大鼠肌腱愈合过程中BMP-12、BMP-13和BMP-14基因表达水平的变化

目的研究大鼠跟腱伤口愈合过程中BMP-12、BMP-13、BMP-14基因表达的变化。方法选择7周龄SPF级SD雄性大鼠56只为实验组,均使用麻醉机面罩给氧和异氟醚麻醉成功后,将右后爪的跟腱横行切断,使用单股的Prolene线缝合。分别于术后第1、3、5、7、14、21及28d取8只SD大鼠进行肌腱观察;同一动物的左后爪跟腱作为对照组。提取肌腱组织的总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析各个时间点BMP-12、BMP-13、BMP-14的表达水平。结果 BMP12、BMP-13、BMP-14基因在实验组的各个检测时间点都有表达,而在对照组没有表达。BMP-12基因在第1～28天表达水平均显著升高,其中第1～7天表达水平无明显差异,第14～28天表达水平较高;BMP-13基因第1～5天的表达水平持续升高,第7～28天表达水平则显著降低;BMP-14基因表达水平的变化与BMP-13相似。结论正常无损伤的肌腱没有明显的BMP-12、BMP-13、BMP-14基因表达。当肌腱损伤后,BMP-12、BMP-13、BMP-14基因表达被激活,增加的生长因子可能参与了肌腱的内源性愈合机制,其中BMP-12可能是目前发现的在韧带/肌腱形成、发育和创伤修复中最关键的生长因子。

激素性股骨头坏死与凝溶紊乱的实验研究

目的 :观察激素性股骨头坏死家兔模型的血液凝溶功能变化 ,探讨激素性股骨头坏死的发病机理。方法 :健康雄性成年家兔 36只 ,随机分为对照组 (注射生理盐水 ) ,实验组 (冲击注射地塞米松 )。检测血脂、血浆组织纤溶酶原激活物 (tPA)、纤溶酶原激活物抑制物 (PAI)、血栓素A2 (TXA2 )、前列环素 (PGI)的阶段性变化。观察实验 35、70d双侧股骨头的病理变化。结果 :实验组 15d甘油三脂、总胆固醇、TXA2 /PGI比值均显著高于对照组。实验 30、6 0d ,实验组tPA/PAI比值显著低于对照组。实验组 35、70d双侧股骨头软骨下区骨陷窝空虚率均较对照组显著增高。结论 :地塞米松冲击应用可引起家兔血液高凝、低纤溶。血液凝溶功能紊乱可能参与兔激素性股骨头坏死的发病。

川芎嗪拮抗激素所致兔血管内皮细胞功能失调

目的 探讨川芎嗪拮抗糖皮质激素引起的血管内皮细胞功能失调。方法 健康雄性家兔 4 0只 ,随机分为A组 (注射生理盐水 ) ,B组 (短期注射地塞米松 )及 C组 (短期注射地塞米松 +川芎嗪 )。在实验前及实验 15 ,30 ,6 0d,观察 3组家兔血小板数量、血浆血栓素、前列环素、组织纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物的变化。结果实验前 3组的各项检测指标均无显著差异。用药后 ,3组的血小板数量未发生有意义的变化。B组 t PA / PAI比值显著降低。TXB2 / PGI2 含量比值长期升高。C组 t PA/ PAI比值各阶段均显著高于 B组 ,而 TXB2 / PGI2 比值各阶段均显著低于 A、B组。结论 川芎嗪能够有效拮抗大剂量地塞米松造成的兔血管内皮细胞功能失调 。

现阶段骨科多媒体教学的思考

多媒体教学已经在骨科临床教学中得到广泛应用,它具有形式丰富,形象直观,信息容量大,交互性强,易于讲清疑难知识等优势。但是现阶段骨科多媒体教学也存在较多的问题,如过分依赖多媒体课件,课件传递的信息过多过滥,成为课堂教学的"霸主"等。认清现阶段骨科多媒体教学的优势和存在的问题,才能促进它的进一步推广和发展,以便真正地发挥骨科多媒体教学的优势。

下肢深静脉血栓后综合征临床治疗探讨

目的 探讨非溶栓药物综合应用对下肢深静脉血栓 (DVT)后综合征的临床疗效。方法 4 2例下肢DVT患者 ,采用口服阿司匹林、潘生丁 ;肌注罂粟碱、妥拉苏林 ;静滴丹参酮、低分子右旋糖苷 ;上述药物应用 10d ,同时应用抗生素 7d。治疗前后观察患者症状、体征 ,测定肢围 ,并行多普勒超声检查。结果 治疗结束时DVT后综合征治愈 8例 ,显效 2 2例 ,有效 10例 ,无效 2例。多普勒超声检查显示病变处深静脉部分再通2 6例 ,恢复通畅 8例。治疗过程中 ,患者无 1例死亡。结论 下肢DVT后综合征仍然需要强调及早治疗。抗凝、解痉、改善血液流变对于下肢DVT后综合征有较好的治疗效果。

成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体基因突变对小鼠骨髓基质细胞发育的影响

目的:观察对比野生型小鼠和成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体突变型小鼠骨髓基质细胞体外培养的生长情况以及成骨潜能,探讨成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能持续增强对小鼠骨髓基质细胞发育的影响。方法:实验于2005-09/2006-02在解放军第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。①实验动物:将雄性成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体S252W突变小鼠(由陈林教授在美国国立卫生研究院建立后引入本实验室)和雌性C57BL/6J小鼠(由解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供)交配,经过基因型鉴定的雄性F1代8周龄小鼠按照基因型分为野生型组和突变型组,12只/组。②实验方法:将两组小鼠脱臼处死后分离胫、股骨,用DMEM培养液冲出骨髓,离心后弃上清,加入DMEM低糖培养液制成细胞悬液,贴壁法分离培养骨髓基质细胞,以1×108 L-1密度传代。③实验评估:倒置相差显微镜下观察细胞形态及贴壁生长情况。采用MTT法检测两组骨髓基质细胞的增殖情况。检测体外成骨诱导条件下两组骨髓基质细胞的碱性磷酸酶活性。采用Vankossa染色检测体外成骨诱导条件下两组骨髓基质细胞的钙结节形成能力。结果:①形态学观察:倒置相差显微镜下两组骨髓基质细胞形态变化相似。第3代骨髓基质细胞在体外诱导成骨条件下增殖速度明显减慢,多数细胞由梭形变成长方形,并逐渐成为立方形,细胞体积增大。②生长曲线:野生型组骨髓基质细胞的吸光度值在接种后2d内变化不大,细胞处于潜伏期,第4天显著增加,第6天达高峰,进入平台期。与野生型组比较,突变型组骨髓基质细胞生长曲线出现右移和平台期滞后。③碱性磷酸酶活性:在体外诱导成骨条件下,野生型组骨髓基质细胞随培养时间延长碱性磷酸酶活性逐渐上升,第9～15天达高峰,然后随细胞老化而下降。与野生型组相比较,突变型组骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性增高出现滞后现象,并且其高峰数值显著低于野生型组(P<0.05)。④钙结节形成:经过21d的成骨诱导培养,野生型组骨髓基质细胞可见较多的钙结节形成,突变型组有分散的钙结节形成,但较细小。结论:成纤维细胞生长因子及其受体信号对细胞发育的调控效应是复杂多面的,持续的成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能增强可能引起体外培养的小鼠骨髓基质细胞增生减缓,并可能阻抑其向成骨细胞的分化。

成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体功能获得型点突变影响小鼠颅底软骨发育

目的:对比野生型小鼠和成纤维细胞生长因子Ⅱ型受体(fibroblast growth factor receptor2,fgfr2)基因S252W突变型小鼠颅底软骨的生长发育情况,探讨fgfr2功能持续增强对小鼠颅底软骨发育的影响。方法:实验于2004-03/2005-04在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。①fgfr2+小鼠和C57BL/6J小鼠交配后取F1代,利用聚合酶链反应方法进行fgfr2突变型小鼠基因型的鉴定,得到野生型和fgfr2受体功能获得型点突变型两组小鼠。②标本取材及处理:分别在两组实验动物中,取胚胎期16d(E16)、胚胎期17d(E17)、新生2d(P2)、新生8d(P8)的小鼠的颅底作为标本。一部分体积分数为0.75的乙醇溶液固定。另一部分标本行40g/L多聚甲醛固定,150g/L乙二胺四乙酸溶液脱钙,常规石蜡包埋、切片。③阿尔辛-茜素红骨架染色显示颅底整体骨骼的发育情况。软骨组织染为蓝色,骨组织染为红色。④脱钙骨切片后进行苏木精-伊红染色。未脱钙骨切片后进行Calcein染色,荧光显微镜下观察钙化组织的情况。⑤使用地高辛RNA标记试剂盒按照产品说明制备Col 10(Collagen 10)地高辛标记的互补RNA探针,对颅底软骨联结进行检测软骨分化标志基因表达情况的原位杂交。⑥组织切片染色结果使用SPOT Advanced软件进行数码拍摄。结果:①实验小鼠颅底发育的大体情况:fgfr2受体功能获得型点突变小鼠从胚胎后期开始就表现出短颅现象。②阿尔辛蓝-茜素红骨架染色、Calcein染色和苏木精-伊红染色显示,fgfr2受体功能获得型点突变小鼠出生后颅底软骨联结没有出现提前融合的现象,但是颅底软骨生长发育差,软骨细胞增生区、肥大区缩短。突变小鼠的颅底软骨发育障碍导致颅底骨组织的生长发育也出现障碍。③原位杂交:Col10在野生型和突变型小鼠颅底软骨的表达部位未见明显差异,但是这个软骨细胞分化标志基因的表达强度降低。结论:fgfr2 S252W点突变能够引起小鼠颅底软骨联结处的软骨细胞发育异常,导致颅底骨骼发育畸形。fgfr2可能具有调控软骨细胞系发育的功能,从而可能在骨骼发育、骨折修复等方面发挥重要作用。

综合微创技术在常规腰椎间盘摘除术中的应用

目的 :探讨在常规腰椎间盘摘除术中应用综合微创技术的方法及意义。方法 :60例有手术指征的单间隙腰椎间盘突出症患者均分为 2组。标准组采用常规后路腰椎间盘摘除术 ,微创组结合应用综合微创技术 ,记录手术资料 ,进行术后即时和中远期疗效评价。结果 :两组间比较 ,微创组平均切口长度、术中总出血量显著减少 ,术后 3d腰腿痛程度显著减轻 (P <0 .0 1 )。平均随访 39.5个月 ,微创组腰背痛评分显著和疗效优良显著增高 (P <0 .0 1 )。结论 :综合微创技术可以进一步提高常规腰椎间盘摘除术的疗效。它不需要特殊设备和过多药物 ,具有一定的临床应用价值。

股骨头缺血坏死的血液流变学临床研究

目的 探讨创伤性与非创伤性股骨头缺血坏死 (ANFN)患者的血液流变学特性。方法 选取创伤性与非创伤性股骨头缺血坏死患者以及其它骨创伤患者共 3组 ,每组 2 8例 ,进行血液流变学指标检测分析。结果 创伤组和对照组比较 ,血小板、血脂含量、血液流变学指标均无明显差异 (P >0 0 5 )。非创伤组和对照组比较 ,全血低切粘度、血浆纤维蛋白原、甘油三脂明显增高 (P <0 0 1)。结论 血液高粘滞状态与创伤性ANFH无明显关系 ,但是可能参与非创伤性ANFH的发病。它的形成可能与高脂血症有关 ,同时还有其它未知病理因素参与。在临床上对有ANFH危险因素的患者进行血液流变学监测 。

家兔激素性股骨头坏死的血液流变学改变及意义

目的探讨血液流变学改变在家兔激素性股骨头坏死发病机制中的作用。方法雄性家兔30只 ,随机分为激素组 (短期注射地塞米松 )及对照组 (注射生理盐水 ) ,观察血清总胆固醇 (TC)、甘油三脂 (TG)、血液流变学参数、兔股骨头骨陷窝空虚率的阶段性变化。结果实验15、30d ,激素组的TG、TC、全血粘度、血浆粘度显著高于对照组。实验60d ,激素组血清TC、血浆粘度仍然显著高于对照组。激素组35、70d双侧股骨头骨陷窝空虚率均显著高于对照组。结论地塞米松冲击应用可造成家兔血液流变特性恶化 。

短期应用地塞米松造成的家兔血液纤溶功能紊乱及其意义

探讨短期应用地塞米松造成的家兔血液纤溶功能紊乱及其意义。方法 :健康雄性家兔 3 6只 ,随机分为实验组 (第 1,2 ,7,8天注射地塞米松磷酸钠 10mg/kg/d)及对照组 (注射生理盐水 )。在实验前及第 15,3 0 ,60天 ,观察两组家兔血小板数量、血清脂质、血浆血栓素、组织纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物的变化。结果 :实验前两组的各项检测指标均无显著差异。实验第 15天 ,血清甘油三脂 (TG)、总胆固醇(TC)、血浆组织纤溶酶原激活物 (tPA)及纤溶酶原激活物抑制物 (PAI)活性明显高于对照组 ,血小板数量、血浆TXB2 含量明显低于对照组 ,血浆tPA/PAI比值保持正常。实验第 3 0天 ,血清TG、TC、血浆PAI活性仍然保持高水平 ,血浆TXB2 含量、tPA活性、tPA/PAI比值明显低于对照组 ,血小板数量恢复正常。实验第 60天 ,只有血清TC仍然保持高水平 ,血浆TXB2 含量、tPA活性、tPA/PAI比值显著低于对照组 ,其余指标在正常范围。结论 :地塞米松冲击应用可造成家兔血液长期 (>60d)处于高凝低纤溶状态 ,从而可能诱发某些缺血性疾病。

新形势下改进骨科临床教学的探讨

骨科临床教学是临床医学生走向骨科临床工作，成为临床医师的必经学习阶段。然而随着大学生就业形势的变化，考研复习的需要，新的医学模式的要求和旧有医患关系的改变，骨科临床教学出现很大变化，许多医学生临床学习的积极性减退，临床教学质量下降。面对这种新形势，临床需要改变一些旧有的教学方法，现把笔者的实践体会总结如下。

联合应用人工关节和游离组织瓣治疗严重肘关节损伤1例

报告严重肘关节损伤患者应用关节假体置换和游离组织瓣移植的临床应用结果。表明在掌握人工关节技术和显微外科技术条件下 。

快速康复理念在超高龄患者髋关节置换术中的应用

目的探讨快速康复理念在超高龄髋关节置换患者围术期的应用。方法回顾性分析2008年8月至2012年10月该科年龄大于或等于85岁行单侧髋关节置换术的患者资料。将行快速康复治疗的42例患者作为试验组,行传统模式治疗的37例患者作为对照组。比较两组患者术后住院时间,术后是否输血,术后并发症,术后疼痛(VAS)、功能(HSS)评价。结果与对照组相比,试验组平均住院时间较对照组缩短,术后发生早期并发症总人数减少,早期疼痛减轻(P<0.05);术后输血患者比例、中晚期并发症及疼痛发生率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在行髋关节置换术的超高龄患者中应用快速康复模式是安全可行的,可以有效减少患者术后并发症,缩短住院时间。

大鼠跟腱损伤修复局部生长因子内源性表达变化的研究

目的测定损伤肌腱修复术后康复过程中手术局部分泌型生长因子表达的变化情况。方法 21只大鼠切断单侧跟腱后立即以丝线修复,术后第1、3、5、7、14、21和28天分别处死3只实验大鼠。收集损伤局部及健侧跟腱标本,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β2、TGF-β3,骨形态形成蛋白(BMP)-12、BMP-13、BMP-14,血管内皮生长因子(VEGF),肝细胞生长因子(HGF),组织连接生长因子(CTGF),胰岛素样生长因子1(IGF-1)、IGF-2,成纤维细胞生长因子(FGF-1)、FGF-2,血小板源性生长因子a(PDGFa)、PDGFb和表皮生长因子(EGF)等分泌型生长因子的表达水平并进行对比分析。结果术后第1、3、5、7、14、21和28天损伤修复测标本,TGF-β2表达水平最高,其中术后第1、3、5天表达最明显。BMP-13、BMP-14,VEGF和IGF表达水平基本相当,但较TGF-β2表达水平少。术后第7天,上述因子表达水平显著减少。而TGF-β1在术后第21天达到最大表达。对照组标本未测出相关生长因子RNA表达。结论 TGF-β2、BMP-13、BMP-14、IGF-1和VEGF在术后第1天即开始高表达,术后第7天显著降低。TGF-β1在术后第21天表达水平达最大值。在肌腱损伤后局部综合应用上述生长因子可有效加快其愈合进程,增加肌腱修复后的强度,促进肌腱早期修复。

不同浓度的肌肉源神经生长因子对游离神经移植修复脊髓损伤的作用

目的探讨不同浓度的肌肉源神经生长因子(mNTF)对游离神经移植修复脊髓损伤作用及高浓度的mNTF是否会产生高效应。方法从3周龄Wistar大鼠腓骨肌中提取mNTF,用1mm×1mmPhast凝胶块运载后放入移植的游离神经与脊髓的连接处。并将30只成年Wistar大白鼠根据其浓度不同随机分成对照组(10只),低浓度组(10只)和高浓度mNTF实验组(10只)。结果单纯游离的周围神经移植后4周仅仅见到极其微弱的脊髓神经的再生。加入低浓度mNTF后脊髓神经的再生极显著地提高。高浓度mNTF组中虽然脊髓神经的再生能力较对照组明显提高,但是反而明显少于低浓度mNTF组。结论肌肉源神经生长因子(mNTF)对游离神经移植修复脊髓损伤有明显的促进作用,但是仅仅补充高浓度mNTF,而不补充其它营养因子,则会造成其“营养失衡”,所以结果反而不好。

某军队医院医护人员心理健康及相关因素研究

目的 :研究军队医院医护人员的心理卫生状况及相关因素 ,为开展心理咨询和治疗提供科学依据。方法 :采用症状自评量表 (SCL - 90 ) ,对某军队医院 1 81名医护人员进行测试 ,与中国常模、军人常模进行比较 ,并按性别、年龄、专业、学历和职称分组 ,进行组间比较。结果 :军队医护人员躯体化、人际关系敏感、敌对性 3个因子和总均分显著低于中国常模 (P <0 .0 5 ) ;军队医护人员各因子分、阳性项目数和总均分均非常显著地低于军人常模 (P <0 .0 1 ) ;军队医护人员心理卫生水平的变化 ,除 30岁以上组抑郁因子分显著高于 2 9岁以下组外 (P <0 .0 5 ) ,未表现出明显的年龄、专业、学历、性别和职称差异。结论 :军队医护人员心理卫生水平总体较好 ;军队医护人员产生心理问题的主要原因可能是工作压力大、竞争激烈。

欧几里德几何距离矩阵法对FGFR2 Ser252Trp点突变小鼠头颅形状特征的分析

目的通过定量分析模拟Apert综合征患者的FGFR2 Ser252Trp突变小鼠模型和野生型小鼠头颅表型,并与Apert患者所表现出来的异常头颅颜面特征进行比较,探讨所建立的Apert小鼠模型能否真实地模拟Apert综合征患者的头颅表型。方法采用蚂蚁啃食的方法制备Ser252Trp突变小鼠和同窝对照小鼠头颅标本,用三维坐标测量仪检测头颅27个标记点的三维坐标值,用欧几里德几何距离矩阵法(euclidean distance matrix analysis,EDMA)对突变小鼠和对照小鼠头颅三维数据进行处理和统计分析。结果Ser252Trp突变小鼠头颅形状与同窝对照组相比具有统计学差异(P<0.01),突变小鼠头颅长度缩短,且头颅前端缩短比后部缩短更严重,头颅面部鼻骨长度、前颌骨、上颌骨及颧骨长度明显缩短(P<0.01),眼间距和额骨宽度变宽,颅腔长度有所缩短,宽度增加,颅顶升高(P<0.01),这与Apert患者颅面的临床表现高度相似:眼间距增宽,面中部发育不良,鼻骨缩短,上颌骨发育低下,突眼,颅腔变宽呈圆鼓状。结论FGFR2 Ser252Trp突变小鼠从表型上真实地反映Apert患者的头颅颜面特征,可以作为人类Apert综合征的较好模型用于有关疾病致病机制、手术及药物治疗的研究模型。