急性脑出血模型大鼠脑组织中差异表达基因测序的验证及功能分析

背景:急性脑出血中存在差异表达的基因,这些基因与脑出血发生发展有关。目的:筛选急性脑出血大鼠模型脑组织中差异表达的基因和关键基因,并采用qPCR进行验证,分析关键基因与脑出血后神经功能、脑组织含水量的关系。方法:78只SD大鼠随机分为2组:脑出血组大鼠于右侧尾状核部位注射胶原酶构建脑出血模型,假手术组大鼠于相同部位注射等量生理盐水。运用TRIzol法将2组大鼠的脑组织提取出RNA,转录组测序,筛选急性脑出血脑组织的差异表达的基因,经过qPCR验证,分析基因与脑出血后神经功能、脑组织含水量的关系,并结合生物信息学对关键基因进行GO、KEGG功能富集分析。结果与结论:①筛选出10个关键基因,分别是CXCL8、SERPINE1、TFPI2、CXCR4、GDA、KCNQ5、ERICH3、SCN3B、CACNA1E、CCL20;②脑出血组的关键基因GDA、KCNQ5、ERICH3、SCN3B、CACNA1E含量低于假手术组(P<0.05),CXCL8、SERPINE1、TFPI2、CXCR4、CCL20含量高于假手术组(P<0.05);③关键基因GDA、KCNQ5、ERICH3、SCN3B、CACNA1E含量与脑组织含水量、神经功能缺损评分正相关(P<0.05),CXCL8、SERPINE1、TFPI2、CXCR4、CCL20含量与脑组织含水量、神经功能缺损评分负相关(P<0.05);④GO分析显示基因在生物过程差异表达基因主要富集于白细胞趋化性、趋化因子介导的信号通路;细胞组成差异表达基因主要富集于阳离子通道复合物、离子通道复合物;分子功能差异表达基因主要富集于门控通道活动、离子通道活动;⑤KEGG分析示基因集中于TNF信号通路、谷氨酸能突触、GABA能突触;⑥结论:在脑出血中出现差异表达的基因为CXCL8、SERPINE1、TFPI2、CXCR4、GDA、KCNQ5、ERICH3、SCN3B、CACNA1E、CCL20,这些基因与脑出血后脑组织含水量、神经功能相关,这些基因主要富集在细胞组分、结合功能、细胞突起等相关的生物学功能上。

小柴胡汤联合重复经颅磁刺激、盐酸度洛西汀治疗女性躯体形式障碍临床研究

目的:观察小柴胡汤联合重复经颅磁刺激、盐酸度洛西汀治疗女性躯体形式障碍的效果及安全性。方法:选取女性躯体形式障碍患者90例,将其随机分为三组:对照1组、对照2组、观察组,每组30例。对照1组给予盐酸度洛西汀胶囊治疗,对照2组在盐酸度洛西汀胶囊治疗的基础上结合重复经颅磁刺激治疗,观察组在对照2组治疗的基础上加用小柴胡汤治疗,三组患者均连续治疗8周。观察各组精神症状自评量表(SCL-90)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分、中医证候积分评分和血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、雌二醇(E_(2))水平变化及不良事件。结果:治疗8周后,观察组患者SCL-90、HAMD、HAMA评分、中医证候积分低于对照1组和对照2组(P<0.05)。治疗8周后,三组患者的血清5-HT、NE、E_(2)水平均比治疗前、治疗4周后有所上升,对照2组患者的5-HT、NE、E_(2)水平高于对照1组(P<0.05),观察组患者的5-HT、NE、E_(2)水平高于对照2组(P<0.05)。结论:小柴胡汤联合重复经颅磁刺激、盐酸度洛西汀治疗可改善女性躯体形式障碍患者的躯体症状,疗效良好。

急性脑出血患者血清MIP-1α、CCR5、MMP-9水平动态变化及其与神经功能缺损程度和预后的相关性

目的观察急性脑出血患者血清巨噬细胞趋化蛋白-1α(MIP-1α)、趋化因子受体5(CCR5)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的动态变化,并分析血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与脑出血患者神经功能缺损程度和预后的相关性。方法急性脑出血患者92例(脑出血组),均接受常规西医治疗4周;另选取同期进行体检的健康人群120例纳入健康组。脑出血组患者于入院24 h、治疗3 d、治疗7 d、治疗14 d、治疗4周、出院1个月、出院2个月、出院3个月、出院4个月时,健康组受检者于体检时,抽取静脉血,采用ELISA法检测血清MIP-1α、CCR5、MMP-9。急性脑出血患者于入院24 h、治疗3 d、治疗7 d、治疗14 d、治疗4周时,采用NIHSS评分量表评估患者神经功能缺损程度;于出院1个月、出院2个月、出院3个月、出院4个月时,采用改良Rankin量表评估患者预后情况;采用Pearson相关分析法分析血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与急性脑出血患者神经功能缺损程度和预后的相关性。结果脑出血组患者入院24 h时血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平高于健康组(P均<0.05)。随着治疗的时间延长,急性脑出血患者血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平逐渐下降,NIHSS评分也逐渐降低(P均<0.05)。急性脑出血患者治疗期间血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与NIHSS评分呈正相关(r值分别为0.969、0.992、0.911,P均<0.05)。出院后,随着康复时间的延长,急性脑出血患者血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平逐渐下降,改良Rankin量表评分逐渐升高(P均<0.05)。急性脑出血患者出院后血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与改良Rankin量表评分正相关(r值分别是0.973、0.986、0.972,P均<0.05)。结论急性脑出血患者血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平升高,经治疗后呈动态下降趋势;治疗期间,血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与急性脑出血患者神经功能缺损程度同步下降;出院后,血清MIP-1α、CCR5、MMP-9表达水平与急性脑出血患者预后正相关。

miR-34a抑制BCL-2激活NLRP1炎症小体诱导大鼠癫痫的发生

目的:探究miR-34a影响癫痫的相关机制。方法:通过MicroRNA微阵列芯片和RT-PCR分析miR-34a在癫痫大鼠中的表达量,并观察miR-34a与癫痫发作频率和脑电图的关系;预测miR-34a的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验观察其与靶基因的结合情况,观察过表达和抑制miR-34a对靶基因的影响,随后过表达和抑制靶基因,观察其对下游因子的影响,最终探究miR-34a影响癫痫的相关机制。结果:微阵列芯片和RT-PCR检测表明miR-34a在癫痫中呈高表达(P<0.05),miR-34a表达水平与癫痫发作频率呈正相关(R=0.783,P=0.003),抑制miR-34a的表达可明显减少癫痫的发作频率(P<0.05)。在线数据库TargetScan和miRDB显示miR-34a与BCL-2具有结合区域,双荧光素酶报告基因实验证明两者具有结合关系,当miR-34a过表达时,BCL-2表达量会下调,相反,当miR-34a抑制时,BCL-2表达量会上调。癫痫大鼠脑组织中NLRP1及下游相关因子Caspase-3、Caspase-1、IL-1β、IL-18高表达(P<0.05),当BCL-2抑制时,NLRP1及下游的相关因子表达量会更高,当BCL-2抑制时,结果则相反。结论:高表达的miR-34a通过抑制BCL-2,活化NLRP1炎症小体从而诱发癫痫发生。

中药单体化合物治疗癫痫的实验研究进展

癫痫的基本病理特征为脑部神经元过度放电所致的突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常。大量实验研究表明中药单体化合物在治疗癫痫方面取得不错成绩,文章选取近年来研究次数较为频繁的几味中药,如人参、全蝎、大黄、天麻等中药单体化合物,从调控离子通道、抗氧化应激、保护神经元细胞、抑制神经元细胞凋亡、抑制炎症因子等方面综述国内外期刊报道的中药单体化合物抗癫痫作用机制的实验研究进展,为癫痫的新药研发提实验依据。

小柴胡汤联合认知行为疗法对躯体形式障碍的疗效相关因素分析

目的探讨影响小柴胡汤联合心理干预对躯体形式障碍(somatoform disorders,SFD)患者的疗效相关因素。方法采用单盲抽样法,选取广西中医药大学第一附属医院脑病科门诊及住院部的SFD患者为研究对象,将SFD患者的年龄、依从性、躯体形式障碍程度、疗程、心理干预频率、病程、职业、中医证型、治疗方式等资料进行赋值,采用Logistic回归分析法进行相关因素分析。结果单因素分析表明,SFD患者的年龄、依从性、病程、躯体形式障碍严重程度、疗程、心理干预频率、中医证型、治疗方式与疗效存在相关性(P<0.05);Logistic回归分析显示,躯体障碍程度是影响小柴胡汤联合认知行为疗法治疗SFD患者疗效的最大因素(OR=5.675,P<0.05)。结论小柴胡汤联合认知行为疗法治疗躯体形式障碍有效,同时应关注影响疗效的相关因素,有助于提高疗效。

基于NLRP3通路探讨中医药治疗抑郁症作用机制的研究进展

探讨基于NLRP3通路中医药治疗抑郁症作用机制的研究进展,以期为临床运用中医药治疗抑郁症提供依据。以NLRP3、中医药、抑郁症作为重点词检索PubMed、中国期刊全文数据库等数据库中近年来中医药基于NLRP3通路发挥抗抑郁作用的相关实验性文献进行整理归纳。中医药可以通过抑制NLRP3的激活,保护神经细胞,以减少动物实验模型抑郁样行为。中医药可抑制NLRP3通路发挥抗抑郁作用。

脑出血老龄鼠脑组织中差异表达的miRNA测序、验证及功能

目的利用转录组测序技术筛选脑出血脑组织中差异表达的微小RNA(miRNA),通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行验证,并分析差异表达的miRNA与脑出血后脑组织含水量的关系。方法采用胶原酶构建脑出血老龄鼠(ICH组),另外设立空白组(NC组),将两组脑组织运用Trizol法提取组织RNA,同时构建链特异性转录组文库和sRNA文库,筛选脑出血的miRNA,通过RT-PCR进行验证,并分析差异表达的miRNA与脑出血后脑组织含水量的关系,并运用生物信息学技术对差异基因进行基因本体论(GO)功能富集分析。结果脑出血大鼠中差异表达的miRNA共有6个,其中高表达的miRNA是miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298,低表达的miRNA是miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p;miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298与脑出血后脑组织含水量呈明显正相关(r=0.885、0.820、0.935,P<0.05),miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p与脑出血后脑组织含水量呈明显负相关(r=-0.495、-0.773、-0.838,P<0.05);这些miRNA主要富集在细胞组分、结合功能、细胞突起等相关的生物学功能上。结论miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p、miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298与脑出血后脑组织含水量相关,这些miRNA主要富集在细胞组分、结合功能、细胞突起等相关的生物学功能上。