一氧化氮在神经精神疾病中作用的研究进展

一氧化氮(nitric oxide,NO)作为气体信号分子参与多种生理功能的调节。在中枢神经系统中,生理浓度NO参与维持正常神经精神功能,病理性高浓度NO则表现出神经毒性作用,并通过一系列病理反应参与多种神经精神疾病的发生。文章综述了NO在中枢神经系统中的代谢与作用,并以阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化、抑郁症和自闭症谱系障碍为例,探讨了NO与神经退行性疾病、神经炎症性疾病、精神障碍性疾病和神经发育障碍性疾病等神经精神疾病的关系与致病机制,为疾病发病机制研究和新型治疗药物开发提供思路和动力。

帕金森病构音障碍

构音障碍是帕金森病的常见运动症状,发病率较高,临床表现多样。帕金森病患者常忽视自身构音障碍,直至进展为失代偿阶段,仅少数患者接受相应治疗。本文综述帕金森病构音障碍发病机制、评估及治疗方法,以为帕金森病构音障碍的早期诊断和及时治疗提供理论依据。

人凝血IX因子基因乳腺组织特异性表达载体的构建及其在奶山羊乳腺中的分泌性表达

人凝血ＩＸ因子基因乳腺组织特异性表达载体的构建及其在奶山羊乳腺中的分泌性表达张克忠卢大儒邱信芳（复旦大学遗传学研究所上海２００４３３）黄英黄淑帧（上海市儿童医院医学遗传研究所上海２０００４０）血友病Ｂ（ＨｅｍｏｐｈｉｌｉａＢ）是由于人凝血ＩＸ因子（ｈ...

催化光度法测定痕量亚硝酸根的研究——溴酸钾-结晶紫体系

基于在稀磷酸介质中，亚硝酸根对溴酸钾氧化结晶紫的反应，具有催化作用，建立了测定痕量亚硝酸根的新催化光度法。方法检出限为８．０×１０－９ｍｇ／Ｌ，线性范围０．６～１２．０ｍｇ／２５Ｌ，回收率为９７％～１０２％。与其它方法相比，常见离子如Ｂｒ－、Ｉ－等的允许存在量大。用于地面水和地下水的测定结果满意。

苏云金杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞及转基因植株再生的研究

以葡萄的胚性愈伤组织作为农杆菌介导,Ti质粒转化材料,利用共培养法将苏云金杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞,通过胚状体发生途径再生转基因植株。实验发现:80μmol/L的乙酰丁香酮诱导处理农杆菌和葡萄愈伤组织后可将转化效率提高50倍。OD值为0.8的农杆菌菌液稀释8—10信后与在G培养基预培养10天的胚性愈伤组织共培养2—3夭,Ti质粒对葡萄愈伤组织细胞的转化效率可达50%左右。筛选得到的转基因植株在含Km 30 mg/L的选择培养基上继代存活6个月,生长正常;提取叶片染色体DNA做Southern blot,杂交结果为阳性。将转基因植株各部分切段置于含Km 50 mg/L的选择培养基上,能够脱分化产生抗性愈伤组织并能增殖。

催化光度法测定痕量亚硝酸根的研究——溴酸钾-维多利亚蓝B体系

基于在稀磷酸介质中,亚硝酸根对溴酸钾氧化维多利亚蓝B反应具有催化作用,建立了测定痕量亚硝酸根的新催化光度法。方法的检出限为 2.5 × 10^(-9)g·ml(-1),线性范围为7.4～148ng·ml(-1),回收率为96％～103％,用于地面水及地下水的测定,结果满意。

应用蛋白酶体抑制剂Lactacystin建立有Lewy体的帕金森病大鼠模型

目的建立符合帕金森病(PD)病理特征———黑质细胞有Lewy体的PD大鼠模型。方法分别在大鼠一侧黑质致密部注射蛋白酶体抑制剂Lactacystin8mg(Lactacystin组)、等体积生理盐水(NS组)和6-羟基多巴胺(6-OHDA组)12mg;观察大鼠自主行为和阿朴吗啡诱导的旋转行为;光镜下观察中脑组织学改变;应用免疫组化染色观察黑质细胞α-synuclein表达和酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数;测定纹状体区多巴胺和高香草酸含量。结果NS组大鼠未见行为异常;Lactacystin组大鼠出现进行性的运动迟缓、少动、震颤、头向健侧倾斜,注射阿朴吗啡后出现向健侧旋转运动;给药后3周黑质部TH阳性细胞数较NS组减少了83.29%(P<0.01),部分黑质细胞内出现α-synuclein免疫反应呈强阳性的Lewy体;纹状体多巴胺和高香草酸含量(154.82±37.17,98.66±18.81)较NS组明显减少(822.87±131.25,617.77±95.74)(均P<0.01);6-OHDA组大鼠出现与Lactacystin组类似的行为变化,黑质细胞亦显著减少,但未见Lewy体。结论利用蛋白酶体抑制剂Lactacystin阻碍α-synuclein的降解可以建立有Lewy体的PD大鼠模型。

帕金森病患者非运动症状的临床特征分析

目的:探讨帕金森病非运动症状的临床特征。方法:观察278例原发性帕金森病患者,采用多种量表评估不同临床分期的帕金森病患者的非运动症状的临床表现。结果:帕金森病患者在不同临床阶段均可以伴发多种复杂的非运动症状,其中以自主神经功能障碍的发生率最高达79.1%,在自主神经功能障碍中又以便秘的发生率最高,在晚期帕金森患者中高达91.7%。其他非运动症状如感觉异常、精神症状、睡眠障碍均有不同程度的发生。结论:帕金森病在不同临床阶段常合并有多种复杂的非运动症状,症状的发生随着疾病进展而逐渐增加。

骨髓基质干细胞对lactacystin-帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对lactacystin帕金森病(PD)大鼠的神经保护作用。方法取成年雄性SD大鼠骨髓,培养、分离、增殖和纯化BMSCs,培养至4～6代用于细胞移植。在大鼠单侧黑质致密部(SNc)立体定向注射蛋白酶体抑制剂lactacystin8μg,建立表达Lewy小体并向偏侧旋转的PD大鼠。实验组采用立体定向技术向纹状体区注射BMSCs,对照组注射等体积的生理盐水。观察移植前后大鼠的旋转行为变化以及BMSCs在脑内的脑源性神经营养因子(BDNF)表达、迁移及分化情况。结果实验组中71.43%的大鼠接受BMSCs移植后阿朴吗啡诱导的旋转行为较移植前明显改善(P<0.05),而对照组均未见旋转行为变化。BMSCs在大鼠脑内可以广泛迁移,分布于纹状体、胼胝体和皮质等部位,并表达BDNF;植入的BMSCs未能分化为多巴胺能样神经细胞。结论BMSCs很可能是通过分泌BDNF对lactacystinPD大鼠发挥神经保护作用。

国际运动障碍疾病协会帕金森病诊断新标准(2015)解读

近20年来,帕金森病（Parkinson’s disease,PD）研究领域发生了一些新进展,尤其在突触核蛋白病理、非运动症状和前驱症状[1]方面,因此有必要重新定义PD。2015年8月,国际运动障碍疾病协会正式发布了PD的临床诊断新标准（表1）,以下将对该新诊断标准进行解读[2]。

盐酸普拉克索改善帕金森病非运动症状疗效观察

目的观察盐酸普拉克索对帕金森病非运动症状的疗效。方法随机观察,46例接受普拉克索治疗的伴有非运动症状的原发性帕金森病患者,分别在服药剂量稳定不变后4周,评估用药前后患者非运动症状的变化。结果普拉克索治疗后帕金森病伴发的抑郁、疼痛、下肢痉挛、不宁腿综合征和睡眠障碍明显改善(P<0.05);而流涎、便秘、排尿障碍、性功能障碍、肢体发冷、认知障碍和嗅觉障碍等症状,用药前后没有发生明显变化(P>0.05);普拉克索治疗部分患者出现口干、头晕、体位性低血压、幻觉、嗜睡等不良反应。结论普拉克索能减轻部分帕金森病患者的非运动症状如抑郁、疼痛和双下肢不适等,但也可能加重某些帕金森病的非运动症状如口干、头晕和幻觉等。

重组腺病毒介导的人凝血Ⅸ因子cDNA在奶山羊乳腺中的分泌表达

利用含ｈＦＩＸｃＤＮＡ和腺病毒片段的质粒ｐＡｄＣＭＶｈＦＩＸ与质粒ｐＪＭ１７共转染２９３包装细胞，制备含ｈＦＩＸ的重组腺病毒颗粒，经纯化、浓缩后通过直接转染活体奶山羊乳腺小叶的方法，建立了ｈＦＩＸ蛋白的乳腺表达系统。转染处理４天后，ｈＦＩＸ蛋白在羊奶中的最高表达量为２１ｎｇ／ｍｌ乳汁，活性检测表明乳汁中的人凝血ＩＸ因子蛋白８０％以上具有生物学活性。此研究结果证实了人凝血ＩＸ因子全长ｃＤＮＡ在奶山羊乳汁中分泌表达的可行性，同时也为验证外源基因在奶山羊乳腺组织中的分泌表达提供了一个快速检测系统。

建立外源基因乳腺组织特异性表达快速检测系统的探索

乳腺生物反应器研制是近年来生物工程领域的研究热点，有效的乳腺组织特异性表达载体的构建则是该工作的关键。为了验证外源基因乳腺组织特异性表达载体构建的合理性和有效性，我们实验室探索利用重组逆病毒（retrovirus）、重组腺病毒（adenovirus）和SA脂质体（SAliposome）为介导，将外源基因及其表达构件导入活体奶山羊的乳腺组织，建外源基因乳腺组织表达的快速检测系统；取得了较为理想的效果。

脂肪组织及其衍生成分在创面修复和血管化中的作用

背景:软组织损伤修复过程中,局部的血管化对创面愈合和功能恢复至关重要。脂肪组织被认为是人体最大的干细胞来源库,目前已开发出多种不同的脂肪成分被用于研究和治疗,其促进血管再生和软组织修复的能力被广泛研究。目的:综述血管化在软组织损伤修复中的研究进展,总结脂肪组织及其衍生成分的制备方法及其在血管化和软组织损伤修复中的应用。证实脂肪组织及其衍生成分在血管和软组织工程中具有卓越的研究价值和临床应用前景。方法:利用PubMed、Web of Science和CNKI数据库检索2010年1月至2023年2月发表的相关文献,中文检索词为“软组织修复,伤口愈合,血管化,血管新生,脂肪组织,间质血管成分细胞,脂肪源微血管片段,纳米脂肪,脂肪干细胞基质胶”,英文检索词为“soft tissue repair,wound healing,vascularization,angiogenesis,adipose tissue,stromal vascular fraction,adipose tissue-derived microvascular fragment,nanofat,adipose extracellular matrix/stromal vascular fraction gel”,并纳入少量年份久远的经典文献。通过阅读标题和摘要进行初筛,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入69篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)创面愈合是一项重要的生理过程,主要发生在组织受到损伤时,如创伤、手术、烧伤、肿瘤、感染以及血管性疾病引起的组织损伤缺损等;(2)创伤部位足够的血管化对组织修复、局部稳态的重新构建和功能恢复至关重要;(3)脂肪组织被认为是人体最大的干细胞来源库,目前已有多种不同的脂肪成分被用于研究和治疗;(4)由于其本身具有的成分和制备优势,脂肪组织将在未来的组织工程研究和治疗中继续扮演重要角色。

腹腔镜胃癌D2根治术与传统开腹手术治疗胃癌患者的疗效观察

目的探究传统开腹手术与腹腔镜胃癌D2根治术治疗胃癌患者的临床疗效。方法 88例胃癌手术患者,随机分为对照组与观察组,各44例。对照组应用开腹胃癌D2根治术治疗,观察组应用腹腔镜胃癌D2根治术。对比两组患者手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数、切口大小、住院时间及并发症发生情况。结果观察组手术时间为(208.17±4.02)min、术中出血量为(173.25±17.20)ml、切口大小为(6.15±0.38)cm、住院时间为(10.25±4.70)d,均显著优于对照组的(255.19±27.13)min、(235.61±31.20)ml、(18.18±1.28)cm、(17.31±3.90)d,差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组淋巴结清扫数(46.07±9.9)枚与对照组的(46.14±9.1)枚对比,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组并发症发生率4.5%显著低于对照组的18.2%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜胃癌D2根治术治疗胃癌效果与开腹手术相当,且能有效清扫淋巴结,但操作简便,术中出血量少,手术切口小,手术时间与住院时间短,术后并发症发生率低,具有较高的临床应用价值。

提高葡萄试管苗移栽成活率的技术

试管苗从培养基中移入大田是植物组织培养中重要的一环。本试验以葡萄为试材,研究了葡萄试管苗移栽于盆土及大田中的技术,试管苗移栽成活率达95％～100％。另外,以棉花、芦笋为移栽材料,也取得了较理想的效果。材料与方法 (一)材料试管苗是由葡萄“胜利”品种花药、花药诱导的愈伤组织,经过体细胞胚发生途径产生。移栽的试管苗取自:1)由胚性愈伤组织分化产生的试管苗,2)

老年性低位直肠癌的保肛治疗临床分析(附20例报告)

目的探讨75岁以上高龄低位直肠癌的临床特点及保肛手术。方法回顾性分析207例经手术和病理证实的75岁以上高龄低位直肠癌患者临床资料。结果207例均行手术治疗,其中182例(89%)属经腹根治性切除术,25例行结肠造口术。总切除率为96.1%。28例患者术后发生不同程度的并发症,占13.5%。手术死亡病例4例。3年生存率:miles术者为68%,Dixon术者为63%,两组比较差异无显著性。结论对高龄低位直肠癌患者应采取个体化治疗方案,低位直肠癌患者肿瘤下缘距肛直环1.5cm、肿瘤为高、中分化,术前指诊肿瘤可推动,肿瘤侵犯肠壁不到1周者可行保肛手术。

乳腺生物反应器的基础研究──载体构建,检测及反应器的建立方法

乳腺生物反应器的研究和开发是近年生物工程领域的研究热点。乳腺特异性表达调控的研究和表达载体的构建是该工作的基础和关键。本文介绍了乳腺蛋白基因表达调控的研究现状，外源基因乳腺特异性表达载体构建策略以及乳腺生物反应器建立方法的研究进展。

激光辐照葡萄愈伤组织的过氧化物酶同工酶分析

利用法国产ＤＡＴＡＣＨＲＯＭ—５０００型染料脉冲激光器处理葡萄“胜利”品种的愈伤组织，用聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＰＡＧＥ）分离过氧化物酶同工酶，研究了激光辐照对葡萄生长发育和过氧化物酶同工酶表达的影响，发现：适当剂量的激光辐照能使葡萄愈伤组织明显提前分化；激光能够影响葡萄过氧化物酶同工酶基因的调控，适当剂量的激光能够促进该基因的表达；激光处理的愈伤组织在不同的生长发育时期与对照相比，过氧化物酶同工酶在数目和活性上有明显增加。