基于网络药理学和细胞实验探讨补肾益气活血方对宫颈炎癌转化的作用

目的基于网络药理学和细胞实验探讨补肾益气活血方对宫颈炎癌转化的作用机制。方法通过TCMSP、Swiss Target Prediction和GeneCards数据库检索药物活性成分及作用靶点;通过GeneCards数据库检索炎症相关基因,GEO数据库获取宫颈癌相关数据集(GSE63678、GSE63514),差异分析后筛选炎癌转化基因作为疾病治疗靶标;采用Cytoscape软件构建药物-成分-疾病调控网络及筛选核心靶点;R语言进行KEGG和GO富集分析;对核心靶点及其对应成分进行分子对接验证。体外通过CCK-8、Griess法、Transwell实验、CBA实验、Western blot等验证补肾益气活血方的抗炎作用。结果共筛选得到117种活性成分,对应靶点1801个;炎癌转化基因189个;疾病与药物共同靶点82个。KEGG富集分析显示TNF、AGE-RAGE、Toll样受体信号通路等参与补肾益气活血方的抗炎癌转化作用。体外实验结果显示,补肾益气活血方可抑制LPS诱导的巨噬细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),促进其迁移(P<0.01),降低NO、IL-6、TNF-α、MCP-1水平(P<0.05,P<0.01),并抑制iNOS蛋白表达及PI3K、Akt蛋白的磷酸化(P<0.01),升高IL-10、IFN-γ、IL-12p70水平(P<0.05)。结论本研究揭示了补肾益气活血方通过多靶点、多途径发挥抗炎癌转化作用,为该方治疗宫颈炎癌转化提供理论及实验支持。

线粒体复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A对巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究线粒体复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A(AMA)对巨噬细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 AMA 0.0005,0.05,0.5,5和10 mg·L-1与RAW264.7巨噬细胞分别作用2,24和48 h后,WST-1法检测巨噬细胞增殖;AMA 0.0005,0.05和0.5 mg·L-1与RAW264.7作用2 h后,定量荧光法检测巨噬细胞产生活性氧水平、线粒体膜电位和对白色念珠菌的吞噬作用;Western蛋白印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)P38蛋白磷酸化水平;Griess法检测细胞培养上清一氧化氮含量。结果 AMA作用2 h对RAW264.7巨噬细胞增殖无明显影响,当作用时间延长到24和48 h后,可显著抑制RAW264.7巨噬细胞增殖(P<0.01)。AMA作用2 h可显著诱导RAW264.7巨噬细胞产生活性氧(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.01)。AMA可增强RAW264.7巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬功能,显著降低脂多糖诱导的巨噬细胞炎症介质一氧化氮的产生(P<0.01)。AMA显著诱导MAPK P38磷酸化(P<0.01)。结论 AMA能够诱导RAW264.7巨噬细胞线粒体损伤,增强巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬功用,降低脂多糖诱导的炎症反应,可能与激活MAPK P38磷酸化,进而激活MAPK信号转导通路有关。

金雀异黄素对LPS诱导白色念珠菌感染干预作用

摘要：采用荧光标记（CFSE）法观察脂多糖（LPS）和O～100μmol·L^-1的金雀异黄素与巨噬细胞RAW264．7共刺激后细胞增殖的变化；再用荧光定量法检测不同刺激下巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬作用，以探讨细菌内毒素LPS对巨噬细胞RAW264．7吞噬白色念珠菌的影响以及金雀异黄素的干预作用。结果表明：LPS单独刺激巨噬细胞20h后，对细胞增殖没有显著影响（P〉0．05），而33．3和100．0μmol·L^-1的金雀异黄素抑制巨噬细胞增殖，分别为对照组的65％和71％（P〈0．01）。LPS预刺激巨噬细胞24h后，在白色念珠菌感染15～45min内，巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬作用显著增强，而浓度为3．7～11．1μmol·L^-1的金雀异黄素能显著拮抗这一作用（P〈0．01）。说明LPS能够显著诱导巨噬细胞对活白色念珠菌吞噬作用，金雀异黄素在细菌和白色念珠菌共存条件下对宿主有保护作用。

金雀异黄素对脂多糖诱导的巨噬细胞MAPK和TLR信号转导通路的影响

目的研究金雀异黄素对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路和Toll样受体(TLR)通路的影响。方法用100 ng/mL脂多糖和金雀异黄素分别处理RAW264.7巨噬细胞不同时间后,采用Western blot法检测对MAPK信号通路蛋白磷酸化的影响;采用RT2 ProfilerTMPCR芯片检测金雀异黄素对LPS诱导的TLR信号转导通路基因表达的影响。结果 LPS能够显著诱导蛋白p38和p42/44磷酸化,激活MAPK信号通路,金雀异黄素能够加强其作用,同时,LPS能够显著诱导TLR信号转导通路的细胞因子基因表达,包括IFN-β、IL-10、IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、集落刺激因子2(CSF-2)、CSF-3、趋化因子CCL2和CXCL10、环氧合酶2(COX-2)、NF-κB1和IκB-α等,金雀异黄素能够显著降低这些上调基因的表达。结论金雀异黄素能够显著增强LPS激活的MAPK信号通路并抑制TLR信号通路的激活。

金雀异黄素对巨噬细胞RAW 264.7增殖、形态和细胞周期的影响

目的研究金雀异黄素对巨噬细胞RAW264.7增殖、细胞形态及细胞周期的影响,以探讨其对免疫系统的作用。方法以鼠源巨噬细胞系RAW264.7为细胞模型,将金雀异黄素用二甲基亚砜(DMSO)溶解,再用培养液稀释成所需终浓度为12.5、25、50、100μmol·L-1的4组及溶剂对照组(DMSO体积含量比低于0.1%)。通过WST-1细胞增殖实验、倒置相差显微镜及流式细胞仪分别检测金雀异黄素对巨噬细胞的增殖、细胞形态及细胞周期的影响。结果金雀异黄素对巨噬细胞的影响呈时间和剂量依赖关系。50～100μmol·L-1浓度的金雀异黄素作用巨噬细胞24h和48h后均能抑制细胞增殖,细胞增殖率分别为77%～81%、58%～73%(P<0.01);并能影响细胞形态改变,表现为细胞体积增大,并形成较长伪足。流式细胞结果显示,该浓度金雀异黄素可将巨噬细胞阻滞在S-G2/M期。结论金雀异黄素能抑制巨噬细胞细胞增殖,影响巨噬细胞形态,可能与干扰细胞周期有关。

《傅青主女科》从塞流澄源复旧论治血崩研习心得及应用

傅山治疗妇科疾病的理论集中展现在《傅青主女科》一书中,其辨证合理,说理简洁,方药精辟,临床应用广泛。本文就《傅青主女科》血崩病证现代研究进展,从塞流澄源复旧治疗血崩特点对中医经典学说的继承和阐释。现代中医妇科临床应用中参照傅山观念诊治时,需要结合西医现代化检查及妇科检查,排除宫颈疾病、子宫内膜疾病、妊娠等,对急性大出血患者,必要时可予以输血补液等抗休克治疗。如果考虑围绝经期功能失调性子宫出血,必要时行诊断性刮宫术,诊断术后病理可排除子宫内膜不良疾病后进行中医药治疗。

酪氨酸激酶Src在白色念珠菌感染中的机制研究

目的：探讨酪氨酸激酶Src在白色念珠菌感染中的作用及其机制。方法：通过Alarmarblue法检测不同浓度Src抑制剂PP2作用巨噬细胞不同时间点对细胞增殖的影响，通过荧光定量法检测巨噬细胞对FITC标记的白色念珠菌感染吞噬作用的影响．采用ELISA法检测PP2对巨噬细胞感染白色念珠菌产生细胞因子TNF-α和IL-10的影响。结果：0～33．3μmol／L的PP2作用细胞2h后对细胞生长无明显影响。11．1、33．3μmol／L的PP2作用细胞24h后细胞增殖率分别为78％、9％，48h后增殖率分别为54％、13％。11．1μmol／L的PP2仅在作用巨噬细胞48h后，抑制巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬，此作用可能与抑制增殖相关．然而，PP2能显著抑制白色念珠菌对巨噬细胞的免疫应答，表现为显著抑制细胞因子TNF—α和IL-10的产生．有效浓度为11．1～33．3μmol／L（P〈0．01）。结论：酪氨酸激酶Src在巨噬细胞识别白色念珠菌感染中起着重要作用，尤其在细胞因子免疫应答中作用更加显著。

基于网络药理学的金雀异黄素抗炎作用分子机制

利用TCMSP、CTD和Genecards等数据库获得金雀异黄素抗炎作用靶点。通过String数据库构建蛋白质与蛋白质相互作用关系,利用Cytoscape软件对其进行网络拓扑学分析,通过生物学信息注释数据库(DAVID)分析靶点基因功能及信号通路,以期探讨金雀异黄素抗炎作用的潜在靶标和药理机制。结果表明:金雀异黄素的抗炎作用核心靶点包括IL-6、TNF、JUN等,核心通路主要为凋亡通路、Toll样受体通路、P53信号通路、MAPK信号通路、NOD样受体信号通路等。这一研究说明金雀异黄素主要通过IL-6、TNF、JUN等靶点抑制TLR、MAPK、P53等多条信号转导通路而发挥抗炎作用。

脾酪氨酸激酶抑制剂对脂多糖诱导巨噬细胞炎症反应的影响及机制

目的研究脾酪氨酸激酶（Syk）在LtX3诱导的Toll样受体4（TLR4）信号转导通路的作用。方法用100ng／mL脂多糖和不同浓度Syk抑制剂分别处理RAW264．7巨噬细胞后，采用Alarmar blue方法检测细胞增殖；采用Griess试剂检测细胞培养液中NO的含量；Westernblot法检测诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）的蛋白表达；ELISA检测巨噬细胞中TNF-α和IL-6含量，RAW—Blue巨噬细胞检测核因子KB（NF—KB）和激活子蛋白-1（AP-1）的活化。结果Syk抑制剂作用于RAW264．7巨噬细胞24h，（0．5～14．0）μmol／L的Syk抑制剂对细胞增殖无明显影响，但当剂量超过1．5μmol／L时，能显著抑制LPS刺激的RAW264．7巨噬细胞NO的产生和iNOS的蛋白表达，抑制TNF-α和IL-6的产生（P〈0．01）以及NF—KB和AP-1的激活。结论Syk抑制剂降低LPS诱导的巨噬细胞分泌NO和iNOS的蛋白表达及TNF-α和IL-6的释放，通过下调Syk下游TLR4受体信号传导通路的蛋白，进而显著降低转录因子NF-KB和AP-1的激活有关。

基于关联规则挖掘的白细胞减少症方药规律分析

目的 通过关联规则的方法对治疗白细胞减少症的方药规律进行分析,为选取适当中药或中药有效成分进行药理机制研究提供重要指导.方法 以“白细胞减少”为关键词,从<中医临床诊疗文献数据库>中收集数据.对数据进行描述性分析,并通过关联规则分析探讨药物配伍.结果 中医治疗白细胞减少症前20种药物中,最多的是补虚药（17种）,其次为活血化瘀药（2种）、利水渗湿药（1种）;前三位分别为黄芪（416次）,当归（322次）,鸡血藤（258次）.由关联规则分析得出,前三种关联规则为：熟地黄、补骨脂、鸡血藤=>当归;熟地黄、补骨脂、鸡血藤、黄芪=>当归;党参、当归、熟地黄、白术=>黄芪.3~5味中药的频繁项集分别是：当归、鸡血藤、黄芪（3味药）;当归、补骨脂、鸡血藤、黄芪（4味药）;当归、甘草、补骨脂、鸡血藤、黄芪（5味药）.结论 根据用药频次统计及数据挖掘发现中医治疗白细胞减少症的基本思路是从补肝脾肾之虚来论治.

大数据时代中西医结合创新人才的培养

近年来,大数据已经成为全球学术界的新聚焦热点,为传统科研方法提供了新的视角。在新时代和新技术背景下,中医药的传承创新和发展更有赖于中医药创新人才的培养,其中研究生培养是创新人才培养的关键一环,数据素养又是创新人才的必备素养之一。然而,当前部分研究生存在着创新思维缺乏,科研实践能力、数据素养不足等问题,为此,结合大数据特点并针对中西医结合创新人才培养中存在的问题,提出对学生强化宣传和引导,培养其数据素养能力,加强学术知识的交流和积累,优化课程设置并加强对导师的培养等举措,以期提升高素质人才培养质量。

金雀异黄素免疫药理作用研究进展

本文综述了金雀异黄素的免疫药理作用,主要包括其对免疫系统的作用,抗炎作用,抗白色念珠菌感染及抗病毒感染的免疫药理学进展.

从数据挖掘角度看中医药治疗健忘与痴呆

目的:对中医治疗健忘或痴呆的中药方剂进行用药规律分析。方法:以痴呆或健忘为关健词,从中国方剂数据库中收集数据。除描述性分析外,采用购物篮分析来探讨药物配伍。购物篮分析部分采用SAS9.1forWindows中的EnterpriseMiner模块为挖掘工具。结果:中医治疗痴呆的药物共23类,其中占最多的是补虚药,共有50种,其次为其它类(47次)、清热药(25次)、解表药(18次)及收敛固涩药(14次)。用药频次前三位为补虚药(669次,29%)、安神药(340次,14.8%)和清热药(238次,10.3%)。补虚药的核心药物为人参、当归及熟地;安神药的核心药物为远志、酸枣仁及朱砂;清热药的核心药物为甘草、生地及黄连。二味药购物篮分析表得出,交易数最大的前七种关联规则为:茯苓==>远志;茯神==>远志;茯苓==>人参;石菖蒲==>远志;熟地==>远志;酸枣仁==>远志;酸枣仁==>人参。结论:根据用药频次统计及数据挖掘发现中医治疗健忘或痴呆,其基本思路是从心不藏神来论治,中医认为此等病症病理上属本虚标实,故尤重补虚药、安神药、清热药之使用。

分层次教学法的医学专业英语教学的SWOT分析

随着国际化进程加快,国际交流日益广泛,医学专业英语教育越来越受到重视,根据学生英语基础和能力水平以及未来的定位来指导医学专业英语教学具有必要性及可行性,笔者运用SWOT分析方法评价分层次教学法在医学专业英语教学中的优势、劣势、机遇和挑战。

2010-2019年国家自然科学基金中医学领域糖尿病相关项目申请与资助情况分析

对2010-2019年度国家自然科学基金中医学领域糖尿病相关项目申请与资助情况进行回顾和分析,介绍了面上、青年、地区科学基金项目的申请和资助项目数及资助率,并对资助病种进行总结。分析后发现,近10年国家自然科学基金资助的糖尿病相关项目具有围绕中医优势病种,面向临床需求,聚焦前沿科学问题,重视中医药防治糖尿病基础研究,推动多学科交叉,加强原始创新等特点;但也存在缺乏中医理论支撑,科学问题属性不明确等问题。

基于网络药理学的淫羊藿调节免疫耐受作用机制研究

通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查询淫羊藿主要活性化合物;利用CTD、GeneCards和HIT等数据库收集淫羊藿主要活性化合物的作用靶点和免疫耐受的疾病靶点;通过STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络,并利用Cytoscape软件对网络中的节点进行MCODE聚类分析和网络拓扑学分析;利用DAVID数据库分析靶点的基因功能及信号通路,以探讨淫羊藿调节免疫耐受的作用机制;通过MOE 2020软件将淫羊藿主要活性化合物与其调节免疫耐受的潜在核心作用靶点进行分子对接。结果表明:淫羊藿含有淫羊藿苷、谷甾醇和山奈酚等23个主要活性成分,淫羊藿调节免疫耐受的关键靶点包括IL-6、STAT3、CXCL8等,核心通路主要为IL-STAT信号通路、FoxO信号通路和JAK-STAT信号通路等。这一研究说明淫羊藿的淫羊藿苷、谷甾醇和山奈酚等主要活性成分可作用于IL-6、STAT3、CXCL8等靶点,激活或抑制IL-STAT等相关信号通路调节机体免疫耐受状态。

红藤-败酱草抗炎作用物质基础研究进展

红藤败酱散是国医大师夏桂成治疗急慢性盆腔炎的主方,以红藤和败酱草为主药,在临床上应用广泛。现代药理学研究表明,红藤和败酱草均具有抗感染、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等作用,然而机制尚未完全明确。本文将近年来文献进行梳理,对红藤-败酱草抗炎作用的物质基础和机制研究进行综述,以期为红藤-败酱草的物质基础研究和临床药物研发提供理论依据。

基于网络药理学的黄芪-鸡血藤配伍治疗白细胞减少症作用机制研究

目的采用网络药理学挖掘黄芪-鸡血藤药对配伍治疗白细胞减少症的作用靶点以及信号通路,探究其治疗白细胞减少症的物质基础和作用机制。方法从TCMSP数据库收集黄芪、鸡血藤的化学活性成分,通过Genecards和CTD数据库收集白细胞减少症的靶点以及所选中药成分作用的靶点。对白细胞减少症疾病靶点以及黄芪-鸡血藤药物靶点进行映射,构建作用靶点的PPI网络模型,筛选出排名前10的Hub基因;采用Cytoscape软件建立化合物-疾病靶点的网络模型,利用DAVID数据库进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析。结果确定黄芪-鸡血藤药对活性化合物治疗白细胞减少症靶点网络包含19个化合物,108个靶点,关键靶点涉及PIK3CA、IL-6、TNF、IL-2、IL-10、KRAS、EGFR、CSF2、IL-3和IL-2RB。涉及的主要KEGG通路富集分析确定信号通路包括细胞因子-细胞因子受体相互作用,药物代谢,造血细胞系,JAK-STAT信号通路等。结论黄芪-鸡血藤药对是通过调节PIK3CA、IL-6、TNF、IL-2、IL-10等基因,调控药物代谢,细胞因子-细胞因子受体相互作用,造血细胞系,JAK-STAT等信号通路,通过复杂网络模式治疗白细胞减少症。

从络论治疤痕子宫药物流产后阴道出血

临床中,剖宫产切口疤痕子宫妊娠经西医治疗后依然存在阴道流血和局部包块的案例,其基本病机为气虚血瘀,运用中药益气固冲、化瘀通络,可显著降低血人绒毛膜促性腺激素水平、促进包块尽快消散,减少不规则阴道流血.本案针对气虚血瘀的基本病机,以攻补兼施、从络论治为治疗大法,巧用药对和虫类药化瘀通络为治疗特色,疗效显著.

基于网络药理学方法的二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏作用机制研究

目的筛选二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏的主要活性成分,预测其作用的关键靶点及信号通路,建立多成分-多靶点-多通路的网络模型,从分子水平探讨其作用机制。方法通过多个数据库联用检索和文献挖掘,筛选二至丸的主要活性成分及其靶点,运用String平台对交集靶点进行蛋白-蛋白相互作用网络分析,利用Cytoscape3.6.1软件构建二至丸成分-靶点-通路网络,进行网络拓扑学分析,并通过生物学信息注释数据库DAVID分析靶点基因功能及信号通路。结果筛选出二至丸主要活性成分10个,主要包括木犀草素、槲皮素、芹菜素和山柰酚等,通过调节STAT3、IL6、TNF和IL4等92个靶点,调控血管内皮生长因子、孕激素介导的卵泡成熟等29条信号转导通路。结论二至丸主要通过影响血管功能、神经-内分泌、糖脂代谢及炎症和免疫,协同发挥止血、调节激素水平、免疫调节等作用。