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miR-10b介导NKG2D调节脑胶质瘤细胞免疫效应的实验研究
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作者 袁岗 巨虎 +3 位作者 肖宗宇 李文辉 曹立新 惠超杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期507-512,共6页
目的:观察微小核糖核酸-10b(miR-10b)对脑胶质瘤细胞免疫效应的调节作用并探讨其作用机制。方法:取人脑胶质瘤细胞U251进行培养和传代,获得处于对数生长期的细胞。按照1.0×105个/ml浓度制备细胞悬液,并设置对照组、过表达组、低表... 目的:观察微小核糖核酸-10b(miR-10b)对脑胶质瘤细胞免疫效应的调节作用并探讨其作用机制。方法:取人脑胶质瘤细胞U251进行培养和传代,获得处于对数生长期的细胞。按照1.0×105个/ml浓度制备细胞悬液,并设置对照组、过表达组、低表达组、空白组,每组6个复孔。对照组、过表达组、低表达组分别采用脂质体转染法转染阴性对照、miR-10b模拟物、miR-10b抑制剂,空白组予以等量无菌生理盐水。分离和培养1例健康志愿者外周血自然杀伤(NK)细胞。MTT法检测不同效靶比时NK细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测各组NK细胞表面NK细胞激活受体(NKG2D)表达,并检测各组人脑胶质瘤细胞U251表面主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)表达。结果:对照组、过表达组、低表达组转染效率分别为(93.55±2.05)%、(95.67±3.14)%、(94.18±3.26)%;与对照组和空白组相比,过表达组miR-10b表达升高,低表达组miR-10b表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组和空白组miR-10b表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均降低、NKG2D表达降低,低表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均增高、NKG2D表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05),各组NK细胞杀伤活性均随效靶比增加而增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组相比,相同效靶比NK细胞杀伤活性、NKG2D表达差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均降低,低表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制miR-10b表达能够增加NK细胞表面NKG2D和人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强NK细胞对人脑胶质瘤细胞U251的杀伤活性。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-10b 脑胶质瘤 NK细胞激活受体 主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A UL16结合蛋白2 UL16结合蛋白3
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
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作者 张正平 李坤正 +3 位作者 吴彬杰 刘熹 巨虎 张晓璐 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1017-1024,共8页
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pear... 目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936和miR-665表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229细胞,si-NC、si-circ_0000936分别转染至LN229细胞,pcDNA-circ_0000936转染至LN229细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936与miR-665的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:胶质瘤组织中circ_0000936的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936和miR-665呈负相关(r=-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白水平和circ_0000936的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936后miR-665的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936能够逆转败酱草对LN229细胞生物学行为的作用。结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 败酱草 胶质瘤 circ_0000936 miR-665 细胞增殖 迁移 侵袭
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桑黄多糖调控MICB/NKG2D信号通路增强机体对脑胶质瘤细胞的免疫监视作用
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作者 张正平 李坤正 +1 位作者 巨虎 刘熹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期578-585,共8页
目的:探讨桑黄多糖对脑胶质瘤细胞免疫监视的增强作用及其对主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B(MICB)/自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)信号通路的调控机制。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠60只和GL261细胞株培养传代,随机取其中的50只小... 目的:探讨桑黄多糖对脑胶质瘤细胞免疫监视的增强作用及其对主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B(MICB)/自然杀伤细胞活化性受体2D(NKG2D)信号通路的调控机制。方法:取6~8周龄C57BL/6小鼠60只和GL261细胞株培养传代,随机取其中的50只小鼠建立脑胶质瘤模型,其余10只小鼠记为对照组,另将建模成功小鼠采用随机数字表分组,榄香烯组予以100 mg/kg榄香烯与1 ml/100 g生理盐水混匀灌胃,桑黄多糖各剂量组分别予以50、100、200 mg/kg桑黄多糖溶于1 ml/100 g生理盐水中灌胃,对照组和模型组均予以等量生理盐水灌胃,均1次/d,共4周。干预后处死小鼠,比较各组瘤重和抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察瘤组织病理变化;以CD57抗体标记检测瘤组织中NK细胞浸润;实时-逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测瘤组织主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、MICB、UL16结合蛋白1(ULBP1)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)mRNA表达,Western blot检测瘤组织MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3蛋白表达;采用磁珠亲和细胞分选法分离各组组织中NK细胞,采用流式细胞仪检测其表面NKG2D活性。结果:与模型组比较,榄香烯组和桑黄多糖各剂量组瘤重下降,抑瘤率升高,瘤组织细胞变性、坏死增多,NK细胞浸润增多,MICA、ULBP2、ULBP3 mRNA和蛋白表达下降,MICB、ULBP1 mRNA和蛋白表达升高,且NK细胞表面NKG2D活性增强,上述差异均有统计学意义(P<0.05);桑黄多糖的作用呈剂量依赖性,桑黄多糖低剂量组和榄香烯组所有指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:桑黄多糖可抑制脑胶质瘤增长,促进瘤细胞变性、坏死,增加NK细胞浸润,推测d与调控MICB/NKG2D信号通路,增加MICB、ULBP1表达和NK细胞表面NKG2D活性,下调MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强对脑胶质瘤细胞的免疫监视有关。 展开更多
关键词 桑黄多糖 主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因B 自然杀伤细胞活化性受体2D 脑胶质瘤
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过表达JAK1对岩藻多糖保护神经元免受糖氧剥夺/复氧损伤的影响
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作者 巨虎 翟婷 +1 位作者 达哇卓玛 刘川川 《天津中医药》 CAS 2023年第10期1337-1346,共10页
[目的]研究探讨岩藻多糖是否通过抑制Janus激酶1/信号转导和转录激活因子3(JAK1/STAT3)信号通路来保护神经元免受糖氧剥夺/复氧损伤(OGD/RP)引起的氧化损伤和细胞凋亡。[方法]建立大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)OGD/RP模型,采用CCK8法筛选... [目的]研究探讨岩藻多糖是否通过抑制Janus激酶1/信号转导和转录激活因子3(JAK1/STAT3)信号通路来保护神经元免受糖氧剥夺/复氧损伤(OGD/RP)引起的氧化损伤和细胞凋亡。[方法]建立大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)OGD/RP模型,采用CCK8法筛选出岩藻多糖对OGD/RP模型的最大浓度;流式细胞术检测细胞凋亡;活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)法测定细胞ROS水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;JC-1法测定线粒体膜电位(MMP)变化;透射电镜观察线粒体自噬情况;蛋白免疫印记法(Western Blot)检测线粒体自噬、细胞凋亡及JAK1/STAT3通路等相关蛋白的表达。[结果]通过CCK8筛选出OGD/RP损伤模型下400 mg/kg岩藻多糖组的细胞活性及增殖能力最强,用于后续实验研究;与OGD/RP组相比,OGD/RP+岩藻多糖组细胞中SOD、GSH-Px的含量、线粒体自噬体数量、MMP值及PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)及微管相关蛋白轻链3(Lc3B)蛋白的相对表达增加,细胞凋亡率、细胞凋亡相关蛋白、ROS含量及p-JAK1/JAK1、p-STAT/STAT3蛋白的相对表达量降低;与OGD/RP+岩藻多糖-pcDNA-NC组相比,OGD/RP+岩藻多糖+pcDNA3.1-JAK1组的细胞中SOD、GSH-Px的含量、线粒体自噬体数量、MMP值及PINK1、Parkin及Lc3B蛋白的相对表达下降,而ROS含量增加。[结论]岩藻多糖能够通过抑制JAK/STAT信号通路,降低细胞凋亡及氧化损伤,促进线粒体自噬,达到保护神经元免受OGD/RP损伤的目的。 展开更多
关键词 岩藻多糖 线粒体自噬 Janus激酶1/信号转导和转录激活因子3信号通路 肾上腺嗜铬瘤细胞 氧化应激
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颅脑损伤患者入院后不同时间段血清中Tau蛋白浓度的诊断价值 被引量:7
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作者 许常林 张广华 +2 位作者 巨虎 贺瑛福 裴杰 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第2期243-246,共4页
目的通过检测颅脑损伤(TBI)患者入院后不同时间段血清中的Tau蛋白浓度,对照比较TBI患者标准化治疗后的预后情况。方法筛选无TBI及相关颅脑疾病的体检者为对照组,检测对照组血清中Tau蛋白的浓度。收集临床确诊的TBI患者76例,于伤后的6 h... 目的通过检测颅脑损伤(TBI)患者入院后不同时间段血清中的Tau蛋白浓度,对照比较TBI患者标准化治疗后的预后情况。方法筛选无TBI及相关颅脑疾病的体检者为对照组,检测对照组血清中Tau蛋白的浓度。收集临床确诊的TBI患者76例,于伤后的6 h及1、3、7 d分别采集患者血清标本。通过ELISA法分别检测对应时间段内的血清Tau蛋白浓度。于患者入院标准化治疗1个月后进行随访或复诊计算患者预后分数(通过Barthel指数评分计算)。应用SPSS统计软件对患者血清中Tau浓度、GCS评分、Barthel指数评分进行相关性分析。结果各TBI组血清Tau蛋白浓度与对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);重型组与轻中型组相比较,其血清Tau蛋白浓度差异有统计学意义(P<0.05)。重型组患者的预后明显差于轻中型组。预后不同的各组血清中Tau蛋白浓度相比较,预后差组、预后中组、预后良组与对照组差异有统计学意义(P<0.05);预后差组与预后中组、预后良组差异有统计学意义(P<0.05);预后中组与预后良组差异无统计学意义(P>0.05)。结论在发生TBI后,患者血清中Tau蛋白含量升高,升高的程度与TBI的严重程度呈正相关。TBI的程度与患者预后有关,损伤越重,患者预后越差。预后差患者与患者血清中Tau蛋白含量相关,Tau蛋白含量极高者预后差。 展开更多
关键词 颅脑损伤 TAU蛋白 GCS评分 Barthel指数评分 预后
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miR-422a通过调控SOX6抑制H2O2对PC12细胞的损伤 被引量:5
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作者 张广华 铁婷婷 +3 位作者 巨虎 许常林 肖宗宇 苑乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2235-2240,共6页
目的:研究微小RNA-422a(miR-422a)靶向调控人性别决定区Y框6(SOX6)对过氧化氢(H 2O 2)刺激下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12(具有神经细胞特性)损伤的作用。方法:采用real-time PCR检测H 2O 2处理后PC12细胞中miR-422a表达的变化,在PC1... 目的:研究微小RNA-422a(miR-422a)靶向调控人性别决定区Y框6(SOX6)对过氧化氢(H 2O 2)刺激下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12(具有神经细胞特性)损伤的作用。方法:采用real-time PCR检测H 2O 2处理后PC12细胞中miR-422a表达的变化,在PC12细胞中转染miR-422a mimics,MTT法测定细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术测定细胞凋亡水平。靶基因预测软件预测SOX6可能是miR-422a的靶基因,萤光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。在PC12细胞中共转染miR-422a mimics和SOX6过表达载体,检测过表达SOX6对miR-422a mimics调控H 2O 2条件下PC12细胞活力、LDH漏出率和凋亡的影响。结果:H 2O 2处理后PC12细胞中miR-422a表达水平降低(P<0.05)。H 2O 2处理后的PC12细胞的活力降低,LDH漏出率和细胞凋亡率升高(P<0.05)。miR-422a mimics能够提高H 2O 2条件下PC12细胞活力,降低LDH漏出率和凋亡率(P<0.05)。miR-422a靶向负调控SOX6表达。SOX6过表达载体可以逆转miR-422a对PC12细胞活力提高和LDH漏出率、细胞凋亡率降低的作用(P<0.05)。结论:miR-422a通过靶向抑制SOX6可降低H 2O 2对PC12细胞的损伤作用。 展开更多
关键词 微小RNA-422a PC12细胞 SOX6基因 细胞凋亡 细胞活力
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幕上枕部开窗在治疗后颅窝硬膜外血肿的应用 被引量:2
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作者 许常林 张广华 +2 位作者 巨虎 贺瑛福 裴杰 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2018年第4期370-371,共2页
后颅窝硬膜外血肿是常见的颅脑损伤疾病,血肿往往继发于枕骨骨折以及横窦损伤[1-2]。采用枕部开窗清除后颅窝硬膜外血肿,较以往采用枕下旁正中直切口,手术方法简便易行,避开颈部分离肌肉过程,开颅速度快,在冷光源辅助下能够彻底清除血... 后颅窝硬膜外血肿是常见的颅脑损伤疾病,血肿往往继发于枕骨骨折以及横窦损伤[1-2]。采用枕部开窗清除后颅窝硬膜外血肿,较以往采用枕下旁正中直切口,手术方法简便易行,避开颈部分离肌肉过程,开颅速度快,在冷光源辅助下能够彻底清除血肿。手术疗效好,现报告如下。一、对象与方法1.一般资料:本文资料根据我院2013年1月至2016年12月外伤致后颅窝硬膜外血肿病例15例。其中男11例,女4例。 展开更多
关键词 幕上 枕部 后颅窝 硬膜外血肿
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SOX6基因对H2O2诱导的星形胶质细胞损伤的机制 被引量:2
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作者 巨虎 肖宗宇 +1 位作者 张广华 许常林 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期88-93,共6页
目的探讨干扰SOX6基因表达对H2O2诱导的星形胶质细胞(AS)凋亡、线粒体膜电位及PI3K/AKT信号通路影响。方法从乳大鼠大脑皮质分离培养AS细胞,将细胞分为阴性对照组(NC组):AS转染无干扰作用的siRNA;H2O2组:20μmol/L的H2O2处理AS细胞24 h;... 目的探讨干扰SOX6基因表达对H2O2诱导的星形胶质细胞(AS)凋亡、线粒体膜电位及PI3K/AKT信号通路影响。方法从乳大鼠大脑皮质分离培养AS细胞,将细胞分为阴性对照组(NC组):AS转染无干扰作用的siRNA;H2O2组:20μmol/L的H2O2处理AS细胞24 h;H2O2+NC组:无干扰作用的siRNA转染AS细胞24h后,20μmol/L的H2O2处理细胞24 h;H2O2+si-SOX6组:SOX6特异性siRNA转染AS细胞24 h后,20μmol/L的H2O2处理细胞24 h。通过LDH试剂盒、流式细胞术及JC-1探针分别检测细胞毒性、凋亡率及线粒体膜电位;Western blotting检测SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和p-AKT蛋白表达。结果H2O2可明显上调AS细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9和Bax表达,下调Bcl-2和p-AKT表达,提高细胞毒性,诱导细胞凋亡,而干扰SOX6基因表达可明显减弱H2O2对细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和p-AKT表达及细胞毒性和凋亡影响。结论干扰SOX6基因表达可通过抗凋亡途径保护H2O2诱导的AS损伤,此保护作用与线粒体通路及PI3K/AKT信号通化激活有关。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 SOX6基因 H2O2诱导 凋亡 线粒体膜电位 大鼠
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经鼻内镜手术在垂体腺瘤中的临床应用 被引量:3
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作者 贺瑛福 贺姣 +1 位作者 张广华 巨虎 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2018年第6期537-540,共4页
目的初步总结分析我科经鼻内镜治疗垂体腺瘤的治疗效果和经验,进一步推广内镜操作理念。方法回顾性分析采用经鼻内镜手术治疗47例垂体腺瘤的临床资料,观察其肿瘤切除程度,内分泌缓解情况和术后住院时间、脑脊液漏、颅内感染等。结果其... 目的初步总结分析我科经鼻内镜治疗垂体腺瘤的治疗效果和经验,进一步推广内镜操作理念。方法回顾性分析采用经鼻内镜手术治疗47例垂体腺瘤的临床资料,观察其肿瘤切除程度,内分泌缓解情况和术后住院时间、脑脊液漏、颅内感染等。结果其中42例(89. 4%)全切,5例(10. 6%)次全切。所有病例随访6~26个月,患者头痛症状均明显缓解,视力改善31例,颅神经麻痹7例均恢复。出现颅内感染2例,未见永久性垂体功能低下的出现。结论经鼻内镜治疗垂体腺瘤,手术切除率高,并发症低,疗效确切,术后鞍底多层修复能明显减少脑脊液漏和颅内感染的风险,临床应用前景好。 展开更多
关键词 垂体腺瘤 内镜手术 脑脊液鼻漏 颅底重建
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早期预防性低分子肝素治疗对重度创伤性脑损伤患者的神经保护作用 被引量:5
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作者 李文辉 巨虎 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1025-1028,共4页
目的观察低分子肝素对重度颅脑损伤患者神经功能恢复的影响。方法收集2010~2013年之间在我院治疗的重度创伤性脑损伤(TBI)患者病历资料,共有216例患者接受低分子肝素治疗,根据低分子肝素使用的时间分为早期组(〈3d,n=70)、中期... 目的观察低分子肝素对重度颅脑损伤患者神经功能恢复的影响。方法收集2010~2013年之间在我院治疗的重度创伤性脑损伤(TBI)患者病历资料,共有216例患者接受低分子肝素治疗,根据低分子肝素使用的时间分为早期组(〈3d,n=70)、中期组(3~5d,n=68)和晚期组(〉5d,n=78)。统计三组患者入院时的格拉斯哥昏迷评分(GCS)、头部损伤评分、损伤度分值,观察治疗过程中脱水疗法的使用、是否进行紧急神经手术及延迟静脉血栓栓塞的发生率。观察三组患者脑损伤的影像学和功能变化。结果三组患者入院时临床和影像学特点基本相似,差异无统计学意义(P〉0.05)。治疗10d后,头部CT显示,早期治疗组继发性脑损伤最轻,神经功能恢复最快。’结论早期开展低分子肝素预防性治疗对重度TBI患者的神经具有保护作用。 展开更多
关键词 肝素 颅内出血 创伤性脑损伤(TBI)
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血清丙二醛水平对高原地区重型颅脑损伤患者近期预后的影响 被引量:4
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作者 李文辉 巨虎 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期616-621,共6页
目的 评价高原地区重型创伤性脑损伤(sTBI)患者的血清丙二醛(MDA)与近期预后的相关性。方法 选取青海大学附属医院神经外科治疗的98例sTBI患者作为研究组(sTBI组,n=98),选取同期在我院进行体检的100例健康者作为对照(对照组,n... 目的 评价高原地区重型创伤性脑损伤(sTBI)患者的血清丙二醛(MDA)与近期预后的相关性。方法 选取青海大学附属医院神经外科治疗的98例sTBI患者作为研究组(sTBI组,n=98),选取同期在我院进行体检的100例健康者作为对照(对照组,n=100)。在进入ICU治疗第1、3、7、15天抽取sTBI组患者5 mL静脉血,分离血清并检测患者MDA水平。在入院6个月后根据格拉斯哥预后量表(GOS)评分评估患者预后,并将sTBI组患者分为预后良好组与预后不良组。评价sTBI组与对照组MDA水平的差异及ICU治疗过程中sTBI组患者MDA指标的变化,比较预后良好组、预后不良组与对照组MDA水平的差异,采用单变量与多变量分析评价患者预后不良的影响因素。评价MDA水平预测患者预后不良的准确性,依据患者约登指数为最大值时的cut-off值将患者分为高MDA组与低MDA组,比较高MDA组与低MDA组患者累计生存率差异。结果 sTBI组98例患者中,有52例(53.1%)预后不良,46例(46.9%)预后良好。预后不良组患者的MDA水平显著高于预后良好组,且均显著高于对照组(P<0.001)。在第3、7、15天,预后不良组患者MDA水平均显著高于预后良好组,差异有统计学意义(均P<0.001)。多变量Logistic回归模型显示,高MDA水平可以增加sTBI患者6个月预后不良风险[OR=4.662,95%CI1.466~14.824,P=0.018]。sTBI患者MDA水平(AUC 0.763,敏感度52%,特异度85%,约登指数0.37,cut-off值为2.963 nmol/mL)对预测患者预后不良具有较高准确性。高MDA(MDA>2.963nmol/mL)组患者的累计生存率显著低于低MDA(MDA≤2.963nmol/mL)组(HR=3.615,95%CI1.429~8.481,P<0.001)。结论 活性氧类介导的氧化损伤对高原地区sTBI预后具有重要作用,sTBI患者高MDA水平会增加患者预后不良风险。 展开更多
关键词 丙二醛(MDA) 创伤性脑损伤 预后
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用siRNA研究IQGAP1基因调控STAT3信号对脑胶质瘤细胞生物学特性的影响
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作者 张广华 巨虎 +2 位作者 许常林 肖宗宇 苑乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期830-836,共7页
目的:探讨敲减IQGAP1基因表达对脑胶质瘤细胞侵袭、迁移及免疫抑制的影响及机制。方法:将人脑胶质瘤U251细胞随机分为空白组、阴性对照组和si-IQGAP1组,AG490作为STAT3信号通路抑制剂。转染48 h后,MTT法检测细胞活力;Western blot检测IQ... 目的:探讨敲减IQGAP1基因表达对脑胶质瘤细胞侵袭、迁移及免疫抑制的影响及机制。方法:将人脑胶质瘤U251细胞随机分为空白组、阴性对照组和si-IQGAP1组,AG490作为STAT3信号通路抑制剂。转染48 h后,MTT法检测细胞活力;Western blot检测IQGAP1、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、STAT3和p-STAT3的蛋白水平;Transwell小室检测细胞的侵袭和迁移能力。结果:si-IQGAP1-1组和si-IQGAP1-2组的IQGAP1蛋白表达均显著低于空白组(P<0.05)。与空白组比较,si-IQGAP1组和AG490组的细胞活力、侵袭能力和迁移能力均显著降低,VEGF、TGF-β1和p-STAT3的蛋白水平均显著降低(P<0.05)。与AG490组比较,AG490+si-IQGAP1组的细胞活力、侵袭能力和迁移能力均显著降低,VEGF和TGF-β1的蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:敲减IQGAP1基因表达可降低脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,减弱细胞免疫抑制因子VEGF和TGF-β1的表达,机制与下调STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 IQGAP1基因 细胞侵袭 细胞迁移 免疫抑制 STAT3信号通路
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高海拔地区重型颅脑损伤血清FSH、LH、PRL的变化
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作者 贺瑛福 肖宗宇 +5 位作者 马进海 许常林 裴杰 袁岗 张广华 巨虎 《中国临床神经外科杂志》 2016年第6期359-361,共3页
目的探讨高海拔地区重型颅脑损伤内分泌激素水平的变化规律,为提高高海拔地区重型颅脑损伤的治疗效果提供帮助。方法 2012年1月至2013年12月收治高海拔地区颅脑损伤120例,其中重型颅脑损伤(入院时GCS评分3~8分)60例,轻型颅脑损伤(... 目的探讨高海拔地区重型颅脑损伤内分泌激素水平的变化规律,为提高高海拔地区重型颅脑损伤的治疗效果提供帮助。方法 2012年1月至2013年12月收治高海拔地区颅脑损伤120例,其中重型颅脑损伤(入院时GCS评分3~8分)60例,轻型颅脑损伤(入院时GCS评分13~15分)60例。伤后1、3、7、14、21 d应用放射免疫定量分析法检测血清促卵泡生长素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)水平。结果伤后1、3、7、14、21 d,重型颅脑损伤血清FSH、LH水平与与轻型颅脑损伤相比无显著性变化(P〉0.05);而PRL水平在伤后1 d有显著变化(P〈0.05),以后无显著性差异(P〉0.05)。结论高海拔地区重型颅脑损伤血清PRL有轻微变化,而血清FSH、LH的水平无显著性变化。 展开更多
关键词 颅脑损伤 高海拔地区 内分泌激素 血清水平 促卵泡生长素 促黄体生成素 催乳素
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成年小鼠视网膜穆勒细胞向神经干细胞转化的实验研究
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作者 肖宗宇 李文辉 +6 位作者 惠超杰 张广华 唐万峰 杨生龙 曹立新 马进海 巨虎 《西部医学》 2020年第2期198-202,共5页
目的探讨Muller细胞在视网膜损伤后能够转化为神经干细胞,并经诱导后可以分化、新生视网膜中多种类型的神经元,研究该培养细胞是否具有多能向分化能力。方法取72只雌性成年SD小鼠建立视神经切断模型,采用酶解法对SD小鼠视网膜Muller细... 目的探讨Muller细胞在视网膜损伤后能够转化为神经干细胞,并经诱导后可以分化、新生视网膜中多种类型的神经元,研究该培养细胞是否具有多能向分化能力。方法取72只雌性成年SD小鼠建立视神经切断模型,采用酶解法对SD小鼠视网膜Muller细胞进行消化传代提纯。取第4代胰酶消化过的视网膜Muller细胞,用含有碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)、表皮生长因子(EGF)的改良的Eagle培养基(DMEM)-F12培养基培养5d,用含有0.5μmol/L RA、1μg/L BDNF与0.5%胎牛血清的DMEM培养基进行10d诱导分化,采用免疫荧光染色法对去分化及再分化后的细胞进行鉴定。结果免疫荧光染色鉴定3~4代培养的Muller细胞结果显示,特异性标记物谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸转运体(GLAST)抗体表达阳性,呈现红色,荧光染色GS和GLAST抗体表达阳性细胞比例分别为(92.76±4.28)%与(95.28±2.79)%。对去分化后的Muller细胞球给予免疫荧光染色鉴定,结果显示特异性标记物巢蛋白(Nestin)表达阳性,呈现红色,荧光染色阳性细胞比例为(95.37±1.46)%。免疫荧光染色鉴定去分化后的Muller细胞球,结果显示神经胶质细胞特异性标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,呈绿色,荧光染色阳性细胞比例为(10.28±3.37)%。细胞抗5溴-2脱氧尿苷(BrdU)的表达阳性,呈现红色,荧光染色阳性细胞比例为(90.44±4.23)%。免疫荧光染色鉴定诱导分化后的Muller细胞球,结果显示神经节细胞的特异性标记物Thy1.1表达阳性,呈现绿色,主要为轴突和细胞质,荧光染色阳性细胞比例为(21.25±4.62)%。结论视网膜Muller细胞是一种视网膜干细胞潜在来源细胞,细胞因子刺激能够使体外培养的视网膜Muller细胞获得干细胞特征。 展开更多
关键词 MULLER细胞 神经干细胞 细胞分化
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岩藻多糖调节JAK2/STAT3信号通路保护神经元免受缺氧缺糖/再灌注损伤 被引量:7
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作者 巨虎 刘川川 +1 位作者 王虎 樊海宁 《中国高原医学与生物学杂志》 2022年第1期7-17,共11页
目的开展岩藻多糖(Fucoidan,FU)调节JAK2/STAT3信号通路保护神经元免受缺氧缺糖/再灌注损伤(OGD/RP)研究,明确FU减轻脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法以大鼠神经元PC12细胞为研究对象,通过三气培养箱和无葡萄糖的培养基建立OGD/RP... 目的开展岩藻多糖(Fucoidan,FU)调节JAK2/STAT3信号通路保护神经元免受缺氧缺糖/再灌注损伤(OGD/RP)研究,明确FU减轻脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法以大鼠神经元PC12细胞为研究对象,通过三气培养箱和无葡萄糖的培养基建立OGD/RP细胞损伤模型。为明确JAK/STAT信号通路在FU调节PC12细胞凋亡和自噬中的作用,采用JAK/STAT信号通路抑制剂WP1066干预。实验分为对照组(Control),OGD/RP组、OGD/RP+1μM FU组、OGD/RP+μM FU+10μM WP1066(JAK/STAT抑制剂)组。用CCK-8实验检测细胞活力;用流式细胞仪分析PC12细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS情况;用ELISA法分析细胞培养上清液中抗氧化蛋白SOD、GSH-Px水平;用Western blot法分析细胞凋亡、自噬与JAK/STAT信号通路相关的蛋白表达水平。結果OGD/RP处理能明显抑制PC12细胞增殖,经1μM FU处理能缓解OGD/RP对细胞增殖的抑制。OGD/RP组的细胞凋亡率和ROS量及线粒体膜电位明显增高,经FU处理组的情况则相反。而且通过Western blot法证实,FU处理导致Bax、Cleaved-caspase3、LC3 I/II蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量增加。此外,经FU和0GD/RP处理后,与单独0GD/RP处理相比,P-JAK2和p-STAT3表达明显下调。WP1066抑制剂能进一步下调FU和OGD/RP作用下的JAK2、STST3蛋白磷酸化水平。结怡FU通过抑制JAK2/STAT3信号通路来保护神经元免受OGD/RP引起的氧化损伤和细胞凋亡。 展开更多
关键词 岩藻多糖 脑缺血 氧化应激 自噬
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脑膜瘤合并海绵状血管畸形1例报告
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作者 肖宗宇 陈晓娟 +3 位作者 潘琪 张正平 惠超杰 巨虎 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2016年第2期181-181,共1页
患者,女性,35岁,因反复头痛2月,加重10余天于2014年11月19日入院。家族中无类似病史。入院神经系统查体提示右侧肢体肌力4级,右侧肢体浅感觉较对侧减退。头颅MRI提示:左侧颞部可见一团块状等T1等T2信号影,边界清楚,以宽基地附着于左侧... 患者,女性,35岁,因反复头痛2月,加重10余天于2014年11月19日入院。家族中无类似病史。入院神经系统查体提示右侧肢体肌力4级,右侧肢体浅感觉较对侧减退。头颅MRI提示:左侧颞部可见一团块状等T1等T2信号影,边界清楚,以宽基地附着于左侧颞部,大小约58 mm×59 mm×43mm,增强后病灶呈明显强化,其内可见斑片状低信号区,病灶周边可见水肿信号影,左侧侧脑室受压。 展开更多
关键词 脑膜瘤 海绵状血管畸形
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经侧裂手术联合高压氧治疗西宁地区脑基底节出血疗效分析
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作者 许常林 张广华 +2 位作者 巨虎 贺瑛福 裴杰 《高原医学杂志》 CAS 2018年第4期34-36,共3页
目的:探讨高原高血压脑基底节区出血经侧裂入路手术联合高压氧治疗的临床效果。方法:将经侧裂入路手术后常规应用脑细胞活化剂、止血、支持治疗并早期高压氧治疗的36例患者作为治疗组,选取较前普通照明下开颅经颞叶血肿清除常规治疗36... 目的:探讨高原高血压脑基底节区出血经侧裂入路手术联合高压氧治疗的临床效果。方法:将经侧裂入路手术后常规应用脑细胞活化剂、止血、支持治疗并早期高压氧治疗的36例患者作为治疗组,选取较前普通照明下开颅经颞叶血肿清除常规治疗36例患者作为对照组。比较两组临床疗效、并发症的发生率。结果:治疗组有效率88.8%明显高于对照组66.6%;术后随访半年,两组患者共存活68例、死亡4例,其中治疗组死亡1例,对照组死亡3例。死亡4例中再出血1例放弃再次手术,脑功能衰竭2例,肾功能衰竭1例。结论:经侧裂入路手术清除脑基底节出血是一种安全有效的治疗方法,术后早期采用高压氧治疗可有效改善微循环,抗缺氧,保护脑细胞,降低致残率,疗效显著。 展开更多
关键词 高原 脑基底节出血 侧裂 手术 高压氧
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