Urocortin抑制心肌缺血再灌注诱导的自噬

目的研究urocortin(UCN)对缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬的影响,探讨UCN的心肌保护机制。方法构建大鼠在体心脏缺血再灌注损伤和离体新生大鼠心肌细胞的缺氧复氧模型,进行缺血/缺氧1h再灌注/复氧2h的损伤,在缺血/缺氧前1h给予UCN预处理;在再灌注/复氧2h后观察UCN对缺血再灌注/缺氧复氧诱导的心肌损伤、细胞自噬和自噬相关基因表达的影响。结果 UCN预处理可以显著降低缺血再灌注损伤导致的心肌损害,使梗死面积降低,血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)降低;增加缺氧复氧离体心肌细胞活力、减少培养上清的LDH水平。与上述心肌保护作用相伴随的是UCN预处理还能抑制缺氧复氧导致的心肌细胞自噬,使LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值显著降低,并且抑制自噬相关基因Beclin1、Bnip3的mRNA表达。结论 UCN可以抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬,可能在抗缺血再灌注损伤中起重要作用。

虚拟现实技术在上海市住院医师规范化培训中的应用及探讨

以虚拟现实技术设计的心脏解剖教学系统作为研究内容,以参加上海市规范化培训住院医师为研究对象,设计和传统心脏解剖教学方式相结合的教学模式,并与传统教学模式对比,发现临床教学效果的差异。在此基础上,进一步探讨住院医师培训现状以及在培训过程中引用虚拟现实技术的优点,指出该方法可充分调动住院医师的培训积极性、学习主动性。

RNA干扰血管内皮生长因子受体表达对人肺腺癌细胞的抑制作用

目的:观察人血管内皮生长因子受体(VEGFR)RNA干扰重组腺病毒(Ad-VEGFRshRNA)对人肺腺癌细胞株A549生长的抑制作用。方法:制备携带人VEGFR的RNA干扰重组腺病毒,转染A549细胞,通过荧光显微镜观察转染效率。应用Western印迹法检测A549细胞VEGFR蛋白的表达,MTT比色法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线,细胞周期及集落形成试验测定细胞生长抑制情况。同时,制备裸鼠A549细胞移植瘤模型,观察肿瘤生长情况。结果:Western印迹法显示RNA干扰组VEGFR表达水平明显降低;细胞生长曲线表明,RNA干扰后细胞生长明显减缓;细胞周期及集落形成试验提示RNA干扰后肿瘤细胞生长受到明显抑制。裸鼠皮下移植瘤生长情况提示RNA干扰可以显著抑制肿瘤生长。结论:RNA干扰重组腺病毒Ad-VEGFRshRNA能有效抑制A549细胞中VEGFR的表达,并能抑制肿瘤生长。

长链非编码RNA HIF1A-AS1对大鼠心肌缺血再灌注损伤的调控作用

目的研究长链非编码RNA HIF1A-AS1对大鼠缺血再灌注损伤的调控作用,并初步探索其机制。方法构建大鼠心肌缺血再灌注损伤和心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,利用实时定量PCR检测HIF1A-AS1的表达。采用siRNA抑制心肌细胞HIF1A-AS1的表达并制备缺氧/复氧损伤模型,用MTT法检测心肌细胞生长活力,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶的水平,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白Beclin-1的表达变化。结果 HIF1A-AS1在缺血再灌注大鼠心肌组织和缺氧/复氧损伤心肌细胞中表达上调。抑制HIF1A-AS1表达可保护心肌细胞,逆转缺氧/复氧刺激导致的心肌细胞生长活力降低、乳酸脱氢酶分泌水平增高、自噬标志蛋白Beclin-1表达增高现象。结论抑制长链非编码RNA HIF1A-AS1,可能通过抑制心肌细胞的过度自噬抵抗缺血再灌注诱导的心肌损伤。

经右胸微创切口左房室瓣手术同期单极双房射频消融治疗房颤临床分析

目的评价经右胸微创切口外科治疗左房室瓣病变并同期采用单极冲洗式射频消融术治疗房颤的手术安全性及疗效。方法选取我院2008年1月至2011年12月左房室瓣病变合并房颤患者共60例,经右胸微创切口行瓣膜手术及心内膜射频消融术30例为研究组,经正中切口行瓣膜手术30例为对照组,两组术前资料差异无统计学意义。研究组术中行左房室瓣成形或置换,并应用单极冲洗式射频消融房颤,射频线路以改良迷宫Ⅲ手术为基础。随访并比较分析两组手术疗效、术后并发症及房颤的消除率。结果研究组无中转开胸、再次瓣膜手术、延期拔除气管插管、血红蛋白尿、重要脏器功能衰竭及死亡。与对照组比较,研究组平均主动脉阻断时间和平均体外循环时间延长、胸液量和输血量减少、住院日缩短,两组差异有统计学意义(P<0.05)。研究组和对照组术后即刻、出院时、术后6个月房颤消除率分别为96.7%、66.7%、73.3%和50%、23.3%、16.7%,两组差异有统计学意义(P<0.01)。术后6个月研究组心功能改善情况好于对照组。结论经右胸微创切口实施左房室瓣手术同期行心内膜射频消融术治疗房颤,既达到微创的理念,又能有效处理左房室瓣并消除房颤,并不增加心内手术的风险及并发症,术后早、中期效果理想。

周围体外循环辅助下右侧乳房下小切口微创左房室瓣手术临床分析

目的总结50例右侧乳房下小切口微创行左房室瓣手术的临床经验和疗效。方法采用右侧乳房下小切口结合头灯光源辅助方法共对50例左房室瓣疾病患者实施体外循环左房室瓣置换或成形手术(微创组),所有患者采用单腔气管插管,仰卧位,右侧垫高20～30°,右上肢悬吊,插股动脉供血管、双极股静脉引流管的插管技术实施周围体外循环。手术主要切口为右侧乳房下小切口6～8cm(经该切口第4肋间进胸可进行心脏操作)+两孔(右侧锁骨中线第2肋间放置长冷灌针头和牵引上腔静脉阻断带、右侧腋中线第4肋间放置特制的升主动脉阻断钳和牵引下腔静脉阻断带),术者佩戴头灯,经切口可提供良好的视野光源。经房间隔切口或房间沟切口进行左房室瓣手术。对照组为同期传统正中开胸左房室瓣手术的患者50例。结果微创组无中转开胸、延期拔除气管插管、重要脏器功能衰竭、血红蛋白尿及手术死亡病例,4例术中低潮高频通气出现低氧血症,处理后好转,1例术后因肋间肌肉血管出血再次原切口进胸止血。微创组与对照组相比,手术时间、体外循环时间、主动脉阻断时间、体外辅助时间、术后拔除气管插管时间差异无统计学意义;而微创组术后住院时间缩短,术后胸液引流量、住院期间输血量明显减少(P<0.05)。出院前复查心脏超声示左房室瓣瓣膜位置、活动良好,无瓣周漏,左房室瓣成形术后微量或轻度反流,右房室瓣轻度反流,成形效果满意。结论右侧乳房下小切口第4肋进胸结合术者头灯光源辅助、周围体外循环的方法行微创左房室瓣手术,手术安全,术野暴露良好、操作简便易掌握,较常规正中开胸手术创伤小、出血少、住院时间短、切口美观隐蔽,术后早期效果理想。

互动式教学模式在胸心外科教学中的应用研究

胸心外科中的教学是交互性高、实践性强的教学活动。为了提高学生学习绩效质量,本文结合胸心外科教学的特点、交互学习的特点,提出了胸心外科中的交互式学习模式,并对教学中的应用提出了几点反思意见,以便为胸心外科教学提供一定的指导作用。

终末期心力衰竭受者术前肺动脉压对心脏移植围手术期预后的影响

目的探讨终末期心力衰竭受者术前肺动脉压对心脏移植围手术期预后的影响。方法回顾性分析行心脏移植手术的105例受者临床资料,以肺动脉平均压(mPAP)作为诊断标准,确定mPAP预测心脏移植预后的最佳临界值,根据临界值将受者分为低mPAP组(66例)和高mPAP组(39例)。比较低mPAP组和高mPAP组受者的术中指标(体外循环时间、主动脉阻断时间、辅助循环时间、供心冷缺血时间)和术后指标[主动脉内球囊反搏(IABP)支持率、IABP辅助时间、体外膜肺氧合(ECMO)支持率、ECMO辅助时间、机械通气时间、重症监护室(ICU)入住时间、三尖瓣中重度反流率、围手术期病死率],比较两组受者的预后情况。结果m PAP预测心脏移植预后的最佳临界值为30.5 mmHg。高mPAP组受者的ECMO支持率和围手术期病死率均高于低mPAP组(均为P<0.05);两组受者的体外循环时间、主动脉阻断时间、辅助循环时间、供心冷缺血时间、IABP支持率、IABP辅助时间、ECMO辅助时间、机械通气时间、ICU入住时间、三尖瓣中重度反流率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。高mPAP组和低m PAP组受者的术后1、2、3、4年的生存率间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论终末期心力衰竭患者术前肺动脉压力与心脏移植围手术期预后密切相关,mPAP=30.5 mmHg是预测心脏移植受者围手术期预后的最佳临界值,高mPAP组受者围手术期ECMO支持率高,围手术期病死率高,但并未对术后中、远期预后产生影响。

心脏外科住院医师规范化培训的问题及思考

心脏外科作为外科的重要分支,专业性强、风险高,并未在全国医院普及和开展,但因其学科特点,有助于培养住院医师的临床综合能力,而且心脏外科疾病的基本知识、基本理论、基本操作和部分危重病人的抢救处理技能已成为医生临床知识结构中必不可少的部分,住院医院规范化培训中应重视并创造条件安排心脏外科的培训。本文结合心脏外科培训工作的体会,探讨了住院医师心脏外科规范化培训的一些问题,从四个层面提出了改进措施,有利于制定更科学更实际的培训方案、帮助住院医师在有限的培训时间内完成培训目标。

沉默Yes相关蛋白1对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究Yes相关蛋白1(YAP1)在非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。方法通过慢病毒介导的小干扰RNA靶向抑制人非小细胞肺癌细胞株A549中YAP1基因的表达,采用CCK-8法、流式细胞术分别检测沉默YAP1对A549细胞增殖及凋亡周期的影响,Transwell实验观察沉默YAP1对A549细胞迁移、侵袭能力的影响。结果沉默YAP1后,A549细胞YAP1mRNA和蛋白表达均下调(P<0.01),CCK-8实验结果显示沉默YAP1抑制A549的增殖、增加G0/G1期的细胞比例(P<0.01),Transwell实验结果示沉默YAP1抑制A549细胞的迁移、侵袭(P<0.01)。结论沉默YAP1基因对非小细胞肺癌细胞的恶性生物学特征具有抑制作用,YAP1可能成为肺癌治疗的潜在靶标。

血府逐瘀胶囊对急性心肌梗死再灌注后心肌及内皮素-1、一氧化氮/一氧化氮合酶体系影响的实验研究

目的:观察血府逐瘀胶囊对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)再灌注后心肌组织及一氧化氮(nitric oxide,NO)/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)体系和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的影响,探讨其改善血管内皮功能的机制。方法:Yorkshire猪45只,随机分成假手术组、模型对照组和血府逐瘀胶囊治疗组。开胸结扎左冠状动脉前降支90min后,松解2h制备AMI再灌注模型。测定造模前后和再灌注后血清ET-1和NO的含量;冠状动脉造影观察心肌血流恢复情况;Western blot分析心肌组织内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和ET-1蛋白表达;病理学分析心肌组织形态变化。结果:血府逐瘀胶囊组造模后和再灌注后血ET-1水平低于模型组(P<0.01),而NO表达水平明显高于模型组(P<0.01)。冠状动脉造影提示治疗组冠状动脉血流通畅情况优于对照组,但结果没有统计学意义(P=0.253)。Western blot显示血府逐瘀胶囊组eNOS蛋白表达较模型组有所提高,ET-1蛋白表达则有所下降(P<0.01)。HE染色及微血管密度分析显示与模型对照组相比,血府逐瘀胶囊组毛细血管扩张程度明显减轻,心肌组织损伤明显改善,微血管密度明显增加。结论:内皮细胞受损可能是无再流现象发生的重要机制之一,血府逐瘀胶囊可能通过调控NO和ET-1基因表达来达到对AMI的治疗作用。

小干扰RNA抑制ΔNp63α表达对人食管鳞癌细胞生物学特性的影响

目的通过腺相关病毒介导的小干扰RNA(siRNA)抑制人食管鳞癌细胞Eca109中ΔNp63α的表达,观察其对食管鳞癌细胞生物学特性的影响。方法构建H1启动子驱动的表达针对ΔNp63α的siRNA重组腺相关病毒AAV-ΔNp63αshRNA并感染Eca109细胞。同时以感染空腺相关病毒AAV-Null的细胞及不加腺相关病毒的细胞分别作为对照组和空白对照组,观察siRNA干扰ΔNp63α表达在体外及体内对Eca109细胞生长、增殖、致瘤及凋亡的影响。结果与对照组和空白对照组比较,Eca109细胞感染AAV-ΔNp63αshRNA后ΔNp63α蛋白表达下降(P均<0.05),细胞生长速度减慢(P均<0.05),细胞增殖指数(proliferation index,PI)降低(P均<0.01),裸鼠瘤体质量减轻(P均<0.05),细胞凋亡增加(P均<0.05)。结论腺相关病毒介导的siRNA干扰能显著抑制Eca109细胞ΔNp63α的表达,减慢肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长。

前列地尔注射液对成人体外循环术后急性肾损伤早期患者肾功能的保护作用

目的探讨前列地尔注射液对成人体外循环术后急性肾损伤(AKI)早期患者肾功能的保护作用。方法 85例成人体外循环术后AKI早期患者,随机分为对照组42例和研究组43例。对照组和研究组均予常规治疗,研究组在常规治疗的同时给予前列地尔注射液10μg+生理盐水10ml缓慢静注,1次/12h,连用7d。对照治疗期间(7d),对照组2例、研究组3例患者因需透析治疗被剔除。观察治疗前后两组患者尿量(UV)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)的变化,并计算两组患者ICU停留时间、对照治疗结束后透析治疗率。研究组患者使用前列地尔注射液期间观察药物不良反应。结果与对照组相比,研究组治疗后UV明显增加(P<0.05),尿NAG、尿α1-MG、尿β2-MG、Scr、BUN降低(P<0.05)。研究组ICU停留时间少于对照组(P<0.05),但两组对照治疗结束后透析治疗率差异无统计学意义。研究组患者使用前列地尔注射液期间无严重不良反应。结论前列地尔注射液对成人体外循环术后AKI早期患者的肾功能具有一定的保护作用。

年龄对风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量影响的前瞻性研究

目的研究年龄对风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量的影响。方法采用前瞻性队列研究方法,将符合入选条件的2010年3月至2010年12月期间在长海医院接受主动脉瓣置换术的风湿性心脏病患者根据年龄分为3组:A组,<45岁;B组,≥45岁且<65岁;C组,≥65岁,每组14例。使用SF-36量表评估患者术前和术后不同时间(3、6、12个月)的生活质量。采用配对非参数Wilcoxon秩和检验分析3组术后与术前生活质量评分的变化;采用重复测量方法分析年龄对患者术后生活质量评分的影响。结果 (1)与术前相比,A、C两组术后3个月生理职能(RP)、总体健康(GH)、活力(VT)和精神健康(MH)等4个维度,以及术后6、12个月SF-36量表8个维度评分差异均有统计学意义(P<0.05);B组术后3个月RP、GH、VT和社会职能(SF)等4个维度评分差异均有统计学意义(P<0.05),术后6个月除MH外,余7个维度差异均有统计学意义(P<0.05),术后12个月,8个维度评分差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)各组之间比较,除A组GH评分趋势显著好于B、C两组(P=0.000)外,余7个维度评分差异均无统计学意义。结论风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量有明显改善;年龄不是影响患者术后生活质量的危险因素,但对年轻患者及时行手术治疗更有利于其GH的恢复。

无顶冠状静脉窦综合征的诊断与外科治疗

目的探讨并总结无顶冠状静脉窦综合征(UCSS)的临床表现和外科处理方法。方法1999年1月至2009年6月我科共收治9例UCSS患者,其中Ⅰa型3例、Ⅰb型1例、Ⅱa型1例、Ⅲa型3例、Ⅲb型1例。术前经超声心动图检查明确诊断6例,术中探查明确诊断3例。合并永存左上腔静脉(PLSVC)共7例,其中PLSVC直接汇入左房(Ⅰa型)3例,采取房间隔重建术1例,心内隧道术2例;PLSVC汇入冠状静脉窦后同时开口于左右房(Ⅱa型)1例,开口于左房(Ⅲa型)3例,均处理冠状静脉窦左房开口。合并其他心内畸形或继发性改变同期手术矫治。结果术后早期2例出现并发症,余7例恢复顺利。全组均痊愈出院,1例失访,8例随访2个月至5年,无死亡和晚期并发症发生。结论UCSS是一种罕见的先天性心脏病,术前诊断有一定困难,术中须仔细探查,可根据PLSVC连接心房的方式、冠状静脉窦异常开口的位置、合并其他心内畸形或继发性改变的特点选择手术方法,如能达到生理性矫治则预后良好。

谈加强医学生人文素质的培养

卓越医师不仅要求具有高超的医疗专业水平,还应有高尚的职业道德和良好的人文素质。在医学院校教育中,着重加强塑造和培养高尚的职业道德、严谨的批判性思维和高超的交流沟通技能,是选拔和培养医学生的必要条件,也是卓越医师教育培养计划的重要组成部分。

血管内皮细胞生长因子RNA干扰真核表达载体的构建

目的构建特异性的人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因siRNA真核细胞表达载体,为探索RNA干扰(RNAi)分子靶向治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的作用奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的VEGF基因核苷酸序列,按照Reynolds设计原则,针对VEGF的序列及二级结构选择靶序列,设计双链小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pRNAi-H1质粒定向连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子Hl的真核表达载体pRNAi-H1VEGF siRNA,经限制性内切酶酶切、PCR和DNA测序进行鉴定。结果构建针对人VEGF的RNAi真核细胞表达载体经限制性内切酶酶切、PCR和DNA测序证实与设计完全一致。结论针对人VEGF的RNAi真核细胞表达载体构建成功。

风湿性心脏瓣膜病合并活动期真菌性心内膜炎的手术治疗1例报告

1临床资料患者，男性，42岁，于2009年6月5日因“活动后乏力、气急20余年，反复发热2个月”入我院。查体：体温37．5℃，血压110／76mmHg（1mmHg-0．133kPa）。营养状况差，急性面容；双肺呼吸音清；房颤心律，

腺病毒介导RNA干扰抑制血管内皮生长因子的表达治疗人肺腺癌的实验研究

目的:构建针对人血管内皮生长因子(VEGF)的腺病毒载体pAd-Easy/VEGF,应用RNA干扰的方法,观察其在体内和体外对人肺腺癌细胞株A549生长的抑制作用。方法:应用PCR构建RNA干扰pAd-Easy/VEGF腺病毒载体,并利用该线性化质粒用Lipofectamine2000转染293细胞,制备携带人VEGF的腺病毒转染A549细胞。荧光显微镜和流式细胞仪观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的转染效率,RT-PCR和蛋白质印迹法检测VEGFmRNA的表达,MTT比色法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线。同时制备裸鼠A549细胞移植瘤模型,观察肿瘤生长情况。结果:pAd-Easy/VEGF重组质粒经测序证实已把预设人VEGF基因RNA干扰的siRNA模板序列插入载体。转染重组腺病毒及空病毒24h后流式细胞术测得转染效率分别为100%、99.7%。pAd-Easy/VEGF组VEGF表达水平较生理盐水对照组明显降低。pAd-Easy/VEGF组细胞生长明显减缓。pAd-Easy/VEGF治疗组肿瘤体积和质量明显小于对照组(P<0.01)。结论:pAd-Easy/VEGF介导的VEGFshRNA能有效抑制A549细胞中VEGF的表达,并在体内抑制肿瘤生长。

高龄患者冠状动脉旁路移植术早期死亡危险因素分析

目的:比较高龄冠心病患者术后早期死亡的危险因素与非高龄患者的不同。方法:选择行单纯冠状动脉旁路移植手术患者820例,高龄组(年龄≥70岁)222例,对照组(年龄<70岁)598例。收集患者入院后的相关资料,危险因素分为术前变量、术中变量及术后变量,进行统计学分析。结果:影响高龄患者早期死亡的危险因素为:术前合并COPD(OR=7.653)、OPCAB(OR=6.785)、体外循环时间(OR=1.263)。结论:对于高龄患者术前合并COPD及体外循环时间延长是高龄组患者术后早期死亡的独立危险因素;高龄患者更易从OPCAB中获益。