bHLH转录因子调控药用植物萜类化合物生物合成的研究进展

萜类是种类最多的植物次生代谢产物,具有广泛的药理活性,但含量低是普遍存在的问题。转录因子(transcription factor,TFs)能在转录水平上调控次生代谢合成途径中多个基因的协同表达,与植物的生长发育、形态建成、次生代谢、抗逆反应和激素信号有着密切的关系,其中bHLH类转录因子是最大的转录因子家族之一。随着bHLH转录因子在不同药用植物中被陆续发现,如何在基因工程和代谢工程中应用,提高萜类化合物的产量,实现大规模工业化生产,满足广大患者的需要成为研究的热点。本文主要总结了近年来bHLH转录因子对萜类合成途径的调控作用。

人TFPI基因转染对兔移植静脉血栓形成和近期通畅率的影响

目的:为减少冠状动脉旁路移植术后血栓形成,探讨人组织因子途径抑制因子(TFPI)基因转染对兔移植静脉血栓生成的影响。方法:构建真核表达质粒pCMV-(Kozak)TFPI。采用阳离子脂质体和腔内加压灌注法,转染移植静脉内皮细胞。RT-PCR、Western blotting和免疫组化法检测外源基因在兔移植静脉中的表达。病理标本、扫描电镜观察移植静脉血栓形成情况,血管多普勒观测其通畅率。结果:移植静脉中有人TFPI基因和蛋白表达。静脉移植术后3d,基因转染组、空载体和空白对照组分别有1条、8条和7条移植静脉发生血栓,术后30d,以上各组分别有0条、5条和5条移植静脉完全闭塞,前者静脉血栓发生率和闭塞率均低于后两者(P<0.05)。扫描电镜显示两对照组内皮表面有红细胞和血小板黏附、聚集,而转染组基本正常。结论:人TFPI基因干预,减少了兔移植静脉血栓形成,提高了近期通畅率。

人工机械瓣膜替换围术期凝血功能改变及抗凝治疗

为探讨人工机械瓣膜围术期合理抗凝治疗， 减少血栓栓塞与抗凝出血并发症， 对４０ 例患者术前、术中及术后第１、３、７、１５ ｄ 凝血酶原时间（ＰＴ）、血浆凝血因子Ｘ活性、抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ Ⅲ）、Ｄ－二聚（Ｄ－ｄｉｍ ｅｒ）、纤维蛋白原含量（Ｆｇ） 及血浆血小板α颗粒蛋白（ＧＭＰ－１４０） 改变进行了动态监测。研究结果： 体外循环期间及术后早期， 出现大量血小板破坏、多种凝血因子减少、抗凝血酶Ⅲ水平降低， 同时伴有继发性纤溶活性增强。讨论了引起凝血功能异常的因素以及围术期及时抗凝治疗并适当提高抗凝强度的意义。

机械瓣替换术后抗凝与凝血状态的观察

为探讨心脏机械瓣膜替换术后口服华法令抗凝治疗期间 ,凝血因子的变化及 μFPA与 INR的相关关系 ,随机选取 10 2例机械瓣替换术后口服华法令抗凝治疗患者 ,稳定抗凝治疗 1个月以上。4 2例健康志愿者为对照组 ,一期法测定 INR、纤维蛋白原 ( Fg)及凝血因子 、 的活性 :C、 :C;高效液相色谱法 ( HPL C)测定尿液纤维蛋白肽 A的尿肌酐校正浓度 ( μFPA)。结果表明 :口服华法令抗凝治疗者 :C、 :C显著降低 ,分别为 ( 4 8.5± 2 0 .2 ) %、 ( 3 9.4± 16.7) % ;μFPA均值 ( 6.7± 4 .3 ) ng/ m gcr,显著低于正常值 ;INR在 2 .0～ 3 .0时 , :C、 :C适度抑制 ;INR>3 .0时 ,呈过度抑制 ;INR在 2 .0～ 2 .5时 ,μFPA与 INR呈负相关 ( r=- 0 .5 194 ,P<0 .0 0 1) ;Fg在抗凝早期 ( 3个月内 )显著增高 [( 4 .2 3± 0 .2 7) g/ L,P<0 .0 0 1],抗凝晚期 ( 3个月以后 )逐渐降至正常范围。小剂量口服华法令抗凝显著抑制 :C、 :C,抗凝效果良好 ;国人抗凝适当范围 INR2 .0～ 3 .0 ;μFPA小剂量抗凝时与 INR呈负相关 ,与 :C、 :C呈弱的正相关。用 μFPA指导抗凝有一定价值。

不同生长时期罗汉果果实转录因子的转录组分析及酵母单杂交文库的构建

目的:研究罗汉果果实中的转录因子(transcription factors,TFs)。方法:在授粉后3、50、70 d(days after flowering,DAF)的罗汉果果实转录组中查询注释为转录因子的所有非重复Unigene,并在表达谱中查找其表达情况;应用Matchmaker Yeast One-Hybrid Library Construction系统构建酵母单杂交c DNA文库。结果:罗汉果表达谱数据中共有38个家族的119个转录因子Unigene具有表达差异,其中以70 DAF/3 DAF和50 DAF/3 DAF组中具有差异表达的转录因子数目较多,且上调和下调的转录因子Unigene数目相近。此外,初步筛选到4个可能参与罗汉果甜苷合成调控的b HLH(basic helix-loop-helix,b HLH)转录因子Unigene(b HLH014、b HLH025、b HLH093、b HLH096)及8个可能参与黄酮类化合物合成调控的MYB转录因子Unigene;成功构建了酵母单杂交文库p GADT7-Rec2-Lib,其库容量为2.3×106 cfu,插入片段的平均长度约为1.5 kbp。结论:转录组数据分析和酵母单杂交实验有助于筛选罗汉果果实中具有调控作用的转录因子。

柴油机低温启动过程关键影响参数研究

为实现柴油机在极端低温环境下可以具备较好的启动性能,对相关影响柴油机启动的参数进行研究。通过正交仿真研究了环境因素(进气压力、进气温度)、设计参数(压缩比、燃烧室缩口比、喷嘴直径)、控制参数(喷油温度、预喷油量、主喷提前角、主喷持续期、主预喷间隔)对柴油机低温条件下启动过程的影响,通过极差分析提取出对柴油机启动过程影响较大的关键影响参数,并以缸内压力、缸内温度和瞬时放热率为评价指标对各因素进行参数匹配研究。结果表明,环境因素和控制参数对柴油机启动过程的影响程度更高,进气压力、进气温度、主喷提前角和主喷持续期为影响柴油机低温条件下启动的关键影响参数,并选择组合1作为最佳参数匹配组合。研究得到了柴油机低温启动过程中的关键影响参数,可为改善低温环境下柴油机的启动效果提供参考。

Ebstein心脏畸形的外科治疗

我所自1989年11月至1993年7月为5例Ebstein心脏畸形病人施行了外科治疗。其中3例行房化右心室游离壁折叠术和后瓣环成形术；1例行后瓣环成形术和手术切断旁路传导束及冷冻切断房室结双径路；1例行三尖瓣置换术。无术后早或晚期死亡。对手术适应证，认为手术时机可放宽到心功能严重受损以前施行。手术方法则应根据病变而选择。

二氮嗪对缺血再灌注致大鼠心肌细胞坏死和凋亡的影响

目的研究二氮嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护效果。方法健康SD大鼠随机分为两组,实验组静脉注射二氮嗪12.5 mg/kg进行预处理,对照组静脉注射相应量溶媒,10 min后每组大鼠均行左侧开胸,结扎左前降支,造成局部心肌缺血2 h,恢复再灌注2 h后取心脏,测量心肌梗死面积大小及采用TUNEL法原位标记缺血区凋亡心肌细胞。结果与对照组相比,二氮嗪预处理组心肌梗死面积显著减小(P<0.05),心肌细胞凋亡发生率明显降低(P<0.05)。结论二氮嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用,能减少心肌细胞坏死和凋亡。

原位同种心脏移植术后早期急性排斥反应的监测与治疗

我院心外科于１９９４年３月成功地为１例１３岁晚期扩张型心肌病女性患者施行了原位同种心脏移植术。术后存活２８ｄ．因第三次心肌急性排斥反应抢救无效死亡。作者强调应采用多种抗排斥反应药物，且需小剂量，对使用抗胸腺细胞球蛋白药物应谨慎．尽管拥有众多的非侵入性检查，但没有一种非侵入检查技术能直接有效地诊断心肌排斥反应，心内膜心肌活检是监测心肌排斥反应最直接可靠的手段而不能被取代。

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

主动脉窦瘤破裂是一种少见的疾病。1981年7月～1989年9月,我所为18例主动脉窦瘤破入右心腔的病人施行了修补手术。临床资料一、一般资料:男13例,女5例,年龄12～53岁。14例起自右冠窦,4例起自无冠窦。主动脉窦瘤穿破右室16例,右房2例,合并畸形有室间隔缺损8例,右室流出道狭窄1例。

鹅颈式远射程苗圃风送喷雾机设计与试验

苗圃种植呈现“密植、连片”的特点,传统风送式喷雾机难以兼顾“气流射程远、雾滴沉积均匀”的双重要求,导致药液附着率低、雾滴飘移等问题。针对上述问题,该研究基于CFD仿真与自由淹没射流理论设计“鹅颈式三出风口”分流结构并通过计算获得其关键参数,研制出鹅颈式远射程苗圃风送喷雾机,并开展了气雾流场分布规律测试与田间试验。试验结果表明,风机转速大于等于2 200 r/min时,3个出风口的气流速度满足射程20.0 m的喷施要求,轴向上气流能量衰减速度缓慢且均匀;风机转速为2 400 r/min,喷雾机行驶速度为1.0 m/s时,雾滴沉积量随喷施距离增大呈现少-多-少的趋势,雾滴沉积量较为均匀,变异系数为28.87%;田间试验冠层上部叶片正反面雾滴覆盖率分别为51.93%、24.38%,下部分别为42.99%、19.26%;冠层上部叶片正反面平均雾滴沉积量分别为13.34和2.82μL/cm^(2),下部分别为5.44和2.63μL/cm^(2),满足植保喷雾作业需求。研究结果可为苗圃风送式远射程施药装备研发提供新思路。

两相流振荡流动特性的可视化实验研究

为了解决活塞内冷油腔中气液两相流的振荡传热问题,设计并搭建了由柴油机改装的往复振荡实验装置,利用高速摄像技术对内冷油腔实验件中气液两相流的振荡流动过程进行了可视化观测实验,分析在不同转速和液体填充率下实验件中气液两相流在起振阶段和充分振荡阶段的振荡流动形态。结果表明:在起振阶段,气液两相的分界面明显,没有强烈的湍流混合运动,在充分振荡阶段,液体的运动规律及流动形态呈周期性变化;转速主要影响气液两相流的湍流强度,填充率主要影响气液两相流的流动形态。研究结果揭示了内冷油腔中气液两相流的振荡流动规律,可为高强化活塞的结构优化设计提供参考。

老年患者机械瓣膜替换术后合理抗凝治疗研究

目的 探讨老年患者机械瓣膜替换术后合理抗凝治疗。方法 将129例患者分为2组,A组年龄≥65岁(30例),B组年龄<65岁(99例),随访2～79个月,比较不同年龄组在不同抗凝强度下血栓栓塞和出血发生率,观察抗凝效果。结果 随访期间共发生与抗凝有关的出血16例,血栓栓塞6例,其中A组分别为4例(13.3％)和2例(6.7％),B组12例(12.1％)和4例(4.0％)。死亡4例(3.1％),A组1例(3.3％),B组3例(3.0％)。在同一抗凝水平下,A、B两组血栓栓塞和出血发生率差异无显著性意义,抗凝治疗期间国际标准化比值(INR)长时间低于1.65或高于2.50者,血栓栓塞和出血发生率高于INR 1.65～2.50水平者。结论 老年患者机械瓣膜替换术后维持INR为1.65～2.50,可有效减少抗凝并发症。

烤烟成熟期质体色素含量和颜色值的变化

【目的】本文研究了成熟期烤烟质体色素含量和颜色参数值的关系。【方法】以云烟87和红花大金元为试验材料,定量测定了成熟期烟叶颜色参数值和质体色素含量并进行了相关分析。【结果】成熟期烟叶绿色素含量和颜色参数H*值整体均呈下降趋势,其余颜色参数值整体均呈增加趋势,黄色素含量先升高后降低。相关分析表明,成熟期烟叶绿色素含量与H*值呈极显著正相关,与其余颜色参数值均呈极显著负相关,烟叶黄色素与H*值呈极显著负相关。线性回归分析表明,绿色素的决定系数R^2值较大(R^2>0.990),紫黄质值最小(R^2=0.663),但模型预测不同品种烟叶质体色素含量具有一定的局限性。【结论】颜色参数a*和C*值是反映成熟期绿色素含量的较佳指标,C*、H*值是反映成熟期黄色素含量的较佳指标。

无创性缺血预处理延迟相心肌保护作用及其机制的研究

目的 通过建立大鼠在体缺血再灌注模型 ,探索无创性缺血预处理 (NIPC)延迟心肌保护作用 ,以及核因子κB (NF κB)在此过程中所起的作用。方法 将SD雄性大鼠随机分成 4组 ,Ⅰ组 (I/R组 ) ;Ⅱ组 (NIPC组 ) ;Ⅲ组 (PDTC +NIPC组 ) ;Ⅳ组 (PDTC组 )。PDTC为NF κB特异性抑制剂。建立体内大鼠缺血再灌注模型 ,分别结扎前降支 4 5min ,复灌 30min ,观察大鼠心肌超微结构、心律失常发生率 ,并测量超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛(MDA)、热休克蛋白 70 (HSP70 )、NF κB的值 ;复灌 2h测定心肌梗死面积。其中NIPC为I/R前 2 4h采用止血带阻断双下肢血流 5min ,复灌 5min ,反复 3个循环。结果 Ⅱ组心功能恢复优于其它 3组、心梗面积小于其它 3组(P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;心律失常发生率较其他 3组低 (均P <0 0 5 )。Ⅲ组的各项结果与另外 3组比较均有统计学意义 ,Ⅰ和Ⅳ组的结果差别没有统计学意义。结论 无创性缺血预处理可以起到延迟相心肌保护作用 ;NF κB在预处理过程中可以诱导产生心肌保护蛋白 ,但在心肌持续缺血过程中作为一种重要炎症因子可加重心肌损伤。

Stanford A型主动脉夹层的外科治疗

目的 分析报道StanfordA型主动脉夹层这一凶险复杂疾病的外科治疗方法。方法 2006年6月至2007年9月采用手术治疗StanfordA型主动脉夹层患者24例，经增强血管CT（CTA）、磁共振扫描（MRI）、心脏彩色多普勒（UCG）确诊。无名动脉或右腋动脉＋腔房管插管建立体外循环，涉及弓部置换的15例均采用深低温（鼻咽温度16～18℃）停循环选择性脑灌注。依据内膜破口位置、夹层累及的部位、有无主动脉瓣关闭不全采用不同的手术方式，其中Wheat术2例、David术1例、Bentall术6例、Bentall术＋半弓置换3例、Bentall术＋全弓置换＋支架象鼻5例（其中合并CABG3例）、升主动脉＋全弓置换＋支架象鼻7例。结果 平均体外循环时间（197．3±28．3）min，平均心肌阻断时间（86．1±10．8）min，深低温停循环选择性脑灌注时间（41．2±8．7）min。死亡2例（8．3％），1例患者出现一过性脑功能紊乱，1例出现声音嘶哑。结论 外科手术治疗StanfordA型主动脉夹层明显降低死亡率。消除假腔、置换病变血管、重建分支血管血供是手术原则和治疗思考顺序。手术治疗加血管内支架植入这一杂交技术成为StanfordA型主动脉夹层的经典术式。

主动脉内球囊反搏在冠状动脉旁路移植术围术期的应用

目的探讨主动脉内球囊反搏(IABP)在冠状动脉旁路移植术(CABG)围术期的应用效果。方法在CABG围术期,对急性心肌梗死(2例)、术中停体外循环困难(16例)、停体外循环后发生低心排血量(7例)和发生恶性心律失常、心跳骤停行心肺复苏后(3例)患者经皮股动脉穿刺置入IABP进行循环辅助。结果IABP辅助时间36h～7d(74.16±31.64h),住ICU时间为4～27d。围术期死亡3例,死亡率为10.7%(3/28);其余患者均存活。使用IABP后舒张压从48.7±3.1mmHg升至68.0±8.8mmHg(t=4.504,P<0.01),平均动脉压从52.0±8.8mmHg上升至73.0±9.5mmHg(t=6.060,P<0.01),多巴胺用量由12.8±2.6mmol/L降至8.5±1.3mmol/L(t=3.490,P<0.01)。随访25例,随访时间6个月,25例患者心功能均恢复良好,无1例发生并发症。结论在CABG围术期使用IABP可明显改善危重患者的心功能,掌握好IABP的使用指征和时机是救治危重患者成功的关键。

复杂先天性心脏病术后延迟关胸的原因及意义

回顾性分析27例复杂先天性心脏病术后延迟关胸患儿的临床资料。延迟关胸的原因分别为术后循环不稳定5例,难止性出血3例,循环不稳定及难止性出血19例。术后保持胸骨开放直接回ICU,待达到关胸指征后重新关胸。结果显示,延迟关胸者术后痊愈22例(81.48%),放弃治疗1例,死亡4例。延迟关胸时间为术后(57.13±14.44)h,呼吸机使用时间为(100±26.02)h,ICU停留时间为(11.56±5.77)d。因合并难止性出血者术后引流量为(86.89±13.79)ml/kg。术后并发伤口感染4例,肺部感染6例,血糖异常升高3例。认为对于复杂先心病术后出现的循环不稳定、出血等术后无法立即直接关胸者,延迟关胸是一种安全而有效的解决方法。但是延迟关胸也存在肺部及伤口感染等并发症。

NF-κB激活对缺血再灌注心肌TNF-α和IL-1β表达的影响

目的探讨心肌缺血再灌注损伤时NF-κB激活对TNF-α和IL-1β表达的影响。方法65只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=5);对照组(心肌缺血30 min后再分别灌注0、15、30、60、120、240 min,每个时间点n=5);PDTC干预组,术前给予PDTC 15 mg/kg,其它与对照组相同。RT-PCR检测TNF-α和IL-1βmRNA表达,电泳迁移率实验(EMSA)检测NF-κB活性,硫代巴比妥酸法测定心肌MDA含量。结果TNF-α和IL-1β表达在再灌注开始之前即有升高,分别在再灌注30和60 min达到高峰,再灌注120 min仍维持较高水平;NF-κB在再灌注15 min开始激活,至再灌注60 min达到高峰。PDTC干预组的NF-κB激活被阻断,与对照组各时间点相比,TNF-α和IL-1βmRNA表达均不同程度下降,MDA含量减少。结论NF-κB激活对缺血再灌注心肌细胞因子表达具有重要作用,抑制NF-κB信号通路可能对于再灌注损伤具有潜在的治疗价值。

27例围手术期主动脉内球囊反搏治疗的分析

目的 报道 2 7例围手术期应用主动脉球囊反搏 ( IABP)治疗心脏术前、术中、术后顽固性心功能不全和心绞痛经验 ,评估 IABP的有效性、死亡率和并发症发生率。方法 自 1999年 3月至 2 0 0 0年 11月在协和医院连续 2 7例患者围手术期应用 IABP治疗 ,其中心脏瓣膜疾病 10例、冠心病 14例、扩张性心肌病 1例、左房粘液瘤 1例、肾肿瘤1例。结果 2 0例有效 ( 74.0 % ) ;7例死亡 ( 2 6.0 % )。IABP致命性并发症发生情况 ,下肢缺血表现 1例 ( 3 .7% ) ;局部血肿 4例 ( 14.8% ) ;神经系统症状 2例 ( 7.4% )。结论 IABP对围手术期药物治疗无效的因心肌供血不足而引起的顽固性心功能不全和心绞痛有明显作用。穿刺操作熟练可降低并发症发生 。