CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性

本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化;转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后,采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化,采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na^(+)浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示,与对照组相比,PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势,24~48 h内上升显著(P<0.05),而PEDV N蛋白表达水平在12~48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外,CD44重组质粒转染试验结果显示,与PEDV感染组相比,过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明,高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用,干扰CD44后PEDV复制增多。同时,为研究PEDV感染情况下,CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节,采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na^(+)浓度。结果表明,过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度逐渐恢复正常水平。相反,干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度呈现失衡状态。结果提示,CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点,它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量,从而维持细胞内外Na^(+)运转平衡。

ACE2对猪流行性腹泻病毒体外感染传代猪小肠上皮细胞的影响

为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪小肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2细胞)模型,通过RT-qPCR、Western blot检测PEDV感染后ACE2的mRNA、蛋白表达水平的变化。过表达与抑制表达ACE2后通过RT-qPCR、Western blot、TCID50检测PEDV复制水平。结果显示,PEDV感染IPEC-J2后ACE2的mRNA及蛋白表达水平均显著下调,与转录组学结果一致。过表达ACE2组PEDV感染量显著上升,抑制表达ACE2组PEDV感染量显著下降。本研究在细胞水平上验证了ACE2在PEDV感染过程中的作用,即PEDV感染能够使ACE2表达量下降,在IPEC-J2细胞中过表达ACE2能提高PEDV复制水平,抑制ACE2的表达可降低PEDV复制水平。

芦荟的快速繁殖与多倍体诱导

目的 :改良现有的芦荟栽培品种 ,丰富遗传育种资源。方法 :在无菌条件下 ,将丛生芽浸入 0 .0 2 % ,0 .0 5 % ,0 .2 % ,0 .5 % ,1.0 %秋水仙碱水溶液中浸泡 2 4h ,然后转入MS +2～ 2mg·L-16 BA +0 .2mg·L-1NAA中培养。结果 :培养 40～ 6 0d后各处理丛生芽的叶片逐渐变肥大。通过根尖细胞染色体检测 ,变异芽为四倍体或嵌合体。结论 :以浓度为 0 .5 %的秋水仙碱溶液处理丛生芽 2 4h效果最好。得到的变异芽 90 %为纯合的四倍体。其染色体数量由 14(2n =2x =14)变为 2 8(2n =4x =2 8)

药用百合的多倍体诱导及快速繁殖

为改良现有的药用百合栽培品种,丰富遗传育种资源。在无菌条件下,将丛生芽浸入0.02%,0.05%,0.10%,0.25%,0.50%秋水仙碱水溶液中1～4d,然后转入MS+1mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA中培养;或将浸透0.02%,0.05%,0.10%,0.25%秋水仙碱溶液的药棉嵌入已转入MS+1mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA中的丛生芽上培养1～5d。结果是培养30d后,2种方法都诱导出了变异芽。通过根尖细胞染色体检测,变异芽为四倍体或嵌合体。结论为以浓度为0.1%的秋水仙碱溶液浸泡处理丛生芽3d效果最好,得到的变异芽75%为纯合的四倍体,其染色体数量由24(2n=2x=24)变为48(2n=4x=48)。

互叶白千层组织快繁及多倍体诱导

报道了互叶白千层快速繁殖方法及运用秋水仙碱诱导处理培养多倍体的几种途径。研究结果表明 :利用白千层幼嫩茎和叶作外植体均能再生成完整的植株 ;无菌扦插繁殖是最理想的快繁方法 ,繁殖系数为 (3～ 5 ) 2n;利用秋水仙碱作诱导剂 ,成功地诱导出了多倍体植株 ,其形态特征为叶色浓绿、叶片增厚、根系肥大 ,染色体数目由 2n =2x =2 2变为 2n =4x =44。

补骨脂生物学特性研究

在一般大田生产条件下,对补骨脂生物学特性进行了观察,并寻找其生长发育规律,为进一步探索高产栽培技术提供依据。

依托办学区位优势,提升兽医硕士创新实践能力

全日制兽医硕士专业学位研究生作为高素质复合应用型人才,其培养过程中应更加注重创新能力培养和专业实践能力的提高。以西南大学为例,从兽医硕士人才培养模式,共建研究生联合培养基地,培养方案强化创新实践能力,课程体系突显创新实践环节等方面,研究了依托办学区位优势,提升兽医硕士创新实践能力培养途径。

山栀子繁殖技术及品种优良性状的保持研究

山栀子繁殖技术及品种优良性状的保持研究张兴翠周昌华余红梅孟中贵胡开治（四川省中医药研究院药物种植研究所南川６４８４０８）山栀子系茜草科栀子属植物栀子Ｇａｒｄｅｎｉ－ａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｉｌｓ，为异花授粉植物。可用种子、扦插、嫁接、分株等方法繁殖...

花叶绿萝的多倍体诱导及快速繁殖

为改良现有的绿萝栽培品种,丰富遗传育种资源。在无菌条件下,将丛生芽浸入0.05%,0.1%,0.2%,0.5%秋水仙素水溶液中1d,然后转入MS+3mg·L$C16-BA+0.2mg·L$C1NAA中培养。培养30d后,4种处理都诱导出了变异芽,通过根尖细胞染色体检测,变异芽为四倍体或嵌合体,其中以浓度为0.2%的秋水仙素溶液浸泡处理效果最好,得到的变异芽71%为纯合的四倍体,其染色体数量由58(2n=2x=58)变为116(2n=4x=116)。

重庆何首乌遗传多样性的SRAP研究

目的：采用新型分子标记SRAP对重庆地区何首乌资源进行遗传多样性研究，为何首乌种质资源的分类、鉴定和选种打下良好的理论基础。方法：选择重庆各地区形态差异较大的16份何首乌材料进行SRAP多态性分析，利用DPSv3．01和UPGMA法进行聚类分析，构建遗传系统树。结果：从155个引物组合中筛选出104个多态性组合，共扩增产生了250个多态性位点，聚类分析结果显示，16份材料可以分为2大类和1个特异类，Nei＆Li相似系数在0．23-0．99，平均遗传距离为0．44。结论：何首乌资源遗传关系大体上符合地域差异，但也不能完全按照地理位置来判定它们的亲缘关系，应有少量的变异，SRAP技术研究中药资源多样性具有极大的优越性和可行性．

氮磷钾对半夏块茎生物碱含量的影响研究

目的:通过施用不同的配比肥料,观察其对半夏块茎生物碱含量的影响,进而为半夏的合理施肥提供理论依据。方法:采用三元二次正交旋转回归设计方法进行田间试验设计。结果:氮、磷、钾的施肥量与生物碱含量呈负相关关系。随着施氮、磷、钾的增加,半夏的生物碱含量均降低,影响大小顺序为氮>钾>磷,低钾水平有利于生物碱的形成,在低钾水平下,氮能促进半夏生物碱的形成,磷肥施用量的高低对半夏生物碱的形成影响不大。结论:高水平施肥对半夏生物碱的形成有不利影响,确定半夏施肥方案时,不能仅考虑产量水平,应在保证半夏块茎中生物碱含量符合中国药典规定指标的前提下加以确定。

山栀子品种资源的综合评价

山栀子品种资源的综合评价周昌华张兴翠罗健余红梅胡开治（重庆市药物种植研究所南川４０８４３５）山栀子ＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌｉｓ属异花授粉植物，不仅基因型不同而且表现型也不同，从而在自然群体中存在多个变异类型，经过多年的研究，我们摸...

川麦冬品种同工酶分析研究

川麦冬品种同工酶分析研究杨美全李品明曾维群张兴翠周斌（重庆市药物种植研究所南川４０８４３５）李晓林（西南农业大学园艺系重庆６３０７１６）川麦冬Ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｊａｐｏｎｉｃｕｓ（Ｌ．ｆ．）Ｋｅｒ．－Ｇａｗｌ．为百合科多年生常绿草本植物，以块根供药...

半夏研究概况

半夏是一种常用的中药材,由于受生态变化及人为因素影响,其野生资源日益减少。为保护和开发这一常用药材资源,已对其进行了系列的研究。本文介绍了半夏高产栽培所取得的经验以及倒苗的原因和预防倒苗的技术措施,同时对半夏生药学、药理等方面的研究情况作简要综述,以便为进一步比较研究提供参考。

半夏工厂化育苗技术体系研究初探

目的建立一套半夏工厂化育苗体系，实现半夏的快速繁殖，解决半夏生产因用种而造成的退化问题。方法探讨了外植体诱导、植物生长调节物质质量浓度、光照条件及继代周期对丛生芽增殖的影响。结果外植体的诱导以MS＋6-BA（4～5）mg／L＋NAA0．2mg／L培养基为宜。组织培养中生长调节物质质量浓度为NAA0.2mg／L＋6-BA2mg／L、转接时组织块带两个或两个以上芽时，半夏生长状况最好。结论采用工厂化育苗技术可进行半夏的快速繁殖，为保护和持续利用这一重要药材资源提供有效途径。

野葛主要成分积累动态变化研究

目的通过对野葛块根产量和主要活性物质含量积累动态变化规律进行研究,以确定野葛的适宜采收期。方法用紫外法于250 nm处比色以测定总异黄酮含量和HPLC测定其葛根素含量。结果5年生野葛6月份采收,葛根素和异黄酮含量最高,分别为7.91%,8.73%;11月份二者含量次之,分别为5.90%,7.53%。而块根产量在11月份最高,且单株块根中葛根素和异黄酮总量最高,分别为29.81,38.05 g。结论5年生野葛在11月采收具有最高的利用价值。

半夏茎尖组织培养的研究

以半夏茎尖作为外植体,研究半夏茎尖培养技术.以半夏茎尖成活率和成苗率为指标,以时间、温度、茎尖大小为因素进行正交试验.结果表明,半夏块茎在35℃的高温条件下处理21 d取出,在解剖镜下剥去3层叶原基后切取茎尖培养,可以得到较高的成活率和成苗率.

重庆主产地灰毡毛忍冬枝叶中总黄酮的含量测定

目的:测定重庆主产地不同年龄灰毡毛忍冬枝叶中总黄酮的含量.方法:采用紫外分光光度计测定法.结果:灰毡毛忍冬叶片和枝条都含有较多的黄酮类物质,其中含量变化为叶片大于枝条,嫩叶大于老叶.不同年龄灰毡毛忍冬叶片之间和枝条之间存在着显著性差异.而不同个体之间的总黄酮含量也有一定的差异.结论:灰毡毛忍冬叶片和枝条都有很好的开发利用价值.