降(P<0.05或P<0.01);大脑皮层和脑干中的cGMP含量以及脑干中的NO含量亦出现显著性变化(P<0.05或P<0.01)。以上结果提示,甲醛暴露的神经系统毒性作用与NO/cGMP信号转导通路和cAMP信号通路存在一定的关系。

三氧化钨纳米方块致小鼠肝脏和肾脏的急性氧化损伤

目的为探讨WO3纳米方块对小鼠肝脏和肾脏组织的急性氧化损伤作用。方法将42只Balb/c小鼠随机分为7组,每组6只,分别为5、10、20、40、80、160 mg/kg的WO3纳米方块染毒组和生理盐水对照组。灌胃染毒7 d后测定肝脏和肾脏组织中活性氧(ROS)、还原性谷胱甘肽(GSH)以及丙二醛(MDA)的含量。结果随着WO3纳米方块染毒剂量的升高,肝脏和肾脏组织的ROS和MDA的含量均呈逐渐上升的趋势,而GSH含量呈逐渐降低的趋势,各指标均呈一定的剂量-效应关系。剂量≥20 mg/kg时肝脏组织ROS含量和剂量≥10 mg/kg时肾脏组织ROS含量分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);剂量≥20 mg/kg时,肝脏和肾脏组织MDA含量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);剂量≥40 mg/kg时肝脏组织GSH含量和剂量≥20 mg/kg时肾脏组织GSH含量分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定剂量的WO3纳米方块能够对小鼠肝脏和肾脏造成急性氧化损伤。

DIDP经口暴露对小鼠过敏性皮肤炎症的影响

目的探究邻苯二甲酸二异癸酯（di-iso-decyl phthalate,DIDP）经口暴露对过敏性皮炎的影响。方法用0.5%异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）构建过敏性皮炎模型,以褪黑素（melatonin,MT）为阻断剂,将雄性Balb/c小鼠随机分为7组：1生理盐水组;2200 mg/kg/d DIDP组;3FITC组;4FITC＋2 mg/kg/d DIDP组;5FITC＋20 mg/kg/d DIDP组;6 FITC＋200 mg/kg/d DIDP组;7 FITC＋200 mg/kg/d DIDP＋MT组。1~7组每天用生理盐水或不同浓度的DIDP对小鼠进行灌胃,同时第7组小鼠还进行MT灌胃,连续21 d。第3~7组小鼠分别在第22、23、28 d进行致敏（0.5%FITC）。检测耳组织中的活性氧（reactive oxygen species,ROS）、还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）、白介素-4（interleukin-4,IL-4）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）和血清中的免疫球蛋白E（immunoglobulin E,Ig E）含量。结果高浓度的DIDP（200 mg/kg/d）可诱导耳组织产生氧化应激反应,并促进炎症因子的释放。MT处理能有效降低耳组织中的氧化应激水平,减轻过敏性皮炎的反应程度。结论 DIDP的长期暴露可使小鼠形成获得性过敏性体质,并通过增强氧化应激反应及下游分子事件,加重过敏原诱导的过敏性皮炎。