儿童重症肺炎支原体肺炎与重症肺炎链球菌肺炎的临床特征对比分析

目的 对比重症肺炎支原体肺炎(MPP)与重症肺炎链球菌肺炎(SPP)的临床特征。方法 回顾性分析2015年1月—2020年1月收治的77例重症MPP和40例重症SPP患儿,对比两组患儿的一般情况、临床表现、辅助检查等资料。结果 重症MPP患儿组男性48例(62.3%),年龄为44(24~78)月。重症SPP患儿组男性22例(55.0%),年龄为14(9~25)月。96.1%(74/77)的重症MPP患儿与80.0%(32/40)的重症SPP患儿在入院前使用抗生素(P=0.007)。与重症SPP患儿相比,重症MPP患儿出现发热、高热比例较高,出现喘息、神经系统症状比例较低(P均<0.05)。重症SPP患儿更易在肺部闻及湿啰音、哮鸣音,且双侧均出现体征患儿比例更高(P均<0.05)。与重症SPP患儿相比,重症MPP患儿WBC较低、LDH水平较高,胸部CT更易出现支气管充气征(均P<0.05)。两组患儿支气管镜镜下表现及肺泡灌洗液常规检查结果的差异无明显统计学意义(P均>0.05)。结论 重症MPP与重症SPP患儿临床特征常不典型,年龄、发热、高热、喘息、肺部体征、神经系统表现、外周血白细胞计数、外周血乳酸脱氢酶水平等对临床鉴别有提示作用。

儿童社区获得性肺炎严重程度判断及评估方式的研究进展

肺炎仍是全球5岁以下儿童死亡的主要原因,进行疾病严重程度评估是诊疗中的关键。不同国家和地区评估儿童社区获得性肺炎(CAP)严重程度的标准和方式并未完全统一。在世界卫生组织制定的儿童重症肺炎诊断标准的基础上,许多量化儿童CAP严重程度的评分也逐步出现,包括改良PIRO量表、APACHEⅡ评分、儿童疾病危重值评分、儿童早期预警评分、肺部超声评分、Williams儿童重症肺炎风险模型等。本文就儿童CAP严重程度判断及评估方式的研究进展进行综述,旨在加深儿科医生对不同评估方式的认识,以更好地指导临床决策。

树突状细胞CCR7功能研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)做为体内功能最强的专职抗原提呈细胞,自从被发现以来,其功能受到了研究者们广大的关注。调节外周骨髓来源DCs通过输入淋巴管迁移至淋巴结发动初始免疫应答的机制至今仍不是十分清楚,但是利用基因打靶等技术已经表明趋化因子受体CCR7(CC chemokine receptor7)是DCs从外周迁移至淋巴系统发挥作用的最重要的启动和调节者。除此之外,现有研究发现CCR7在DCs细胞上尚可发挥趋化功能以外的多种多样的功能,本文就DCs上CCR7的功能研究现状做一综述。

CTLA4-Ig基因修饰的树突状细胞体外对Th1/Th2平衡的影响

目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4 Ig)基因修饰的树突状细胞(CTLA4 Ig-DCs)体外对Th1/Th2平衡的影响。方法:通过腺病毒载体将目的基因(CTLA4 Ig)转染至小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)。采用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子和胞内CTLA4 Ig的表达;采用混合淋巴细胞反应检测DC刺激同种异体T细胞的能力,ELISA法检测DC抗原提呈反应中Th1和Th2类细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平。结果:CTLA4 Ig基因成功转染至DC,转染率约为80%,制备的CTLA4 Ig-DCs稳定表达CTLA4Ig,表面分子CD86呈现低表达;CTLA4 Ig-DCs可有效抑制T细胞增殖,降低抗原提呈反应上清中IFN-γ和IL-4的分泌,并增加IFN-γ/IL-4比值。结论:通过腺病毒将CTLA4 Ig转染DC并且高效表达,可有效降低DC表面CD86分子,抑制同种异体T细胞反应,并能影响体外Th1/Th2水平。

情景模拟联合案例教学法在儿科临床实践中的应用

目的探讨情景模拟联合案例教学法在儿科呼吸系统疾病临床实践中的应用。方法随机选取我校2016年9月的临床专业学生100例作为研究对象。按照1∶1比例将其随机分为实验组和对照组。对照组采用传统的教学模式,实验组采用情景模拟联合案例教学的方法。比较两组学生的理论知识与实践操作能力。结果在理论成绩上,实验组学生成绩和对照组相比,差异不具有统计学意义(P>0.05);而实验组学生实践成绩优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中,实验组学生成绩的优秀率达到84.0%,优于对照组的60.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。94.0%的学生都喜欢情景模拟联合案例教学,90.0%认为该教学法能够加深理论知识,86.0%的认为情景模拟联合案例教学能够提高学习效率。结论情景模拟联合案例教学法不仅能够提升学生的学习兴趣,还能提升学生的综合能力。

案例教学法在呼吸系统疾病教学中的心得体会

呼吸系统疾病是内科学的重要组成部分,是每一位医生必修的医学内容。传统呼吸系统疾病教学主要从某一特定疾病的发病机制入手,重点围绕临床表现展开诊断与治疗知识的讲授。随着医学教育课程体系的不断完善与医疗水平的不断提高,传统医学授课模式逐渐表现出些许不足,而案例教学法的出现提供了一种假设前提,可引导学员独立思考,注重双向交流,在实践技能教学方面具备一定的理念优势。故为了进一步提高呼吸系统疾病教学质量,将案例教学法引入到呼吸系统疾病教学中,结果显示,案例教学法与传统理论知识授课相结合能够得到良好教学效果,具有深入研究及推广意义。

小鼠CCR7基因重组腺病毒的构建及其在DC2.4的表达

目的构建含有小鼠趋化因子受体-7（CCR7）基因的重组腺病毒（AdCCR7）,观察其体外感染DC2.4细胞效率。方法将小鼠CCR7基因克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,在BJ5l83菌内和骨架质粒pAdeasy-1同源重组,筛选阳性克隆;经线性化后转染HEK293细胞,获得含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7;TCID50方法检测病毒滴度,PCR法鉴定病毒DNA。带绿色荧光蛋白腺病毒（AdGFP）和AdCCR7分别感染DC2.4（GFP-DC2.4和CCR7-DC2.4）,同时设未处理DC2.4为空白对照。流式细胞术（FCM）检测各组细胞表面分子CD11c,MHCⅡ,CD86及CCR7表达,趋化实验检测CCR7的功能。结果获得滴度约为l.4×1010pfu/ml重组腺病毒AdCCR7。AdCCR7感染DC2.4后,CCR7-DC2.4组与另外两组细胞比较CD11c、MHCⅡ及CD86的表达均无明显差异,但CCR7表达升高;其对趋化因子CCL19的趋化率可达44.7%~60.0%,明显高于其它两组。结论成功构建含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7,该病毒可感染细胞株DC2.4,增加细胞表面CCR7表达以及细胞对CCL19的趋化性,为进一步体内实验研究携带CCR7基因的未成熟DCs功能提供了工作基础。

支气管肺泡灌洗术治疗时机对重症支原体肺炎伴肺不张患儿影像学恢复的影响

目的:探索儿童重症肺炎支原体肺炎伴肺不张治疗中支气管肺泡灌洗术(bronchoalveolar lavage,BAL)的不同治疗时机与胸片恢复的关系。方法:选取 2017 年 1 月至 2018 年 2 月期间于重庆医科大学附属儿童医院确诊的重症肺炎支原体肺炎伴肺不张的患儿作为研究对象,根据行支气管肺泡灌洗术时病程分为 A 组(≤10 d,55 例)、B 组(10~20 d,94 例)、C 组(≥21 d,66例)。分别于术后 1 周及术后 1 个月左右复查胸片,比较 3 组患儿肺不张吸收情况。结果:3 组患儿术后 1 周随访胸片恢复情况比较:Kruskal-Wallis H 检验:χ^2=39.542,P=0.000。说明 3 组患儿术后 1 周随访胸片恢复情况存在统计学意义。进一步进行组间两两比较,A 组与 B 组比较(PAB=0.026);A 组与 C 组比较(PAC=0.000);B 组与 C 组比较(PBC=0.000);说明 3 组患儿术后 1 周随访胸片吸收情况,A 组优于 C 组,B 组优于 C 组,A 组及 B 组无明显差别。 3 组患儿术后 1 月随访胸片恢复情况比较:Kruskal-Wallis H 检验:χ^2=58.717,P=0.000。说明 3 组患儿术后 1 月胸片恢复情况存在统计学意义。进一步进行组间两两比较显示:A 组与 B 组比较(PAB=0.01);A 组与 C 组比较(PAC=0.000);B 组与 C 组比较(PBC=0.000);组间两两比较均具有统计学意义,说明 3 组患儿术后 1 月随访胸片恢复情况均存在差异,吸收情况 A 组优于 B、C 组,B 组优于 C 组。结论:对于重症肺炎支原体肺炎伴肺不张的患儿,BAL 早期介入(10 d 以内)有助于减轻病情、促进影像学恢复,从而改善预后。

糖皮质激素调控Keap1-Nrf2通路减轻哮喘小鼠肺氧化应激反应的作用研究

目的探讨哮喘小鼠肺氧化应激水平以及地塞米松对其影响及可能的机制,为哮喘治疗提供新的方向。方法将30只6-8周龄C57BL/6雌鼠随机分为对照组、哮喘组及地塞米松组,利用屋尘螨(House dust mites,HDM)建立哮喘小鼠模型,检测哮喘激发后或地塞米松干预后,各组小鼠脂质过氧化物代谢产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、氧化型谷胱甘肽(Oxidized glutathione,GSSG)的表达水平。利用qPCR检测小鼠肺部氧化应激转录因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor2,Nrf2)和血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)表达情况。免疫组化和免疫荧光检测小鼠肺部Nrf2蛋白表达水平。Western blot检测Nrf2-Keap1信号通路改变情况。结果哮喘组小鼠肺组织中MDA含量较对照组明显升高(P<0.01),地塞米松组MDA较哮喘组明显降低(P<0.05);哮喘小鼠的GSSG含量较对照组升高(P<0.01),地塞米松组小鼠GSSG含量较哮喘组降低(P<0.05)。qPCR结果显示哮喘组小鼠Nrf2和HO-1mRNA表达均较对照组明显增加(P<0.05),地塞米松组小鼠Nrf2和HO-1 mRNA表达较哮喘组降低(P<0.05)。免疫组化和免疫荧光检测结果显示哮喘组小鼠肺组织中Nrf2蛋白表达较对照组明显增加(P<0.01),地塞米松组小鼠肺组织Nrf2蛋白表达较哮喘明显减少(P<0.01)。Western blot结果显示地塞米松组肺组织Nrf2蛋白表达较哮喘组明显降低(P<0.05),Keap1蛋白表达较哮喘组明显增加(P<0.05)。结论哮喘小鼠中氧化应激水平增加,地塞米松可能通过调节Keap1-Nrf2通路,影响下游抗氧化反应元件的表达,从而抑制哮喘小鼠肺部氧化应激水平。

敲除Brg1基因对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量和功能的影响及其机制研究

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECⅡs)上特异性敲除Brg1的C57BL/6小鼠(Brg1fl/fl)作为实验对象,每组选取8只小鼠,收取标本,利用免疫组化及免疫荧光分析肺组织中表面活性物质相关蛋白C(surfactant-associated protein C,SFTPC)阳性的细胞率,流式细胞术分析小鼠肺组织中表面活性物质蛋白C前体蛋白(prosurfactant protein C,pro SP-C)阳性的细胞(即AECⅡs)数量。Western blot检测各组小鼠肺组织中pro SP-C、SFTPC、表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SFTPA)、表面活性物质相关蛋白D(surfactant-associated protein D,SFTPD)的表达水平。Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达及增殖相关信号转导途径中关键蛋白EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及NF-κB p65的活化水平。结果抗SFTPC免疫组化、免疫荧光显示其在肺泡上皮表达较WT小鼠增多(P<0.05);流式细胞术显示Brg1fl/fl组小鼠肺组织中pro SP-C+的细胞百分比较WT小鼠明显增高(P<0.05),Western blot检测结果显示AECⅡs的功能性蛋白pro SP-C、SFTPC、SFTPA及SFTPD在Brg1^fl/fl小鼠中明显增多;Brg1^fl/fl组小鼠肺组织中NF-κB p65及周期蛋白CyclinD1的表达增加,且p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT百分比显著提高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论特异性敲除C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的Brg1可促使AECⅡs数量和分泌功能的增加,其可能机制与敲除Brg1促进EGFR/PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,且与增殖周期蛋白CyclinD1表达的增加有关。

儿童临床诊断不明呼吸系统疾病97例基因二代测序结果分析

目的探讨基因二代测序在儿童呼吸系统疑难疾病中的诊断应用。方法回顾性分析2016—2021年采用二代测序对以呼吸系统症状为主要表现的疑难疾病的诊断情况,总结患儿的临床特征及基因二代测序结果。结果进行基因二代测序的患儿共97例,均以呼吸系统症状为首发或主要表现,中位年龄1.9(7.6)岁,男57例、女40例。确诊单基因病31例(诊断率32.0%),中位年龄4.0(7.6)岁;主要表现为慢性湿性咳嗽,部分患儿进展到后期有不同程度的营养不良、杵状指。其中原发性纤毛运动障碍20例,18例为复合杂合变异(HYDIN 7例、CCNO 3例、CCDC402例、DNAH12例、DNAAF31例、DNAI21例、DNAH111例、RSPH4A 1例);1例为DNAI2基因纯合变异;1例存在X连锁PIH1D3基因半合子缺失。囊性纤维化4例,其中3例为CFTR基因复合杂合变异,1例为CFTR基因c.4056G>C纯合变异。肺表面活性物质代谢障碍3例,均为SFTPC基因杂合变异。原发性免疫缺陷病2例,分别为PIK3CD基因变异致PI3Kδ过度活化综合征1例、CXCR4基因变异致WHIM综合征1例。神经肌肉疾病2例,为MTM1基因变异致中央核肌病1例、SMN1基因纯合缺失致进行性脊肌萎缩症1例。66例基因检测阴性患儿以反复呼吸道感染和慢性咳嗽表现为主,伴或不伴支气管扩张;部分患儿表现为不明原因气促、呼吸窘迫,伴或不伴肺部广泛间质改变。结论以呼吸系统症状为首发或主要表现的儿童单基因病具有高度的临床和遗传异质性,基因二代测序的应用给诊治带来了新思路,扩展对疾病谱的认识。

儿童肺炎支原体肺炎与肺炎链球菌肺炎的研究进展

肺炎支原体肺炎和肺炎链球菌肺炎均为儿童常见的社区获得性肺炎,临床表现多样,无明显特异性。肺炎支原体肺炎可引起重症肺炎支原体肺炎、难治性肺炎支原体肺炎,还可导致闭塞性支气管炎、坏死性肺炎等严重肺内并发症。肺炎链球菌肺炎除引起坏死性肺炎、肺脓肿等肺内并发症外,还可出现败血症、关节炎等表现,严重者甚至出现脓毒血症、感染性休克、呼吸衰竭等情况。本文就儿童肺炎支原体肺炎与肺炎链球菌肺炎的研究进展作一综述。

儿童迁延性细菌性支气管炎研究进展

迁延性细菌性支气管炎(Protracted Bacterial Bronchitis, PBB)是指由细菌引起的支气管内膜持续的感染,是国内外儿童慢性湿咳的常见病因之一,通常在口服2周有效的抗生素后症状可缓解;目前研究认为PBB、慢性化脓性肺疾病(Chronic Suppurative Lung Disease, CSLD)、支气管扩张(Bronchiectasis, BE)是同一疾病进展的三个不同阶段。提高对PBB认识有助于对儿童CSLD、BE的早期识别及干预,对改善预后至关重要。现就近年来有关PBB的病原学、发病机制、共患病、治疗及预后等研究进展进行综述。

维生素D补充与儿童哮喘的系统评价及meta分析

目的探讨维生素D补充与儿童哮喘的相关性。方法纳入对象为基于社区、学校和医疗机构的儿童,暴露因素为维生素D补充,观察哮喘相关结局的随机病例对照研究。计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library数据库,检索截止日期为2018年12月30日。对纳入的文献行筛选、资料提取及方法学质量评价,采用Cochrane风险偏倚评估工具,应用Revman5.3软件进行meta分析。结果共有11项符合纳入标准的随机对照试验,最终纳入9项研究,其中干预组共361例,对照组共341例。meta分析结果显示:2组血清25(OH)D水平比较差异无统计学意义(P=0.13);以是否联合特异性免疫治疗进行亚组分析,合并效应均数差(MD)分别为9.44nmol/L和15.23nmol/L;干预组哮喘发作次数显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.0001);2组肺功能和哮喘症状评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论补充维生素D可以减少哮喘发作,对血清25(OH)D水平、肺功能和哮喘症状评分的作用有限;由于有其他潜在的混杂因素,未来需要进行大规模、长时间、精心设计的随机对照试验来了解维生素D对儿童哮喘的治疗作用。

孟鲁司特纳片联合沙美特罗替卡松粉吸入剂对儿童支气管哮喘的临床疗效

目的:探究孟鲁司特纳片联合沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗儿童支气管哮喘的临床疗效并分析复发情况。方法:选取2011年9月至2012年12月在本院就诊并住院治疗的100例支气管哮喘患儿,随机分成的对照组以及研究组,各50例。对照组吸入沙美特罗替卡松粉吸入剂,研究组给予孟鲁司特纳片联用沙美特罗替卡松粉吸入剂,观察哮喘的复发和控制情况。结果:用药治疗后两组肺功能指标均有改善(P<0.05);研究组用药第3、6个月和停药6个月时患儿肺功能较对照组改善更明显,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患儿治疗后临床控制率均有显著的改善,但仅研究组差异有统计学意义(P<0.05);研究组在用药3个月、6个月以及停药6个月三个阶段临床控制率均高于对照组,而在用药6个月以及停药6个月两个阶段复发率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:孟鲁司特纳片联合沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗儿童支气管哮喘疗效较单用沙美特罗替卡松粉吸入剂治疗效果更好,复发率低。

新型冠状病毒感染疫情对毛细支气管炎患儿住院影响的临床多中心研究

目的探讨新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)疫情对毛细支气管炎患儿住院的影响,以提高临床医生对于COVID-19流行期间毛细支气管炎特点的认识。方法该研究为多中心临床研究,病例资料来自全国23个儿童研究中心。回顾性收集2019年1月1日至2021年12月31日在各研究中心住院治疗的毛细支气管炎患儿的临床资料,包括性别、住院时月龄、住院天数、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)检测结果、病情严重分度、是否住ICU治疗以及同期呼吸道感染住院患儿总数。对COVID-19流行前的2019年和流行期间的2020、2021年的毛细支气管炎患儿临床资料进行统计分析比较。结果根据23个儿童研究中心提供的数据汇总,2019年毛细支气管炎病例共4909例,2020年共2654例,2021年共3500例。与2019年相比,2020年和2021年毛细支气管炎病例数量分别下降了45.94%和28.70%。2019年、2020年和2021年患儿性别比例、住院时月龄、住院天数差异无统计学意义。与2019年相比,2020年和2021年毛细支气管炎占呼吸道感染住院总人数的比率均显著下降(χ^(2)=12.762,P<0.05;χ^(2)=84.845,P<0.05)。2020年和2021年中/重度毛细支气管炎的比例均低于2019年,差异有统计学意义(χ^(2)=4.054,P<0.05;χ^(2)=8.109,P<0.05)。2019年、2020年和2021年入ICU治疗的毛细支气管炎患儿比例差异无统计学意义(χ^(2)=1.914,P>0.05)。2019年共有52.60%(2582/4909)毛细支气管炎患儿进行RSV病原检测,其中RSV阳性708例,阳性占比为28.00%;2020年有54.14%(1437/2654)的毛细支气管炎患儿进行RSV病原检测,RSV阳性403例,阳性占比为28.04%;2021年有66.80%(2238/3500)的毛细支气管炎患儿进行RSV病原检测,RSV阳性935例,阳性占比为41.78%。与2019年和2020年相比,2021年RSV检出阳性率显著升高(χ^(2)=99.673,P<0.05;χ^(2)=71.292,P<0.05)。结论在COVID-19疫情期间,疫情防控措施降低了毛细支气管炎患儿的住院率和严重程度,但未降低住院毛细支气管炎患儿的RSV检出阳性率。

全反式维甲酸拮抗地塞米松抑制人气道上皮细胞16HBE凋亡

该研究探讨全反式维甲酸(all-trans Retinoic Acid, ATRA)对GCs诱导人气道上皮细胞过度凋亡的拮抗作用。将人支气管上皮细胞16HBE作为研究对象,使用10μmol/L地塞米松(Dex)、1μmol/L ATRA处理细胞,体外培养16HBE细胞,分为Dex组、ATRA组、Dex+ATRA组和Control组。采用TUNEL法检测16HBE细胞凋亡情况, Annexin V/PI双染法检测膜磷脂酰丝氨酸外翻的情况,荧光探针JC-1检测线粒体膜电位变化, Western blot检测细胞的凋亡蛋白Caspase-3和其水解片段Cleaved-caspase-3的水平。相较于Control组, Dex组的TUNEL阳性细胞明显增多, Annexin V阳性蛋白明显上调,线粒体膜电位明显下降, Caspase-3和Cleaved-caspase-3的水平明显增高;联合ATRA则可以显著减轻Dex引起的这个趋势。因此, Dex可以导致人支气管上皮16HBE细胞的过度凋亡,而ATRA可以削弱Dex的这种作用。

调解路上展“锋”采——记浙江省杭州市上城区清波街道劳动路社区人民调解委员会调解员陈叶锋

"你年纪轻轻,为何会选择这么婆婆妈妈又吃力不讨好的调解工作?"有人问陈叶锋。陈叶锋说:"为老百姓干点实事,解决点实际问题,我很开心。"陈叶锋是浙江省杭州市上城区清波街道劳动路社区人民调解委员会调解员,2013年成为一名专职人民调解员。