结肠癌组织中Cyr61和HPA-1的表达水平及其在侵袭转移中的作用

目的:检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白、乙酰肝素酶(HPA-1)蛋白及Cyr61基因、HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法:用western blot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA-1的蛋白表达水平,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测结肠癌Cyr61和HPA-1的基因表达水平,分析二者与结肠癌的临床病理特征的关系。结果:结肠癌中Cyr61蛋白及HPA-1蛋白的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001);结肠癌中Cyr61 mRNA及HPA-1 mRNA的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001)。Cyr61蛋白及基因和HPA-1蛋白及基因表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期等相关(P均<0.05)。结论:Cyr61蛋白、HPA-1蛋白及Cyr61 mRNA、HPA-1 mRNA在结肠癌组织中呈高表达,可促进结肠癌的侵袭转移。

塞来昔布联合顺铂对SGC-7901人胃癌细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合顺铂对SGC-7901人胃癌细胞生长、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法:终浓度为100、200及300μmol/L的塞来昔布作用于SGC-7901人胃癌细胞24h后加入顺铂(2.0μg/mL),采用MTT比色法测定细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及Bcl-2表达水平。结果:不同浓度的塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞均有抑制作用,抑制率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞学检测到凋亡峰,细胞阻滞于G0/G1期。同时伴随Bcl-2表达水平下降,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,且以上抑制作用与顺铂具有协同作用。结论:塞来昔布能促进顺铂诱导胃癌细胞凋亡,进而抑制胃癌细胞的增殖,这可能是COX-2抑制剂抗肿瘤的机制之一。

胃癌患者中hTERT启动子及外显子区域基因多态性的研究

目的:探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)基因rs2853676和rs2853677位点单核苷酸多态性与胃癌遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对297例胃癌患者、105例萎缩性胃炎患者及402例非萎缩性胃炎患者进行基因多态性分析,采用病理学诊断和13C尿素酶呼气试验(13C-UBT)检测幽门螺杆菌(Hp)感染情况。结果:rs2853676位点胃癌组AA基因型频率显著高于对照组(15.2%vs 6.5%),AA基因型携带者患胃癌风险增加2.47倍(95%CI 1.46-4.16);对照组、萎缩性胃炎组、胃癌组HP感染率分别为40.3%、64.8%、56.9%,与对照组相比,萎缩性胃炎组及胃癌组Hp感染率明显增加,差异有统计学意义(P均<0.01),OR值分别为2.73(95%CI 1.74-4.26)、1.96(95%CI 1.44-2.67),经Logistic回归分析发现,Hp感染与基因突变无明显交互作用;rs2853677位点CC、TC、TT基因型频率在对照组、萎缩性胃炎组及胃癌组分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:hTERT基因rs2853676基因多态性与胃癌遗传易感性有关,其增加胃癌风险与Hp感染可能无关。

SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测结直肠癌中Tiam-1和HPA-1基因的表达

目的:检测Tiam-1基因和HPA-1基因在结直肠癌组织中的表达水平,探讨两者与结直肠癌侵袭转移及预后的关系。方法:选取2009年8月-2010年1月我院行手术治疗的结直肠癌患者53例。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Tiam-1 mRNA及HPA-1 mRNA在结直肠癌组织、癌旁组织(距癌2cm)及远离结直肠癌的手术切缘正常组织中(距癌5cm以上)的表达水平,并分析两者与结直肠癌临床病理参数的关系。结果:HPA-1 mRNA和Tiam-1 mRNA在结直肠癌中的表达水平(35.87±12.30,40.79±9.32)显著高于癌旁组织(13.13±6.71,12.39±5.38)和正常组织(4.06±3.55,6.09±4.86,P均<0.05),癌旁组织中二者的表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Tiam-1和HPA-1的基因表达水平在肿瘤的高/中分化和低分化之间,T1～T2和T3～T4之间,有淋巴结转移和无淋巴结转移之间、有血行转移和无血行转移之间及Ⅰ～Ⅱ和Ⅲ～Ⅳ期之间的差异均有统计学意义(P均<0.05)。Spearman等级相关分析证明了Tiam-1与HPA-1的表达呈正相关趋势(OR=0.46,P=0.048)。结论:Tiam-1 mRNA和HPA-1 mRNA在结肠癌组织中呈高表达,且二者的表达增强可促进结肠癌的侵袭转移,联合检测Syndecan-1及HPA-1对于指导结肠癌临床治疗及判断预后有重要价值。

结肠癌易感性与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的关系

目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因外显子49位点及启动子1661位点单核苷酸多态性(SNP)及临床病理参数与青岛地区人群结肠癌的发病的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态分析(PCR-RFLP)检测来自青岛地区人群结肠癌患者及对照组中位CT-LA-4+49A/G,-1661A/G基因多态性的分布,并研究多态性与结肠癌临床病理参数的关系。结果:1)CT-LA-4+49A/G:与AA基因型携带者相比,AG及GG基因型人群罹患结肠癌的风险都显著增加(P=0.00),携带GG基因型罹患结肠癌的风险明显增加5.12倍,且男性、吸烟结肠癌患者携带AG及GG基因型明显增加;2)CTLA-4-1661A/G:以AA基因型为对照,AG+GG基因型携带者的患病风险显著增高,为对照组的2.50倍(P=0.001),多态性与结肠癌患者的性别、年龄、肿瘤分化程度及TNM分期无相关性。结论:CTAL-4+49A/G及-1661A/G基因多态性与结肠癌的遗传易感性相关,性别、吸烟与否也是影响因素。

MiR-146a与胃癌组织TAMs的相关性研究

目的:通过检测胃癌组织内肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)中MiR-146a的表达,探讨MiR-146a对TAMs的影响。方法:采用RT-PCR法分别检测BALB/c小鼠BGC-823移植瘤和腹腔中TAMs、胃癌患者肿瘤组织及外周血单核细胞中MiR-146a的表达量;转染MiR-146amimics的巨噬细胞与BGC-823细胞混合接种于小鼠,观察TAMs中MiR-146a的表达对肿瘤生长的影响。结果:1)小鼠BGC-823移植瘤TAMs中MiR-146a表达量显著降低,MiR-146amimics能明显抑制小鼠BGC-823移植瘤的生长。2)人胃癌组织TAMs中MiR-146a表达水平越低,肿瘤分化程度越差,肿瘤体积越大;与年龄、性别、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及远处转移无关(P>0.05)。结论:MiR-146a作为抑癌基因调节TAMs的功能,抑制胃癌的发生发展。

Cyr61和COX-2的表达与胃癌及其临床病理因素的关系

目的:探讨富含半胱氨酸61(Cyr61)、环氧合酶-2(COX-2)基因在胃癌组织中的差异表达及意义。方法:将标本分成3组,分别为胃癌组45例、癌旁组(距癌缘2 cm)45例和正常组(距癌缘5 cm以上)45例,采用RT-PCR方法检测Cyr61和COX-2的基因表达水平,并分析二者与胃癌临床病理因素的关系。结果:RT-PCR结果显示,胃癌组织中Cyr61 mRNA及COX-2 mRNA的表达水平高于癌旁组织和正常组织(P均<0.001),癌旁组织高于正常组织(P<0.05)。Cyr61和COX-2基因的表达与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期相关(P均<0.05),结论:Cyr61 mRNA、COX-2 mRNA在胃癌组织中呈高表达,联合检测Cyr61和COX-2对指导胃癌临床及判断预后有重要价值。

实时荧光定量检测胃癌患者MUC1基因表达及临床意义

目的:检测胃癌患者肿瘤组织及外周血MUC1mRNA的表达水平,探讨MUC1mRNA表达的临床意义。方法:利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测胃癌组织、正常组织及外周血中MUC1mRNA水平,分析其表达与肿瘤临床病理因素的关系。结果:胃癌患者肿瘤组织及外周血MUC1mRNA表达水平高于正常对照组(P<0.05),肿瘤组织MUC1mRNA的检出率与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、血行转移及临床分期有关(P<0.05),外周血MUC1mRNA的检出率与肿瘤的淋巴结转移、血行转移及临床分期有相关(P<0.05)。结论:检测胃癌组织及外周血MUC1mRNA的表达有助于早期发现胃癌及其微转移。

力尔凡联合顺铂对恶性腹腔积液临床疗效及端粒酶活性的影响

目的探讨力尔凡对恶性腹腔积液的临床治疗价值及对端粒酶活性的影响。方法48例恶性腹腔积液患者分为治疗组和对照组。治疗组(28例)采用力尔凡联合顺铂腹腔内注入,对照组(20例)单用顺铂腹腔内注入。分别在治疗前,治疗后1周、2周及3周,观察腹腔积液消失情况,评定疗效,采用半定量TRAP-银染法检测腹水细胞端粒酶活性。结果治疗组临床治疗有效率89.3%,对照组为60.0%(P<0.01),随着治疗时间的延长,端粒酶活性逐渐下降。结论力尔凡联合顺铂治疗恶性腹腔积液具有协同作用,其对端粒酶活性的抑制可能参与了以上机制,检测端粒酶活性可作为评价其疗效的敏感生物学指标。

端粒酶反义基因对紫杉醇诱导原代胃癌细胞凋亡的增敏作用

目的:探讨端粒酶反义寡核苷酸(PSASODN)与紫杉醇(TAXOL)联合应用对原代胃癌细胞凋亡作用的影响。方法:常规组织块培养法进行胃癌细胞原代纯化培养,取第3代对数生长期细胞进行实验。各组在培养24h及48h分别加入相同剂量的培养液;终浓度:3μM的PSASODN,3μM的NASODN,1.0μM的TAXOL。作用24h后再分别在PSASODN组及NASODN组加入终浓度为1.0μM的TAXOL;分别于培养后24,48,72,96h收集各组细胞。以台盼蓝拒染法计算各组细胞生长抑制率,观察PSASODN联合TAXOL对原代胃癌细胞生长的影响;流式细胞学观察细胞凋亡率及细胞周期变化。结果:终浓度为3μM的PSASODN作用于原代胃癌细胞24h后加入TAXOL1.0μM,能明显抑制胃癌细胞增殖,同时流式细胞学检测到凋亡峰,细胞受阻于G2/M期,作用48,72,96h的凋亡细胞百分率(34.8%,44.6%及50.6%)明显高于TAXOL组及NASODN+TAXOL组,差异有统计学意义(P<0.05),其作用呈时间依赖性及序列特异性。结论:以端粒酶RNA模板区为靶点的PSASODN可促进TAXOL诱导的胃癌细胞凋亡,对胃癌具有重要治疗价值。

经尿道气化和电切治疗前列腺增生症97例报告

我院自1997年开始,采用经尿道气化和电化治疗前列腺增生症97例,效果满意,报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 本组97例,年龄54～88岁,平均71.6岁。排尿困难史,1～20年。平均4.3年。直肠指诊前列腺Ⅰ度增生17例,Ⅱ度增生37例,Ⅲ度增生12例。术前留置导尿管28例,耻骨上膀胱造瘘5例,并发高血压病21例,冠心病16例,糖尿病19例。IPSS症状评分23.8。 1.2 手术方法 硬膜外麻醉或硬膜外麻醉加腰麻截石位,插入电切镜,持续冲洗下,观察膀胱、前列腺。耻骨上膀胱穿刺造瘘。气化电切先后气化前列腺中叶、侧叶。

TIPSS对门脉高压患者血浆液递物质及门脉系统血流动力学的影响

目的 经颈内静脉肝内门静脉内支架分流术。方法 运用彩色超声多普勒进行门脉系统血流动力学检测。结果 术后一周,门静脉、肠系膜上静脉、脾静脉血流速度分别加快达128％、65％及73％、血流量显著增加(P<0.01)肝外门体分流量由术前的1093ml/min降至264ml/min。TIPSS前后门脉血流量与胰高糖素与血管紧张素Ⅱ水平之比呈显著正相关。结论 TIPSS术后门脉系统血流动力学变化导致液递物质水平改变。扩血管物质与缩血管物质比例增大。

62例97指断指再植临床体会

随着显微外科技术的深入发展,不少医院都开展了断指再植术,并获得较高成活率。作者共进行断指再植62例97指,采用常规再植法,顺逆结合再植法、移位再植法及邻指血管、神经、肌腱转移等4种方法再植,共成活92指,失败5指。

长链非编码RNA MEG3在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)在胃癌组织中的表达及其与预后的关系,并进一步探讨MEG3与凋亡相关蛋白P53、鼠双微基因2(murine double minute 2,MDM2)的相关性。方法:收集2012年9月至2013年6月青岛大学附属青岛市市立医院55例行手术治疗的胃癌切除标本(包括癌组织及对应的远端正常组织),实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测胃癌组织中MEG3的表达,并分析其与临床病理参数的关系;应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测胃癌中P53、MDM2蛋白的表达水平,并分析其与MEG3的相关性。结果:lnc RNA MEG3在胃癌组织的相对表达水平(7.98±0.19)低于所对应的正常组织(9.47±0.18,P<0.05);在胃癌组织(r=-0.627,P<0.001)及远端正常组织(r=-0.807,P<0.001)中,P53与MDM2的表达呈负相关;P53与MEG3的表达呈正相关(r=0.591,P<0.05),MDM2与MEG3的表达呈负相关(r=-0.346,P<0.05);MEG3高表达者较低表达者中位生存期明显延长。结论:MEG3在胃癌发生发展过程中起抑癌基因的作用;MEG3与P53、MDM2在胃癌发生发展的生物学机制上有重要联系;检测MEG3的表达水平对胃癌预后有潜在价值。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与肝癌的易感性研究

目的本研究旨在探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)外显子49位点、启动子1661位点及1722位点单核苷酸多态性(SNP)与青岛地区人群乙肝肝癌的易感性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测来自青岛地区人群肝癌患者98例、非肝癌乙肝病毒感染组185例、健康对照组205例CTLA4基因型分布。结果 1以健康人群为对照组CTLA4外显子49位点及启动子1661位点基因型频率分布差异有统计学意义(P<0.05),启动子1722位点基因型分布频率差异无统计学意义(P>0.05),CTLA4+49位点AG、GG基因型携带者、CTLA4-1661位点AG+GG基因型携带者肝癌发病风险明显增高(O■值分别为2.48、5.22及2.51)。2以非肝癌乙肝感染者为对照组,49位点AG、GG基因型、1661位点AG+GG基因型显著增加肝癌的发生风险(O■值分别为2.48、4.60和2.13)。3以所有非肝癌者对照,49位点AG、GG基因型、1661位点AG+GG基因型显著增加肝癌的发生风险(O■值分别为2.48、4.91及2.32)。结论CTLA4外显子49位点、启动子1661位点基因多态性与肝癌易感性相关。

结肠癌中MEG3和GAS5的表达及与预后的关系

目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、生长特异抑制物5(GAS5)在结肠癌组织中的表达水平,分析GAS5与细胞周期蛋白P21、E2F1的相关性以探讨其作用机制。方法:收集2014年12月--2015年12月结肠癌患者手术切除标本(包括癌组织及对应的远端正常组织)。qRT-PCR检测63例结肠癌中MEG3、GAS5的表达,并分析其与临床病理参数的关系。Western blot法检测结肠癌中P21蛋白、E2F1蛋白的表达水平,并分析其与GAS5的相关性。结果:(1)结肠癌组织中MEG3的表达水平(7.76±1.38)显著低于正常组织(9.52±1.31),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)结肠癌组织中GAS5的表达水平(3.98±1.15)显著低于正常组织(6.21±1.33),差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在结肠癌组织(r=-0.627,P=0.000)及远端正常组织(r=-0.807,P=0.000)中,P21与E2F1的表达呈负相关。GAS5的相对表达水平与P21存在正相关(r=0.410,P=0.001),与E2F1存在负相关(r=-0.366,P=0.003)。(4)MEG3、GAS5高表达者较低表达者中位生存期明显延长(P<0.05)。结论:MEG3、GAS5在结肠癌中表达降低,表明其扮演抑癌基因的角色,P21和E2F1是GAS5发挥抑癌作用的重要靶点,检测MEG3、GAS5的表达水平对结肠癌预后有潜在价值。

hTERT基因多态性与胃癌易感性的研究

人端粒酶逆转录酶(hTERT)作为端粒酶的关键酶参与了包括胃癌在内的多种肿瘤的发生和发展,有研究发现该基因的多个单核苷酸多态性(SNP)位点与多种恶性肿瘤具有不同程度的相关性。目的:探讨hTERT基因rs2853676和rs2853677位点SNP与胃癌遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测297例胃癌、105例萎缩性胃炎和402例对照组患者rs2853676和rs2853677位点的基因多态性,采用病理学检查和^(13)C-尿素呼气试验检测幽门螺杆菌(Hp)感染。结果:胃癌组rs2853676位点AA基因型频率显著高于对照组(15.2%对6.5%,P=0.01),AA基因型携带者患胃癌的风险增加2.47倍(95%CI:1.46~4.16)。三组rs2853677位点CC、TC、TT基因型频率差异无统计学意义。与对照组相比,萎缩性胃炎组和胃癌组Hp感染率显著升高(64.8%、56.9%对40.3%,P均<0.01),OR值分别为2.73(95%CI:1.74~4.26)、1.96(95%CI:1.44~2.67)。Logistic回归分析发现,Hp感染与基因突变无明显交互作用。结论:hTERT基因rs2853676基因多态性与胃癌遗传易感性有关,其增加胃癌的风险与Hp感染可能无关。

高精度活塞直径测量的新进展

在总结了1999年及2003年两次活塞压力计基准国际比对活塞面积溯源测量经验的基础上,提出了一种实现活塞直径非接触测量的新方法.它是以一等量块作为标准,采用白光迈克耳逊干涉进行表面定位,激光干涉与移相干涉相结合实现活塞直径测量的方法,该方法的特点在于将显微移相干涉应用于尺寸测量,测量不确定度可达到10-6量级.该方法可以解决中国计量科学研究院建立并维护的覆盖250MPa以下压力量值所对应的活塞压力计基准的面积溯源问题,并为诸如航天航空、汽车制造、超精加工等对陀螺、高速旋转轴系等圆柱件尺寸、形状的测量提出高精度需求的行业提供了一种新的测量方法.

胃蛋白酶原及其亚群对胃癌早期诊断及预后判断的意义

目的探讨血清胃蛋白酶原（PG）及其亚群（PGⅠ、PGⅡ）与胃癌病人早期诊断及术后复发的关系。方法采用放射免疫分析法测定胃癌病人及正常对照组血清PGⅠ、PGⅡ含量，并对两者联合检测进行综合评价。结果胃癌病人血清PGⅠ含量及PGⅠ／PGⅡ比值明显低于正常对照组，早期胃癌即表现有显著性差异，而进展期胃癌则下降更显著（t’=11．84～14．95，t=15．82～40．27，P〈0．01）。胃癌病人根治性手术后血清PGⅠ及PGⅡ的含量明显下降，根治性全胃切除术后病人血清胃蛋白酶原含量很低，胃癌复发后PGⅠ及PGⅡ均明显升高（t’=4．60～15．51，t=4．72，P〈O．01）。结论监测PGⅠ及PGⅠ／PGⅡ比值变化对早期胃癌筛选有一定意义，可用于胃癌术后复发的监测。

TERT基因多态性及HP感染与胃癌遗传易感性的研究

目的:探讨端粒酶逆转录酶(TERT)基因rs2075786单核苷酸多态性(SNP)、幽门螺杆菌(HP)与胃癌遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析297例胃癌患者、105例萎缩性胃炎患者及402例非萎缩性胃炎患者的基因多态性,采用病理学诊断和13C尿素酶呼气试验(13C-UBT)检测幽门螺杆菌(Hp)感染。结果:rs2075786位点CC、TC、TT基因型频率在对照组与萎缩性胃炎组分布差异无统计学意义,胃癌组TT基因型频率显著高于对照组(25.6%vs12.5%),TT基因型携带者患胃癌风险增加2.23倍(95%CI:1.46～3.40),对照组、萎缩性胃炎组、胃癌组HP感染率分别为40.3%、64.8%、56.9%,差异有统计学意义(P<0.01),OR值分别为2.73(95%CI:1.74～4.26)、1.96(95%CI:1.44～2.67)。经Logistic回归分析,发现Hp感染与基因突变无明显交互作用。结论:TERT基因rs2075786基因多态性与胃癌遗传易感性有关。