温和灸足三里穴对自然衰老大鼠肾组织p16 DNA甲基化的影响

目的 观察温和灸足三里穴对自然衰老大鼠肾组织p16 DNA甲基化的调控作用及潜在机制。方法 将Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为12月龄组、24月龄组和艾灸组。24月龄组和艾灸组制备自然衰老模型。12月龄组和24月龄组大鼠不予治疗,待相应时间取材;艾灸组采用温和灸足三里穴至24月龄取材。采用免疫荧光法观察3组大鼠肾组织衰老相关标志物β-半乳糖苷酶的表达。采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测3组大鼠肾组织衰老相关p16蛋白及甲基转移酶[甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)和甲基转移酶3b(DNA methyltransferase 3b,Dnmt3b)]蛋白的表达。采用定量反转录聚合酶连锁反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测3组大鼠肾组织端粒长度、肾组织衰老相关p16 mRNA及甲基转移酶(Dnmt3a和Dnmt3b) mRNA表达。采用重亚硫酸盐测序技术检测3组大鼠肾组织p16 DNA CpG岛甲基化程度。结果 与12月龄组比较,24月龄组大鼠肾组织β-半乳糖苷酶表达、端粒长度的损耗及衰老相关p16蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),24月龄组大鼠肾组织Dnmt3a和Dnmt3b蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05)。与24月龄组比较,艾灸组大鼠肾组织β-半乳糖苷酶表达、端粒长度的损耗及肾组织衰老相关p16蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05),艾灸组大鼠肾组织Dnmt3a和Dnmt3b蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论温和灸可通过影响自然衰老大鼠肾组织衰老相关甲基转移酶的表达调控p16 DNA CpG岛整体甲基化水平,降低肾组织p16蛋白及mRNA在衰老机体肾组织的表达,延缓肾组织衰老进程。

艾灸对老年人衰老症状及外周血单个核细胞细胞周期的影响

目的:探讨艾灸延缓衰老的作用及对细胞周期的影响。方法:将61名60～75岁老年人随机分为艾灸治疗组和衰老对照组,并另设正常青年人对照组。艾灸组以温和灸肾俞和关元穴,疗程3个月。采用积分表法观察艾灸对老年人衰老症状的变化情况,用流式细胞术检测老年人外周血单核细胞细胞周期变化。结果:艾灸组较衰老对照组衰老症状积分明显降低(P<0.01),综合疗效、主症有效率均明显升高(P<0.01);G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.01),PI指数显著升高(P<0.01)。结论:提示艾灸不仅可明显改善老年人衰老症状,且可能通过降低细胞周期G0/G1期细胞比例,升高PI指数,增加有丝分裂原的反应能力和合成DNA的能力,使细胞进入S期,从而发挥延缓细胞衰老的作用。

从细胞凋亡角度验证隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠环氧合酶2及前列腺素E_2的调节作用

背景:研究证实,艾灸有可能通过细胞因子调节环氧合酶2及前列腺素E2表达、影响细胞凋亡。目的:实验拟观察环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达及前列腺素E2的含量与溃疡性结肠炎的关系,探讨灸疗的影响作用并比较隔药灸和温和灸治疗作用的差异。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在上海中医药大学实验动物中心和国家中医药管理局针灸免疫实验室完成。材料:SPF级雄性SD大鼠40只,体质量(140±20)g,采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型。方法:40只大鼠随机数字表法分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组,每组10只。正常组:不做任何治疗。模型组:只作与各治疗组相同的抓取固定。温和灸组:选取天枢、气海穴悬灸,每次每穴灸10min。隔药灸组:选取天枢、气海穴隔药灸,每次每穴灸2壮。疗程:1次/d,共灸14次。主要观察指标:免疫组织化学法检测溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达;放射免疫法测定溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中前列腺素E2的含量。结果:纳入SD大鼠40只,造模过程有1只大鼠死亡,解剖见结肠明显扩张,未见穿孔,39只进入结果分析。模型组大鼠结肠组织环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量高于正常组(P<0.01);而Bax的表达低于正常大鼠(P<0.01)。经过灸治后,与模型组比较,隔药灸组和温和灸组环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量均显著降低(P<0.01);隔药灸组Bax的表达上调(P<0.05)。结论:灸疗干预可调节溃疡性结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶2、Bax、Bcl-2的表达并降低前列腺素E2的含量,隔药灸的作用优于温和灸。

丹参酸乙的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞增生的影响

目的:研究丹参酸乙(salvianolic acid B,SAB)的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞(hepatic stallate cells,HSC)增生周期的影响。 方法:采用原位灌注法消化大鼠肝脏,108 g·^(-1)nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞,分别以不同浓度的SAB或MDA/SAB处理细胞,~3H-TdR掺入法观察细胞的增生能力,流式细胞术分析细胞周期各时相变化及凋亡情况。 结果:1和10 μmol·L^(-1)SAB可显著抑制HSC的增生(2862±1234&2988±407 vs 4986±727,P<0.05,P<0.01),这种作用主要是抑制了细胞周期过程中G_1期向S期的过渡;1和10μmol·L^(-1)SAB均可抑制MDA刺激的HSC增生(3067±731&3042±321vs 4007±587,P<0.05,P<0.01);两组剂量的SAB均不促进HSC的凋亡。 结论:丹参酸乙可抑制体外培养HSC的增生,这种抑制作用与SAB的抗氧化作用有一定的关系。

艾灸对EAT大鼠甲状腺功能及其IL-17、IL-23表达影响的研究

目的:观察艾灸干预实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠的效应,以及对炎性细胞因子IL-17、IL-23及受体表达的影响,拟阐释艾灸干预EAT的作用机制。方法:将SD大鼠随机分成5组:正常组、模型组、优甲乐组、隔附子饼灸组和温和灸组。采用碘剂和猪甲状腺球蛋白联合免疫的方法建立EAT动物模型,艾灸和西药各干预30 d。观察甲状腺组织形态学、血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、IL-17、IL-23和IL-23R的浓度;甲状腺组织IL-17、IL-23和IL-23R mRNA表达。结果:隔附子饼灸、温和灸和优甲乐均能纠正EAT大鼠甲状腺的组织病理学改变。与正常组比较,模型组大鼠血清FT3下降(P<0.01),血清TSH、TGAb、TPOAb浓度升高(P<0.05),血清IL-17、IL-23和IL-23R蛋白的浓度升高(P<0.05);甲状腺组织IL-17、IL-23和IL-23R mRNA的表达上调(P<0.05)。与模型组比较,优甲乐组血清FT3升高(P<0.01),TPOAb、IL-23R浓度降低(P<0.05);隔附子饼灸组大鼠血清FT3升高(P<0.01),血清TSH、TGAb、TPOAb、IL-17、IL-23和IL-23R浓度降低(P<0.05),甲状腺组织IL-17、IL-23和IL-23R mRNA表达下降(P<0.05);温和灸组大鼠血清TSH、TGAb、TPOAb、IL-17和IL-23浓度降低(P<0.05);血清IL-17、IL-23的浓度,甲状腺组织IL-17、IL-23、IL-23R mRNA的表达水平和血清中TGAb的浓度呈正相关关系;血清中IL-17、IL-23、IL-23R的浓度,甲状腺组织中IL-17 mRNA的表达水平与血清中TPOAb的浓度呈正相关关系。结论:隔附子饼灸、温和灸均能有效纠正EAT大鼠甲状腺组织病理学的变化,改善EAT大鼠的甲状腺功能,降低甲状腺自身抗体水平,可能与调节炎性细胞因子IL-17和IL-23的表达有关。

艾灸对亚急性衰老大鼠胸腺CD4^+T细胞IL-2、IL-2Rα、NF-κB和I-κB蛋白表达的影响

目的:通过观察IL-2及相关受体蛋白水平的变化情况,探讨艾灸对亚急性衰老大鼠胸腺CD4+T细胞的影响。方法:采用D-半乳糖致亚急性衰老大鼠模型。24只清洁级雄性SD大鼠随机分为:正常组,模型组和艾灸组。艾灸组温和灸双侧肾俞穴5 min/次,共计40 d。采用免疫磁珠法分离胸腺CD4+T细胞,并再用Western Blot方法检测各组大鼠胸腺CD4+T细胞IL-2、IL-2Rα、NF-κB和I-κB的蛋白表达量。结果:模型组大鼠胸腺CD4+T细胞中IL-2、IL-2Rα、NF-κB、I-κB蛋白的表达量较正常组降低,差异有统计学意义(P<0.05);艾灸组大鼠胸腺CD4+T细胞中IL-2、IL-2Rα、NF-κB、I-κB蛋白表达量升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:艾灸肾俞穴可上调胸腺CD4+T细胞IL-2、IL-2Rα、NF-κB、I-κB的表达。

隔药饼灸治疗脾肾阳虚型桥本甲状腺炎的疗效观察

目的观察隔药饼灸治疗脾肾阳虚型桥本甲状腺炎(HT)患者的临床疗效及其对患者情绪的影响。方法将62例脾肾阳虚型HT患者随机分为治疗组和对照组,每组31例。对照组采用常规药物治疗,治疗组在对照组基础上采用隔药饼灸治疗。观察两组治疗前后甲状腺功能各项指标[血清促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)]、中医证候量表评分(TCMSSS)、医院焦虑抑郁量表评分(HADS)及血浆转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-17(IL-17)浓度的变化情况,并比较两组临床疗效。结果治疗组总有效率为62.1%,对照组为21.4%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后TCMSSS评分、HADS-A评分、HADS-D评分及血浆中TGF-β和IL-17浓度与同组治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。两组治疗前后TCMSSS评分差值比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组甲状腺功能正常患者治疗前后TCMSSS评分差值比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组甲减患者治疗后HADS-A评分和HADS-D评分与同组治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。治疗组甲状腺功能正常患者治疗后TSH浓度与同组治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论隔药饼灸治疗脾肾阳虚型HT疗效确切,可改善HT伴甲减患者的焦虑、抑郁情绪,调节炎症因子水平。

艾灸对衰老大鼠肝组织细胞周期及PKC、PP2A表达的影响

目的研究艾灸对衰老大鼠组织细胞周期及PKC、PP2A表达的影响。方法以注射D-半乳糖溶液法制备亚急性衰老大鼠模型,采用艾灸"肾俞"穴进行治疗,并与模型组和正常组进行对照,以流式细胞术和免疫组化法观察各组大鼠肝脏组织细胞周期及PKC、PP2A表达的变化。结果与正常组相比,亚急性衰老模型大鼠组织PKC、PP2A阳性表达面积和阳性表达光密度均明显降低(均P<0.01);艾灸组PKC阳性表达面积和阳性表达光密度均较亚急性模型组显著增高(P<0.05,P<0.01),PP2A阳性表达面积与阳性表达光密度也有显著增高(P<0.01,P<0.05)。亚急性衰老模型大鼠组织G0/G1期细胞比例较正常组升高(P<0.05),PI指数降低(P<0.05);而艾灸组G0/G1期细胞比例则较模型组有所下降,PI指数有所升高,但两组间未见统计学差异(P>0.05)。结论艾灸可能是通过调节衰老机体组织PKC、PP2A活性,降低G0/G1期细胞比例,升高PI指数,从而达到延缓衰老的目的。

静脉输液拔针后不同按压方法的效果观察

目的:了解患者对3种按压方法的认同程度,探讨拔针后合适有效的按压方法。方法:采用自身对照的方法,对168例病人,506次静脉输液拔针后,同一病人分别采用4指按压法、大鱼际按压法及大拇指按压法按压,按压时间平均为4 min,按压力度中等,观察皮肤出血和/或皮下淤血的发生情况。结果:4指按压法与大鱼际按压法及大拇指按压法比较有显著性差异(P<0.01)。结论:静脉输液拔针后采用4指按压法能有效减少出血的发生,病人依从度高。

丹参酸乙对大鼠肝星状细胞细胞内氧化水平及增殖细胞核抗原的影响

目的:研究丹参酸乙(SA-B)对大鼠肝星状细胞细胞内氧化水平及增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。方法:原位灌注法分离正常大鼠肝星状细胞,丹参酸乙直接添加于原代培养的肝星状细胞;2`7`-二氟二氢荧光素(DCFH)掺入反映细胞内氧化程度,Western blot蛋白印迹法检测PCNA含量。结果:1μm和10μm丹参酸乙可减低活化的以及经丙二醛(MDA)刺激后的肝星状细胞的细胞内氧化程度。1μm和10μm丹参酸乙都可抑制活化的以及经MDA刺激后的肝星状细胞的PCNA表达量。结论:丹参酸乙可降低细胞内氧化程度,抑制MDA刺激后肝星状细胞PCNA的表达,丹参酸乙的抗氧化和抗增殖这两方面的作用可能有一定的联系。

基于生命周期成本分析的多层宿舍经济评价

生命周期成本分析是一种确定方案最佳成本效果的方法。为辅助高校建设项目投资决策,采用生命周期成本分析方法,确定了两种结构形式的宿舍楼的生命周期成本,结果表明:在设计使用寿命内,使用年限越长,年生命周期费用越小;就多层宿舍楼而言,框架结构较之混合结构并未显示出经济性。

建设项目全寿命周期成本分析与控制研究

建设项目全寿命周期成本是现在建筑造价中必须计算的项目之一。项目全寿命周期指工程项目中对工程的设计、开发和建造及后期的使用维修、报废等过程产生的费用。准确的对建设项目的全寿命周期成本进行分析，可以提高工程建筑过程中的管理水平。

浅析房屋建筑工程项目管理问题及措施

对于房屋建筑工程来说,其施工质量与人们的生活密不可分、息息相关。因而,分析影响施工质量的因素并提出合理的措施具有重要的现实及理论意义。鉴于此,引出本文。

针灸对大鼠溃疡性结肠炎结肠上皮细胞凋亡影响的实验研究

目的:探讨针灸调节大鼠溃疡性结肠炎结肠上皮细胞凋亡的作用机制。方法:在建立大鼠溃疡性结肠炎模型的基础上,随机分为模型组、隔药灸组、电针组,并设立正常组,隔药灸组和电针组选取"气海"穴、"天枢"穴,分别进行隔药灸与电针治疗。疗程结束后,剖取动物结肠组织,应用电镜、流式细胞仪观察各组大鼠结肠组织结构的改变及上皮细胞凋亡的变化。结果:与正常组大鼠比较,溃疡性结肠炎模型大鼠在结肠组织病理学改变的同对上皮细胞凋亡大量增加,电针、隔药灸可使上皮细胞凋亡得到显著地抑制。结论:电针、隔药灸治疗溃疡性结肠炎的主要作用机制之一是调节溃疡性结肠炎结肠上皮细胞的凋亡异常。

从单一到多元:温针灸的临床应用进展

温针灸是将针刺和艾灸结合在一起的方法,具有行气活血、温通经络、祛湿逐寒等作用。温针灸被广泛应用于临床,其干预手法从单一到多元化发展,通过总结温针灸临床应用进展概况,以期推动温针灸的传承与创新,促进温针灸的推广。采用检索10年来中国知网、维普两大数据库,以"温针、温针灸、临床应用"作为主题词检索,从140篇相关文献中筛选出76篇作回顾性综述。结果发现2008年(含)以前温针灸临床应用32篇,主要采用单纯温针灸作干预方法(62.5%);2008年以后共44篇,单纯温针灸的文献只有17篇(38.64%),已从单纯温针灸为主导模式,转为采用多元化的干预方法,有的配合中药或/和西药,有的配合手法或/和康复训练等。

艾灸大鼠天枢、气海穴对结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的调控作用

目的:研究显示,胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1与溃疡性结肠炎患者肠纤维化的形成关系密切。实验通过艾灸对大鼠结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的影响,探索艾灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化机制。方法:实验于2004-05/2005-07在上海中医药大学实验动物室和国家中医药管理局针灸免疫三级实验室完成。①实验材料:SPF级雄性SD大鼠75只,体质量200g左右。②实验分组及处理:采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型,随机将大鼠分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组和西药组。隔药灸组、温和灸组选取天枢、气海穴分别进行隔药灸、温和灸治疗,西药组柳氮磺胺吡啶溶液灌胃治疗,模型组和正常组仅固定不做治疗。治疗结束后麻醉下处死大鼠,剖取结肠组织,分离并培养结肠成纤维细胞。③实验评估:用酶联免疫吸附法检测各组大鼠成纤维细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1含量。结果:每组取8只进入结果分析。①造模大鼠结肠黏膜缺损,溃疡形成,胶原纤维增生,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维排列紊乱,数量增多;肉芽组织、纤维组织增生。②模型组大鼠结肠成纤维细胞大量分泌转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ;与模型组比较,隔药饼灸、温和灸组大鼠转化生长因子β1分泌量减少(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸、温和灸和西药组大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ分泌量减少(P均<0.01)。结论:艾灸大鼠天枢、气海穴能抑制大鼠结肠成纤维细胞分泌促细胞外基质细胞因子胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1,减少细胞外基质的积聚,达到防治肠纤维化的作用。

针灸防治组织纤维化的思考

组织纤维化是多种疾病发展过程中共同的病理改变 ,它对于疾病的发生、发展、转归及预后具有重要的影响。对针灸防治以组织纤维化为主要病理变化的相关疾病研究表明 ,针灸防治组织纤维化具有良好潜力 ,同时也存在着重视不足、研究不够深入等问题。通过对近年来针灸防治组织纤维化现状的分析 ,笔者认为应充分认识组织纤维化在疾病发病中的重要作用 ,加强组织纤维化病因病机的研究和针灸防治纤维化的研究 ,筛选有效穴位与疗法。

不同储存年份的艾条燃烧生成自由基的ESR波谱研究

目的:研究艾条燃烧生成自由基种类及其含量随储存期的变化,从自由基角度探讨新、陈艾的安全性。方法:采用电子自旋共振(ESR)技术,对艾绒产地为湖北蕲春的1年、3年、5年储存期的艾条燃烧生成的自由基进行检测和分析。结果:1)储存期分别为1年、3年、5年的艾条燃烧产生的焦油和烟气中均检测到自由基信号,检测到的焦油自由基以醌/半醌自由基为主,气相自由基包括烷基、烷氧自由基和NO自由基。2)储存期为3年、5年的艾条燃烧生成醌/半醌自由基、烷类和烷氧自由基以及NO自由基的信号均低于1年艾条(P<0.05,P<0.01),而储存期为3年和5年的艾条燃烧生成的醌/半醌自由基、烷类和烷氧自由基信号比较无统计学意义(P>0.05),5年艾条燃烧生成的NO自由基信号强度低于3年艾条(P<0.01)。结论:艾条燃烧生成的自由基主要为醌/半醌自由基、烷基和烷氧自由基以及NO自由基,储存期为3年和5年艾条燃烧生成的上述自由基均少于1年艾条;艾烟中自由基的检测有可能成为新陈艾鉴别和艾灸安全性评价的重要依据。

隔药灸治疗溃疡性结肠炎的临床研究

目的观察隔药灸、隔麸灸对溃疡性结肠炎(UC)患者症状的改善作用和对结肠黏膜TNF-α及其受体的影响。方法将67例UC患者随机分为隔药灸组(35例)和隔麸灸组(32例),对比观察两组患者症状的改善作用;并采用免疫组织化学法观察两组结肠黏膜TNF-α及其受体的变化。结果隔药灸组在腹泻、矢气、神疲乏力、里急后重、腰酸症状的改善方面优于隔麸灸组;隔药灸组结肠黏膜TNF-α、TNF-αR1、TNF-αR2的表达均较治疗前显著下降,隔麸灸组仅见TNF-αR1较治疗前显著下降。结论艾灸对UC患者各项症状均有较好的改善作用,在腹泻、矢气等部分症状的改善方面隔药灸优于隔麸灸;隔药灸能够下调结肠黏膜TNF-α、TNF-αR1、TNF-αR2的表达,隔麸灸仅能下调TNF-αR1的表达。

艾灸增强溃疡性结肠炎大鼠穴区HSP72和IL-6的表达

目的:通过观察艾灸对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠穴区HSP72、IL-6表达,探讨艾灸后穴区HSP72和IL-6的表达是否有变化,如果艾灸后其表达有变化,这种变化与艾灸的刺激量之间是否相关。方法:采用免疫学方法加局部刺激制备实验性UC大鼠模型,确定造模成功后,随机分模型组,艾灸A组,艾灸B组,艾灸C组,每组8只,选取天枢穴施以不同灸量的麦粒灸治疗并设立正常对照组。治疗结束后,HE染色观察结肠病变区及免疫组化染色法观察天枢穴区HSP72和IL-6的表达。结果:(1)与正常组比较,模型组大鼠结肠病理变化明显;艾灸治疗后,大鼠结肠病理变化明显改善。(2)造模后,模型组穴区HSP72和IL-6表达降低,与正常组比较,模型组阳性目标总面积具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(3)艾灸治疗后,穴区HSP72和IL-6表达增强。阳性目标总面积:与模型组比较,艾灸A组、艾灸B组穴区HSP72表达具有统计学意义(P<0.01);各艾灸组穴区IL-6表达具有统计学意义(P<0.01)。阳性目标积分光密度:与模型组比较,艾灸B组穴区HSP72表达具有统计学意义(P<0.01);艾灸A组、艾灸B组穴区IL-6表达具有统计学意义(P<0.01)。(4)不同灸量组间,穴区HSP72和IL-6表达呈现不同程度增强。结论:麦粒灸可改善UC大鼠结肠病理变化,增加穴区HSP72和IL-6的表达,不同灸量具有不同治疗效果。