硝唑尼特的多重作用机制及应用研究进展

硝唑尼特(NTZ)是上世纪七十年代开发的一个抗寄生虫药物,已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗隐孢子虫或蓝氏贾第鞭毛虫引起的腹泻,被中国农业农村部批准用于治疗犬绦虫病。近年来的研究发现,硝唑尼特不仅能抗多种寄生虫,而且对多种危害严重的人或动物病原菌、病毒也具有很好的活性,但是研究发现硝唑尼特对各种病原体的活性作用机制却各不相同。本文主要综述了硝唑尼特对多种病原体的作用及其可能的机制,从而为硝唑尼特的利用和相关研究提供资料。

猪和鸡可食性组织中氨苄青霉素残留的微生物学检测法

为监控氨苄青霉素 ( Ampicillin,AMP)在动物性食品中的残留 ,建立了 AMP在猪肌肉、肝脏、肾脏和鸡肌肉组织中残留的微生物学检测法。组织样品用 1%磷酸盐缓冲液 ( p H6 .0 ) 5倍稀释并提取。以藤黄微球菌 ( Micrococcus lutea)CMCC( B) 2 80 0 1为工作菌 ,用微生物学杯碟法测定提取液中 AMP的浓度 ,并选择各类代表抗菌药进行特异性试验。结果显示 :AMP的最低定量限在缓冲液和组织中分别为 0 .0 0 5 mg/ L和 0 .0 2 5μg/ g,标准曲线和组织标准曲线线性范围分别在 0 .0 0 5~ 0 .0 4 m g/ L 和 0 .0 2 5~ 0 .1μg/ g之间。组织中 AMP的回收率多在 90 %以上 ,日内和日间变异系数分别小于 5 %和 15 %。在 MRL( 0 .0 5 μg/ g)浓度时 ,AMP与阿莫西林和青霉素分别有 80 .4 3%和 86 .4 3%的交叉反应。表明该方法快速、灵敏、简便 ,各参数均符合兽药残留检测要求 ,与其他抗菌药无交叉反应 ,适用于测定AMP在猪和鸡组织中的残留。

大鼠粪便中抗球虫新药沙咪珠利的HPLC检测方法研究

为研究抗球虫新化合物沙咪珠利在大鼠粪便中的排泄情况和物料平衡规律，建立检测大鼠粪便中沙咪珠利含量的高效液相色谱法，大鼠粪便经乙酸乙酯提取，过MAX固相净化小柱后上样，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，经C18色谱柱分离，251 nm波长紫外检测器检测。结果表明：该方法在20-400μg/g添加浓度范围内检测粪便中的沙咪珠利具有很好的线性关系（R2=0.995）；平均回收率为74%-117%，日内变异系数为3.2%-11.5%，日间变异系数为6.6%-16.3%，具有特异性好、灵敏度高、准确性和重现性良好、操作简单等优点，能初步满足粪便中沙咪珠利的检测需求。大鼠一次性经口灌服沙咪珠利后，约有60%通过粪便以原型形式排泄。

脱二氧喹烯酮的制备及其细胞毒性研究

脱二氧喹烯酮为喹烯酮主要代谢物之一,了解脱二氧喹烯酮的安全性对喹烯酮的安全性评价具有重要意义。为评价脱二氧喹烯酮的药效及安全性,本研究探索体外合成制备脱二氧喹烯酮,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究脱二氧喹烯酮对Vero、HepG2、Chang Liver和L-02等多种细胞生长的抑制作用,利用单细胞电泳研究其对Chang Liver和L-02细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对Chang Liver和L-02细胞周期的改变。结果显示,体外成功合成制备出脱二氧喹烯酮,而脱二氧喹烯酮对各种细胞都具有较弱的生长抑制作用,其剂量检测范围内细胞抑制率均不到50%,但在较高剂量下脱二氧喹烯酮能导致细胞DNA损伤,主要表现为尾长和尾部DNA含量显著升高;并且脱二氧喹烯酮还改变Chang Liver细胞周期,表现为S期阻滞。说明脱二氧喹烯酮具有一定的细胞毒性。

硝唑尼特抗免疫抑制小鼠隐孢子虫活性试验

研究硝唑尼特抗隐孢子虫的活性,采用地塞米松抑制昆明鼠免疫功能,经口接种感染微小隐孢子虫孢子化卵囊,成功制备出微小隐孢子虫感染的动物模型。将感染微小隐孢子虫的小鼠随机分为感染对照组以及高、中、低剂量3个药物剂量组,连续经口灌服硝唑尼特治疗1周,观察每只小鼠每天排出微小隐孢子虫卵囊的数量,以感染抑制率来评价硝唑尼特抗微小隐孢子虫的活性。结果表明,200 mg/(kg.d)剂量组能显著减少小鼠排出隐孢子虫卵囊的数量,对治疗微小隐孢子虫感染具有较好的疗效。

动物性食品兽药残留的快速筛选方法

在人类消费的可食性动物组织或产品中出现兽药和其代谢物残留可能将对消费者造成不同程度的毒害,这迫切要求开发具有快速、简易、敏感性好等特征的检测方法。本文对动物性食品中兽药和其代谢物残留的微生物学、免疫学、生物感应器、色谱学等快速筛选方法的检测原理、现状及研究进展作一综述。

地克珠利在雏鸡体内的药动学研究

目的应用高效液相色谱测定单次给药后雏鸡体内地克珠利的血药浓度，研究其药动学规律。方法44羽雏鸡按10mg／kg．BW经口单次灌服地克珠利预混剂，采用高效液相色谱系统的流动相为乙腈：0．1％三氟乙酸：水，流速1．0mL／min，分流比57：20：23，固定相为TC-C18柱，检测波长280nm，测定地克珠利血浆浓度，计算其药动学参数。结果在0．3125～20μg／mL范围内，地克珠利血药浓度呈线性关系，最低检测浓度为0．16μg／mL，回收率在79．75％以上，日内RSD小于5．68％。单剂量给药后地克珠利的主要药动学参数为：血药浓度峰值（Cmax）32．97μg／mL，达峰时间（Tpeak）1．64h，消除半衰期（T1／2β）24．29h，药时曲线下面积（AUC）349．47（mg／L）·h，血浆清除率（CL）0．03mg／kg·h。结论地克珠利在雏鸡体内代谢符合一级吸收的二室模型，药物吸收比较快和消除缓慢。

抗寄生虫新药硝唑尼特研究进展

一、药物概况 硝唑尼特（Nitazoxanide，NTZ）为硝基噻唑酰胺化合物，勒马克实验室（Romark Laboratories）首创，首次报道于1976年，化学名是2-乙酰氧基-N-（5-硝基-2-噻唑）

兽药的立体污染及防治

兽药经动物代谢后以原型或代谢产物进入环境,对环境潜在的影响已经成为国内外关注的热点。本文论述了兽药污染的来源、环境影响、环境安全评估方法以及我国兽药污染防治应加快研究的方向。

微量环丙沙星对人源大肠杆菌和粪肠球菌体外敏感性的影响

建立人离体肠道模拟模型,研究微量环丙沙星对人源肠道大肠杆菌和粪肠球菌敏感性的影响,进而用聚合酶链反应法扩增耐药菌的gyrA基因的耐药决定区,并分析其耐药机制。结果显示,大肠杆菌连续培养后存活菌株对微量环丙沙星耐药,此耐药菌对其他抗菌药敏感;粪肠球菌经连续培养,对环丙沙星和其他抗菌药物仍敏感;耐药大肠杆菌的gyrA基因发生突变,248位碱基由C变为T,259位由G变为T,相应地,该基因编码的蛋白质在83位的丝氨酸和87位的天冬氨酸分别改变为亮氨酸和酪氨酸。研究表明,微量环丙沙星对人肠道菌群具有不同的选择作用,能诱导大肠杆菌产生耐药性。这为动物源食品中环丙沙星残留的安全性评价提供了试验依据。

隐孢子虫病及其有效药物筛选

本文从病原、临床表现、病理学特点、诊断方法等方面介绍隐孢子虫病,并论述目前抗隐孢子虫的药物筛选模型与临床有效药物的发现。

采用高效液相色谱-串联质谱法检测鲫鱼组织3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留量

将待测鱼肉和鱼皮匀浆样品经碱水解、液-液萃取后,采用HPLC-TMS方法对其中的3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)残留量进行了检测。结果,此方法的最低检测限为1.16μg/kg,市售鲫鱼样品中MQCA的含量低于检测限。结果表明,HPLC-TMC灵敏,易操作,能满足鱼组织内MQCA残留量检测的要求。

高效液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中的喹烯酮标示残留物

采用液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定鸡组织(肌肉、肝、肾)中喹烯酮标示残留物3-甲基喹啉-2-羧酸的含量。组织匀浆样品经碱水解、液液萃取,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM),以喹啉-2-羧酸为内标进行定量。检出限为5μg/kg。

蛹虫草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究蛹虫草多糖对巨噬细胞免疫功能的影响。方法将1000、500、250、125、62.5μg/mL5种浓度的CMP40和CMP50分别加入到小鼠腹腔巨噬细胞的培养体系中进行研究,培养24、48h后收集细胞上清液,测定各组细胞NO、NOS、iNOS、IL-1和TNF-α的含量。结果CMP40在1000μg/mL、CMP50在250μg/mL组的NO、NOS和iNOS的含量显著高于对照组（P〈0.05）;CMP40在62.5~125μg/mL和500~1000μg/mL组、CMP50在1000μg/mL组的IL-1浓度显著低于对照组（P〈0.05）;CMP40和CMP50在500μg/mL组的TNF-α浓度比对照组分别提高3.31%和2.84%。结论CMP40和CMP50在合适的浓度能促进小鼠腹腔巨噬细胞产生NO、NOS和iNOS以及TNF-α,从而增强巨噬细胞的功能。

蛹虫草多糖对注射环磷酰胺小鼠抗氧化功能的影响

试验旨在阐明蛹虫草多糖（CMP）对小鼠抗氧化活性的影响。选取90只雄性 BALB/c 小鼠,体重18-20 g,随机分为6组,3个 CMP 组（低、中、高 CMP 组）,模型对照组（CY 组）、阳性对照组（PC 组）及空白对照组（BC组）各1个。CMP 组和 CY 组分别腹腔注射80 mg/kg 环磷酰胺,连续3 d,然后3个 CMP 组分别灌胃给予17.5、35.0、70.0 mg/kg 体重的 CMP,BC 组和 CY 组给予生理盐水,PC 组灌胃给予70 mg/kg 体重的 CMP,持续18 d。于最后一次给药24 h 后,采集小鼠内脏,测定心脏、肝脏及肾脏匀浆液中 T-AOC、MAD、CAT、SOD 和 GSH-Px 水平。结果显示,与 CY 组相比,3个 CMP 处理组小鼠内脏匀浆液中的 SOD 和 T-AOC 活性均极显著增加（P 〈0.01）,MDA 水平极显著降低（P 〈0.01）；低剂量 CMP 组心脏 CAT 无显著变化（P 〉0.05）,中、高剂量 CMP 组心脏 CAT 水平分别显著（P 〈0.05）、极显著（P 〈0.01）提高；除低剂量 CMP 组肝脏 GSH-Px 活性显著增加（P 〈0.05）外,其余 CMP 组内脏 GSH-Px 活性均极显著增加（P 〈0.01）。本试验中 CMP 可以有效提高小鼠心脏、肝脏及肾脏的抗氧化活性,这为抗氧化新药的研发提供了借鉴。

蛹虫草多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

为研究蛹虫草多糖(CMP)对鸡新城疫苗免疫效果的影响,将200只14日龄雏鸡随机分为5组,除空白对照组(BC)外,均接种新城疫疫苗,28日龄第二次接种。第一次接种疫苗的同时,三个CMP40组鸡分别肌肉注射低、中、高浓度的多糖,免疫对照组(VC)和BC组注射等量生理盐水,每天1次,连续3 d。在第1次接种后的第7(D7)、14(D14)、21(D21)、28(D28)、35(D35)和42(D42)天采血,分别用MTT法和血凝抑制(HI)试验测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体效价变化,在D14、D21和D28用ELISA测定血清IL-4和IFN-γ浓度。结果显示,CMP40L组在所有时间点的A570值和血清抗体效价显著高于VC组和BC组(P<0.05);低剂量的CMP40发挥佐剂性能的效果最好,同时可促进机体对IFN-γ和IL-4的分泌。

蛹虫草多糖对鸡脾脏淋巴细胞的影响

试验将7种浓度蛹虫草多糖（CMP）单独或与刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）同时加入鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖（A570值）的变化;将5种浓度的CMP 40％乙醇提取物（CMP40）、CMP 50％乙醇提取物（CMP50）分别与ConA加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定白细胞介素-2（IL-2）和γ-干扰素（IFN-γ的含量.结果显示,CMP在31.25～2 000 μg/mL时,CMP40＋ConA组的A570值显著高于ConA对照组;CMP在31.25～500μg,/mL时,CMP50＋ConA组A570值显著高于ConA对照组,CMP40＋LPS组、CMP50＋LPS组的A570值显著高于LPS对照组;CMP40在125～1 000μg/mL时、CMP50在500 μg/mL时,各多糖组的A570值显著高于细胞对照组;CMP40和CMP50在250～1 000 μg/mL时,各多糖组的IL-2和IFN-γ浓度显著高于对照组.结果表明,CMP40和CMP50在合适的剂量能单独或协同ConA、LPS刺激鸡的T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫能力.

甲氧苄啶、二甲氧苄啶与磺胺氯吡嗪钠联用的抗球虫效果比较

选用220只10日龄海兰褐公雏口服柔嫩艾美耳孢子化卵囊制造人工感染球虫病模型,对不同浓度的磺胺氯吡嗪钠(Esb3Na)以5∶1比例与甲氧苄啶(TMP)、二甲氧苄啶(DVD)联合应用的抗球虫增效作用进行比较。结果表明:高剂量Esb3Na(0.06%)与TMP或DVD联用均呈高效,抗球虫指数(ACI)分别为180.32和181.30,二者之间无明显差异。中、低剂量Esb3Na(0.03%、0.015%)与TMP联用的ACI分别为181.56和129.38,抗球虫效果强于与DVD联用,对应的ACI分别为169.68和106.19。推荐使用0.03%的Esb3Na与TMP以5∶1联用防治鸡球虫病感染。

上海市猪源大肠杆菌耐药性监测

目的了解上海市猪场大肠杆菌耐药情况及耐药规律。方法按照常规方法分离培养细菌,应用HX-21细菌鉴定/药敏分析仪以及API20E鉴定系统进行了鉴定细菌,采用HX-21细菌鉴定/药敏分析仪测定了大肠杆菌对24种抗菌药耐药情况。结论本地区猪源大肠杆菌耐药性严重,其中对阿米卡星、多黏菌素敏感率高,对氨苄西林、卡那霉素、四环素、甲氧苄啶耐药性较高,耐药谱复杂,多重耐药性、交叉耐药性严重。

一种广谱微生物消毒剂过硫酸氢钾复合粉的稳定性研究

为确定过硫酸氢钾复合粉的有效期和包装运输条件,以电位滴定法和碘量法测定过硫酸氢钾复合粉中氯化钠和有效氯的含量,并分别用影响因素试验、加速试验和室温长期留样试验对过硫酸氢钾复合粉进行稳定性研究。影响因素试验结果表明过硫酸氢钾复合粉对湿度较敏感,6个月加速试验的结果显示双层铝箔纸可以作为合适的包装材料,室温留样1年后,样品各项检测指标均符合质量标准的规定。稳定性试验结果表明本品在密闭、遮光的贮存条件下性质稳定,室温下贮存期可暂定为2年。