羊胚胎移植技术研究进展

胚胎移植技术是一项可加快家畜种群扩大及繁殖速率的现代繁殖技术,在牛、羊、马等动物优良品种推广与迅速扩繁的过程中得到了广泛应用。本文从羊胚胎移植所涉及的超数排卵技术、同期发情技术以及影响胚胎移植的因素等方面进行综述,以期为羊胚胎移植技术的提高及在羊产业中的应用提供思路,为后续技术进步奠定基础。

陕西省榆林市一株仔猪肠道乳杆菌的筛选鉴定与安全性评价

为寻找经济、安全、有效的益生菌类饲料添加剂,从陕西省榆林市健康断奶仔猪肠道中分离筛选出1株乳杆菌,通过细菌形态学观察、生理生化试验以及16S rRNA基因同源性分析对该菌株进行鉴定,并进行了耐酸、耐胆碱盐试验以及动物安全性试验。结果显示:该菌株的形态特征与生化试验结果均符合乳杆菌的典型特征,其16S rRNA基因序列与罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)具有极高的同源性,相似度超过99%;结合生化试验结果,将该菌株鉴定为罗伊氏乳杆菌,并命名为YL006。该菌株在pH 2.0和0.2%胆盐质量分数条件下表现出显著的耐受能力;动物试验中,所有试验小鼠均存活且生长状况良好,日采食量和日增重较对照组有所增加。结果表明,分离筛选出的罗伊氏乳杆菌YL006在耐酸、耐胆盐以及生长状态、安全性方面表现优异,对小鼠生长具有一定的促进作用,具有用作益生菌饲料添加剂的应用潜力。

复方中草药制剂对母猪生产性能及哺乳仔猪生长性能、免疫功能及健康水平的影响

试验旨在研究复方中草药制剂对母猪生产性能及哺乳仔猪生长性能、免疫功能及健康水平的影响,选择30头胎次相同且产期接近的母猪随机分为两组,每组3个重复,每个重复5头母猪。在基础饲料与饲养环境相同的情况下,对照组投喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加1%的复方中草药制剂。投喂期42 d,于妊娠母猪临产前14 d开始至哺乳母猪产后28 d为止。仔猪断奶后跟踪观察母猪和断奶仔猪至仔猪60日龄。结果显示:试验组仔猪断奶成活率为99.33%,相比对照组提高了4.89%(P<0.05)。试验组母猪平均发情间隔天数为5.5 d,较对照组缩短了30.38%(P<0.05);试验组乳房炎发病率为5.7%,较对照组降低了44.66%(P<0.05)。试验组仔猪28日龄体重、1~28日龄平均日增重比对照组提高了16.14%、20.00%(P<0.05),腹泻率比对照组降低了60.83%(P<0.05)。试验组仔猪60日龄体重、29~60日龄平均日增重相比对照组提高了18.49%、19.23%(P<0.05),腹泻率及出现其他疾病的次数分别比对照组降低了51.04%、64.66%(P<0.05)。与对照组相比,试验组仔猪免疫球蛋白G (IgG)、免疫球蛋白M (IgM)、血清免疫球蛋白A (IgA)含量分别提高了29.06%、26.54%、21.05%(P<0.05),白细胞介素-2 (IL-2)、白细胞介素-6 (IL-6)含量提高了13.63%、26.46%(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性提高了6.48%、1.41%(P<0.05),丙二醛(MDA)含量降低了28.52%(P<0.05)。研究表明,复方中草药制剂可明显提高母猪的生产性能及健康状况,提高仔猪生长性能、免疫功能及健康水平。

羊常见体外寄生虫病的诊断和防治

羊常见体外寄生虫病可对羊的体表、毛绒和机体发育等造成严重危害,严重影响羊的健康生长,阻碍羊产业的正常发展。为准确鉴别羊体外各类常见的寄生虫病,科学有效进行预防和控制,本文综述了羊养殖过程中常见的各类体外寄生虫病,对各类常见体外寄生虫病的诊断方法进行了逐一介绍,通过在寄生虫病易发时间加强羊群饲养和羊舍环境卫生管理,制定科学合理的驱虫计划和合理应用各类药物等防治措施,从而有效减少各类体外易发寄生虫病的发生。

生产中犏牛人工授精扩繁肉牛

本文主要通过以优质母犏牛为母本,安格斯牛为父本,使用人工授精技术,获得培育杂交商品肉牛--雅江雪牛,通过对配种过程的详细记录以及配种后的效果跟踪,阐述目前生产中制约雅江雪牛扩繁的原因。

犬腺病毒Ⅰ型和Ⅱ型Taq Man双重荧光定量PCR方法的建立

为鉴别检测犬腺病毒(CAV)Ⅰ型和Ⅱ型,根据GenBank中CAV-I和CAV-II型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-Ⅰ型和CAV-Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-Ⅰ的检测敏感度为100copies/μL,对CAV-Ⅱ的检测敏感度为10copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的TaqMan双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ型。本研究为CAV-I和CAV-II型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。

内蒙古绒山羊KAP9.2基因遗传多态性及其与生长性状的关联分析

【目的】探究内蒙古绒山羊KAP基因家族角蛋白相关蛋白9.2(KAP9.2)基因插入/缺失(insertion/deletion,InDel)突变及其与生长性状的关系,以期为内蒙古绒山羊分子育种提供理论基础。【方法】选取606只雌性阿拉善型内蒙古绒山羊为研究对象,采集耳组织提取DNA并测定其体重及体高、体长和胸围等体尺数据,利用琼脂糖凝胶电泳方法与直接测序技术检测KAP 9.2基因的InDel突变,检测遗传多样性指标,利用SPSS 23.0软件分析突变位点与生长性状的关联性。【结果】在内蒙古绒山羊KAP9.2基因外显子区存在30 bp的InDel突变,产生II、ID和DD 3种基因型。多态信息含量(PIC)显示,该位点在育成羊群体中属于中度多态(0.25<PIC<0.50),在成年羊群体中属于低度多态(PIC<0.25),且均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05);在整个群体中,属于低度多态(PIC<0.25),但偏离哈代-温伯格平衡状态(P<0.05)。关联分析结果表明,在育成羊群体中,此30 bp的InDel突变对体长和十字部高有显著影响(P<0.05),对体高、胸深和胸宽有极显著影响(P<0.01);在成年羊群体中,此突变对管围、胸深和胸宽有极显著影响(P<0.01)。进一步的分析发现,在育成羊和成年羊全部群体中,此突变对体长和十字部高有显著影响(P<0.05),对体高、胸深和胸宽有极显著影响(P<0.01)。【结论】KAP9.2基因InDel突变对阿拉善型内蒙古绒山羊多个生长性状有显著或极显著影响,可作为内蒙古绒山羊优良性状选育的分子标记。

A型塞内卡病毒VP1结构蛋白在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定

目前在昆虫杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)中表达A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)结构蛋白VP1尚未见报道。本研究将VP1基因通过限制性酶切位点插入杆状病毒载体pFastBac I,然后将鉴定正确的重组载体转化至DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选,对鉴定正确的菌落提取质粒。将质粒转染Sf9昆虫细胞,待有明显细胞病变后收获重组杆状病毒rBac-I-VP1,并进行病毒滴度测定。随后通过蛋白免疫印记(Western Blot)和间接免疫荧光(IFA)鉴定VP1蛋白表达情况。结果显示,重组杆状病毒rBac-I-VP1滴度为6.8×105 pfu/mL;Western Blot可检测到相对分子质量约27 kDa的表达产物,且其能够被SVA兔阳性多克隆血清识别;IFA试验显示,VP1蛋白能够在Sf9细胞内表达。结果表明,本研究利用BEVS表达的SVA VP1蛋白具有良好的免疫反应性,为其后期功能研究及SVA诊断试剂研制提供了技术基础。

香辛料在冷却肉保鲜中的应用研究进展

冷却肉是集健康、营养及美味于一体的最科学的生鲜肉,是当代肉类市场的宠儿。就冷却肉的加工而言,首先应当聚焦于解决其保鲜问题。随着问题食品的层出不穷和生活水平的不断提升,人们愈发关注食品的安全质量,因此绿色天然的保鲜剂和保鲜方案的探索与开发便成了当代肉业发展的必然要求。尽管冷却肉有诸多的优点,但是其缺点也显而易见,诸如运输条件高、货架期短等。结合最新的冷却肉保鲜剂和防腐方法,重点综述了冷却肉腐败变质的原因和机理,天然香辛料抑菌成分的提取方式及几种典型香辛料提取物的保鲜效果和抑菌机理。同时对香辛料保鲜剂的发展前景进行预期分析,以期为冷却肉的保鲜加工及进一步研究提供参考。

犬肾上腺皮质功能减退案例分析

肾上腺皮质功能减退是指由于一种、多种或全部的肾上腺皮质激素分泌不足或缺乏引起的疾病。1例患有肾上腺皮质功能减退的泰迪犬,结合临床症状、病史调查以及实验室检测做出诊断,经过治疗后预后良好。文章主要记录该患犬的诊断治疗过程,以期对患有肾上腺皮质功能减退犬的临床诊断以及治疗提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达载体pET-32a-GP5。经过酶切和测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG低温诱导表达。使用亲和层析法纯化PRRSV GP5蛋白。然后将纯化的蛋白免疫北京大耳白兔制备多克隆抗体,并进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光分析(IFA)。结果显示,表达的PRRSV GP5原核蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量大约30 kDa;制备的GP5蛋白多克隆抗体ELISA效价可达1:64000;IFA检测显示,制备的多克隆抗体能够识别PRRSV。重组PRRSV GP5蛋白及其多克隆抗体的成功制备为PRRSV血清学检测方法的建立提供了良好的生物学材料。

2020—2022年榆林市重大动物疫病免疫抗体水平监测分析

研究旨在了解重大动物疫病防疫效果,于2020—2022年采集畜禽血清样品5596份,通过ELISA、HA/HI试验进行血清学抗体检测。结果显示:2022年春季猪、牛、羊O型口蹄疫及牛A型口蹄疫、小反刍兽疫、禽流感H5N6 H5Re-13株、禽流感H7N9 H7Re-4株抗体合格率分别为87.57%、93.53%、95.56%、92.23%、93.41%、93.55%、94.24%。与其他病种相比,猪O型口蹄疫防疫需进一步加强;周期内重大动物疫病防疫状况整体良好,但不同区域、不同病种及不同年份抗体合格率存在差异,禽流感免疫抗体合格率不稳定,牛A型口蹄疫抗体合格率呈持续下降趋势。研究表明,今后应加强猪O型口蹄疫、牛A型口蹄疫及禽流感防疫效果的动态监测。

塞内卡病毒CH/ZZ/2016株全基因组测序与分析

为了解塞内卡病毒分离株SVA/CH/ZZ/2016全基因组序列,设计4对相互重叠的特异性引物扩增基因片段,将扩增产物分别克隆至pCE2TA/Blunt-Zero载体并进行测序,拼接校正后获得SVA/CH/ZZ/2016株全基因组。结果显示,该毒株基因组全长7292 bp,包括5'UTR(670 bp)、ORF(6546 bp)以及3'UTR(76 bp)。选择国内外其他9株参考毒株序列,对编码区12个基因的核苷酸及编码氨基酸进行比对。结果显示,核苷酸同源性最高的是3B基因,最低的是VP1基因,其余基因的核苷酸序列同源性均在85.2%~100%之间。VP1基因遗传进化分析显示,SVA/CH/ZZ/2016株与美国分离株USAIL_Purdue_43_2016和USAIN_Purdue_3698_2016株亲缘关系最近,属同一进化分支,与原始毒株SVV-001株亲缘关系最远。对SVA/CH/ZZ/2016株和原始毒株SVV-001 VP1蛋白的氨基酸序列进行比对,发现共有10处氨基酸差异。本研究通过对SVA/CH/ZZ/2016株全基因组测序及分析,为进一步开展SVA分子生物学研究及流行病学调查提供了基础数据。

犬腺病毒和犬细小病毒双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中已登录的CAV Hexon基因序列和CPV VP2基因序列,设计了2对特异性引物和2条Taq Man探针。经过条件优化建立了检测CAV和CPV的双重TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示,以含有CAV Hexon基因和CPV VP2基因的重组质粒标准品为模板绘制标准曲线,其相关系数(R^2)均大于0.990,CAV和CPV荧光定量PCR均具有良好的线性关系。特异性试验结果显示,该方法仅对CAV-I型、CAV-II型和CPV检测结果为阳性,而对犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬冠状病毒检测结果均为阴性,表明其特异性强。该方法的敏感性检测结果显示其检测下限为10拷贝/μL。重复性试验结果显示该方法的组内和组间变异系数均小于2%,表明该方法重复性好。利用普通PCR方法与本实验建立的方法分别对感染CAV(10份)和CPV(27份)的犬模拟病料样品进行检测,两种方法对CAV和CPV检测的符合率分别可达100%和96.30%。本研究建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、敏感、准确等优点,可以用于CAV和CPV的临床检测。

2014—2022年榆林市猪O型口蹄疫免疫效果监测及影响因素分析

研究旨在系统评估榆林市猪O型口蹄疫免疫成效,采用采样检测与追溯调查相结合的方法,对2014—2022年榆林市的猪O型口蹄疫疫苗免疫抗体水平及其影响因素进行了监测与系统分析。结果显示:2014—2022年榆林市猪O型口蹄疫免疫抗体合格率平均为80.9%,均达到农业农村部规定的不低于70%的标准,但是2019年、2020年散养户猪O型口蹄疫免疫抗体合格率分别为56.3%和66.7%,2014年、2019年规模猪场抗体合格率均为75.7%。研究表明,抗体水平不合格或是不够高的主要原因包括无加强免疫、免疫与采样监测间隔时间过长或过短、疫苗保存或使用不当、免疫操作不规范以及猪群健康情况等。

羔羊腹泻防治措施研究进展

羔羊腹泻病因复杂,致病因素多,以高发病率和高致死率为特征,是造成养殖者重大经济损失的原因之一。抗生素的长期大量使用,造成动物体内药物残留和病原耐药性问题日益严重。笔者介绍了羔羊腹泻的防治方法,旨在为规模化羊场防治腹泻提供参考,为科学家开发绿色抗生素替代品提供资料。

榆林市畜间布鲁氏菌病的防控现状及对策

为切实提高榆林市畜间布鲁氏菌病防控水平,有效控制畜间布鲁氏菌病流行,降低传播风险,本文以2021—2023年榆林市畜间布鲁氏菌病血清学监测数据为基础,根据当地畜间布鲁氏菌病防控现状和流行特点,提出针对不同流通环节的防控措施,为科学防控畜间布鲁氏菌病,维护公共卫生安全,保障畜牧业健康发展提供参考。