狼疮性肾炎肾活检病理与临床对照分析

目的探讨狼疮性肾炎(LN)不同病理类型与临床表现特点的关系。方法采用肾穿刺活检、免疫荧光、组织化学以及临床检验(尿检,SCr,ANA,dsDNA,C3)等方法对75例LN病人临床与病理改变进行对照分析和观察。结果 75例LN中,急性肾炎综合征(AG)占48例(64%),Ⅲ型LN占26例(34.67%),二者为LN最多见的临床和病理类型;Ⅳ型LN各项临床检测指标异常(尿改变、ds-DNA阳性以及补体C3降低等)明显高于其他类型LN。结论 AG和Ⅲ型LN分别为发病率最高的临床和病理类型;Ⅳ型LN的临床检查指标异常提示,LN免疫机制异常与病变程度关系密切。

肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．

人黑色素瘤细胞系中MTS_1/p16CDK_4基因的突变

目的 探讨MTS1/p16CDK4基因在人肿瘤细胞中的突变及意义。 方法 采用PCRSSCP方法和基因序列测定技术对人黑色素瘤细胞系Bowes、Hela细胞和正常人肺细胞HFL中p16基因exon2进行检测和分析。 结果 Bowes细胞和Hela细胞中p16基因exon2扩增的单链DNA在聚丙烯酰胺凝胶中泳动加快,表明其DNA顺序存在单链构象改变。核酸序列测定证实第341号核苷酸发生T→C的颠换。 结论 p16基因的突变导致其编码蛋白质异常,引起细胞异常增殖。p16基因的突变是肿瘤发生和发展的重要原因。

应用地高辛配基标记cDNA探针检测肾综合征出血热病人尸检组织中病毒RNA

应用地高辛配基标记的流行性出血热汉坦病毒RNA M和S片段cDNA探针对因出血热死亡的病人15种尸体解剖组织的51例石蜡切片进行病毒RNA原位杂交检测.结果显示,51例尸检组织中,病毒RNA M片段阳性检出率为70.59%(36/51),S片段为76.47%(39/51).病毒RNA主要存在于各种上皮组织胞浆中,呈包涵体样或弥漫分布.提示,汉坦病毒是一种泛嗜性病毒,主要侵害人体多种上皮组织,其侵害能力因地区不同亦有差异.用原位杂交法在尸检组织中直接检测病毒RNA是一种敏感而特异的方法,优于免疫组化法.

人肝癌及肝硬变中胰岛素样生长因子Ⅱ的表达及其与HBXAg的关系

本文对60例肝癌(HCC)和47例LC(肝硬变)石蜡切片进行了免疫组化研究。结果显示:胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF—Ⅱ)在HCC、癌旁肝和LC中均可阳性表达,其表达强度以HCC最强,癌旁肝和LC次之。在癌旁肝和LC中增生活跃的肝细胞(如:多倍体、双核肝细胞及小多角细胞等),IGF—Ⅱ可呈较强阳性。在HBxAg阳性表达的HCC和LC组织中,IGF—Ⅱ的阳性率明显高于HBxAg阴性的组织(x^2检验,p<0.05)。癌旁肝和LC组织中一种小多角细胞(SPLC)不仅可以表达IGF—Ⅱ,而且还可以表达HBxAg。上述结果提示,IGF—Ⅱ在HCC中可呈强阳性表达,IGF—Ⅱ的作用可能与HCC恶性增殖有关。SPLC为一种增生活跃的幼稚肝细胞,不仅可以表达IGF—Ⅱ而且还呈HBxAg强阳性。我们认为,SPLC较容易受到HBV等致病因子的侵害,而HBV的表达产物—HBxAg可以通过反式调节机制激活IGF—Ⅱ基因并过量表达,致使SPLC增殖。在癌旁肝和LC中部分肝细胞可呈IGF—Ⅱ强阳性表达,说明这部分细胞处于“活跃增殖”状态,是否具有恶性转化趋势,尚待进一步研究。

11G工程细胞株人尿激酶原基因拷贝数的测定

采用DNA印迹和狭线印迹(Slot blot)的方法,对高效表达人尿激酶原(Pro-UK)的工程细胞11G含有的pro-UK基因拷贝数进行了测定。结果显示,11G工程细胞株内所含的pro-UK拷贝数为100～200/细胞。结果证明,11G细胞株是稳定高表达pro-UK的工程细胞,符合WHO规定的关于用于基因工程产品的外源基因转化细胞的标准。

人肝癌石蜡切片N-ras,C-myc癌基因的表达

为了探讨癌基因在人肝细胞癌发生过程中的作用,我们用生物素标记的N-ras,C一myc癌基因探针,在21例肝癌石蜡切片上进行了原位分子杂交,并进行光镜组织学观察。

人膀胱移行细胞癌中c-erb B-2基因扩增的检测及意义

为了探讨膀胱移行细胞癌中c-erbB-2基因扩增的意义,应用Southern blot方法对51例石蜡包埋的膀胱移行细胞癌标本进行c-erbB-2基因扩增的检测。结果显示,31.4%(16/51)的标本呈c-erbB-2基因扩增。在不同分化程度的膀胱移行细胞癌中c-erb-2基因扩增率的差异无统计学意义(P〉0.05),表明人膀胱移行细胞癌中存在c-erb B-2基因的扩增,但与膀胱癌细胞分化及恶性程度无相关性。

肝硬化及肝癌癌旁肝组织中小多角肝细胞性质的免疫组化研究

为了探讨小多角肝细胞(SPLC)的性质和特点,应用免疫组化方法,对60例肝细胞癌(HCC)癌旁肝组织和47例肝硬化组织中 HBxAg 和胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的表达进行实验观察。结果显示,在癌旁肝和肝硬化 SPLC 中 HBxAg 和 IGF-Ⅱ的阳性表达率分别为69.1%和66.7%,其中 HBxAg 阳性的 SPLC 中 IGF-Ⅱ阳性率为82.1%,而 HBxAg 阴性的 SPLC 中 IGF-Ⅱ阳性率为32.0%。IGF-Ⅱ在 HBxAg 阳性的 SPLC 中的表达明显高于 HBxAg 阴性 SPLC 组(P<0.05)。结果表明,SPLC 为癌旁肝和肝硬化等病变肝组织中一种幼稚的肝细胞成分,具有肝细胞和胆管细胞分化潜能,其增殖和分化的作用可能与肝细胞再生、胆管增生及肝内纤维增生关系密切。

肝硬变及肝癌癌旁肝组织中小多角肝细胞性质的免疫组化研究

应用免疫组织化学的方法对６０例ＨＣＣ、癌旁肝组织和４７例肝硬变组织中ＨＢｘＡｇ和ＩＧＦⅡ表达进行实验观察，以探讨小多角肝细胞（ＳＰＬＣ）的性质。结果显示，在癌旁肝和肝硬变的ＳＰＬＣ中ＨＢｘＡｇ和ＩＧＦⅡ的阳性表达率分别为６９１４％和６６６７％，其中ＨＢｘＡｇ阳性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦⅡ阳性率为８２１４％，而ＨＢｘＡｇ阴性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦⅡ阳性率为３２００％。ＩＧＦⅡ在ＨＢｘＡｇ阳性的ＳＰＬＣ中的表达明显高于ＨＢｘＡｇ阴性ＳＰＬＣ组（Ｐ＜００５）。结果表明，ＳＰＬＣ为癌旁肝和肝硬变等病变肝组织中一种幼稚的肝细胞成分，具有肝细胞和胆管细胞分化潜能，其增殖和分化的作用可能与肝细胞再生。

人膀胱移行细胞癌中c－erbB－2基因扩增的检测及意义

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法对５１例石蜡包埋的膀胱移行细胞癌标本进行ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增的检测。结果显示，３１．３７％（１６／５１）的标本呈ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。在不同分化程度的膀胱移行细胞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增率差异无统计学意义（χ２检验，Ｐ＞０．０５）。表明人膀胱移行细胞癌中存在ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的扩增；但ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的扩增与膀胱癌细胞分化及恶性程度无相关性。

人膀胱移行细胞癌中C-myc、Ha-ras癌基因mRNA原位检测及意义

应用 Dig 标记的 cDNA 探针对51例膀胱移行细胞癌石蜡切片进行 C-myc、Ha-ras 癌基因mRNA 的原位杂交检测。结果显示,C-myc mRNA 阳性率为62.75%(32/51),Ha-ras 为70.6%(36/51)。二者的阳性率和阳性强度随肿瘤的恶性程度的升高而增加。在临床分期较高的肿瘤中二者的阳性率亦明显增高。上述结果提示,C-myc、Ha-ras 癌基因在人膀胱移行细胞癌中的表达增强与膀胱癌的恶性程度及其肿瘤临床特性有关。

癌基因理论及其在膀胱肿瘤中的研究

当代分子生物学及其实验技术的发展,使肿瘤的病因学研究已经扩展到细胞分子水平。国内外许多研究表明,癌基因与肿瘤发生关系密切。本文仅就癌基因的基础理论及其与膀胱肿瘤的关系综述如下。1 癌基因的组成及致癌机理癌基因(oncogene)是一类具有使正常细胞转化潜能的 DNA 序列。70年代人们从致瘤性逆转录病毒中发现可使易感细胞恶变的基因序列,命名为病毒癌基因(viral oncogene,V-onc)。1978年 Bishop 首次证实正常脊椎动物基因组中存在有 V-onc

肝细胞癌与胰岛素样生长因子2 乙型肝炎病毒X抗原的关系

近年来的研究表明,肝细胞癌的发生是多步骤,多因素作用的结果。肝癌组织中多种癌基因的异常表达与肝癌发生关系密切。已报道,至少有7种癌基因参与了肝细胞癌的恶性转化过程;即IGF-2、C-myc、N-ras、p53、C-fos,C-ets-2和C-fms。上述癌基因的激活因素和过程则是复杂多变的,其中最引人关注的是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的作用。本文仅就肝细胞癌与IGF-2和HBV的关系及研究现状综述如下:

非酒精性脂肪性肝炎大鼠血清肿瘤坏死因子α变化和肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达

目的探讨TNFα和PPARγ在高脂饮食所致脂肪性肝炎形成中的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分组为3组,每组10只,正常组普通饲料喂养;模型Ⅰ、Ⅱ组喂高脂饲料。12周末处死正常组和模型Ⅰ组大鼠,模型Ⅱ组大鼠继续喂养至16周末处死.测定血清肿瘤坏死因子α(TNFα)含量,肝匀浆丙二醛(MDA)含量,观察肝组织学改变,免疫组化法测PPARγ表达。结果模型组大鼠肝组织脂质过氧化产物MDA含量与正常组比明显升高(Ⅰ组6.45±1.07,Ⅱ组8.38±1.32μmol/g,vs正常组5.08±0.91μmol/g,P<0.01),血清TNFα水平明显增高(1.95±0.39,2.48±0.50μg/Lvs0.82±0.18μg/L,P<0.01),肝脏的脂肪变性程度和炎症活动度计分均显著增高(P<0.05),PPARγ阳性表达细胞明显减少(P<0.05),但与脂肪变性的严重程度无关,而与肝组织的炎症活动度呈负相关。结论TNFα为非酒精性脂肪肝发病过程中胰岛素抵抗的一个关键性介质,PPARγ表达减弱在NASH大鼠模型脂质过氧化、炎症介质释放、肝组织损伤等方面起着关键作用。

人肝细胞癌中N－ras、c－myc癌基因的表达──原位分子杂交和免疫组织化学研究

为了明确Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ癌基因在人肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达及其形态学分布，我们对３８例石蜡包埋的ＨＣＣ（其中３３例带有癌周肝组织）标本进行了原位核酸杂交和免疫组化研究。结果表明，ＨＣＣ及癌周肝组织中Ｎ－ｒａｓ表达阳性率分别为４２％和３９％；ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性表达率分别为４７％和３６％；ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性率分别为５３％和３９％。ＨＣＣ与癌周肝之间Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及ｃ－ｍｙｃ蛋白表达水平无显著差别；ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及蛋白阳性强度也无显著差别，其形态学分布基本一致，主要集中于癌细胞和癌周肝中的部分高度增生结节；Ｎ－ｒａｓ表达增强主要见于癌细胞、癌周肝中的高度增生结节、小细胞性不典型增生及少部分肝小多角细胞。它们与ＨＢｘＡｇ表达之间无明确的对应关系。上述结果显示，ＨＣＣ中Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达都显著增强，它们可能是人ＨＣＣ发生中较晚期的事件，而Ｎ－ｒａｓ表达增强早于ｃ－ｍｙｃ癌基因活化。

外阴白斑细胞角蛋白的表达和意义探讨

采用多克隆ＲＫ１抗体和单克隆Ｋ（２７）抗体，应用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察了７４例女阴白斑在不同病变的表达方式。研究结果表明，Ｋ（２７）可作为角化或正在角化细胞的标志物。应用Ｋ（２７）单克隆抗体，外阴白斑ＣＫ异常均发生在疾病不同类型的细胞增殖状态，提示角蛋白表达的改变可能与引起角朊细胞的高度增生因素有关。用Ｋ（２７）单克隆抗体，有助于增生病变与萎缩病变及良性与恶性病变的区别。

原发性肝癌内HBV DNA及HBAg的分布与意义

采用原位分子杂交和免疫组化及双标记技术,对44例原发性肝细胞肝癌及痛旁肝组织进行了乙型肝炎病毒DNA及其表达产物x抗原、核心抗原检测。癌组织中HBV DNA、HBxAg、HBcAg检出率分别为70.5％、65.9％及20.5％;癌旁肝组织依次为76.5％、76.5％及29.4％。HBV DNA及HBxAg主要位于肝细胞浆中,在HBcAg阳性组中的检出率高于HBcAg阴性组(P<0.05)。9例枯否氏细胞浆有HBxAg检出。HBVDNA在癌及癌旁组织中的检出有“伴随现象”。HBcAg多位于核内,部分为核浆型,且总是伴随HBV DNA和(或)HBxAe检出,无一例单独检出HBcAg者。此外,HBxAg可由肝内游离型HBV DNA所表达;肝内核型或浆型HBcAg均可反映HBV的复制。因此,肝内HBxAg的检测可作为HBV感染的灵敏指标之一,进一步证实HBV感染与HCC的发生有密切关系。