基于多元化兴趣引导的《禽生产学》课程教学改革实践

《禽生产学》是动物科学相关专业的主要专业课之一,是一门重要的应用科学,是高等农业院校农学类动物科学专业学生必修的专业核心课,《禽生产学》在教学实践中占据显要地位。然而,当前课程教学存在较大的教学矛盾。为解决这些矛盾,该文采用更新课程教学育人目标时代化、教育技术多样化、授课方式多元化、考核方式全面真实化等多元化兴趣引导的角度分析了《禽生产学》的具体教学方法。该教学模式不仅可发挥学生学习的主体作用,激发学生专业兴趣和动力,培养学生创新思维,而且为提升教学实效提供思路和参考。

广西瑶鸡商品代杂交组合的屠宰性能与肉品质分析

为了更有效地保护和利用广西瑶鸡的优良种质特性,本研究以广西瑶鸡Y系为终端父本分别与两系配套组合AH系、DH系和MH系进行三系杂交组合的配合力测定实验。3种组合模式(Y×AH系、Y×DH系、Y×MH系)分别选取公母各50只测定生产性能,并选取16周龄公母各6只进行屠宰性能与肉品质的测定,最终筛选出最佳配套组合。结果表明:YAH生长速度在2个性别中均极显著优于YDH、YMH组合,其日均采食量也明显高于其他组合,因此表现出YMH组合公鸡饲料报酬最高(3.78),YAH组合母鸡饲料报酬最高(4.44);屠宰性能方面,YAH组合公鸡在全净膛、肌间脂带宽、皮脂厚表现最佳,而该组合母鸡在屠体重、肌间脂带宽、皮脂厚等方面表现最佳,其他各屠宰性状与其他组合无异;肉品质方面,YAH组合公鸡和母鸡在胸肌干物质、胸肌肌内脂肪含量方面均显著高于其他组合,此外YAH母鸡的腿肌干物质含量同样显著高于其他组合。综上,Y×AH杂交组合在生产性能、屠宰性能及肉品质等方面表现均表现出较高的生产水平,为广西瑶鸡配套系组合提供可靠的数据支撑。

TIMP3对鸡前脂肪细胞增殖与分化的影响

实验旨在为探讨组织金属蛋白酶抑制剂3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase 3,TIMP3)对鸡前脂肪细胞增殖与分化的影响。以qRT-PCR技术检测TIMP3在30周龄固始鸡不同组织和2周龄固始鸡胸肌脂肪细胞不同分化时期中的表达情况,通过脂质体转染法在肌内前脂肪细胞中过表达和干扰TIMP3,利用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷、Cell Counting Kit-8法、油红O染色法、qRT-PCR技术检测TIMP3对脂肪细胞的增殖和分化的影响。结果表明:TIMP3在不同组织和不同发育阶段的表达存在差异,TIMP3在固始鸡胸肌中表达量最高,在不同分化时期的胸肌脂肪细胞中的表达量先升高后下降,在第4天最高;在鸡肌内前脂肪细胞中过表达TIMP3后,细胞显著增殖且存活率上升(P<0.05),细胞内脂滴增加(P<0.001),脂肪细胞分化标志基因脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FASN)、过氧化物酶体增殖物激活受体-a(Peroxisome ProliferatorActivated Receptor-Alpha,PPARa)上调(P<0.001);干扰TIMP3的检测结果则相反。由此可见,TIMP3能促进鸡前脂肪细胞的增殖和脂肪细胞的分化,参与鸡脂肪沉积过程。

固始鸡与AA肉鸡胸肌脂质组特征及关键候选基因鉴定

为研究不同鸡种胸肌的脂质组成,试验采用液相色谱质谱联用(LC-MS)技术对120日龄固始鸡和45日龄AA肉鸡胸肌的脂质组成进行表征。结果显示:共鉴定到51个亚类1 523种脂质分子,以甘油磷脂类(GPs)和甘油酯类(GLs)为主。筛选出207个显著性差异脂质分子(同时满足VIP>1、P<0.05),其中甘油三酯(TG)含量在固始鸡中较高,磷脂酰胆碱(PC)含量在AA肉鸡中较高。联合转录组结果分析,从固始鸡和AA肉鸡胸肌中分别筛选到49个和154个基因-脂质标识物对。基于上述结果,鉴定到17个关键基因和84个脂质标识物以及甘油磷脂代谢和甘油酯代谢两个关键通路,揭示了固始鸡和AA肉鸡胸肌肉质不同的脂质标识物和关键调控通路及候选基因。结果表明:TG和TC脂类分子含量的差异可能是导致固始鸡和AA肉鸡间肉质风味差异的主要原因。

鸡FGF6基因生物学特性及其多态性与经济性状的关联分析

旨在探究鸡成纤维细胞生长因子6(fibroblast growth factor 6,FGF6)基因的生物学特性,挖掘FGF6基因单核苷酸多态性(SNP)位点并分析其与经济性状的相关性,为后续研究鸡FGF6基因对生长性状的影响提供参考。本研究对FGF6蛋白序列进行生物信息学分析;基于768只固始鸡-安卡鸡F_2资源群的GBS数据及相关经济性状表型数据对FGF6基因包含启动子2 kb区域SNP位点进行筛选,并进行连锁不平衡和关联分析,探究FGF6基因SNP和单倍型与鸡经济性状的相关性。生物信息学分析结果显示,鸡FGF6氨基酸序列与火鸡同源性为91.26%;系统进化分析表明,鸡FGF6与火鸡亲缘关系最近,其次是绿海龟,与斑马鱼遗传距离最远;保守性分析显示不同物种间FGF6保守性较高。鸡FGF6蛋白为亲水性蛋白、存在1个跨膜区,主要定位于细胞质;其二级、三级结构相符。鸡FGF6蛋白被22个磷酸化位点和1个N-糖基化位点修饰;与其受体家族FGFR1~4和EGF存在互作关系。鸡FGF6基因启动子区域筛选到6个SNPs位点,均位于1号内含子上;多态性分析显示6个SNPs位点存在高多态性,其中5个处于哈代-温伯格平衡,呈强连锁状态(D′=1,r^(2)=1)。关联分析结果显示,rs73399071位点与F_2资源群不同阶段体重(BW)、胫长(SL)、胫围(SG)、体斜长(BSL)等17个生长性状指标显著相关(P<0.05),与全净膛重(EW)、半净膛重(SEW)、屠体重(CW)、胸肌重(BMW)等10个屠体性状指标显著相关(P<0.05),与肉质性状的关联未达到显著水平(P>0.05),与高密度脂蛋白(HDL)和胆碱酯酶(ChE)显著相关(P<0.05),CC基因型个体的大部分性状表型均值高于GG基因型个体;单倍型组合分析显示不同阶段CCTTCCTTCC组合个体的体重均高于其他单倍型组合个体。本研究结果为进一步探究鸡FGF6基因的功能提供理论参考,筛选到FGF6基因存在5个与固始鸡-安卡鸡F_2资源群体重、体尺、屠体性状和血液生化指标显著关联的SNPs位点,为鸡育种提供候选的分子标记,为地方鸡标记辅助选择提供新的思路。

基于全基因组重测序分析中国地方鸡的群体结构和保护优先权

[目的]旨在对中国本土鸡品种群体结构和保护优先权进行分析,促进畜牧业的可持续健康发展。[方法]收集了8个品种、共96个个体的重测序数据。通过主成分PCA分析、构建系统进化树及近交和遗传距离分析来了解群体结构,计算去除每个品种后总体基因和等位基因多样性的增减、模拟计算品种对具有最大基因多样性和最大等位基因多样性合成群体的贡献占比,进而系统评估品种保护优先权。[结果]所研究的品种可分为4个集群,其中藏鸡与其他品种分化最高,其自身分为2个亚群,其他品种则分为南北2个集群。藏鸡对遗传多样性的贡献最大;其次是文昌鸡和瑶鸡,此三者应考虑作为优先保护的品种。[结论]该研究结果将可为地方鸡品种保护与开发利用提供参考。

鸡SLMO2基因CDS区克隆、生物信息学及组织表达分析

为了探究类果蝇慢移基因的氨基酸序列特征,探索其在不同肤色鸡不同组织中mRNA表达变化规律,实验采集不同肤色鸡各组织,PCR克隆获得SLMO2完整CDS区,进行生物信息学分析及组织表达分析。实验得到SLMO2的CDS区序列全长560 bp,其中可编码氨基酸174个。生物信息学研究结果表明,鸡SLMO2蛋白并不具有信号肽和跨膜结构,蛋白主要结构以无规性卷曲的α-螺旋结构结合为主,且蛋白分布在线粒体内膜间隙。通过氨基酸序列对比发现,鸡与爪蟾的亲缘关系较近。qRT-PCR结果表明,SLMO2在背肤组织中相对表达量极显著高于其他组织,且该基因在丝羽乌骨鸡背肤组织中表达量极显著高于“豫粉1号”H系鸡。以上结果为进一步探究鸡SLMO2对黑色素沉积的调控机制提供了理论依据。

太子参多糖对雏鸡肠道指标及微生物区系的影响

试验旨在探究日粮中添加太子参多糖(PHP)对雏鸡肠道指标及微生物区系的影响。选取7日龄平均初始体重为(62.27±8.26)g的固始公鸡400只,随机分为4组,每组100只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加100、200、400 mg/kg PHP。试验期28 d。在14、21、28、35日龄,每组随机选取5只鸡,采集肠道样品检测各项指标。结果表明:与对照组相比,添加200、400 mg/kg PHP提高了21、28、35日龄雏鸡盲肠食糜蛋白酶含量(P<0.05),提高了28日龄和35日龄盲肠食糜淀粉酶含量(P<0.05),提高了21、28日龄盲肠食糜脂肪酶含量(P<0.05);200 mg/kg PHP组14日龄盲肠食糜淀粉酶含量提高(P<0.05);100 mg/kg PHP组28日龄的盲肠食糜脂肪酶含量提高(P<0.05);200 mg/kg PHP组雏鸡28日龄十二指肠、空肠的绒毛高度与隐窝深度的比值以及与雏鸡生长发育相关的基因ZO-1、BMP4、GATA3和SMAD4的相对表达量均提高(P<0.05)。盲肠α、β多样性显示,与对照组相比,200 mg/kg PHP组的Chao1、Simpson和Shannon指数有所降低,变形杆菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和巨单胞菌属(Megamonas)的相对丰度降低,厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidota)的比值、乳杆菌属(Lactobacillus)和粪杆菌属(Faecalibacterium)的相对丰度均提高,但差异均不显著。Lefse分析与KEGG功能预测结果表明,200mg/kgPHP组优势菌是放线菌门的Ilumatobacteraceae,并显著富集在蛋白质输出、糖代谢、药物代谢、脂肪酸代谢等通路。以上结果表明,在日粮中添加200 mg/kg PHP可通过调节肠道菌群的微生态平衡,提高肠道消化酶活性以及改善雏鸡肠黏膜形态,来增强小肠对营养物质的吸收能力,提高营养物质利用率,进而促进雏鸡肠道生长发育。

河南省地方鸡骨骼特性的研究

【目的】研究河南省地方鸡骨骼特性的特点与差异。【方法】随机选取固始鸡、河南斗鸡、正阳三黄鸡、淅川乌骨鸡和卢氏鸡这5个河南省地方鸡品种的成年鸡,每个品种16只,公母数量各8只,屠宰后取股骨、胫骨和跖骨,分别对公母鸡的股骨、胫骨、跖骨的骨骼形态计量学指标,以及胫骨骨密度、骨强度和母鸡的胫骨骨骼成分指标测定,并进行方差分析和主成分分析。【结果】河南省地方鸡不同品种中,河南斗鸡的股骨、胫骨和跖骨的质量、长度均显著高于其他品种,河南斗鸡(公)骨强度和骨密度显著高于正阳三黄鸡(公)和卢氏鸡(公),与固始鸡(公)和淅川乌骨鸡(公)无显著差异。除了河南斗鸡(母)外,淅川乌骨鸡(母)的骨密度、骨强度均显著高于其他品种母鸡。正阳三黄鸡(母)和淅川乌骨鸡(母)胫骨钙含量显著高于固始鸡(母)、灰分显著高于固始鸡(母)和卢氏鸡(母),卢氏鸡(母)胫骨磷最高,显著高于淅川乌骨鸡(母)。结合主成分分析从22个骨骼指标提取出2个主成分,能够反映骨骼指标的信息,河南斗鸡综合评分最高。【结论】河南斗鸡的骨骼特性要明显优于其他4个地方鸡品种,其次是淅川乌骨鸡、固始鸡、正阳三黄鸡和卢氏鸡。

固始鸡A系与矮小贵妃鸡杂交F_(1)代生长性能探究及生长曲线拟合

试验旨在探究固始鸡A系与矮小贵妃鸡杂交后代的生长发育规律,选育出最优杂交组合。试验以固始鸡A系和矮小贵妃鸡进行正反交后代为素材,每周测量体重,90日龄和110日龄分别测量体尺性状并进行相关性分析,使用Logistic、Gompertz和Von-Bertalanffy三种模型拟合其生长曲线。结果显示,前4周,AG公母鸡与GA公母鸡的生长速度差异不大,4周龄以后,生长速度出现差异分化,GA公鸡的拐点周龄为8周,AG公鸡的拐点周龄为7.2周。GA母鸡的拐点周龄为7.9周,AG母鸡的拐点周龄为6.7周。90日龄时,GA母鸡的体重、体斜长、胫长、胸深优于AG母鸡,110日龄时,GA公鸡的体斜长优于AG公鸡,与AG群体相比,GA群体体尺性状较为优良。GA群体体重与体斜长和骨盆宽存在显著相关(P<0.05)。Gompertz模型对AG公鸡与GA母鸡这两个群体拟合效果更佳,Logistic曲线对AG母鸡和GA公鸡这两个群体拟合效果更佳。综上所述,矮小贵妃鸡♂×固始鸡A系♀为最优杂交组合。

不同来源外泌体对骨骼发育及骨骼疾病的影响

在骨骼发育过程中,骨骼是通过膜内成骨和软骨内成骨两种不同的成骨机制形成的,软骨内骨化是长骨发育的第二阶段,生长板是机体进行软骨内骨化的场所,生长板软骨细胞受损会破坏软骨内成骨的进程,严重抑制骨骼发育或产生骨骼疾病。外泌体是由膜的双层内陷形成,具有脂质双分子层的细胞外囊泡,可以包裹蛋白质、脂质和核酸(非编码RNA、mRNA)等,作用于靶细胞从而发挥细胞间通讯的关键作用。外泌体作为近年来研究的热点,有大量研究发现其与骨骼发育、骨骼疾病的发生和治疗关系密切。因此,本文主要综述了不同来源外泌体对骨骼发育和骨骼疾病的影响,梳理了不同来源外泌体对骨骼的调控作用,为探究不同来源外泌体在畜禽骨骼发育与骨骼疾病方面的预防和治疗提供理论依据。

5个贵妃鸡配套系生长发育规律、屠宰性能和肉品质比较分析

旨在筛选出生长性能好、屠宰性能优良、肉品质鲜美的贵妃鸡杂交组合,为贵妃鸡的品种改良提供科学依据。本研究选择体重接近的20周龄健康贵妃鸡为母本,与河南农业大学家禽种质资源场培育的同周龄的豫农D系、豫农L系、豫农SHj系、豫农C系和豫农H系进行杂交配套试验,杂交后代分别为D×HD、L×HD、SHj×HD、C×HD、H×HD。各组合按性别选取健康雏鸡各50只,常规饲养至12周龄,每两周固定时间测定体重,采用Logistic、Gompertz和Von Bertallanffy 3种非线性生长曲线模型对其体重进行拟合,并随机挑选各组合12周龄健康试验鸡公母各6只进行屠宰,测定其生长性能、屠宰性能以及肉品质等指标,对各指标进行生物统计学分析。结果表明:Gompertz模型的拟合结果最优,拟合度均在0.998以上;在生产性能方面,C×HD组合的平均体重和体尺指标显著高于其他组合(P<0.05)且母鸡饲料报酬最高(2.59),SHj×HD组合公鸡饲料报酬最高(2.39);在屠宰性能方面,除L×HD和H×HD组合中的母鸡之外,其它组合公母鸡均达到半净膛率70%以上,全净膛率60%以上,肉用性能良好;在肉品质方面,D×HD组合的肉质较优于其他组合,但各组合滴水损失无显著差异。基于以上结果,C×HD组合在生长性能、屠宰性能、肉品质等方面大多表现优异,可以在一定程度上满足消费者的需求。此外,研究结果也为贵妃鸡遗传资源的保护、进一步开发和品种选育提供重要参考依据,为贵妃鸡的高效养殖和推广提供了有力的支持。

干扰素调节因子敲减细胞系的构建及其对猪伪狂犬病病毒增殖的影响

旨在揭示干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRFs)对猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)增殖的影响,本研究通过shRNA技术构建敲减IRF 1-9的PK15细胞系,并检测其敲减效率。采用流式细胞术以及滴度测定检测敲减IRF 1-9后PRV的增殖情况;利用RT-qPCR技术检测PRV感染细胞后PRV-gB、IFN-β、ISG-15和IL-6的mRNA表达水平;Western blot技术检测PRV感染细胞后gB蛋白的表达水平。敲减效率测定结果显示,PK15细胞中的IRF 1-9 mRNA表达水平均有显著降低;流式细胞术及滴度测定结果表明,敲减IRF 1-9基因后有助于PRV的增殖;RT-qPCR及Western blot结果证明,敲减IRF 1-9基因后,PRV-gB mRNA及蛋白表达水平均有显著提高;细胞炎性因子的mRNA表达水平检测结果发现,敲减IRF 1-9抑制PRV诱导的IFN-β、ISG-15以及IL-6 mRNA表达。综上所述,IRF 1-9是PRV在PK-15细胞内复制的宿主限制因子。

地方农业高校科技创新团队建设的实践探索——以河南农业大学地方鸡保护利用创新团队为例

地方农业高校是国家农业科技创新体系和实现农业强国、农业农村现代化的重要力量。科技创新团队建设状况直接影响着地方农业高校高质量发展的程度。以团队内部管理的视角,深度解析河南农业大学地方鸡保护利用创新团队的建设案例,从聚焦稳定方向、紧盯产业需求、注重交叉融合、创新转化模式、发挥头雁效应、注重激励创新、塑造文化氛围、坚守立德树人等方面探索该团队的发展道路,提出地方农业高校科技创新团队建设要在以下5个方面找准着力点:设定明确共同目标、坚持特色研究方向、服务区域产业需求、注重人员交叉互补、涵养团队文化氛围,进而推动团队、学科和学校持续健康高质量发展。

鸡骨骼肌中天然反义lncRNA VGLL2-AS的鉴定及其与VGLL2的关系研究

旨在探究鸡骨骼肌中VGLL2基因天然反义链转录本VGLL2 AS lncRNA(VGLL2-AS)与VGLL2的关系。本研究首先采用PCR和测序技术验证VGLL2-AS是否存在;之后分别采集不同周龄固始蛋鸡(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄,每个周龄各6只)组织样,采用荧光定量PCR分析VGLL2基因和其反义链转录本VGLL2-AS的表达谱;采用双向转录试验和核酸酶保护试验检测VGLL2和VGLL2-AS是否可以双向转录且两者之间关系;体外分离培养原代成肌细胞(11胚龄固始鸡胚),然后用2μg·mL^(-1)的放线菌素D处理成肌细胞(对照组不做处理),收取处理不同时间点细胞(0~8 h,每组各个时间点各做3个重复),检测VGLL2-AS与VGLL2的半衰期;分离鸡成肌细胞的细胞核和细胞质,通过RT-qPCR方法确定两者的细胞定位;利用PCR扩增及测序对VGLL2的转录本进行验证;最后利用RT-qPCR检测它们在固始蛋鸡胸肌组织(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄每个周龄各6只)中的时空表达规律和相关性。结果表明,VGLL2-AS在鸡的转录组中真实存在;VGLL2与VGLL2-AS均在肌肉中特异高表达(P<0.05);VGLL2-AS与VGLL2可以进行双向转录且二者之间可以形成双链RNA;VGLL2-AS半衰期较VGLL2长;在成肌细胞中,VGLL2-AS和VGLL2主要定位于细胞质中(P<0.001);VGLL2只存在VGLL2-mRNA、VGLL2-X2和VGLL2-X3转录本;VGLL2-mRNA和VGLL2-X3与VGLL2-AS表达趋势一致,且VGLL2-mRNA、X3和VGLL2-AS的表达呈现极强的正相关(r分别为0.943和0.935,P<0.01)。综上所述,VGLL2-AS作为VGLL2的反义链编码的lncRNA定位于细胞质中,可能通过与VGLL2形成的双链RNA之间的相互作用,然后参与调节VGLL2的表达并维持其稳定性,最终在鸡的早期肌肉发育中发挥重要作用。本研究的结果扩展了鸡中关于NATs的研究,并为鸡VGLL2基因与其天然反义链转录本VGLL2-AS在鸡骨骼肌发育中的生物学功能的研究奠定了基础,对于提高禽类的生长发育具有一定的意义。

我国畜牧业绿色发展:现状、制约与战略应对

在界定畜牧业绿色发展内涵的基础上,运用统计分析技术和熵值法分析了我国畜牧业绿色发展不同维度发展状况和整体水平,总结面临的制约并提出相应的战略应对举措。结果发现,2010—2019年资源节约、环境友好、产品安全和产出高效等4个维度表示的畜牧业绿色发展水平不断提升,总体水平稳中有升,区域间布局呈现“北高南低、中快北慢”的发展态势;畜牧业绿色发展面临着养殖模式固化、技术研发与采用不足、结构布局不优、智能升级不力等制约;畜牧业绿色发展亟需强化育种、疫苗、饲料、数字化、屠宰加工等全产业链技术开发,推行种养结合、规模化、特色化等生产模式,优化产品结构和区域布局,提升智能化数字化水平。

鸡成纤维细胞生长因子家族生物信息学特性及表达调控

【目的】探索鸡成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族的生物学特性及表达调控,为进一步研究FGF家族相关成员的生物学功能奠定基础。【方法】利用在线软件对鸡FGF家族19个成员的生物信息学特性进行系统分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术对鸡FGF家族成员的组织时空表达特性及雌激素对FGF 19和FGF23基因表达的影响进行分析;利用主成分分析对鸡FGF家族基因的遗传变异及其对不同鸡品种形成的贡献进行分析;采用混合线性模型对FGF 19基因上的遗传变异与固始鸡不同阶段产蛋量进行关联分析。【结果】鸡FGF家族各成员均有1个相同的保守基序和FGF结构域。鸡FGF家族19个成员聚类在3个分支上。主成分分析显示,鸡FGF家族有助于蛋鸡和肉鸡品种分类。鸡FGF家族各成员在肝脏、肾脏、十二指肠、卵巢和腹脂器官中均有表达。FGF 19基因在产蛋高峰期(30周龄)的卢氏鸡肝脏的表达水平显著高于产蛋前期(20周龄),而FGF 23基因的表达水平无显著变化。雌激素可显著下调鸡肝脏FGF23基因的表达,显著上调FGF19基因的表达。关联分析结果显示,FGF19基因上存在5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,包括rs17814792、rs17816980、rs17817557、rs17814446和rs17811770,除rs17814446外的4个变异位点均与固始鸡不同阶段产蛋数显著相关。【结论】FGF家族在肉鸡和蛋鸡品种形成中有重要贡献,各成员在脂质代谢相关器官中均有表达;FGF 19基因在鸡产蛋高峰期肝脏表达量高于产蛋前期,且受雌激素正向调控,对鸡产蛋性能有重要影响。

不同消毒剂及清洗方式在不同时间内对鸡舍水线的消毒效果

为探究不同消毒剂及清洗方式在消毒6、12、24、48、72、96 h后对鸡舍内水线的消毒效果,本试验采用过氧乙酸(60 mg/L)、二氯异氰脲酸钠(270~330 mg/L)、癸甲溴铵(50 mg/L)和过硫酸氢钾(1200 mg/L)4种市场上常见消毒剂,通过持续浸泡、持续冲洗、间断冲洗等不同的清洗方式对鸡舍内水线进行消毒,检测消毒前后总菌落、大肠杆菌(Escherichia coli)和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)数量。结果显示:不同消毒剂消毒6 h后对总菌落的杀菌率达到最高,分别为96.63%、96.6%、96.11%、97.03%(P>0.05);过氧乙酸、癸甲溴铵、过硫酸氢钾在消毒24 h内总菌落数以及二氯异氰脲酸钠在消毒72 h内总菌落数均小于100 cfu/mL,达到国家畜禽饮用水标准;大肠杆菌和产气荚膜梭菌在消毒6 h和24 h内的杀菌率分别达100%,间断冲洗24 h后的大肠杆菌数量低于持续浸泡(P<0.05)。本试验结果表明选用二氯异氰尿酸钠和间断冲洗的消毒方法对鸡舍内水线消毒效果最好。

鸡骨骼肌卫星细胞系的建立及分析

旨在通过慢病毒包装SV 40-LT基因并转导PMSCs以构建鸡骨骼肌卫星细胞系。本研究采集20~30枚15胚龄健康AA鸡的胸部组织,采用混合酶消化法分离培养PMSCs。将细胞随机分为两组,每组3个重复,处理组选择SV 40-LT慢病毒转染48 h后,更换含1μg·mL^(-1)的嘌呤霉素筛选培养基于处理组和对照组(病毒不转染)。待对照组细胞全部死亡,对处理组细胞进行不断传代培养,最终获得鸡骨骼肌卫星细胞系。免疫荧光试验分析鸡骨骼肌卫星细胞标志基因PAX7的表达;采用CCK-8和细胞周期分析检测细胞增殖特性;血清依赖性和软琼脂分析检测其恶性转化情况;构建诱导分化模型检测其诱导分化能力。结果表明,PMSCs中有92%细胞PAX 7基因呈阳性,可用于后续研究。SV 40-LT基因在鸡骨骼肌卫星细胞系(IMSCs P12)中的表达是原代鸡骨骼肌卫星细胞的15倍,且连续传代至12代后,IMSCs P12与PMSCs均呈纤维样状。IMSCs P12具有更高的增殖活性且没有发生恶性转化,随后,对IMSCs P12进行诱导分化,在其增殖至70%到诱导分化1 d这一阶段,IMSCs P12与PMSCs的PAX 7基因表达下调,而MyoD和MyHC基因表达上调。结果提示,本研究通过转染SV 40-LT基因成功培养了鸡骨骼肌卫星细胞系,其具有与原代鸡骨骼肌卫星细胞相似的特性。该细胞系的建立为研究家禽骨骼肌相关的功能基因提供了新的平台,也为SV 40-LT基因在家禽细胞永生化的研究奠定了基础。

基于全基因组SNP标记分析中国地方鸡品种的遗传多样性和种群结构

旨在对中国地方鸡品种的遗传多样性与种群结构进行分析。本研究使用Affymetrix Axiom 600K高密度鸡基因分型芯片对来自8个品种的157只地方鸡及233只商品鸡进行基因分型,以品种作为分组来计算各分组的观测杂合度、期望杂合度、次等位基因频率、近交系数及核苷酸多样性分析地方鸡群体的遗传多样性,利用进化树、主成分分析、群体结构、MDS等方法分析鸡群体的群体结构,基于状态同源(IBS)和群体分化系数(Fst)分析种群内部与种群之间的亲缘关系,利用长纯合片段(runs of homozygosity,ROH)估算得到基于ROH的近交系数。结果表明,各群体的观测杂合度均高于期望杂合度,次等位基因频率在0.175~0.236之间,近交系数在0.018~0.205之间,核苷酸多样性在0~6×10^(-4)之间,进化树与主成分分析表明品种间出现了明显的群体分化,地方鸡群体与商品鸡群的MDS分析发现我国地方鸡与商业肉鸡品种的遗传距离较近;IBS遗传距离在0.0929~0.3199之间;各品种成对Fst分析表明,群体间呈现中高分化程度(0.09~0.22);此次分析共得到了5242个ROH,长度分布在1~41.51 Mb之间,基于ROH的近交系数在0.010~0.150之间。以上结果表明,地方鸡遗传多样性整体较为丰富,其中狼山鸡与皖南三黄鸡的遗传多样性最高。斗鸡、固始鸡及茶花鸡近交程度较高,可能经历过近交事件。不同品种间出现了较高遗传分化,该研究结果将有助于设计和实施遗传资源保护策略,促进遗传资源在保护中利用、利用中保护。