崔治中(山东农业大学教授、博士生导师):选择净化的种源对于防控白血病尤为重要

崔治中教授在题为《我国鸡群病毒性肿瘤病的流行动态、鉴别诊断和防控》的报告中谈到，目前我国蛋鸡、三黄鸡和地方品系鸡中白血病特别是J亚群白血病是主要的肿瘤病。2005年以前，ALV—J在白羽肉鸡中流行情况很严重，后来得到基本控制：2013年以后，蛋鸡中发生的J亚群白血病也基本被控制，但马立克氏病肿瘤仍有发生．主要发生在小型个体户鸡场．最近一些大的蛋鸡场也提出MDV的问题。有些鸡场两种病毒的肿瘤同时存在。发生白血病或马立克氏病肿瘤的鸡场．往往同时有禽网状内皮增生病毒感染。

我国白羽肉用型鸡群中CAV、REV和REOV感染状况的血清学调查

为了解鸡传染性贫血病毒（CAV）、禽网状内皮增生病病毒（REV）和呼肠孤病毒（REOV）在我国白羽肉用型鸡中的感染状态，在2003—2004年，检测了来自5省市8个公司不同年龄鸡群血清样品中3种病毒抗体的存在状况。结果表明，在送检的75个鸡群中，对CAV、REV和REOV呈现抗体阳性的鸡群分别有64个（85．3％）、36个（48％）和74个（96％）。在总共检测的1764份血清样品中，对这3种病毒的平均抗体阳性率分别为51．4％、9．8％和75．1％。在1日龄雏鸡，对CAV和REOV的平均母源抗体阳性率可达100％和81．1％，但对REV只有7．4％。抗体阳性率随年龄变化的动态分析表明，对REV和REOV的母源抗体在出壳后2～3周内消失，而对CAV的母源抗体则可持续3～4周。对CAV和REOV的抗体从5周龄起再次出现，到20周龄时，所有送检鸡群全部阳性，平均阳性率在90％以上。有近一半送检鸡群对REV呈现抗体阳性，抗体阳性率普遍较低，即使在达到开产年龄后，仍还有很高比例鸡为抗体阴性，即对REV仍为易感鸡。研究表明，我国多数鸡群中都同时存在着这3种病毒的感染，但它们在感染的程度和动态等流行病学特点上显著不同，应根据鸡群中抗体的阳性率分别采取不同的措施。

对种鸡场禽白血病净化方案的建议

在过去的20多年中,禽白血病病毒(ALV)特别是J亚群白血病病毒(ALV-J)诱发的鸡群白血病,给我国养鸡业带来了极大损失。为帮助种鸡公司在ALV净化方面做出相应的决策,本课题组在参考国际成功经验和过去多年自身工作经验教训的基础上,针对不同种鸡群的ALV净化要求,分别拟定了自繁自养的原种鸡场核心群、引进的祖代或父母代种鸡群、小型自繁自养黄羽肉鸡或地方品种种鸡群等三套相应的禽白血病净化原则方案的建议。

鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株GX8/99株的致病性

鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)超强毒株GX8/ 99,系 1999年从广西一自然发病鸡群采集到。用原始病鸡法氏囊悬液连续 3次人工感染SPF鸡后 ,再取其法氏囊制备悬液 ,分装 ,在 - 70℃保存。以此悬液经卵黄囊接种 10日龄SPF鸡胚 ,测定鸡胚的半数致死量 (ELD50 )。随着鸡的日龄和接种剂量的不同 ,其致死率有很大差异。对 2 8～ 30日龄SPF鸡 ,病毒接种量为 2 0 0个ELD50 时 ,感染后 7日内死亡率最高可达 73%～ 90 5 % (11/ 15和 19/ 2 1) ;感染量为 2 0个ELD50 时 ,死亡率亦可达 5 3%～ 92 % (8/ 15和 2 3/ 2 5 )。以 5 0 0个ELD50 感染 2 8～ 10 4日龄的SPF鸡 ,死亡率均在 5 5 1%～ 6 7 2 % ;甚至 113～ 12 0日龄的SPF鸡 ,感染后仍有 10 %～ 15 %致死率。但 12 8日龄的SPF鸡感染后既不引起死亡也不表现任何症状 ,但抗体全部转阳。人工接种发病死亡的鸡 ,其法氏囊的出血程度也随感染量和年龄而异。 5 0日龄鸡接种 2 0 0 0个ELD50 后 ,死亡的鸡 10 0 % (12 / 12 )法氏囊严重出血 ;而 4 0日龄鸡感染 2 0 0个ELD50 后 ,死亡鸡中仅 17% (3/ 18)发生出血。在 2、3、4周龄带有母源抗体的商品代蛋鸡 ,以 2 0 0 0个ELD50 病毒接种后 ,只引起 10 % (2 / 2 0 )、35 % (7/ 2 0 )和 35 % (7/ 2 0 )的死亡率。但在

我国肉用型鸡群中J亚群白血病流行现状的调查

从 90年代中期起 ,国内一些肉用型种鸡场就陆续发现 ,在开产前后不断有零星死亡发生 ,主要表现在肝、脾肿大。但直到 1999年 ,我们才在国内首次分离到J亚群白血病病毒 (ALV_J)。我们从市场上临床健康商品代肉鸡及兽医院门诊死亡肉用型种鸡的随机病料分离到 2株ALV_J,还从 8个呈现肝脾增生性肿大及骨膜增生性瘤的鸡群分离到 8株ALV_J。上述毒株分别来自江苏、山东、河南和宁夏四省区的爱维因、AA和科宝品系的肉用型鸡。大多数发病鸡为开产的种母鸡或性成熟的种公鸡 ,但在商品代肉鸡中亦发现J_亚群白血病肿瘤 ,发病死亡率在 5 %～ 2 0 %。显然 ,J亚群白血病在我国各不同品系肉用型鸡中均已有不同程度流行。病毒囊膜蛋白基因比较表明 。

中国株和德国株兔出血症病毒的基因组比较

以兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）德国株基因组ｃＤＮＡ的部分片段为探针，与中国的ＮＪ株和ＬＷ株ＲＨＤＶ的基因组做分子杂交，结果表明，它们属于同一病毒。将中国株ＲＨＤＶ感染兔肝组织，用硫氰酸胍－氯化铯超速离心法提取的核酸沉淀，或将提纯病毒悬液经苯酚抽提法获取的核酸沉淀，在用ＲＮａｓｅ或ＤＮａｓｅ，消化后直接做Ｄｏｔｂｌｏｔ，或将相应样品做ＰＣＲ后再做Ｄｏｔｂｌｏｔ或Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，再与经Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的ｃＤＮＡ探针做分子杂交，结果证明，在中国的二个不同来源的兔出血症病料中，与德国株ＲＨＤＶ基因组ｃＤＮＡ同源的病毒是一种ｓｓＲＮＡ病毒。本文还讨论了在中国兔出血症病料中存在另一种ＤＮＡ病毒的可能性。

禽网状内皮组织增生病病毒感染和鸡群的免疫抑制

近几年来,我国鸡群中一些免疫抑制性综合症候,越来越常见。不久前,我们分别在江苏和山东的二个种鸡场遇见了典型的病例。虽然二个鸡群对网状内皮增生病病毒(REV)和鸡贫血病毒都有较高的感染率,但在对鸡群的系统病史、病理剖解变化和实验室检查结果做综合分析判断的基础上,确定这二个鸡群的免疫抑制主要是由于整个鸡群在早期感染了网状内皮增生病病毒所致。本文还讨论了造成这种早期感染的可能原因。

马立克病病毒的38kd磷蛋白基因重组产物对雏鸡的免疫抑制作用

在ＳＰＦ来源的一日龄雏鸡，不论是注射能表达马立克病病毒（ＭＤＶ）的３８ｋｄ磷蛋白（ｐｐ３８）基因的重组杆状病毒感染的昆虫Ｓｆ９细胞裂解物还是注射经亲和层析提纯的重组ＭＤＶｐｐ３８，都能抑制雏鸡的体液免疫反应，表现为相应雏鸡对注射小鼠红血球５～７ｄ后的血球凝集抗体的平均滴度比对照鸡低１．３８～１．６８个Ｌｏｇ２（ｐ＜０．０２５）和２．５５～３．２５个Ｌｏｇ２（ｐ＜０．００５）。

鸡致病性外源性禽白血病病毒特异性核酸探针交叉斑点杂交检测试剂盒的研制

用特定引物通过PCR合成了经地高辛标记的鸡致病性外源性及内源性禽白血病病毒特异性核酸探针,通过交叉斑点分子杂交,这些探针将可用于检测病料样品中致病性外源性禽白血病毒特异性核酸的存在。利用此试剂盒,对从病料组织样品中提取的基因组DNA作交叉斑点分子杂交或对提取的DNA用相应引物扩增后的PCR产物作交叉斑点分子杂交,可在24～36 h内完成检测并报告结果。

免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用

根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽群体中是非常普遍的,但往往只有在同一个体发生二重或多重感染时,在它们的相互作用下对个体和群体造成的免疫抑制和其它病理反应才比较明显。在此基础上,本文提出了"条件致病性病毒"的概念,并对其含义和内涵作了讨论。这一观念的引入,可能有助于理解和解释高密度饲养鸡群中疫病的复杂性及其控制的艰难性。鸡群中的免疫抑制性病毒的多重感染造成一部分个体处于"不完全免疫状态",使许多已经多次强化免疫的鸡场中仍有部分个体成为A类病病毒侵袭的对象并成为新的传染源,也容易造成在"免疫选择压"作用下病毒的抗原变异。此外,同一个个体的多重病毒感染,为病毒间通过基因重组产生新病毒创造了条件。

鸡白血病的流行现状和防制对策

鸡白血病普遍存在于商品鸡群中,呈渐进性发生和持续的低死亡率,白血病毒感染鸡群,导致鸡群生产性能下降,尤其是产蛋率和蛋的品质下降。介绍了鸡白血病病毒和该病在鸡群中的流行现状,分析了病毒间的谱系关系和发病原因,指出鸡白血病与禽网状内皮组织增生症的鉴别诊断方法,科学地提出对鸡白血病的预防和控制措施。

发挥单克隆抗体在我国兽医诊断试剂中的作用——我国单抗有多少?用了多少!

从八十年代中期以来 ,我国已先后研制出对动物病毒、病原菌、寄生虫、毒素和不同种免疫球蛋白的数百个杂交瘤细胞株 ,几乎复盖了大多数常见的猪鸡病毒病和细菌性传染病。然而 ,究竟其中有多少在兽医实验室诊断中发挥了作用 ,又有多少已开发成试剂盒 ,还有多少仍然有效地保存着 ?从现有的单克隆抗体中验证和筛选出特异性和效价皆高的细胞株 ,将它门开发成能商品化的实验诊断试剂盒 。

马立克病病毒群共同性抗原P79蛋白质基因的鉴定和定位

马立克病病毒(MDV)的79kD蛋白质是该属3个型共有的抗原。用抗该抗原的单克隆抗体T81(MAb T81),从建于大肠杆菌噬菌体λgt11中MDV感染的鸭胚成纤维细胞基因组DNA的基因库中,筛选到一个能表达该蛋白质片段的克隆GB-2。对该重组噬菌体的DNA做酶切分析,用PCR扩增插入片段,结果表明GB-2含一个2.5kb来自MDV的插入片段。用标记的该片段DNA作探针,分别与GA株MDV感染的鸭胚成纤维细胞基因组DNA的限制性内切酶消化物及MDV基因组DNA的BamH I-B片段做Southern blot和分子杂交反应,结果证明,编码MDV属共同抗原79kD蛋白质的基因位于其基因组DNA酶切图的BamH I-R片段及B和O片段与R联结的部分。

鸡白血病及其鉴别诊断和预防控制

近两年来,我国各地蛋鸡场开产后普遍发生由J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染引起的血管瘤病例,给我国蛋鸡业造成了巨大的经济损失,并引发了不少商业纠纷。本文依托国家农业公益性行业科研专项经费项目"鸡白血病流行病学和防控措施的示范性研究",基于对各地鸡白血病的广泛调查研究,就鸡白血病的病原特性和流行特点、我国鸡白血病的流行史和感染状况、蛋鸡中ALV-J的传染来源和系谱关系、鸡白血病的鉴别诊断和防控措施进行了系统阐述。

我国鸡群中禽白血病流行现状和对策

鸡白血病及鸡白血病病毒(ALV)感染对鸡群的危害巨大。通过近年来对血清中鸡白血病病毒抗体检测发现,鸡白血病病毒感染在我国非常普遍,尤其是地方品系,且绝大部分为ALV-J,少数为ALV-A。对白血病的防制,目前尚无商品化疫苗,只能依靠对种鸡群的净化。

鸡群中免疫抑制性病毒的共感染及其相互作用——对新城疫和禽流感疫苗免疫反应的抑制作用

在鸡场中对NDV和高致病性禽流感疫苗的免疫失败时而发生,由不同免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制很可能是引起这种免疫失败的流行病学因素。我们的研究表明,在这些亚临床感染中,网状内皮增生病病毒(REV)是最强的免疫抑制性病毒。在中国鸡群中REV感染非常普遍,而且经常是以与其它病毒共感染的形式存在,如马立克氏病病毒(MDV)、传染性贫血病病毒(CAV)、J亚群白血病病毒(ALV-J)等。动物试验表明,REV的早期感染可显著抑制NDV,H5-和H9-AIV疫苗的抗体反应。而且,这种免疫抑制作用至少可持续4个半月。REV与ALV-J、MDV和CAV的共感染又能进一步增强这种免疫抑制作用。由免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制有可能造成不完全免疫抑制的个体,进而成为鸡群中被NDV和AIV进一步感染的靶动物和传染源。鸡群的免疫抑制状态还将有助于NDV和AIV在鸡场中持续循环和变异。

特超强毒型马立克病病毒囊膜糖蛋白I基因序列及与其它致病型毒株的比较

特超强毒型 6 48A株马立克病病毒 (MDV)的囊膜糖蛋白I(gI)基因经PCR扩增后克隆进pUC18质粒载体 ,并对其ORF完成了DNA测序。与已发表的其它致病型毒株的糖蛋白I的DNA和氨基酸序列比较表明 ,6 48A株的 gI基因序列与超强毒RBIB株已发表的ORF 5′端 76 1个碱基完全相同。但是在该基因中完整ORF的 10 6 8个碱基中 ,6 48A株与强毒GA株间有 8个碱基变异并导致 7个氨基酸的变化 ,且这一变化主要发生在该基因的 5′端 ,其