“趣味引导,融合重构”推进兽医药理学教学创新改革

兽医药理学传统教学过程中,如何克服知识点繁复枯燥、思政元素孤立生硬、过程性评价参与度不高等挑战,是提高教学效果必须面对的一个问题。通过利用现代化信息平台,授课教师秉持“趣味引导,融合重构”的教学理念,通过多元化知识体系融合和探究式的课程设计,围绕学生的需求和兴趣切入教学,开展兽医药理学课程的教学改革。教师采用“5Q”教学法进行授课,引导学生主动探究和发现问题;加强课程思政建设,使学生在潜移默化中接受思想政治教育;通过对知识点进行模块化设计,形成“5M”课程内容体系;并通过构建四元教学评价体系,建立及时、精准的教学反馈机制。兽医药理学作为兽医学科的重要分支,其教学创新理念和实践具有较强的辐射推广价值。

基于网络药理学探究地锦草防治溃疡性结肠炎的作用机制

【目的】基于网络药理学并结合分子对接方法分析地锦草防治溃疡性结肠炎(UC)的活性成分和靶点,探究其潜在机制,进而保护动物肠道。【方法】利用TCMSP数据库获取地锦草的活性成分及对应药物靶点。通过GeneCards、DisGeNET、TTD、PharmGKB和DrugBank数据库获取疾病靶点。药物靶点和疾病靶点取交集获取潜在靶点,分别借助STRING和DAVID数据库对潜在靶点进行蛋白互作(PPI)分析及GO功能和KEGG通路富集分析。借助AutoDock 1.5.7软件进行分子对接验证,利用PyMOL软件将对接结果可视化。通过体内试验利用30只BALB/c小鼠制作葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC模型,设置对照组、模型组、地锦草低(5 mg/mL)、高(15 mg/mL)剂量组、美沙拉嗪组(52 mg/mL)。除对照组外,其余各组小鼠连续7 d自由饮用3%DSS诱导UC模型,各给药组小鼠每天灌胃1次,根据小鼠体重灌胃相应剂量的药物0.1 mL/10 g,对照组和模型组小鼠灌胃等体积无菌生理盐水,连续7 d,测其体重变化、疾病活动指数(DAI)评分和结肠长度,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL6)和IL10含量。【结果】地锦草主要活性成分有山柰酚、4’-5二羟基黄酮和鞣花酸等,对应的药物靶点256个,疾病靶点4265个,潜在靶点128个,核心靶点7个。GO功能富集涉及对活性氧的反应、对氧化应激的反应、炎症反应、膜筏、小窝、激酶调节剂活性等。KEGG信号通路涉及PI3K-Akt和TNF信号通路等。分子对接结果显示,山柰酚和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、4’,5-二羟基黄酮和PPARG、鞣花酸和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、鞣花酸和IL6具有较强结合潜力。体内试验结果表明,与对照组相比,模型组小鼠体重严重下降,严重的甚至出现水样血便,DAI评分极显著升高(P<0.01),结肠组织的黏膜层及黏膜下层出现大量炎性细胞浸润,甚至有小溃疡的出现,表明小鼠UC造模成功。与模型组相比,各给药组小鼠结肠组织黏膜层炎症细胞浸润减少,DAI评分极显著降低(P<0.01),结肠挛缩情况好转,TNF-α和IL6含量显著减少(P<0.05),IL10含量显著增加(P<0.05),抑制炎症发生。【结论】地锦草中的山柰酚、4’-5二羟基黄酮和鞣花酸等主要活性成分可能通过作用于AKT1、PPARG和IL6等核心靶点参与炎症相关信号通路及生物功能,抑制炎症,减轻肠道损伤,从而发挥防治UC的效用。

基于网络药理学与分子对接探究青蒿增强鹅免疫功能的作用机制

研究旨在基于网络药理学研究日粮中添加青蒿提高鹅免疫功能的作用机制。通过Symmap数据库对青蒿的有效成分与作用靶点进行收集,通过Gene Card数据库搜寻免疫抑制的相关靶点,对两者交集靶点进行蛋白质互作分析(Protein-Protein Interaction Networks,PPI)、基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)途径富集分析;同时进行动物试验,对鹅生长性能及免疫相关指标进行检测。结果显示:通过数据库搜集获得179个青蒿提高鹅免疫功能的关键靶点,蛋白质互作分析显示CASP3、EGFR、IL-6、CCND1、JUN、ESR1、MAPK1、MDM2、VEGFA、GSK3B等核心靶点可能在青蒿提高鹅免疫功能的过程中起到关键作用;GO与KEGG富集分析结果显示,青蒿可能参与环加氧酶途径、DNA损伤诱导的蛋白磷酸化、肥大细胞趋化性的正向调节、一氧化氮的生物合成过程,通过p53信号通路、细胞凋亡、C型凝集素受体信号通路、VEGF信号通路、细胞衰老Toll样受体信号通路、FOXO信号通路等多种信号通路发挥免疫调节作用;分子对接结果显示青蒿主要有效成分与免疫的相关靶点均有较好的对接活性;动物试验结果显示,日粮中添加青蒿可显著提高鹅的生长性能、血清IgA、IgG水平,降低IL-6含量。本试验条件下,日粮中添加青蒿可通过多靶点多途径起到提高机体免疫功能的作用,为青蒿作为鹅饲料添加剂的开发提供理论参考。

金银花提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为了观察金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法测定金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌注小鼠,然后再用金银花提取物灌注治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明:无论是体外还是体内,金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌和沙门杆菌的抑制作用最强,对大肠杆菌的抑制作用最弱;灌注金银花提取物后,可显著降低各致病菌致病后小鼠的死亡率。说明金银花提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。

早期断奶对仔猪空肠和回肠兴奋性氨基酸载体1表达的影响

本试验旨在研究仔猪出生后10~20 d,早期断奶仔猪小肠谷氨酸转运载体基因表达情况与哺乳仔猪的差异。试验分别从40头不同母猪的仔猪中各选出体重相近,10日龄的＂杜×长×大＂三元杂交仔猪1头,共40头仔猪,随机不配对分为2组,每组20头仔猪,对照组（哺乳组）为哺乳仔猪,随母猪喂养;试验组（断奶组）为断奶仔猪,隔离断奶饲养;试验期10 d。饲养结束,每组随机取12只仔猪,宰杀取空肠和回肠,测定谷氨酸转运载体兴奋性氨基酸转运载体1（EAAC1）蛋白质表达情况和游离氨基酸含量。结果显示,断奶显著降低了仔猪空肠和回肠EAAC1（57和73 ku）及其相关蛋白谷氨酸转运联合蛋白（GTRAP3-18）（50 ku）的蛋白质和mRNA表达量（P〈0.05）。断奶提高了仔猪空肠游离谷氨酸和总氨基酸含量,却降低了仔猪回肠游离谷氨酸和总氨基酸含量,差异显著（P〈0.05）。结果提示,早期断奶降低EAAC1和GTRAP3-18的蛋白质含量,这可能与早期断奶仔猪遭受营养谷氨酸缺乏导致的肠道氨基酸吸收转运障碍有关。

威灵仙痛风方治疗禽痛风的网络药理学分析及分子对接预测

为预测威灵仙痛风方治疗禽痛风的效果及探究其作用机制,试验采用网络药理学和分子对接的方法对威灵仙痛风方治疗禽痛风的靶点进行预测,并评估其准确性。结果表明:威灵仙复方有效成分158个,相应的作用靶点有66个;禽痛风的作用靶点1231个,二者互作潜在靶点共33个,其中核心靶点有STAT3、VEGFA、IL6、BCL2L1、IL10、PTGS2、MYC、IFNG和NFKBIA,富集到MAPK、Toll样受体、FoxO和VEGF信号通路等。威灵仙痛风方中的主要活性成分包括槲皮素、山奈酚和β-谷甾醇等,可能靶向作用于PTGS2、IL6、BCL2L1等靶点,经MAPK、Toll样受体等炎性信号通路发挥治疗效用。

核转录因子NF-E2相关因子基因缺失对高脂饲粮诱导非酒精性脂肪肝模型小鼠肝脏的影响

本试验旨在研究敲除核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)对高脂饲粮诱导小鼠肝脏氧化应激的影响。选择雄性野生型(WT)和Nrf2基因敲除(KO)ICR小鼠各20只,分别随机分成2组,每组各10只。1组WT和1组KO小鼠饲喂普通饲粮,为对照组,另2组饲喂高脂饲粮,为高脂组。试验期8周。结果显示,1)与对照组相比,WT和KO高脂组小鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)含量和谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性极显著升高(P<0.01),碱性磷酸酶(ALP)活性显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),总蛋白(TP)含量极显著降低(P<0.01),但甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL)含量变化不显著(P>0.05)。2)WT高脂组小鼠肝脏表现出小泡性脂肪变性,KO高脂组小鼠肝脏表现出严重的大泡性脂肪变性和温和的小泡性脂肪变性。3)与对照组相比,WT和KO高脂组小鼠肝脏中谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),而过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。与WT小鼠相比,KO高脂组小鼠肝脏中MDA含量增加49%,但GSH含量及SOD、POD活性变化不显著(P>0.05)。与WT对照组小鼠相比,KO高脂组小鼠肝脏中SOD、POD活性和MDA含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而GSH含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,高脂诱导Nrf2基因缺失小鼠发生较严重的脂肪变性,同时高脂饲粮诱导的非酒精性脂肪肝模型小鼠肝脏发生氧化应激。

复合益生菌制剂对离乳马鹿生长性能、粪便菌群及免疫球蛋白的影响

试验旨在研究复合益生菌制剂对离乳马鹿生长性能、粪便菌群及免疫球蛋白含量的影响。选用离乳10 d左右,胎次、体重相近,遗传组成基本相似,健康状况良好的马鹿10头,分别分为2组,每组5头。I组为对照组,采食基础饲粮;II组为试验组,基础饲粮中添加0.2%的复合益生菌制剂。每组自由采食,自由饮水,试验期60 d。结果显示:与对照组相比,饲喂复合益生菌可以显著提高马鹿的平均日增重(P<0.05);试验组马路粪便乳酸菌数量显著增加(P<0.05),大肠杆菌数量显著下降(P<0.05)。结果说明,复合益生菌制剂有促进离乳马鹿增重和维护肠道微生态平衡的作用。

黄芩提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为观察黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法,测定黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用黄芩提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明,无论在体外还是体内,黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌抑制性最强,对大肠杆菌和沙门氏菌抑制性较弱;且通过灌注黄芩提取物,显著降低了各致病菌致病后小鼠的死亡率。通过研究得出,黄芩提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。

连翘提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为观察连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法,测定连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用连翘提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明,无论是在体外还是在体内,连翘提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌抑制性最强,对沙门氏菌抑制性最弱;通过灌注连翘提取物,显著降低了各致病菌致病后小鼠的死亡率。通过研究得出以下结论,连翘提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。

笼养和散养蛋鸡小肠细菌菌群区系的聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳分析

本试验对笼养和散养蛋雏鸡和成年蛋鸡的小肠中细菌种类进行分析。取8周龄雏鸡和30周龄产蛋鸡整个小肠内容物,进行聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析,结合指纹克隆,研究鸡小肠细菌菌群的DNA指纹图谱。结果显示,共从蛋鸡的肠内容物中分离出39株细菌,有4个菌门,包括变形菌(2株,5.1%),拟杆菌(4株,10.2%),放线菌(5株,12.8%)和厚壁菌门(21株,53.8%),以及7个环境样品(不可培养细菌)。不同阶段蛋鸡不同肠段存在不同的细菌种类,在成年母鸡和自由放养鸡肠道中的细菌种类比雏鸡和笼养鸡丰富。所有分离细菌中,共分离得到10株乳酸菌,除陪伴粪球菌外,其余9株乳杆菌作为微生态制剂后备菌保存。结果提示,饲养模式和饲养阶段对蛋鸡肠道中细菌群落种类分布有很大影响,散养模式细菌群落更丰富,成年鸡较雏鸡肠道细菌多。

阿莫西林——克拉维酸钾注射用混悬剂在猪体内的药物动力学试验

阿莫西林（Amoxicillin），是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素。阿莫西林对β-内酰胺酶不稳定，克拉维酸为不可逆性β-内酰胺酶抑制剂，与阿莫西林联合，可保护阿莫西林免遭β-内酰胺酶水解，并使阿莫西林的抗菌作用显著增强和抗菌谱拓宽。阿莫西林一克拉维酸的复方制剂已在临床上广泛应用。本试验以猪为研究对象，用高效液相色谱法测定猪血浆中AMO和CLA的含量，旨在为兽医临床合理用药提供理论依据。

中草药对奶牛乳房炎致病菌的体外抑菌效果

选择常用6味中草药煎剂及中药复方制剂,采用试管二倍稀释法,对所分离的3种致病菌进行抑菌试验,并测定了最小抑菌浓度(M IC)和最小杀菌浓度(MBC)。体外抑菌试验结果表明:鱼腥草对大肠杆菌有较强的抑菌活性,M IC为62.5 g/L。野菊花、连翘、金银花对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,M IC分别为15.7、31.3和31.3 g/L。金银花、连翘对无乳链球菌有较强的抑菌活性,M IC为15.7和31.3 g/L。而复方中金银花+野菊花+连翘相对其它4个组方对3种致病菌都有较强的抑菌活性。

《兽医药理学》课程教学中《动物生理学》内容的引入与建议

《兽医药理学》和《动物生理学》是动物医学教学中重要的专业基础课程,这2门课程的知识体系同为一个"理"字贯穿始终,为了提高《兽医药理学》课程教学效果,以及增强学生对药物作用机理的理解,对《兽医药理学》课程教学中《动物生理学》内容的引入提出几点建议。

《兽医临床诊断学》课程教学中《兽医药理学》内容的引入与建议

《兽医临床诊断学》和《兽医药理学》是兽医学教学中两门重要的专业基础课程,其核心内容"诊断"与"治疗"在临床实践中紧密相连。为了提高《兽医临床诊断学》课程实践教学效果以及增强学生临床诊治疾病的能力,对《兽医临床诊断学》课程教学中《兽医药理学》内容的引入提出几点建议。