《血站技术操作规程(2015版)》研读

《血站技术操作规程》是指导血站开展常规工作的规范性文件,2015版是《规程》发展过程中的第3次修订,此次修订是结合我国血液事业的发展形势,推动血液核酸检测全覆盖,进一步保证血液安全。通过与2012版的比较,本文从此次修订的主要方向、细则条款入手,对2015版《规程》剖析解读、研判变化背后的深刻含义。对《规程》的研读有助于血站技术人员理解并应用《规程》指导实践工作,有助于血站规范化、科学化管理,提升献血服务水平、保障血液安全。

储存红细胞生化指标研究进展

最近20多年来,红细胞储存损伤引起的输血安全问题逐渐成为输血医学领域研究的重点。尽管,红细胞储存损伤能否引起临床相关的输血并发症,目前还没有定论。但可以肯定的是:不仅红细胞形态及理化性质等随着储存时间的延长发生了日渐明显的改变;而且储存期长的红细胞输注后引起了受血者更多的血管外溶血。

一家三甲医院近7年输血不良反应的发生情况及原因分析

目的全面了解该院7年来输血不良反应的发生情况,并分析其分布特点和可能的相关性因素,为深入研究输血不良反应的发生机制提供参考。方法通过手工查阅2010年以来所有输血不良反应的相关记录信息,通过电子病历的输血管理系统查阅2013年来所有悬浮红细胞的有效期和发血日期。结果 2010年以来,从该院输血不良反应发生率来看,总体发生率为2.38±0.86‰(349次/151 605 U),血小板为5.64‰,红细胞为3.17‰,血浆为1.28‰,冷沉淀为0.94‰。在非溶血性发热反应中RBC占64%(172/212);过敏反应中血浆占38.1%(40/105),血小板占28.6%(30/105)。消化内科和血液内科分别占输血反应总数的32%和21%(110/349和72/349);消化道出血患者发生的不良反应中RBC占93%(63/68);肝病患者发生的不良反应中血浆占71%(17/24);白血病患者发生的不良反应中血小板占57%(20/35)。储存期为第1、2、3和第4周的悬浮RBC不良反应发生率分别为5.66‰、4.49‰、3.65‰和4.89‰。结论 RBC发生的输血不良反应以非溶血性发热为主,其他血液成分以过敏反应为主;随着悬浮RBC储存时间的延长,其输血不良反应的发生率出现先降低后升高的趋势。本研究不能完全排除疾病类型和相关血液成分之间发生特定输血不良反应的相关性。

藏酋猴微卫星富集文库的构建及微卫星分子标记的筛选

通过磁珠富集法构建了藏酋猴AC重复和AAAG重复的微卫星富集文库,分离微卫星序列并对其进行分析。将藏酋猴基因组DNA经Sau3AI酶切后纯化回收,连接特定接头。用生物素标记的探针与酶切片段杂交,捕获300～1000bp片段,随后将获得的片段连接到pMD-19T载体上,转化至JM109中,成功构建藏酋猴微卫星富集文库。(AC)n富集文库和(AAAG)n富集文库的阳性克隆率分别为50%和10%左右。根据测序得到的48个微卫星序列成功设计了24对引物,最终筛选出6个微卫星标记,这些标记将为藏酋猴的遗传多样性研究、圈养种群结构的分析和遗传图谱的构建等奠定一定的基础。

四川省40家综合医院临床用血情况调查与用血评估模式的初步探讨

目的了解四川省综合医院的临床用血情况,对医院临床用血评估模式进行初步探讨。方法 1)设计《临床用血淍查表》,对四川省40家综合医院展开临床用血专项调研,统计40家医院临床成分血(红细胞、血浆、血小板和冷沉淀)用量在主要用血科室之间的分布情况;2)将成分血用量与医院年门诊人次、床位数、年住院人次和年手术台次做相关性分析;3)以单位年门诊人次用量、单位年住院人次用量、单位床位数用量、单位年手术台次用量为指标,分析红细胞用量,探索临床用血的评估机制。结果 1)红细胞和血小板用量最多的科室为内科,三级医院分别占总用量的40.60%和71.15%,二级医院分别占36.62%和51.04%;血浆主要用于内科和外科,三级医院分别占37.11%和34.90%,二级医院分别占27.76%和31.00%;2)三级医院的红细胞用量与年门诊人次、年住院人次、年手术台次及床位数的相关系数(r)分别为0.792、0.818、0.838和0.728,二级医院分别为0.242、0.780、0.793和0.693;3)三级医院以单位年手术台次红细胞用量为评估指标时,有1家医院偏离>x珋+2s;二级医院以单位年门诊人次、单位年住院人次、单位年手术台次和单位床位数红细胞用量为评估指标时,各有1家医院偏离>x珋+2s。结论三级医院成分血应用较二级医院规范,红细胞是应用管理最好的血液成分。临床用血评估在了解医院用血情况的基础上,对同级医院进行用血量的对比分析,不仅可以在宏观上控制临床用血,也可为临床用血考评机制的建立提供有效的借鉴。

中位数-频数分布法应用于我国千人口献血率的评估

目的计算2011年我国千人口献血率的中位数。方法建立2011年全国各省(自治区、直辖市)千人口献血率频数分布表,以千人口献血率为指标分析我国血液供应水平。结果 2011年我国东部、中部及西部地区千人口献血率中位数分别为10.75、8.27、8.04,方差分析显示东部地区与中部、西部地区分别在0.05及0.01水平上;2011年全国千人口献血率中位数为8.53。结论我国血液供应水平处于中等收入国家较低水平,不同区域间发展水平存在较大差异;提高公众献血率、协调采供血体系区域平衡及引入临床用血科学评价体系是我国当前推进无偿献血工作、保障血液供应面临的重要挑战。

昆虫纲分类专家系统的开发

昆虫分类学是一门基础且繁杂的学科,将最有效率的数据组织方式———计算机数据库技术应用于昆虫分类,是信息科学技术与专业学科的高度融合。通过对昆虫纲种类资源检索的专家系统的设计,介绍了如何使用Access 2000建立数据库,高效地获取和处理数据,及使用Visual Basic 6.0开发小型专家系统的过程。

受试者工作特征曲线在血液病毒筛检试验中的应用

目的通过应用案例,将ROC曲线法引入血站实验室病毒筛检试验中诊断阈值的判定、及对诊断方案的评价。方法采用2种厂家生产的ELISA诊断试剂对34例阴性、22例阳性样本中的抗-HCV进行测定。基于吸光值,绘制ROC曲线对诊断试验临界值进行判定、对2组诊断试验准确性进行比较评价。结果应用厂家A试剂开展HCV诊断试验的最佳临界值为2.459,此时灵敏度与特异度综合精度达到最大,为0.73、0.97。ROC曲线下面积为0.9082,表明该诊断试验准确性较高。厂家B组试验价值优于厂家A组。结论由ROC曲线法判定的诊断阈值能够使诊断试验灵敏度、特异度达到最佳优化,诊断试验的Youden指数达到最高。ROC曲线法能够客观、一致地评价诊断试验的准确性、比较不同诊断试验的诊断价值。

红细胞储存损伤对于大肠杆菌感染大鼠输注效果的影响

目的探讨红细胞(RBCs)储存损伤对大肠杆菌感染的免疫力低下大鼠输血后死亡率的影响。方法将69只SPF级SD大鼠,根据是否使用免疫抑制剂(环磷酰胺和地塞米松)和输注RBCs的储存时间不同,随机分成3个实验组:免疫抑制+9 d RBCs组、免疫抑制+1 d RBCs组和免疫抑制+生理盐水(NS)组(18只/组);1个正常对照组:单纯NS组,含15只大鼠。每只大鼠经股静脉放出全身20%血液后,分别输注与失血量相同的储存9或1 d的浓缩RBCs及等量NS,随后植入大肠杆菌溶液0.5 mL,并连续观察7 d。术后24 h,取尾静脉血浆用亚铁嗪微板法测定血清铁,并以LB培养基血细菌培养15 h,用紫外分光光度仪测定OD600;术后24 h处死各免疫抑制组大鼠3只/组,取组织做病理检查。结果 3个免疫抑制组和对照组分别输注9、1 d RBCs和NS后的大鼠死亡率分别为10/15,11/15和9/15(P>0.05),死亡大鼠的平均生存时间(h)分别为55.6±21.3,38±16.6和28.3±15.0(P<0.05);24 h血清铁离子浓度(μmol/L)分别为34.1±9.8,28±10.2,26.8±9.0和22.4±5.9(P>0.05);血细菌培养的结果(OD_(600))分别为0.510±0.340,0.790±0.281,0.427±0.107和0.349±0.069(P<0.05);24 h回肠组织细菌计数(个/1 000倍视野)分别为44±9,101±7和27±8(P<0.05)。结论输注不同储存时间的RBCs对于大肠杆菌感染的免疫力低下大鼠的死亡率没有明显影响;但是相比储存时间长的RBCs,新鲜RBCs输注后明显促进了免疫力低下大鼠体内大肠杆菌的增值并加速了感染大鼠的死亡。

NRLEQAS项目的成功运作及其对我国血站实验室EQA开展的启示

澳大利亚国立参比实验室(NRL)是亚太地区影响广泛、具有出色领导能力的医学检测机构。作为其实验室质量保证解决方案的NRL EQAS项目,集系统化、可持续性教育、培训与合作于一体,截至2013年1月,已为全球64个国家和地区586家传染病检测机构提供了室间质量评价服务,得到国际输血界的普遍认可。本文从分析NRL EQAS项目优势入手,讨论我国室间质评项目在资源整合、方案构建、方法学积累等方面与其存在的差距;从分析NRL运作入手,讨论其与我国室间质评项目组织者相比,在机构资质、政府支持与战略定位等方面具备的优势;进而提出:通过借鉴NRL发展理念与NRL EQAS项目的优势,我国应进一步发展独立自主室间质评体系,扭转目前室间质评的低效运作与丰富参评资源向海外流失局面,积极促进我国传染性疾病诊断事业的发展。

石家庄市农村地区无偿献血者人群结构特征和献血服务满意度调研

目的分析石家庄市农村地区无偿献血者人群结构特征和献血服务满意度,总结献血服务方面的经验和不足,提出农村地区无偿献血服务的相关建议。方法应用服务营销理论中的SERVQUAL模型设计调研问卷,以石家庄市农村地区无偿献血者作为研究对象,进行献血者人群结构特征分析和献血服务满意度评价。结果2019年7~9月,在石家庄市12个县乡发放调研问卷1100份,回收有效问卷983份。人群结构特征:以男性、年龄30~39岁段、大专以下学历、农民、重复献血者、奉献爱心为主。献血服务满意度水平:总体满意度为97.36%,采血地点不方便、采血时间不方便、献血过程等待时间长这3项占到全部不满意选择(165)的74%。以献血次数为行变量分别对献血者人群结构特征指标、献血服务满意度进行统计分析显示:不同献血次数的献血者在性别、年龄、文化程度、职业、献血目的、了解献血的渠道的构成比上均具有统计学差异(P<0.05),不同献血次数的献血者在排名前4的对献血服务不满意的问题及“对本次献血服务总体评价”的构成比上没有统计学差异。结论在农村地区无偿献血服务中,应根据不同人群结构特征、不同献血经历的献血者人群特点,提供精准有效的、适合农村实际情况的无偿献血宣传、招募与服务措施,以进一步提升献血服务满意度。

稻纵卷叶螟线粒体基因组及细胞色素C氧化酶基因分析

线粒体基因是研究生物系统进化的重要分子标记,本文对迁飞昆虫稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis线粒体DNA进行扩增及注释,结果表明:稻纵卷叶螟线粒体基因组全长15377bp,AT含量为82%,基因组结构为鳞翅目所特有的CR-M-I-Q结构。以细胞色素C氧化酶基因(COX)为分子标记,对有翅类昆虫22个物种进行系统树构建,发现与昆虫翅的发生高度吻合。对存在于PCGs终止密码子判定的争议予以阐明并提出注释建议,有利于今后动物线粒体基因组序列注释的统一规范。

基于服务质量差距模型的采供血机构农村地区无偿献血服务研究

目的总结采供血机构现行的提升农村地区无偿献血服务质量的策略,了解这些策略实施效果和拓展方向。方法应用服务质量差距模型设计调研问卷,针对"了解献血者需求"、"制定规章制度"、"内部培训与管理"、"外部宣传与服务"4个维度,每个维度10题,采供血机构员工根据其了解程度及感受,按0分("感觉没有做")—5分("感觉做得非常好")打分;以河北省血液中心4大部门类别(管理部门、制度制定部门、一线科室、支持科室)员工作为调研与访谈对象采集数据,采用部门类别为行变量、问题维度为列变量做秩和检验,对该中心农村地区无偿献血服务工作做系统分析。结果调研分类4个问题维度中,员工评分(均值)依次为"制定规章制度"(4.11±0.97)、"外部宣传与服务"(3.81±1.22)、"了解献血者需求"(3.69±1.34)和"内部培训与管理"(3.57±1.35)。针对模型的重要维度"了解献血者需求",支持科室评分:供血科最高(4.63±0.63)、招募科最低(3.24±1.32),制度制定部门评分:业务科最高(3.34±1.48)、质管科最低(3.13±1.32),一线科室评分:血保部(3.23±1.41);支持科室评分与制度制定部门比较(P<0.01)、支持科室评分与一线科室比较(P<0.01)、制度制定部门与一线科室比较(P>0.05)。调研中收集到的提升农村地区无偿献血服务质量策略建议有:创建农村地区采血队模式,制定配套的服务规范及管理制度,并据献血者需求及时调整;强化农村地区无偿献血服务工作人员的培训、激励和管理;积极发动农村地区大队干部、卫生院院长、村医和志愿者的组织力量;设置乡镇无偿献血宣传栏,编制适合农村地区特点的无偿献血宣传资料。结论应用服务质量差距模型调研所得到的农村无偿献血服务质量提升策略对与调研地区经济社会特征相近的农村地区的无偿献血服务质量改进具有一定的参考价值。

IL-35与相关疾病的研究进展

白细胞介素-35(IL-35)是近年来新发现的抑炎因子,归属于IL-12细胞因子家族,与IL-12、IL-23、IL-27结构相似,是由P35和EBI3两个亚基构成的异二聚体。IL-35通过STAT1、STAT3、STAT4等信号通路发挥免疫效应作用,是调节性T细胞发挥最大抑制效应所必需的一种抑制性细胞因子,而且与许多免疫性疾病的发生、发展密切相关,为这些疾病的免疫治疗提供新的靶点。本文就其来源、分子结构与分泌、信号转导、生物学功能及其与相关疾病的关系做一简要综述。

4℃冷藏保存血小板的储存损伤与应用研究进展

血小板输注是临床预防出血和止血的重要治疗手段之一,但目前(22±2)℃震荡保存的血小板保质期短,易造成细菌污染,输入人体可能产生输血不良反应等。4℃保存血小板可以明显延长血小板的保存时间、降低细菌污染的风险且有更好的止血效果,但4℃冷藏的血小板保存过程中存在储存损伤,输入人体后容易被激活,降低体内有效存活率。本文就4℃冷藏保存血小板的储存损伤和应用研究进展作一综述。

输血相关急性肺损伤潜在治疗靶点的研究进展

输血相关急性肺损伤(TRALI)是输血相关的严重不良反应,是大多数国家输血相关死亡的主要原因之一,目前尚无特异性治疗方法。近10年,TRALI的病理生理学机制已逐渐阐明,许多研究从其发病机制的角度,深入探索TRALI的预防策略。本文主要对TRALI的发生机制及其潜在治疗措施进行临床前的评估和讨论,为其干预和治疗研究提供新的思路。

冻干红细胞残余水的测定及其分布研究

目的建立并比较冻干红细胞残余水含量测定方法,探讨冻干红细胞残余水的分布情况。方法一次性冻干等量(500μL)的含保护剂(主要成分12%甘油)的红细胞、无保护剂的红细胞,含保护剂(同前)的血影细胞、无保护剂的血影细胞及保护剂,用热重分析法及Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法测定其残余水含量,同时用含水量固定的标准品(水分含量4.9%-5.2%)做检验,每组样品重复测量6次;分析各组之间的差异,比较冻干血影细胞及冻干红细胞残余水含量。结果热重分析法测定残余水含量(%):冻干红细胞、无保护剂冻干红细胞、冻干血影细胞、无保护剂冻干血影细胞、单纯冻干保护剂、标准品分别为19.01±2.18、4.60±0.78、18.95±1.89、4.87±1.01、16.12±1.04、5.28±0.16;冻干保护剂及含保护剂冻干红细胞的热重(TG)曲线走势接近,无保护剂冻干红细胞与前二者曲线走势差异明显;Karl-Fisher法测定残余水含量(%):冻干红细胞、无保护剂冻干红细胞、冻干血影细胞、无保护剂冻干血影细胞、单纯冻干保护剂、标准品分别为3.21±0.23、1.22±0.09、3.16±0.26、1.25±0.07、2.63±0.41、5.14±0.13。结论热重分析法测定含保护剂的冻干品残余水含量时的结果偏高,Karl-Fisher滴定法结合卡式炉法能够准确反映冻干红细胞的残余水含量;初步判断冻干红细胞残余水主要分布于细胞膜。

健康个体中SARS-CoV-2反应性记忆T细胞免疫研究

目的 了解健康个体中的SARS-CoV-2反应性CD4+T细胞的记忆表型和功能。方法 使用SARS-CoV-2来源多肽刺激来自参与者的PBMC,通过胞内染色和流式细胞术检测SARS-CoV-2反应性记忆T细胞,并进行记忆表型分析,通过CBA检测SARS-CoV-2来源多肽刺激后的细胞因子分泌水平,初步评估SARS-CoV-2反应性记忆T细胞的功能。结果 40%(6/15)健康个体可检测到SARS-CoV-2反应性CD4+记忆T细胞,记忆表型分析显示其主要由中央记忆型T细胞组成(82.2%),其他记忆细胞占17.8%。与阴性对照相比,SARS-CoV-2来源多肽刺激后,IL-10分泌水平的下降具有统计学意义(P<0.05),IFNγ、TNFα、IL-2和IL-4分泌水平的差异不具有统计学意义。结论 健康个体中存在SARS-CoV-2反应性CD4+记忆T细胞。

HIV-1实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的比较实验

目的比较及评价市场上主流的3个进口品牌(A-QIAGEN、B-Applied Biosystems、C-Promega) HIV-1病毒实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间,确定3者中较优的试剂盒,为临床HIV-1病毒的核酸检测提供方法学参考。方法根据3个品牌试剂盒的说明书,对系列稀释的国内HIV-1 RNA标准品和确证的HIV阴性的标本进行相应的荧光定量RT-PCR平行检测分析,最后将荧光收集值(RFU)均设定为100,结合扩增曲线图、Ct值及相应的分析,比较它们的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间。结果 3种试剂盒的特异性都是100%,但B-Applied Biosystems试剂盒在灵敏度(比A-QIAGEN、C-Promega试剂盒的检出Ct值提前0. 4-1. 5)、稳定性(特别是低浓度(HIV-1 RNA标本浓度为2. 31×102)时)及所需反应时间上均优于A-QIAGEN试剂盒和C-Promega试剂盒。结论不同厂家检测试剂盒的特异性、灵敏度等方面存在一定的差异,导致同样的标本检测的结果会有一定的偏差,甚至漏检。因此,进行临床检测前需要对这些检测试剂盒进行评估。