Cariostat法对成年患者的龋活跃性检测的效果评价

目的 研究Cariostat检测法用于成年患者患龋风险评估的可行性,为不同年龄段成年门诊患者的龋病防治提供参考依据。方法 用Cariostat检测法对南京医科大学附属口腔医院门诊就诊的52例不同年龄段成年患者(18~24岁,25~34岁,35~44岁,45~54岁,≥55岁)进行龋活跃性检测。并按照世界卫生组织《口腔健康调查基本方法》第5版的标准进行口腔检查,同时进行现场问卷调查,用于Cariogram系统评估。口腔检查包括牙列状况、患龋情况等,问卷调查包括饮食习惯、口腔保健习惯等。分析不同年龄段成年门诊患者患龋现状,用Cariostat法检测不同年龄段成年门诊患者的龋活跃性,得出其患龋风险等级,并与Cariogram系统评估的患龋风险等级进行比较,评价Cariostat检测法与Cariogram龋风险评估系统的一致性。结果 Cariostat检测法得出的不同龋风险等级的成年门诊患者低风险组与中、高风险组的龋面均有差异(P<0.05),Cariogram不同龋风险等级的成年门诊患者低风险组与中、高风险组的龋均、龋面均有差异(P<0.05);Cariostat检测法与Cariogram龋风险评估系统对成年患者龋风险等级的评估结果表明,在≥55岁组Kappa值为0.467(P<0.05),为中等一致性。结论 Cariostat检测法有利于了解成年门诊患者的龋活跃性,尤其是对55岁及以上患者更为准确有效。

活化α7乙酰胆碱受体促进LPS刺激的人牙髓干细胞牙/骨向分化

目的:探讨活化α7乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)联合钙离子(calcium ion,Ca^(2+)对LPS刺激的人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)牙/骨向分化的影响。方法:分离培养DPSC,流式细胞术对DPSC进行表面标志物表达鉴定。CCK-8检测α7-nAChR激动剂PNU-282987和Ca^(2+)对DPSC增殖的影响。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和染色筛选PNU-282987促进DPSC表达ALP活性的最佳浓度。用大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)模拟炎性微环境刺激DPSC。采用免疫印迹分析(Western blot,WB)、实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和茜素红染色等方法检测牙/骨向分化的相关蛋白:Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,COL-I)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、骨钙素(osteopontin,OPN)、ALP、核心转录因子-2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX),相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和矿化基质表达情况。Fura-2AM用于检测细胞内Ca^(2+)流动情况。结果:CCK-8实验显示,PNU-282987浓度低于10μmol/L时对细胞增殖无抑制作用,且此浓度处理LPS刺激的DPSC后ALP活性增加最明显;Ca^(2+)浓度低于2 mmol/L对细胞增殖无抑制作用;Western blot和RT-qPCR实验显示,PNU-282987及Ca^(2+)处理后的LPS刺激的DPSC牙/骨向分化相关蛋白(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)的表达及矿化基质形成均明显上调,二者联合后上调最显著(P <0.001)。Fura-2 AM钙离子探针结果显示DPSC细胞内Ca^(2+)浓度增加。结论:10μmol/L PNU-282987联合2 mmol/L Ca^(2+)可以促进LPS刺激的DPSC的牙/骨向分化能力。

磷酸化聚酰胺-胺交联胶原蛋白支架体内成骨能力初探

目的:探究磷酸化聚酰胺-胺(P-PAMAM)树状大分子交联胶原蛋白支架在体内成骨效能。方法:通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)对P-PAMAM进行表征,扫描电镜对胶原蛋白支架、聚酰胺-胺(PAMAM)复合胶原蛋白支架及P-PAMAM复合胶原蛋白支架进行形态表征。将3种复合支架植入SD大鼠颅骨骨缺损后,使用Micro-CT三维重建分析骨愈合过程中骨质、骨量的变化,采用HE染色及Masson染色对大鼠颅骨标本进行组织学分析。结果:FTIR显示PAMAM被成功磷酸化;扫描电镜显示,复合支架均具有良好的孔隙;体内成骨实验显示,与胶原蛋白支架和PAMAM复合胶原蛋白支架相比,P-PAMAM复合胶原蛋白支架具有更好的成骨诱导作用。结论:P-PAMAM树状大分子复合胶原蛋白支架在体内具有促进成骨作用。

人参皂苷Rg1促进人牙龈成纤维细胞增殖、迁移及成骨分化的研究

目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、迁移及成骨分化的影响及分子机制。方法采用组织块法分离培养HGFs,并进行形态学和免疫荧光鉴定;取第3代HGFs,CCK-8法检测6种浓度的GsRg1(0、6.25、12.5、25、50、100 mg/L)对HGFs增殖的影响;Transwell实验检测不同浓度GsRg1对HGFs迁移能力的影响;碱性磷酸酶(ALP)染色检测成骨能力;茜素红染色观察并定量钙结节;qRT-PCR检测COL-Ⅰ、OCN和OPN成骨基因表达;Western blot检测OCN、OPN和COL-Ⅰ以及PI3K/AKT信号通路相关分子的蛋白表达情况。结果与对照组比较,浓度为12.5、25、50、100mg/L GsRg1可明显提高HGFs增殖能力(P<0.05),其中100 mg/L GsRg1促增殖作用最强,6.25 mg/L GsRg1组与对照组比较差异无统计学意义;GsRg1处理后HGFs迁移能力增强,且呈浓度依赖。与对照组比较,100 mg/L GsRg1组ALP活性明显增加(P<0.01);茜素红染色钙结节定量明显增多(P<0.01);成骨相关基因OCN、OPN和COL-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平随时间上调明显(P<0.05),而PI3K、AKT蛋白表达水平无明显变化。结论GsRg1可以促进HGFs增殖和迁移,100 mg/L GsRg1能够促进HGFs的成骨分化,可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。

不同湿度及酸蚀对2种通用型粘接剂粘接强度的影响

目的研究牙本质表面不同湿润度及酸蚀对2种通用型粘接剂——Single Bond Universal(SBU)、Prime Bond Universal(PBU)粘接强度的影响。方法选取60颗人新鲜无龋磨牙,随机均分为6组,制备出一个矩形的平坦、光滑的牙本质粘接面,每个粘接面被均分为两部分,一侧进行酸蚀处理,另一侧不进行酸蚀处理,利用蒸馏水移液器制备出干燥、湿润和过湿的牙本质表面,分别用SBU和PBU进行粘接。树脂固化后垂直于牙本质表面切割出1 mm×1 mm的柱形小棒,在万能测试仪上测试其微剪切粘接强度;采用体视显微镜观察界面断裂模式,并在扫描电子显微镜下观察各组树脂-牙本质粘接界面形态。每两组间采用独立样本t检验进行统计学分析(P<0.05)。结果(1)酸蚀模式、粘接剂、湿润度三种因素均有统计学意义。(2)在酸蚀组,无论是SBU还是PBU,3种湿度牙本质表面的粘接强度差异无统计学意义(P>0.05);在未酸蚀组,SBU在干燥牙本质表面的粘接强度明显低于在湿润和过湿牙本质表面的粘接强度,差异有统计学意义(P<0.05),PBU在未酸蚀的3种不同湿度牙本质表面的粘接强度差异无统计学意义(P>0.05)。(3)SBU酸蚀各组比对应的未酸蚀各组能获得更高的粘接强度,但在湿润和过湿条件下,酸蚀与否差异无统计学意义(P>0.05);PBU酸蚀各组比对应的未酸蚀各组能获得更高的粘接强度,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)SBU与PBU相比,同等实验条件下能获得更高的粘接强度,但在酸蚀后的湿润、过湿牙本质表面,SBU和PBU粘接强度差异无统计学意义(P>0.05)。(5)断裂模式均以界面断裂为主,无显著性差异。(6)扫描电镜观察结果显示:两种粘接剂在酸蚀条件下形成的树脂突更密集、更长,并且有树脂突伸入牙本质小管中。未酸蚀条件下,两种粘接剂形成的树脂突均较稀疏和短小,SBU比PBU形成的树脂突相对较多。结论(1)SBU应用于酸蚀后的牙本质表面对水分的敏感性较低,PBU应用于酸蚀或未酸蚀的牙本质表面对水分的敏感性均较低;(2)SBU和PBU应用于酸蚀后的牙本质表面比未酸蚀的牙本质表面能获得更高的粘接强度。

下颌第一前磨牙的形态特征与根管系统解剖的相关性分析

目的研究下颌第一前磨牙在全景片(dental panoramic tomograms,DPTs)的形态特征与根管系统解剖的相关性,为临床诊疗提供参考。方法266例种植患者拍摄全景片和锥形束CT(cone⁃beam computer tomography,CBCT),共计532例样本。利用CBCT根据Vertucci分类,识别根管数目和形态,Ⅰ型记为单根管,其余为复杂根管;在DPTs上测量外形长度,获取比值。分析形态特征与根管系统解剖的相关性。结果单根管与复杂根管在性别、根中1/2水平近远中径与最大近远中径比值、根管影像突然消失及消失的位置有统计学差异(P<0.05)。生成受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,曲线下面积(area under curve,AUC)值为0.851,预测结果较好,诊断复杂根管的灵敏度0.765,特异度0.846。结论根管影像是否突然消失以及消失的位置、性别和根中1/2水平近远中径与最大近远中径的比值对于根管解剖复杂性判断具有实用意义。

黄芩苷通过调节自噬在炎症牙髓中发挥抗炎及促进成牙/骨向分化作用的研究初探

目的:初步探讨黄芩苷(BA)在炎症牙髓中发挥抗炎及促进成牙/骨分化作用机制。方法:用酶消化法分离提取牙髓干细胞(DPSCs),CCK-8检测不同浓度BA对DPSCs与单核-巨噬细胞(THP-1)细胞活力的影响,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测及染色筛选BA促进DPSCs表达ALP活性的最佳浓度;用脂多糖(LPS)构建体外炎性微环境,采用实时荧光定量PCR、Western blot检测BA对DPSCs成牙/骨向分化相关蛋白和基因表达水平变化,采用免疫荧光染色、Western bolt检测细胞自噬相关蛋白泛素结合蛋白(p62)和微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达水平。诱导THP-1成炎症状态的M1,采用实时荧光定量PCR检测BA对其白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。结果:当浓度≤30μmol/L时,BA对DPSCs的增殖无明显抑制(P>0.05),0~100μmol/L浓度的BA对THP-1细胞增殖无影响(P>0.05)。经10μmol/L BA处理LPS刺激后的DPSCs,其ALP活性增加最明显(P<0.01),牙本质涎蛋白(DSP)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子OSX、骨钙素(OCN)蛋白和基因的表达均上调(P<0.05),自噬相关蛋白p62下调,微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)表达上调(P<0.01)。LPS可增加THP-1中IL-1β、TNF-α、iNOS的表达(P<0.01),而10μmol/L BA处理后上述指标均下调(P<0.05)。结论:BA可能通过调节细胞自噬在炎症牙髓细胞中发挥抗炎作用,并促进其成牙/骨向分化。

高分子涂层寿命预测研究进展

产品使用寿命是高分子涂料的重要指标。本文综述了关于高分子涂层寿命预测的研究进展,介绍了常见的高分子涂层失效机理,包括涂层结构和成分等内在因素,以及光、热、湿度等外在因素;介绍了人工神经网络、灰色模型、阿伦尼乌斯方程等在高分子涂层寿命预测的最新应用;从在经典方程中引入更多因子、将灰色模型与其他方法结合、获取更多实验数据后进行深度学习拟合三个方面对高分子涂层寿命预测技术进行了展望。

大鼠外胚间充质细胞向成牙本质细胞样细胞定向诱导分化——三维诱导模型的建立

目的 :探讨大鼠面突外胚间充质细胞向成牙本质细胞分化的机制。方法 :以胶原作为支架 ,建立外胚间充质细胞三维培养模型 ,并在培养液中加入 10ng/mlbFGF和 (或 ) 10 0ng/mlIGF 1等生长因子 ,观察和检测细胞表型的变化。结果 :经bFGF和IGF 1诱导 4d后 ,在胶原的周边细胞出现平行排列的具有细长单极突起的成牙本质细胞样细胞 ,通过免疫组化抗DSP抗体染色阳性。而其余组细胞排列较紊乱 ,抗DSP染色阴性。结论 :含有bFGF和IGF 1的三维诱导模型可诱导大鼠外胚间充质细胞向成牙本质细胞样细胞分化 。

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响。方法经10ng/mlbFGF(或)和100ng/mlIGF-1刺激4d后,在410nm波长,检测牙髓细胞的碱性磷酸酶活性值;经矿化液诱导后,采用VonKossa染色法检测不同组细胞的矿化能力。结果培养4d后,IGF-1组及bFGF加IGF-1组均高于对照组(P<0.05),而且bFGF加IGF-1组高于IGF-1组(P<0.05),而bFGF组吸光度值与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论IGF-1可促进牙髓细胞向具有矿化能力的细胞分化,而bFGF可能起协同促进作用。

人胚胎干细胞研究的伦理学思考

目的 :随着干细胞 ,特别是人干细胞研究的不断深入 ,结合现代生物医学和工程技术 ,将使过去医学上难以解决的一些疑难杂症的治愈成为可能 ,因此人干细胞研究具有广阔的应用前景。然而就人干细胞研究的伦理学问题引发了一场国际大辩论。本文就这方面的问题作一论述。

胰岛素样生长因子1诱导外胚间充质细胞向成牙本质细胞样细胞分化

目的 :探讨SD大鼠颌突外胚间充质细胞向成牙本质细胞的分化机制。方法 :在建立SD大鼠颌突外胚间充质细胞体外培养模型的基础上 ,用胰岛素样生长因子 1(IGF - 1)刺激外胚间充质细胞 ,采用倒置显微镜和免疫组化等方法从形态学和功能方面检测细胞的变化。结果 :在不含LIF的培养液中加入 10 0ng/mLIGF - 1培养的外胚间充质细胞 ,10d后在倒置显微镜下可见一些细胞出现单一细胞浆突起 ,似成牙本质细胞。消化后爬片经免疫组化抗DSP染色 ,部分细胞胞浆呈强阳性着色。结论 :IGF - 1可部分地诱导外胚间充质细胞向功能性成牙本质细胞分化 。

窝沟釉质成形封闭术封闭剂渗透性和密合性的扫描电镜观察

为了评价窝沟釉质成形封闭术（ＥｎａｍｅｌｏｐｌａｓｔｙＳｅａｌａｎｔＴｅｃｈｎｉｑｕｅ，简称ＥＳＴ）的效果，作者采用扫描电镜（ＳｃａｎｎｉｎｇＥｌｅｃｔｒｏｎＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，简称ＳＥＭ）观察釉质成形封闭术封闭剂的渗透性和与牙面的密合性，并以普通封闭术（ＣｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌＳｅａｌａｎｔＴｅｃｈｎｉｑｕｅ，简称ＣＳＴ）作对照，并对釉质成形封闭术的应用机理进行初步研究．结果表明，釉质成形封闭术优于普通封闭术．

颌突外胚间充质细胞向成牙本质细胞的定向诱导分化

外胚间充质细胞具有多向分化潜能。它可以进一步分化为成牙本质细胞等多种细胞,并将形成上下颌骨、颞下颌关节盘软骨、牙本质、牙髓、牙骨质、牙周韧带、听神经等组织器官。该细胞在牙齿发育和牙体牙髓损伤修复过程中起重要作用。本文从外胚间充质细胞的起源和特性、颌突外胚间充质细胞的分离和体外培养、外胚间充质细胞的定向诱导分化、外胚间充质细胞向成牙本质细胞的定向误导分化、诱导分化的成牙本质细胞的鉴定等方面进行了综述。

大块树脂与常规树脂整体和分层充填后牙Ⅱ类洞边缘微渗漏及固化程度的比较

目的:比较SonicFill大块充填树脂与常规树脂Neofil分层和整体充填后牙窝洞的边缘密合性和固化程度。方法:将40颗离体磨牙近远中分别制备复面洞,冲洗,酸蚀釉质,涂自酸蚀粘结剂,光照20 s后,将离体牙随机分为A、B组(n=20),A组一侧窝洞(A1)以大块充填树脂分层充填,每层2 mm;另一侧(A2)以常规充填树脂Neofil分层充填,每层2 mm;B组一侧窝洞(B1)以大块充填树脂整体充填4 mm;另一侧(B2)以常规树脂Neofil整体充填4 mm。维氏硬度仪测定充填材料的显微硬度。样本在2%亚甲基蓝中37℃水浴染色24 h,低速切片机将牙齿按近远中向沿片切,在体视显微镜下观察龈壁染料渗漏情况。结果:维氏硬度均值和维氏硬度比组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),从大到小依次为B1>A1>A2>B2。A2、B2组的边缘微渗漏高于A1、B1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与常规树脂Neofil比较,SonicFill大块树脂充填材料在整体和分层充填的应用中均可获得更好的边缘密合性和固化硬度。

不同固化充填方法对Z350纳米树脂微渗漏和压缩强度的影响

目的对比研究整体固化和分层固化充填方法对光固化复合树脂微渗漏和压缩强度的影响。方法选取下颌恒磨牙36颗,面中央制备标准Ⅰ类洞,随机分为3组。A组:整体固化充填;B组:水平分层固化充填;C组:斜向分层固化充填组。每组均用SingleBond2粘结,Z350纳米树脂充填,冷热循环500次,2%亚甲基蓝染色,沿牙体长轴颊舌向切片,体视显微镜下观察染料渗透情况。制备Z350整体固化及分层固化试样,万能材料试验机上测定材料的抗压缩强度。结果微渗漏方面,A组最大,C组最小,三组之间比较皆有显著性差异(P<0.01)。抗压缩强度方面,A组最小,B组最大,A组与B组、C组比较有显著性差异(P<0.05),B、C组间无显著性差异(P>0.05)。结论斜向分层充填技术既能减少微渗漏,又能保证树脂的抗压缩强度,是Ⅰ类洞树脂充填的首选方案。

华东地区中国人下颌第一恒磨牙根管形态的锥形束CT分析

目的:通过锥形束CT(cone-beam computed tomography,CBCT)分析华东地区下颌第一恒磨牙不同根管形态及其发生率,以期为临床诊疗提供参考。方法:随机抽取在南京医科大学附属口腔医院放射科行CBCT检查的患者图像资料,参照Vertucci分类法统计分析健康、未经治疗、发育完全的下颌第一恒磨牙的根管形态。结果:共获取766例患者(137例患者单侧下颌第一恒磨牙缺失)的1 395颗下颌第一恒磨牙的CBCT图像数据。下颌第一恒磨牙双根的发生率大约为68.5%,3根的发生率为31.4%;3根管的发生率为57.9%,4根管的发生率为38.5%。近中根大多拥有2个根管。大部分的远中根均为Vertucci I型,近中牙根的根管形态比较复杂,下颌第一磨牙拥有6种不同的根管形态。下颌第一恒磨牙远中舌根的个体发生率为35.3%。男女性别间发生率无统计学差异(P>0.05)。下颌第一恒磨牙远舌根双侧对称性的发生率为60%,且右侧大于左侧,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:下颌第一恒磨牙根管形态及数目具有多样性,CBCT是一个非常有效的工具来辨别分析下颌磨牙的根管形态,为根管治疗提供参考依据。

牙髓再生的研究进展

尽管目前的根管治疗手段可有效地保存牙髓病变的牙齿,但其仍然存在诸多术后并发症。随着分子生物学、细胞生物学、发育生物学等生命前沿科学的发展,牙髓治疗由物理充填治疗向生物学治疗转变成为可能。本文就成牙本质细胞再生、牙髓血运重建、神经再生和支架移植等方面对近年来的牙髓再生研究作一综述。

机械磨除釉质表层对树脂渗透性的影响

目的 :通过研究机械磨除釉质表层对树脂渗透性的影响 ,探讨釉质成形封闭术可提高封闭剂的保存率的作用机制。方法 :通过扫描电镜观察并辅以计算机图像处理技术来对不同牙面处理组的树脂突形态进行定性、定量分析。结果 :机械磨除釉质表层组树脂突长度为 5 1.33± 12 .36 μm ,杯刷刷洗组 39.72± 11.6 9μm ,既未机械磨除表层 ,又未用杯刷刷洗组为 2 5 .5 7± 8.18μm ,统计学检验有显著性差异。结论 :机械性磨除釉质表层可增强树脂在牙面上的粘结性。