冻干甲型肝炎减毒活疫苗成品检定方法的优化

目的对冻干甲肝减毒活疫苗成品检定中关键性项目的检定方法进行优化。方法(1)感染性滴度检测:建立微量免疫荧光法,并与常规组织培养ELISA法比较;(2)牛血清白蛋白残留量检测:比较反向间接血凝法、酶联免疫法的重复性、精确性;(3)水分含量测定:建立助溶剂加入法,并比较助溶剂加入前后冻干疫苗水分含量检测结果。结果(1)微量免疫荧光法灵敏度与常规组织培养ELISA法相仿(P>0.05),重复性佳,可提前1周左右出结果;可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。(2)反向间接血凝法测定结果不稳定,2批疫苗5次测定结果的变异系数(CV)为39.12%,34.23%;酶联免疫法的重复性,精确性均较佳(CV)为2.12%,2.82%,回收率为101.73%。(3)助溶剂加入前后2批疫苗5次测定结果的CV分别由8.32%,9.03%降为1.85%,1.82%。结论微量免疫荧光法有望代替常规组织培养ELISA法用于疫苗滴度检测;牛血清白蛋白残留量测定中酶联免疫法优于反向间接血凝法;加入助溶剂有利于提高疫苗水分含量检测的重复性。

利用Labworks凝胶成像分析系统判断甲肝减毒活疫苗RT-PCR滴度

目的 利用Labworks凝胶成像分析系统判断甲肝减毒活疫苗RT PCR滴度 ,并比较此方法与常规组织培养法的相关性。方法 通过对RT PCR反应液的离子浓度、pH值等条件进行优化 ,建立了检测甲肝减毒活疫苗滴度的RT PCR一步法 ;利用Labworks凝胶成像分析系统的半定量功能判断结果 ,并与常规组织培养法比较。结果 利用Labworks凝胶成像分析系统判断结果的RT PCR一步法与常规组织培养法检测甲肝减毒活疫苗滴度灵敏度相仿 ,检测结果无显著差异。结论 此法与常规RT PCR法相比具有更简便 ,判断标准更客观的优点 ,可代替组织培养法检测甲肝减毒活疫苗滴度。

某污水处理厂污泥的毒性及盆栽试验的研究

对某污水处理厂一级处理后污泥（下称污泥）中综合毒物对大、小鼠的急性毒性和致突变性以及污泥中重金属元素在培栽后农作物中的分布和含量进行了研究，结果：污泥水对大鼠的急性毒性试验ＬＤ５０＝１００００ｍｇ／ｋｇ；小鼠骨髓细胞微核试验各组间与阴性对照组比较无显著性差别。重金属元素通过蚕豆盆栽试验结果提示：蚕豆茎、叶、果实部分铅、镉、铬、铜含量与对照组相近似且果实中含量都小于食物中允许浓度。参照土地改良中污泥的施加量，笔者认为：污泥占２０％的比例应用于农田可以栽种农作物。

利用蚕豆根尖细胞微核检测技术观察污水处理效果

本研究利用蚕豆根尖细胞微核检测技术(VMT)观察污水处理效果及处理前后污水致突变性的强弱及变化。环磷酰胺诱导蚕豆根尖细胞微核具有明显的剂量——效应关系,可以用作衡量各监测点污水中致突变性的强弱及变化,选定的监测点一污管比二污管诱导蚕豆根尖细胞微核‰率更高,提示工业污水比生活污水中含有更多的致突变物(致癌物)。经处理后的污水COD、BOD_5及微核‰率较处理前均有明显下降,但排放的污水三个指标仍较高。VMT的微核‰与COD、BOD_5配合评价可更好地指示污水处理效果。

儿童普及接种甲肝疫苗对人群甲肝抗体水平的影响

目的 研究儿童中普及接种甲肝活疫苗后 ,对人群甲肝总抗体水平的影响。方法 选择浙江省台州市椒江城区 ,按不同年龄分成 7组 ,分别于 1991年疫苗接种前及 2 0 0 0年儿童普及接种疫苗后 9年 ,检测正常人群 72 0名和 80 3名甲肝总抗体。血清检测法ELISA。结果 疫苗接种后人群总抗体阳性率有显著的提高。青少年及儿童 ( 18岁以下 )抗体阳性率由接种前的 2 9 84%提高到接种后的 6 4 15 % (P <0 0 1)。成人组( 2 5～ 35岁 )抗体阳性率从 78 9%到 84 5 % ,没有显著差别 (P >0 0 5 ) ,但未见有下降趋势。结论 儿童普及接种甲肝活疫苗后显著地提高了人群的总抗体水平 。

甲肝减毒活疫苗(H_2株)二针法免疫效果观察

目的 观察甲肝活疫苗 (H2 株 )二针法的免疫原性。方法 用 0、 6免疫程序 ,选 85名免前抗HAV IgG阴性的易感者接种甲肝活疫苗 (TCID5 0 =10 6 5 /ml)。结果 一针免后 1月血清抗体阳转率 10 0 % ,抗体几何平均滴度 (GMT1 )等于 7 2 8± 2 2 1。二针免后 1月 ,抗体阳转率仍为 10 0 % ,GMT2 等于 48 7± 2 2 3 ,再免后抗体滴度比一针增加了 6 7倍。结论 89 4%的再免者抗体均有增长 ,其中增长 4倍以上的占 74 1%。

环磷酰胺诱导蚕豆根尖细胞微核的剂量——效应关系

利用蚕豆根尖细胞微核(micronucleus,MCN)监测水环境,系国内外80年代采用的一种新的生物学测试系统。它对水质中所含致突变物的监测较其它测试法敏感性更高,且方法简便易行,费用低。该方法已列入国家《环境监测技术规范》。

冻干甲型肝炎减毒活疫苗（H2株）的接种与血清学观察

目的 观察H2株冻干甲型肝炎减毒活疫苗接种人体后的安全性和血清学免疫反应。方法 选择广西自治区蒙山县一小学学生(年龄7～12岁)164人和浙江省台州市椒江区一幼儿园儿童(年龄3～6岁)114人，免前筛选抗-HAV-IgG阴性，SGPT正常，无肝炎病史、症状和体症者，分别接种二个批号的H2株冻干甲肝疫苗。观察疫苗接种后30分钟、8、24、48、72小时的局部及全身反应，以后隔天记录体温及其它有关临床反应；接种疫苗后1、2个月采静脉血作SGPT及抗-HAV-IgG测定；同时长期随访作免后13、24个月血清抗-HAV-IgG抗体水平检测。抗体测定用EIA竞争抑制法，用WHO提供的标准品(含100mIU／ml)进行标定。结果 在整个观察期间，所有观察者未见有中、强副反应及其它临床副反应发生，SGPT检测结果无异常升高。H2株冻干甲肝疫苗与液体剂型一样具有良好的安全性。疫苗接种后的抗体应答，免后2个月抗体阳转率为99％～100％，13～24个月阳转率仍高达97．8％～98．9％；免后2个月抗体水平达到高峰，GMT达1607mIU／ml，在免后24个月抗体水平仍维持在448mIU／ml，比同类产品免后2个月抗体还高4倍以上。结论 H2株冻干甲肝疫苗安全性良好，接种后有较高的抗体阳转率和抗体水平，优于同类产品报道。

某冶炼厂环境镉污染对居民健康影响的调查

某冶炼厂1961年开始生产,年排放废水量估计10万吨,内含铜、铅、镉、锌等,均超标排放。大量废渣堆积厂区,无严密遮盖,雨水冲刷的废水入河,对河水、土壤及作物的污染严重。 为摸清其污染程度、污染范围及镉对当地居民健康的特异影响现状,故进行了环境镉污染及周围居民健康的调查研究。 观察区设在离污染源500～2000米的××村,对照区设在观察区南侧距离12公里。

甲型肝炎减毒活疫苗的研究

病毒性甲型肝炎是由甲型肝炎病毒引起的急性病毒性传染病.甲型肝炎病毒一般通过粪-口途径传播,潜伏期4-6周,引起的甲型肝炎是一种自限性急性病毒性传染病,基本上不引起慢性化,病死率很低.

环境镉污染的健康效应

报道了居住35年以上、受不同程度钢污染的484名居民与基本不受镉污染的253名居民的尿中Cd、β2-MG、NAG酶与ALB的不同含量，以分析长期摄入高镉米所引起的肾损害．主要表现在肾近曲小管．严重时可累及肾小球．并存在着剂量反应关系。

人群环境镉接触肾功能损害剂量反应关系

调查和分析居住在不同程度镉污染区的居民镉摄取量和肾功能的情况。用荧光分析法和石墨炉原子吸收法分别测定尿Ｎ－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）和尿镉。结果：镉接触人群中高ＮＡＧ尿和高白蛋白尿的发生率随尿镉排泄增高而增高，同时也随镉摄取量的增加而增高，尤以ＮＡＧ表现明显。结论：环境镉接触与人群肾功能损害之间存在着明显的剂量反应关系，而尿ＮＡＧ可作为镉肾损害的早期监测指标。

单克隆抗体在甲肝减毒活疫苗毒种检定中应用

目的 利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行甲型肝炎减毒活疫苗毒种外源因子检查及鉴别试验。方法 选择适宜的单克隆抗体浓度与甲肝病毒进行中和试验 ,观察单克隆抗体的中和作用 ;利用单克隆抗体中和毒种 ,进行外源因子检查 ,并应用于鉴别试验。结果 此单克隆抗体可中和 10 5细胞培养半数感染量 (CCID50 )甲肝病毒 ,比人、猴免疫血清的中和能力高约 10 0倍 ;将此高效价的单克隆抗体中和毒种后进行血吸附及非血吸附外源因子检查 ,结果均为阴性 ;此单克隆抗体还可用于毒种鉴别试验。结论 此高效价的单克隆抗体可代替人、猴免疫血清应用于毒种的外源因子检查及鉴别试验。

环境镉污染对人体健康影响的研究

镉的环境污染与人体健康影响的研究开始于1979年,终于2001年.从实验研究到外环境(镉污染区)污染源、污染途径、污染范围、污染程度、人群的镉摄入量及对人体健康的危害进行了由浅入深的调查研究.

人乳头瘤病毒16型治疗性疫苗联合免疫效果研究

目的:探索联合免疫策略对人乳头瘤病毒16型(HPV16)治疗疫苗L2E7E6和rAdE7E6的免疫效果的影响。方法:用L2E7E6融合蛋白和重组腺病毒rAd5E7E6以不同的联合免疫程序分别免疫C57BL/6小鼠,通过检测其诱发的体液免疫和细胞免疫反应,以及观察其在HPV16小鼠治疗模型中的抑瘤效果,比较分析联合免疫对小鼠免疫反应及治疗肿瘤效果的影响。结果:异源性联合免疫组均可检测到较高水平的体液免疫,该2组针对E6、E7特异性的T细胞免疫反应与同源性联合免疫2组相比明显提高,并在小鼠肿瘤治疗模型中能抑制肿瘤生长。结论:异源性联合免疫策略可明显提高HPV16 L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的T细胞免疫反应,且有效治疗HPV16相关肿瘤,为HPV16L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的应用提供了实验基础。

以县为单位实现基本消灭甲型肝炎策略探讨

嵊泗县以往是甲肝高发区（１７８．６－９４４．０／１０万）通过在该县开展甲肝活疫苗（Ｈ２株）普种，结合计划免疫工作，主要在１－１５岁儿童组和重点行业人群提高接种率，以控制和消灭甲肝，为制定甲肝免疫策略作好度点工作。结果在所有疫苗接种者１８０４６人中迄今没有发生１种甲肝，保护率达１００％。全人口甲肝发病率由３５９．７／１０万下降到２２．０／１０万，下降了１６．３５倍。

应用单克隆抗体进行甲肝减毒活疫苗毒种的外源因子检测及鉴别试验

目的利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行甲型肝炎减毒活疫苗毒种外源因子检查及鉴别试验。方法通过观察含单克隆抗体不同稀释度的腹水对KMB17细胞的影响，选择适宜的单克隆抗体浓度．将单克隆抗体与甲肝病毒进行中和试验，观察单克隆抗体的中和作用；利用单克隆抗体中和毒种，进行外源因子检查。并应用于鉴别试验。结果(1)当单克隆抗体稀释度≥1：80时，细胞生长良好；(2)此单克隆抗体中中和10^5CCID50/ml甲肝病毒．比人、猴免疫血清的中和能力高约100倍；(3)将此高效价的单克隆抗体中和毒种后进行血吸附及非血吸附外源因子检查．结果均为阴性；此单克隆抗体还可用于毒种鉴别试验。结论此高效价的单克隆抗体可代替人、猴免疫血清应用于毒种的外源因子检查及鉴别试验。避免了由于毒种的大量稀释而使外源因子难以检出，影响疫苗质量。

RT-RCR产物固相杂交-酶联显色方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取光密度值(OD值)，判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果证明本方法与细胞培养法(CCID50)的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论RT-PCR-EIJSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。