IL-2/抗IL-2抗体通过增加中枢神经系统内调节性T细胞数量减轻小鼠颅脑创伤

目的探讨IL-2/抗IL-2抗体增加颅脑创伤(TBI)小鼠中枢神经系统内调节性T细胞(Treg)数量对小鼠TBI的影响。方法所用动物为10周龄C57BL/6健康雄性小鼠,分为Sham组、TBI组、TBI+IL-2/抗IL-2抗体组。TBI+IL-2/抗IL-2抗体组在造模2 h后连续3 d给予IL-2(1.0μg)+抗IL-2抗体(5.0μg)腹腔注射。提取三组小鼠在3、5、7 d的脑组织进行流式细胞术,检测Treg数量,同时将第7日小鼠脑组织进行免疫荧光染色,以明确TBI后中枢神经系统存在Treg浸润,另外对三组小鼠1、3、5、7 d的行为学结果分别进行分析。同时检测造模第7日各组小鼠脑组织含水量、神经元凋亡及炎症因子表达情况。结果与Sham组相比,TBI组及TBI+IL-2/抗IL-2抗体组小鼠中枢神经系统内确实存在Treg浸润情况,且Treg在脑创伤后逐渐增多,Sham组未见Treg浸润,TBI+IL-2/抗IL-2抗体组相较于TBI组Treg明显增多(P<0.05),包括神经元凋亡减少、脑水肿减轻及炎症因子表达降低,预后明显改善。结论IL-2/抗IL-2抗体可以增加中枢神经系统内Treg的数量并在一定程度上能够减轻小鼠TBI症状。

小鼠内皮抑素基因克隆、表达及其抑瘤活性鉴定

利用RT PCR法从小鼠肝组织扩增出Endostatin基因 ,重组入 pUC1 9质粒。经测序后 ,将片段重组入大肠杆菌表达载体 pDH并用温度诱导表达。将表达的蛋白经纯化及复性后直接注入大鼠C6胶质瘤模型内 ,检测其对胶质瘤生长的抑制作用。结果 ,在小鼠肝组织中成功扩增到Endostatin基因 ,测序与报道序列一致。重组进 pDH后经温度诱导表达 ,在SDS PAGE电泳上得到一条新的蛋白表达带 ,分子量为 2 0kD。纯化及复性后的蛋白能明显抑制小鼠体内胶质瘤的生长 ,为利用Endostatin进行脑胶质瘤基因治疗奠定了实验基础。

小鼠内皮抑素基因真核表达载体的构建和表达

目的 构建小鼠内皮抑素 (endostatin) c DNA的真核表达载体并将其在体外培养的脑胶质瘤细胞内表达 .方法 将带有分泌信号的小鼠 endostatin c DNA克隆入真核表达载体 pc DNA3,构建 CMV启动子控制的载体 pc DNA- s Endo,并将上述载体转染体外培养的脑胶质瘤细胞 (SHG44 ) ,采用Western Blot鉴定其表达 ,应用牛微血管内皮细胞抑制实验检测其活性 .结果 成功地构建了真核表达载体 pc DNA-s Endo并转染入脑胶质瘤细胞 ,获得的分泌型 endostatin可以明显抑制牛毛细血管内皮细胞增殖 (ED5 0 =2 0 0μg· L- 1 ) .结论 获得有表达功能活性的 endostatin真核表达载体 。

小鼠endostatin基因的克隆、表达及表达产物的活性鉴定

目的 克隆并表达小鼠 endostatin基因 ,并初步检测其血管生长抑制功能 ,为胶质瘤的基因治疗探索新的途径 .方法 从小鼠肝组织用 RT- PCR法扩增 endostatin基因 ,重组入 p UC19质粒 ,经测序证实无误后 ,重组入表达载体p DH,经温度诱导表达 ,并用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)实验检测表达产物活性 .结果 从小鼠肝组织中成功扩增到endostatin基因 ,测序与报道序列一致 .重组进 p DH后经温度诱导表达 ,在 SDS- PAGE电泳上得到一条新的蛋白表达带 ,分子质量为 2 0 ku.纯化后的蛋白能明显抑制 CAM的血管生长 .结论 成功构建了小鼠 endostatin c DNA的重组克隆p DH- Endo,并在大肠杆菌中获得高效表达 .在 CAM实验中表明纯化后的蛋白具有明显血管抑制作用 .

血红素加氧酶-2基因敲除对脑出血后损伤的保护作用(英文)

目的:观察血红素加氧酶2基因敲除对脑出血后损伤的保护作用。方法:应用血红素加氧酶2基因敲除小鼠,制备脑出血模型。利用MTT法测量出血区域细胞生存率,利用蛋白印记法检测出血区域脑组织氧化反应性蛋白及脂质氧化蛋白含量。结果:血红素加氧酶2基因敲除小鼠出血区域细胞生存率显著高于野生型小鼠,血红素加氧酶2基因敲除小鼠出血区域组织氧化反应性蛋白及脂质氧化蛋白含量显著低于野生型小鼠。结论:血红素加氧酶2参与了脑出血后氧化应激损伤,敲除血红素加氧酶2基因对脑出血损伤具有保护作用。

血红素氧合酶-2基因缺失对氧化应激性脑损伤的保护作用(英文)

目的探讨血红素氧合酶2基因缺失对血红素诱导氧化应激性脑损伤的保护作用。方法分别将6μl(8μmol/L)灭菌氯高铁血红素定向注入野生型小鼠和基因(HO2)敲除小鼠的纹状体内,72h后分别检测纹状体细胞生存率,蛋白和脂类的氧化作用。用蛋白质印迹法检测血红素氧合酶1,2(HO1)的表达。结果与野生型相比,基因(HO2)敲除小鼠纹状体内蛋白和脂类的氧化作用显著降低,而纹状体细胞的存活率显著增加;HO1的表达在两种小鼠注射前后没有明显差异。结论结果提示,血红素氧合酶2基因缺失对血红素诱导的氧化应激性脑损伤具有保护作用;选择性抑制神经元血红素氧合酶2基因的表达可减轻氧化应激性脑损伤。

血红素加氧酶-2 基因敲除对Fe^(2+)诱导的小鼠脑氧化应激损伤中基底节细胞的保护作用(英文)

目的:观察血红素加氧酶2 基因敲除对Fe2+诱导的脑氧化应激损伤的保护作用。方法:采用立体定向法注射10μl FeCl2(10 mmol/L)至血红素加氧酶2 基因敲除小鼠及野生型小鼠右侧纹状体,制备Fe2+诱导的脑氧化应激损伤模型。测量损伤24 h后损伤区域脑水肿程度。利用MTT法测量损伤72 h后细胞生存率。利用蛋白印迹法检测损伤72 h后细胞脑组织氧化反应性蛋白及脂质氧化蛋白含量。结果:血红素加氧酶2 基因敲除小鼠脑水肿程度显著低于野生型小鼠;损伤区域细胞生存率显著高于野生型小鼠;血红素加氧酶2 基因敲除小鼠损伤区域组织氧化反应性蛋白及脂质氧化蛋白含量显著低于野生型小鼠。结论:血红素加氧酶2参与了Fe2+诱导的脑氧化应激损伤,基因敲除血红素加氧酶2 对脑氧化应激损伤具有保护作用。

应用endostatin蛋白治疗裸鼠SHG44脑胶质瘤的实验

目的 克隆小鼠内皮抑素 (endostatin)基因 ,检测其表达蛋白生物学活性 ,应用该蛋白治疗裸鼠 SHG44脑胶质瘤 .方法 从小鼠胶原 c DNA用 PCR法克隆 endostatin基因 ,重组入 p UC19,测序后构建非融合表达载体 p DH- En-dostatin,使其在 DH5 α内经温度诱导表达 ,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性 .经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗其脑内胶质瘤 .结果 成功获得 endostatin基因 ,测序正确 .诱导表达蛋白 Mr为2 0× 10 3 ,具有抑制血管生成的活性 .该蛋白可抑制荷瘤裸鼠脑内胶质瘤生长 .结论 endostatin基因的表达和初步应用 ,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础 .

小鼠内皮抑素基因的克隆及序列测定

目的 获取小鼠内皮抑素 (endostatin)基因并进行序列测定 ,为今后研究其机制及应用创造条件 .方法 以小鼠肝脏总 RNA为模板 ,用 RT- PCR法从中扩增 endostatin基因 ,并将所得基因重组入 p UC19载体质粒 ,采用自动测序仪及荧光素标记引物 ,测定目的基因序列 .结果 从小鼠肝组织中成功扩增 endostatin基因 ,并成功克隆入 p U C19载体 .经酶切鉴定正确后 ,命名为 p UC- Endo.经测序证实所获基因序列与已知的 endostatin基因序列一致 .结论 成功构建小鼠 endo-statin基因的重组克隆 p U C- Endo,为今后利用

《内镜下经鼻蝶垂体瘤切除术后脑脊液漏的危险因素分析》点评

本研究详细分析了神经内镜下经鼻蝶垂体腺瘤切除术后脑脊液漏的危险因素,发现巨大腺瘤、术中脑脊液漏、肿瘤质韧是术后脑脊液漏的独立危险因素;并讨论了术后脑脊液漏可能的预防方法。研究结论对从事内镜颅底外科的医师有重要参考价值。术后脑脊液漏是影响内镜颅底外科发展的关键制约因素,也是内镜颅底外科医师成长过程中必须克服的难题。内镜下颅底修补的主要目的是在鼻腔、鼻窦与颅腔间形成疏水性屏障。颅底重建过程中常根据术中脑脊液漏的程度进行分级重建,采用多重加固、交叉强化、弱点加强等办法和化高流量漏为低流量漏的策略。

新型颅内支架Enterprise结合水解脱弹簧圈栓塞治疗颅内微小宽颈动脉瘤

目的总结应用新型颅内支架Enterprise结合水解脱弹簧圈栓塞治疗颅内微小宽颈动脉瘤的技术及疗效。方法6例颅内微小宽颈动脉瘤(直径<3mm,体/颈比<1.5)采用Enterprise支架结合水解脱弹簧圈栓塞,其中5例采用先放置支架覆盖动脉瘤颈再将微导管经支架网孔放入动脉瘤腔填塞弹簧圈进行栓塞,1例将微导管进入瘤腔后再释放支架进行弹簧圈栓塞。术后3～6个月进行临床随访。结果6例全部技术成功,支架均满意到位,载瘤动脉通畅,无手术并发症;动脉瘤完全闭塞4例,闭塞95%以上2例。术后患者均恢复良好,3～6个月临床随访无再出血及脑血栓形成。结论联合使用Enterprise支架和水解弹簧圈栓塞治疗颅内微小宽颈动脉瘤是一种安全有效的方法,但其长期疗效仍需进一步观察。

儿童去骨瓣减压术后早期颅骨成形术的疗效分析

目的 探讨儿童去骨瓣减压术后早期(3~6个月)颅骨成形术的效果。方法 回顾性分析2016年10月~2020年12月去骨瓣减压术后早期颅骨成形术治疗的16例儿童颅骨缺损的临床资料。结果 年龄2~13岁,平均6.4岁;1例血管畸形,15例为颅脑损伤;采用钛网10例,聚醚醚酮6例。术后随访8~48个月,平均25.06个月,切口均一期愈合;1例颅脑损伤术后钛网成形患儿,因摔倒致头颅再次外伤,使钛网变形、凹陷;其余15例患儿颅骨塑形满意,未出现头颅畸形,无切口感染、材料外露、皮下积液。结论 儿童去骨瓣减压术后早期颅骨成形术,可以有效保护儿童颅脑再次受损,同时有助于儿童心理及生理的康复。

老年胶质瘤预后相关因素分析

目的:探讨影响老年胶质瘤患者预后的相关因素。方法:回顾性分析2014年6月至2017年6月年龄大于60岁的老年胶质瘤患者的临床资料和分子病理学资料。分析性别、年龄、肿瘤大小、病理级别、手术切除程度、辅助治疗、手术前后卡氏量表(Karnofsky Performance Scale,KPS)评分及分子标志物异柠檬酸脱氢酶-1(isocitrate dehydrogenase-1,IDH-1)、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6-methylguanine DNA-transferase,MGMT)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、Ki-67的表达等与预后的相关性。结果:共有45例患者纳入研究,中位总生存时间(overall survival,OS)11.0个月,中位无进展生存时间(progression-free survival,PFS)6.0个月。单因素分析显示:性别、年龄、肿瘤大小、病理级别、术前KPS评分与OS和PFS无显著相关,手术全切、较高的术后KPS评分、术后接受辅助治疗、较低的Ki-67指数、MGMT未表达、EGFR未表达是预后较好的相关因素。多因素分析发现较高的术后KPS评分(P=0.019)、术后接受辅助治疗(P=0.024)以及MGMT未表达(P=0.026)均与患者中位OS和PFS较好的预后有显著相关。结论:老年胶质瘤预后相关因素有辅助治疗、术后KPS评分、分子标志物的表达等,但仍需多中心临床研究验证。

重型创伤性脑损伤救治多模态监测的研究进展

重型创伤性脑损伤(TBI)是世界范围内导致患者死亡和重度残疾的主要疾病。当前TBI救治的监测手段以体格检查、影像检查为主,其并不能及时、有效地发现、诊断、干预TBI的病理生理过程,缺乏明确的、个体化的治疗目标,不能改善患者的临床转归。颅内压监测、脑组织氧监测、脑微透析技术、脑电监测以及脑血流监测是监测TBI的重要方法。多模态监测是对这些孤立监测手段的整合,其能够从不同角度评估TBI程度,相应的目标导向治疗能够指导临床医师采取个体化、精准化的治疗方案,进而改善重型颅脑损伤患者的临床转归。

鞍结节脑膜瘤的手术治疗

为探讨鞍结节脑膜瘤的手术特点 ,作者对 1992年 5月～ 2 0 0 1年 9月的 2 9例鞍结节脑膜瘤病例进行了回顾性分析 ,其中男6例 ,女 2 3例 ,年龄 2 7～ 6 8岁 ,平均 4 6岁 ,肿瘤直径 2 0～ 8 5cm ,平均 3 4cm。首发症状为视力障碍 2 1例 (72 4 % )、头痛 7例 (2 4 1% )、癫痫 1例 (3 4 % )。 13例采用翼点或扩大的翼点入路 ,11例采用额下入路 ,3例采用额下眶上联合入路 ,2例采用双侧额下入路。全切 2 6例(89 7% ) (Simpson’sgradeⅠ) ,大部切除 3例 (10 3% ) (Simpson’sgradeII)。本组无手术死亡。作者认为对于鞍结节脑膜瘤的手术 ,除了要熟悉鞍区的解剖之外 ,还要有娴熟的显微外科技术 ,手术中要注意区分正常的结构和肿瘤的包膜 ,以保护周围的重要血管、视神经和下丘脑等结构。

改良翼点入路显微直视手术切除海绵窦肿瘤

为总结海绵窦肿瘤显微神经外科治疗的经验 ,作者对 1990年 1月～ 2 0 0 1年 6月收治的 2 6例海绵窦肿瘤病例进行了回顾性分析。手术均采用改良翼点入路 ,显微直视手术 ,其中 6例在神经导航辅助下进行。结果全切 19例 (73 1% ) ,部分切除 7例 (2 6 9% )。术后 14例 (5 3 8% )颅神经症状逐渐改善 ,6例 (2 3 1% )出现新的颅神经损害症状 ,无死亡。对部分切除的病人 ,术后加立体定向放射外科治疗。随访 8个月～ 12年 ,未见肿瘤复发。作者认为 ,熟悉海绵窦区的显微解剖并具备熟练的显微神经外科技术 ,可使该类手术取得良好效果。

AngiostatinK(1-3)裸DNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

探讨AngiostatinK( 1 3) [AK( 1 3) ]裸DNA治疗人脑胶质瘤的可行性和作用机制。用脂质体包埋法将AK( 1 3)基因的真核表达载体 pcDNA SAK( 1 3)注入裸鼠皮下SHG44人脑胶质瘤 ,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率 ,结合PCR、免疫组化、电镜、微血管和瘤体坏死区计数 ,确定抗血管生成基因治疗人脑胶质瘤的特点。AK( 1 3)裸DNA在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达 ,裸鼠皮下胶质瘤血管生成能力显著下降 ,肿瘤生长受到抑制 ,抑瘤率达 43%。本研究证明 ,AK( 1 3)裸DNA能抑制人脑胶质瘤生长 ,为非病毒载体介导的抗血管生成基因治疗的应用奠定了基础。

神经外科新进展

目的调研神经外科专业现状和发展动态,为确定军队神经外科研究方向提供参考。方法采用情报调研方法,检索近5年来部分国内外神经外科研究文献,分析全军神经外科领域基础研究与临床工作取得的新进展。结果"十一五"期间,军队神经外科在保持颅脑战、创伤研究等传统优势领域的同时,在脑与脊髓肿瘤、血管内治疗、功能性神经外科疾病等领域取得了巨大成效,共获得军队科技进步和医疗成果奖47项。人才梯队建设成果斐然。但是,神经外科专业在军内、军地、地区之间的发展还不很均衡,需要进一步加强技术合作。结论在今后一个时期,军队神经外科既要紧跟世界神经外科发展趋势,重视基础和临床研究,又要推进军事特色技术创新,在颅脑创伤救治、防护设备研制、非专科治疗等方面加强研究工作。

Journal Club教学方法在神经外科实习教学中的作用

目的探讨Journal Club(杂志沙龙)教学方法在神经外科实习教学中的组织方法和作用。方法在32名神经外科实习学生中开展Journal Club教学方法,以问卷调查形式评价成功应用该方法的组织要素和教学效果。结果调查显示临床经验丰富的专家参与、以实习中常见病例为基础的文献选择和多学科联合讨论是在实习教学中成功组织Journal Club的三大关键因素。实习学生通过参与该教学模式,提高了神经外科临床思维能力(支持率90.6%),获得了新进展跟踪能力(支持率87.5%),以及增强了对常见疾病的综合认识(支持率78.1%)。结论开展Journal Club教学有助于神经外科实习生知识的积累和能力的提升。

整合素β1与胶质瘤侵袭性的相关性研究

目的探讨整合素 β1在人脑胶质瘤细胞粘附和侵袭过程中的作用。方法用免疫组化SABC法 ,检测整合素 β1在人脑胶质瘤细胞SHG44中的表达 ;用细胞粘附实验检测其在SHG44细胞粘附中的作用。结果整合素β1可在人脑胶质瘤细胞SHG44中表达 ,抗整合素β1抗体可明显抑制人脑胶质瘤细胞SHG44对胶原蛋白I和胶原蛋白IV细胞外基质蛋白的粘附。结论整合素β1在人脑胶质瘤细胞的粘附和侵袭过程中必不可少 ,抑制其在人脑胶质瘤细胞中的表达,有助于阻止胶质瘤细胞的侵袭性生长。