我国检验医学发展的道路及前景

我国检验医学发展的道路及前景康格非，何萍（重庆医科大学，６３００００）１关于学科的发展现状１．１我国的临床检验工作长期以来，还是一门介于基础医学和临床医学之间的不完全独立的技术专业，但近２０年来，由于应用化学、应用物理学、分子生物学、生物化学、分子细...

21世纪检验医学的发展前景与我们面临的任务

临床检验医学(Clinical Laboratory Medicine)是现代实验室科学技术与临床医学在更高层次上的结合，是一门发展迅速，十分活跃，相当成熟，多技术、多学科交叉的具有其独特应用目标的学科。

论现代检验医学学科进展中两翼队伍的建设

随着高新科技的迅猛发展,并向临床医学的广泛渗透,临床实验室在工作内容、方式及其在临床诊疗工作中的地位正起着深刻的变化。由于这一学科在理论体系和技术支撑方面出现的重大进展和变革,学科的定位,领域和性质以及对人才的需求的规范和队伍结构方面也正在发生历史的变化。本文试从国际上这一学科领域的发展前景,结合国情作一初步分析和探讨。

《检验与临床》课程建设初探

为了加强实验室和临床之间的联系，培养学生临床咨询能力，从1992年开始我们在医学检验系本科学生中开设了《检验与临床》课程．取得了明显的效果，现将有关情况报告如下。

论现代检验医学学科进展中两翼队伍的建设

随着高新科技的迅猛发展,并向临床医学的广泛渗透,临床实验室在工作内容、方式和在临床诊疗工作中的地位正起着深刻的变化.作为现代化的检验医学,它不断地以化学病理学、细胞病理学和分子病理学作为这一学科坚实的理论体系,同时它融合了现代生命科学中发展极为迅速的生物化学分析技术、分子生物学技术、免疫学技术、细胞学和遗传学技术、计算机和自动化程序,并正在有效地利用生物信息数据库分析和咨询等一系列高新技术和信息系统作为这一学科发展的支撑.

我国检验医学发展中面临的主要任务——论人才的教育与培训

本文从学科发展的现状针对现代化医院临床检验科(中心)的三大工作管理目标，分析和提出了人才培训和合理组合的重要性。其中既有在校教育的问题，更有毕业后岗位培训的问题，对检验医师的岗位设置及规范化培训基地提出了创议。

在医学检验系及临床医学系高年级学生和研究生中开设《临床生物化学》课程的体会

临床生物化学是化学、生物化学与临床医学的结合，近年来随着整个实验室科学与技术（包括现代应用化学、物理学、电子技术、计算机和仪器材料学、新仪器技术）的迅速发展并向生物医学领域的广泛渗透，促使临床生物化学这一边缘性的应用学科获得迅速成长。在不少国家纷纷成立了专门的学会和出版杂志，反映了这一学科的成熟和发展。

苦参碱对TIM2转基因小鼠肝癌细胞的作用研究

目的:观察苦参碱对TIM2转基因修饰小鼠H22肝癌细胞瘤苗的体内作用。方法:构建小鼠TIM2基因真核表达载体并用以转染H22细胞,经体外稳定筛选后获得TIM2转基因H22肝癌细胞全细胞瘤苗(H22-TIM2),用以建立小鼠肝癌移植瘤模型,观察该瘤苗在小鼠体内的成瘤性和免疫原性;加用药物苦参碱(matrine,M)治疗后,观察苦参碱对其体内抗癌活性的影响。结果:筛选得到的TIM2转基因H22肝癌细胞瘤苗有TIM2 mR-NA及EGFP的稳定表达,此瘤苗接种后,在小鼠体内的成瘤率为41%,远低于H22对照组和H22-EGFP空载体组(H22-EGFP)(后两者成瘤率在92%以上),对小鼠肿瘤的抑制率为69.2%,明显高于苦参碱治疗组(67.5%)和其他各组。同时苦参碱可进一步增强H22-TIM2瘤苗的肿瘤抑制率。H22-TIM2组小鼠的脾指数,CD4+T细胞亚群和CD4/CD8较其他实验组明显增高。结论:TIM2基因修饰H22细胞瘤苗可显著降低H22肝癌细胞在小鼠体内的致瘤性,在体内具有一定的免疫原性,苦参碱可明显改善其体内抗癌活性,为进一步研究TIM2基因在肿瘤免疫中的作用及苦参碱的抗癌机制奠定了基础。

我国检验医学发展的道路及前景

(一)我国的临床检验工作，长期以来是一门介于基础医学和临床医学之间的不完全独立的技术专业，但近20年来,由于应用化学、应用物理学、分子生物学、生物化学、分子细胞学、遗传学、免疫学以及电子技术、电子计算机、仪器分析与仪器学等学科新理论。

苦参碱对小鼠H22肝癌细胞凋亡作用的实验研究

目的:研究中药苦参碱在体内外对小鼠H22肝癌细胞的诱导凋亡作用,探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法:An-nexinⅤ-FITC/PI双标记法检测苦参碱对H22细胞的早期促凋亡作用;免疫组织化学法检测苦参碱作用后H22细胞内Bc l-2、Bax两种凋亡相关蛋白的表达。建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,观察苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤生长情况的影响及肿瘤抑制率;电镜观察荷瘤小鼠肿瘤组织的超微结构改变;免疫组化方法检测小鼠肿瘤组织内Bc l-2、Bax的表达情况。结果:AnnexinⅤ法检测到1.0 mg/mL和1.5 mg/mL苦参碱作用48 h后H22细胞有早期凋亡改变,凋亡细胞百分率分别为11.71%和17.86%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤的抑制率达60%以上;免疫组化显示,苦参碱作用后H22细胞内及小鼠肿瘤组织内Bc l-2蛋白的表达水平下降,Bax蛋白表达增强。电镜证实苦参碱治疗后荷瘤小鼠肿瘤组织内有凋亡细胞和凋亡小体的存在。结论:苦参碱在体内体外都对小鼠H22肝癌细胞表现出较强的抗肿瘤作用和诱导凋亡作用,促凋亡作用与其上调细胞内Bax表达,抑制Bc l-2表达有关。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的 :研究银杏叶提取物 (ExtractofGinkgoBilboa,EGB)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法 :应用EGB对四氧嘧啶糖尿病大鼠进行了8wk治疗 ,观察其对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。结果 :EGB能明显提高血清及肾组织中超氧化物歧化酶 (SOD)及谷光甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活性 ,改善基底膜增厚及基质增生 ,减少实验大鼠肾脏尿蛋白排泄量 ,减轻肾功能损害。结论 :EGB在预防与治疗糖尿病肾病方面有一定作用。

苦参碱抗肿瘤作用及其机制的初步研究

目的:研究中药苦参碱(Matrine)的抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变。建立荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;MTT法测定苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖作用的影响;ELISA法检测苦参碱治疗后小鼠血清中IL-2和IL-12的活性。结果:苦参碱可显著抑制小鼠肿瘤细胞的体外分裂和增殖,且抑制作用呈浓度和时间依赖性,使G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数降低。苦参碱对小鼠实体瘤生长具有显著抑制作用,抑瘤率高达60.7%以上;明显抑制小鼠静止PBMC的体外增殖作用;不能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL-12的含量。结论:苦参碱具有较强的抗肿瘤作用,体内体外却表现出一定的免疫抑制作用,提高机体的免疫功能不是苦参碱发挥抗癌活性的主要机制。

全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征

目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征，为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据。方法 建立大鼠全脑缺血模型，采用TTC染色、原位细胞凋亡检测（原位末端标记法，TUNEL）及AO／EB荧光比色法观察脑缺血再灌后海马、皮层凋亡发生的数量和分布，用荧光指示剂Fura-2 AM标记，检测脑海马细胞内游离钙的浓度。结果 TUNEL显示再灌注3h海马部位即出现散在凋亡细胞，并向皮层区域扩展，24—48h达高峰；坏死细胞迟于凋亡出现，弥散分布于凋亡细胞周围，再灌注48h后坏死细胞增多，72h最多。AO／EB法显示海马、额叶和顶叶凋亡细胞总数分布在再灌注后24h和72h达高峰，并显著高于对照组（P〈0．05）。TTC染色证实全脑缺血再灌注后不出现梗死灶，而是在海马及大脑皮层有弥散性坏死。胞内[Ca^2＋];各时间点与对照相比匀显著升高（P〈0．01）。结论 全脑缺血再灌后受累神经元经历了由凋亡到死亡的过程，对缺血敏感的海马神经元首先受损，并向顶叶和额叶皮层扩展，细胞质内[Ca^2＋]i增加是主要原因。利用凋亡时间窗进行早期干预可能有益于保护和挽救凋亡前期神经元，减小继发性损害的严重程度。

苦参碱对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响

目的 研究苦参碱的体内抑瘤效应与荷瘤机体免疫功能的关系 ,初步探讨苦参碱抑瘤作用的免疫学机制。方法 采用 MTT法观察不同剂量苦参碱对荷瘤小鼠外周血淋巴细胞 (PBL )增殖能力的影响 ;采用小鼠 H2 2 肝癌细胞实体瘤模型进行苦参碱的体内抑瘤实验 ,测定肿瘤生长抑制率 (IR) ,观察荷瘤小鼠免疫器官质量和病理学形态的改变 ;EL ISA法检测小鼠血清中白细胞介素 - 2 (IL - 2 )和白细胞介素 - 12 (IL - 12 )水平。结果 高、低剂量苦参碱对小鼠 H2 2 实体瘤生长具有明显抑制作用 ,抑瘤率分别为 6 0 .7%和 6 2 .5 % (P<0 .0 1) ;体外增殖试验显示 ,苦参碱单独作用时 ,对荷瘤小鼠静止 PBL体外增殖的抑制作用较明显 ,但对刀豆蛋白 A (Con A)活化的荷瘤小鼠PBL 的体外增殖反应表现出一定的促进作用 ,随苦参碱质量浓度的增高 ,促进作用随之减弱 ;苦参碱治疗后小鼠的脾脏和胸腺质量减轻 ,其中以脾脏变化更为明显 (P<0 .0 1) ,病理切片显示胸腺皮质变薄 ;苦参碱不能提高荷瘤小鼠血清 IL - 2和 IL - 12水平 (P>0 .0 5 )。结论 苦参碱在体内具有较强的抗肿瘤作用 ,但在体内、体外都表现出一定的免疫抑制作用 ,显示苦参碱的抗肿瘤活性不是通过提高机体的免疫功能来实现的。

苦参碱对小鼠H_(22)细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用。方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H2 2 的体外杀伤作用;AnnexinV -FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H2 2 细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H2 2 移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl- 2、Bax蛋白表达。结果:苦参碱在体外能够明显抑制H2 2 细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为6 0 .71%和6 2 .5 3% ;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl- 2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P <0 .0 1)。结论:苦参碱在体内外对H2 2 肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl- 2表达,诱导肿瘤细胞凋亡。

脑缺血后体感诱发电位和脑电图波谱特征变化及其与细胞凋亡的关系

目的探讨大鼠全脑缺血／再灌注（I／R）后体感诱发电位（SEP）和脑电图波谱特征的变化及其与神经元分布的关系。方法SD大鼠35只，采用随机数字表法分为正常组、假手术组、全脑I／R3、12、24、48和72h组。采用四血管夹闭方法建立全脑I／R模型，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）及吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）荧光比色法检测神经元凋亡；记录I／R后不同时间脑电图和SEP的变化，观察海马、额叶皮质和顶叶皮质神经元凋亡数量。结果脑缺血后大鼠脑电图波幅较假手术组显著下降（P均〈0．05），8波构成比明显增加（P均〈0．05）；伤后SEP的P1波波峰潜伏期较假手术组显著延长（P均〈0．05），P1～N1波波幅显著下降（P均〈0．05）；这些变化与伤后神经元凋亡以及自海马逐渐向额叶皮质和顶叶皮质扩展的结果相吻合。结论脑电图和SEP结合分析可以反映脑缺血损伤后神经元凋亡的发生过程，对临床脑缺血患者的病情和预后判断有参考价值。