基于PBL的混合式教学模式探索——以动物学课程为例

动物学课程是高校生命科学、动物医学等专业重要的专业基础课,是后续学好其它相关专业核心课程的重要基石.为提高学生学习动物学课程的学习效果,将PBL(problem-based learning,PBL)问题式的学习方法融入了混合式教学中.实践表明,该混合教学模式有利于培养学生的创新思维、探索精神和自学能力,能够实现“以学生为主,关注学生素质全面发展、个性特征发展、终身可持续发展”的培养目标.该方法可为动物学课程的教学改革和创新提供参考.

脂磷壁酸激活奶牛乳腺中NUPR1表达及分布研究

为了探究NUPR1基因在奶牛乳房炎中的表达及分布规律,通过构建脂磷壁酸(LTA)诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)体外炎症模型,以奶牛核蛋白1(Nucleus Protein 1,NUPR1)基因为研究对象,利用免疫组织化学技术(IHC)测定NUPR1在患病奶牛乳腺组织中的分布情况。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹(WB)检测炎症相关因子、NUPR1基因及其上下游基因在奶牛乳腺炎组织及乳腺上皮细胞炎症模型中的表达规律。qRT-PCR和WB结果显示,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α在乳腺病理组织及细胞炎症模型中均极显著上调表达(P<0.01),NUPR1在奶牛乳房炎病理乳腺组织及乳腺上皮细胞炎症模型中均显著或极显著上调表达(P<0.05,P<0.01),同时,DNMT1下调表达,KLF4、SESN2和SOCS3基因上调极显著表达(P<0.01)。IHC结果显示,NUPR1主要表达于奶牛乳腺上皮细胞中,并且在奶牛患病乳腺组织中的表达量高于正常组。本研究结果为进一步探究NUPR1基因在乳房炎病理进程中的调控机理提供了试验和理论基础。

PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积的影响及其多态性

为研究PPARA对绵羊肌内脂肪(IMF)沉积的影响及作用机制,寻找绵羊肌内脂肪沉积相关分子标记,以小尾寒羊(STH)和萨寒杂交(STH×SFK)F1群体为研究对象,通过测定其肉品质,利用H&E染色和油红O染色比较2个绵羊群体背最长肌组织学结构及脂滴分布;利用qRT-PCR和WB技术检测PPARA mRNA水平和蛋白水平在不同群体间的表达差异,并分析PPARA基因与肌内脂肪的相关性;Sanger测序技术检测PPARA基因SNP位点以评估其作为绵羊肌内脂肪沉积相关遗传标记的可能性。结果表明:小尾寒羊剪切力和失水率极显著高于萨寒杂交,但是pH值极显著低于萨寒杂交,大理石花纹评分小尾寒羊低于萨寒杂交群体;组织学染色显示,小尾寒羊肌纤维较粗,排列紧密,肌内脂肪在肌纤维间隙集中分布;萨寒杂交肌纤维较细且结构松散,肌内脂肪在肌细胞间及肌纤维间隙均匀、广泛分布,含量更高;PPARA mRNA表达量小尾寒羊群体显著高于萨寒杂交群体,PPARA蛋白表达量小尾寒羊群体极显著高于萨寒杂交群体;相关性分析显示,PPARA基因表达量与绵羊脂滴面积比及pH值呈极显著负相关,与剪切力和失水率呈极显著正相关,与大理石花纹评分弱相关;Sanger测序结果分析显示,2个绵羊群体PPARA基因第2内含子T49885C、T50007C、G50013A、G50835A、G50942A及G51154C位置上发生碱基突变,但小尾寒羊群体未检测到C49885T突变。SNP遗传多样性分析显示,SNP位点群体纯合度均大于杂合度,在群体中处于中低度多态;除G50835A突变偏离了Hardy-Weinberg平衡,其余SNPs均符合Hardy-Weinberg平衡,遗传基础稳定。研究认为,PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积具有重要影响,可作为绵羊肌内脂肪性状选择的潜在分子遗传标记。

小鼠抑郁症模型的构建与评估

抑郁症因逐年升高的发病率已经受到了医学界的广泛关注。抑郁症发病因素极其复杂,因此在进行相关实验时构建相应抑郁症模型成为实验关键步骤。本文主要介绍常见小鼠抑郁症模型的构建方法,例如慢性不可预见性温和刺激模型,特殊药物所致抑郁模型,生命早期应激模型等,以及相关评估抑郁程度的行为学实验,例如强迫游泳实验、蔗糖偏好实验、喷溅实验等,为相关研究人员提供实验思路及方法。

红景天苷体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞

背景:前期实验证明红景天苷能诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化,但是具体的影响方式尚不清楚。目的:以骨髓间充质干细胞为研究对象,进一步探讨红景天苷诱导其向神经元样细胞定向分化的作用方式和分子机制。方法:选取第2代Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,按照不同的诱导剂分为维甲酸诱导组、红景天苷诱导组和对照组,通过不同的时间点对细胞进行观察。结果与结论:两诱导组细胞不同时间点神经干细胞标志物巢蛋白、神经细胞分化相关的兔抗微管蛋白和神经微管相关蛋白2表达阳性率均高于对照组(P<0.01);神经胶质纤维酸性蛋白阳性率维甲酸组显著高于红景天苷组(P<0.01)。RealTime-PCR结果显示,维甲酸和红景天苷诱导不同时间,两组细胞均有神经细胞相关基因神经元特异性烯醇化酶、神经微管相关蛋白2mRNA表达,与诱导时间有关且不完全相同,两组间神经胶质纤维酸性蛋白mRNA的高丰度出现于诱导早期;诱导后两组神经元特异性烯醇化酶蛋白的表达随时间延长显著增加,兔抗微管蛋白表达出现于诱导早期。说明红景天苷能促进骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,其诱导效应与维甲酸相似,且向神经元样细胞定向分化方面优于维甲酸。

混合式教学模式在生理学课程中的探索与实践

生理学是生物技术、动物科学、动物医学等专业的必修课。为提高人才培养质量,对生理学课程混合式教学模式进行探索与实践。通过混合式教学模式改革,教师对学生学习过程的掌握更加精确,课程考核手段更加多样。数字化教育过程提高了学生学习兴趣、学习动机和解决问题的能力,能够提升学习效果、课程成绩和学生的综合能力,为其他课程的混合式教学模式改革提供了借鉴。

基于能力培养导向的“动物生物学”实践教学研究

针对目前学科教学存在的问题,提出了开展多元化动物生物学实践教学的必然性和可行性。基于能力培养的视角下,从教学内容、实践的准备与设计、具体实施方法和考核等多个方面探究了以学生实践为中心的框架与主线,构建了趣味性、连续性和创新性相结合的新型实践教学机制,旨在提高学生的综合技能和专业素质以及动物生物学实验教学效果,达到培养应用型/复合型人才的目的。

新农科背景下“动物生理学”课程教学体系建设研究

动物生理学课程作为一门基础学科,具有很强的实践性特征,在生物医学、农林水产和环境生态等专业中占据着枢纽位置。结合新农科大背景,针对课程教学现状和存在问题,根据生理学课程的特点,基于新农科战略导向,从课程目标定位、教学方式创新、教学内容重构、实践能力培养、思政教育融入、评价体系优化六大方面,提出了课程体系建设的改革举措,以期切实提升课程育人质量。

开放式教学模式在动物生理学实验课程中的应用研究

开放式教学模式注重以人为本.在动物生理学实验课程中采用开放式教学模式有助于强化学生的创造性、创新性及实践操作能力.本文主要论述了传统动物生理学实验课程教学模式的现状,分析了开放式教学模式在动物生理学实验课程中的实践应用.

玉米赤霉烯酮对母猪繁殖性能和胎盘免疫相关基因表达量的影响

本试验旨在研究饲粮中添加玉米赤霉烯酮(ZEN)对母猪繁殖性能和胎盘免疫相关基因表达量的影响。选择胎次相近、体重200 kg、妊娠第30天的长×大二元杂交母猪40头,随机分为2组,每组20个重复,每个重复1头。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲粮在基础饲粮中添加1.5 mg/kg的ZEN。试验期74 d。结果表明,与对照组相比:1)饲粮中添加ZEN显著提高了妊娠期母猪死胎数和弱仔猪数(P<0.05),显著降低了母猪总产仔数(P<0.05);2)饲粮中添加ZEN显著提高了妊娠期母猪血清孕酮含量(P<0.05);3)饲粮中添加ZEN显著提高了妊娠期母猪胎盘中Toll样受体-2(TLR-2)和孕酮受体(PGR)基因表达量(P<0.05)。由此可见,母猪妊娠期饲粮中添加1.5 mg/kg ZEN可显著降低母猪总产仔数,并显著提高死胎数和弱仔猪数。饲粮中低水平的ZEN对母猪繁殖性能仍产生不利影响。

红景天苷通过Wnt/β-catenin信号通路影响小鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞定向分化

目的:以小鼠骨髓间充质干细胞系D1细胞为研究对象,探讨Wnt/β-catenin信号通路介导的红景天苷诱导D1细胞向神经细胞的定向分化。方法:实验分为对照组(D/F12完全培养基)和红景天苷诱导组(100μg/mL+D/F12完全培养基).将细胞分别诱导12、24、48和72 h后,采用细胞免疫荧光化学染色方法检测β-catenin和Gsk-3β的阳性细胞率。利用红景天苷分别诱导MSCs 1,2,8,12,24,48和72 h后,利用实时PCR技术检测Wnt/β-catenin信号通路的关键信号分子wnt3a、Axin2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达;采用Westernblot方法分析D1细胞诱导12、24、48和72 h后,β-catenin和Gsk-3β蛋白的表达;运用Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂DKK1阻断Wnt/β-catenin信号通路,Western blot方法分析红景天苷对β-catenin和NSE蛋白表达的影响。结果:红景天苷诱导24 h时β-catenin的阳性率可达55.76%,与其他组和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01),诱导24 h后Gsk-3β的阳性率与其他时间和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实时PCR检测结果显示,红景天苷诱导MSCs不同时间能促进Wnt/β-catenin信号通路中关键信号分子Wnt3a、Ax-in2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达,诱导不同时间Wnt3a、Axin2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达不尽相同。Westernblot结果表明,红景天苷诱导D1细胞12 h和24 h时β-catenin蛋白的表达明显上调,且与其他组比较差异具有统计学意义(P<0.05);随着作用时间的延长,Gsk-3β蛋白的表达增加且差异具有统计学意义(P<0.05),阻断Wnt/β-catenin信号通路后,β-catenin和NSE蛋白的表达水平明显下调。结论:红景天苷能诱导D1细胞定向分化为神经元样细胞,红景天苷通过激活Wnt/β-catenin信号通路实现其诱导MSCs向神经细胞定向分化。

牦牛TMEM-18基因多态性及其与生产性能关联分析

跨膜蛋白18基因(TMEM-18)是一个末端为低聚嘧啶的基因,与动物生长发育密切相关。为了研究牦牛TMEM-18基因多态性与生产性能的关系。以192头天祝雌性牦牛血样NDA构建混合池,扩增TMEM-18基因内含子1和外显子5的序列。运用BLAST和Chromas软件分析突变位点,运用高分辨率熔解曲线分析技术(HRM)统计基因型分型,采用SHEsis软件进行基因型频率和等位基因频率计算,同时对多态位点进行配对连锁不平衡和单倍型分析,运用SPSS21.0分析基因多态位点与生产性能关联。结果表明,牦牛TMEM-18基因内含子1处存在2个多态位点,分别是861(A/G)和1267(C/T),外显子5处存在1个多态位点为4 447(C/T)。关联分析表明,牦牛TMEM-18基因861(A/G)位点的不同基因型与牦牛的体高、体重、胴体重和屠宰率差异性显著(P<0.05);1267(C/T)位点的不同基因型与牦牛的体高、体重和屠宰率差异性显著(P<0.05),而牦牛TMEM-18基因4447(C/T)位点的不同基因型与牦牛的体斜长、管围、胸围、体重、胴体重、净肉重、净肉率和屠宰率均存在显著性差异(P<0.05)。通过单倍型分析发现群体中存在3种单倍型组合,即ACC单倍型、GTC单倍型和GTT单倍型,其中ACC单倍型组合个体数目明显多于其他单倍型组合,为优势单倍型。本实验揭示TMEM-18基因可作为牦牛生产性能开发的候选分子标记,为牦牛遗传资源的利用、开发与新品种的选育提供依据。

玉米赤霉烯酮降解酶在枯草芽孢杆菌中的表达及其对母猪繁殖性能的影响

本试验旨在建立玉米赤霉烯酮(ZEN)降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法(HPLC)检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明:ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用(P<0.05)。综上:1)本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2)表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3)在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。

‘岷县黑裘皮羊’不同组织中HSP60基因的表达定位

【目的】探讨‘岷县黑裘皮羊’不同组织器官中热休克蛋白60(HSP60)的表达差异及其规律.【方法】以3头成年雄性‘岷县黑裘皮羊’为研究对象,屠宰后采集心脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和睾丸组织,利用实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和Western-Blotting检测不同组织中HSP60的表达差异及规律.【结果】‘岷县黑裘皮羊’不同组织中均可见HSP60基因和蛋白的表达且存在一定的差异,心脏组织中HSP60基因和蛋白表达最高,脾脏组织中表达最低;心脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和睾丸组织切片中均有HSP60的阳性表达,心脏组织着色最深.【结论】HSP60可能对维持心脏或心肌细胞的功能具有重要调节作用,上述结果为今后HSP60基因功能的研究以及绵羊抗逆性研究提供参考依据.

天祝白牦牛OXGR1基因多态性与体尺性状的关联性分析

为了研究牦牛α-酮戊二酸(盐)受体1(Oxoglutarate receptor 1,OXGR1)基因多态性与其体尺性状的相关性,本文以4-8岁天祝雄性(阉)白牦牛的血液DNA(n=192)为实验材料并构建DNA混合池。通过DNA直接测序法检测OXGR1的核苷酸序列潜在的多态位点;利用高分辨率熔解曲线分析技术(High Resolution Melting,HRM)进行分型。采用SHESIS软件对OXGR1基因多态位点进行连锁不平衡分析;运用PIC-Calc 0.6软件分析多态信息含量;采用卡方检验检测Hardy-Weinberg平衡;运用SPSS20.0软件对多态位点与体尺性状进行关联分析;运用RNAFOLD、ExPASy和Swiss-model软件对OXGR1基因突变前后的蛋白结构进行预测分析。结果表明:天祝白牦牛OXGR1基因有两个多态位点,分别为347(A/G)和678(G/A),每个位点均有3种基因型(AA、AG和GG),其优势基因型分别为GG和AA。两个SNPs均达到Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),存在强连锁不平衡(D’>0.75,R^2>0.33),且均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5)。上述位点不同基因型在体斜长、体高、胸围和管围存在显著差异(P<0.05)。分子结构预测显示:347位点处突变为错义突变,其编码的氨基酸由天冬酰胺变为丝氨酸。突变后OXGR1 mRNA二级结构、蛋白质二级结构及三级结构均发生改变。上述结果表明:OXGR1基因可作为牦牛分子育种的候选分子标记,为今后牦牛遗传资源的保护、开发以及新品种的选育提供依据。

双峰骆奶对2型糖尿病大鼠肝细胞凋亡的影响

本试验旨在研究双峰驼奶对2型糖尿病大鼠肝细胞凋亡的保护作用。60只月龄接近的雄性成年大鼠随机分5组,阴性对照(C)组采用基础饲粮,其他4组均通过链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病大鼠模型,各组分别为糖尿病模型对照(DMC)组、低剂量骆奶(LCM)组(2 mL/d)、高剂量骆奶(HCM)组(5 mL/d)和盐酸二甲双胍(MTH)组(200 mg/kg)。试验期4周。结果表明:与C组和DMC组相比,MTH组和HCM组大鼠血糖浓度显著下降(P<0.01);DMC组肝细胞水肿,部分肝细胞核皱缩、碎裂、溶解,而LCM组、HCM组和MTH组肝细胞形态正常,胞核结构清晰;与DMC组相比,HCM组和MTH组大鼠肝细胞B细胞淋巴瘤因子2(BCL-2)蛋白合成增强,BCL-2相关蛋白X(BAX)合成减弱;BCL-2 mRNA相对表达量在MTH组中最高,BAX mRNA相对表达量在LCM组和MTH组中最高;DMC组、MTH组、LCM组和HCM组均可检测出BCL-2和BAX蛋白。综合以上,双峰骆奶能抑制BAX蛋白的合成而促进BCL-2蛋白合成,揭示双峰骆奶能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖。双峰骆奶具有明显的降低2型糖尿病大鼠的血糖及肝细胞损伤的作用,可起到辅助治疗的作用。

基于创新形势下的动物生理学实验课程教学设想

创新是国家发展的内在动力,教育创新是国家创新内容的重要组成部分,不同学科及课程教学的创新是教育创新实施的主体和内容。为了达到推进素质教育,全面提高教育质量的教育创新目标,我们必须进行教学的内容、方法和手段的改革与创新,必须充分利用现代科学技术手段,大力提高教育的现代化水平。论文结合动物生理学实验课程教学实际,基于创新形势的要求,从动物生理学实验教学课程的安排,生理机能虚拟实验室的建立,设计性实验的开展及其他方面对动物生理学实验教学的创新思路进行了分析与总结。

融合PKI基础设施的信息安全保障技术框架研究

传统的基于网络安全防护的安全技术已不能满足信息安全保障(IA)时代的安全需求,与此同时网络安防系统自身也存在各种安全风险和面临各种安全攻击,同样需要强化身份、认证、保密、完整、抗抵赖等安全保障。本文将通过强化密码基础设施的核心和基础安全支持服务功能,融合密码基础设施与网络安防技术,为信息系统及网络安全防护系统提供更加强壮的身份、认证、保密性、完整性及抗抵赖等安全服务。

可信可控:信息安全的基石

网络化已经成为当今社会、工作、生活、学习的必然。当前,网络安全已建设到了一定程度,但网络钓鱼、信息失泄密等事件却仍然屡有发生。本文从当前网络安全建设现状、安全困局着手,提出基于密码技术的可信应用安全架构,从信息安全基础设施入手逐层解决可信身份及基于可信身份基础之上的可信认证、可信授权、可信审计及数据防护。