葛根芩连汤干预肥胖2型糖尿病前期肝脏脂肪异位沉积的脂质代谢研究

目的:考察葛根芩连汤(GQD)灌胃干预肥胖2型糖尿病前期肝脏脂肪异位沉积的脂质代谢机制。方法:采用SD大鼠建立肥胖2型糖尿病前期模型。造模成功后,将大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、GQD高剂量组、GQD中剂量组、GQD低剂量组,模型组和正常组每天灌胃生理盐水、罗格列酮组(5 mg/kg),GQD高、中、低剂量组以生药浓度为14.85、4.85、1.65 g/kg灌胃,持续给药16周后,眼眶取血,以检测血糖指标和生化指标,并观察肝组织脂肪聚集情况。采用UPLC-Q-TOF/MS技术对样本进行检测,对各组结果进行主成分分析法和正交偏最小二乘判别分析,筛选并鉴定差异代谢物,对已鉴定到的生物标志物进行通路分析。结果:高脂饲料饲养16周后,与正常组比较,模型组体重、空腹血糖、胰岛素抵抗(IR)指数均显著升高(P<0.05);与模型组比较,GQD高、中、低剂量组均能降低空腹血糖和IR指数。油红O染色的肝脏病理切片结果显示,模型组存在大量脂质,给药组大鼠肝脏组织有所改善;葛根芩连汤干预模型大鼠的脂类生物标记物相关通路主要涉及调节甘油磷脂代谢、鞘脂代谢、初级胆汁酸生物合成代谢等通路。结论:GQD对肥胖2型糖尿病前期的肝脏脂肪异位沉积具有显著改善作用。

葛根芩连汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏能量代谢及游离脂肪酸的影响

目的探讨葛根芩连汤对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏能量代谢及游离脂肪酸(FFA)的影响。方法采用60%脂肪的高脂饲料连续喂养13周复制IR大鼠模型。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、罗格列酮组(5 mg·kg^(-1))以及葛根芩连汤低、中、高剂量组(1.65、4.96、14.86 g·kg^(-1)),每组6只。灌胃给药,每天1次,连续给药干预16周。测定IR相关指标:血清空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)值,计算IR指数;建立HPLC法测定大鼠肝组织中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量;采用ELISA法测定大鼠肝组织中的FFA含量;采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量;采用HE染色法观察肝脏组织病理变化。结果(1)模型复制结束后,与正常组比较,模型组大鼠的FINS、FPG水平及IR指数显著升高(P<0.01);肝脏组织中ATP、ADP、AMP、FFA含量均无明显变化(P>0.05)。(2)给药干预结束后,与正常组比较,模型组大鼠的FINS、FPG水平及IR指数显著升高(P<0.01),肝脏组织中ATP、ADP、AMP含量均显著下降(P<0.01),FFA含量显著升高(P<0.01),血清TC、TG水平均明显升高(P<0.05);肝细胞排列紊乱,出现脂肪变性,并存在大量脂滴。与模型组比较,各给药组大鼠的FINS水平及IR指数均明显降低(P<0.05,P<0.01),罗格列酮组大鼠的FPG水平明显降低(P<0.05);各给药组大鼠肝脏组织中ADP、AMP含量均明显升高(P<0.05、P<0.01),葛根芩连汤低、中、高剂量组大鼠肝脏组织中ATP含量明显升高(P<0.05、P<0.01);罗格列酮组及葛根芩连汤低、高剂量组大鼠肝脏组织中FFA含量均显著降低(P<0.01);葛根芩连汤低、高剂量组大鼠血清TC水平明显降低(P<0.05,P<0.01),罗格列酮组及葛根芩连汤低剂量组大鼠血清TG水平明显降低(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠的肝细胞脂肪变性有不同程度减轻,且脂滴减少,病理损伤得到改善。结论葛根芩连汤可能通过调节能量代谢并降低FFA水平,从而改善肝脏脂质代谢紊乱,恢复脂质与能量平衡,从而起到改善IR的作用。

基于亲和超滤-液质联用结合相关性分析方法筛选青钱柳提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂

目的:为快速筛选青钱柳提取物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂,采用亲和超滤-液质联用技术结合相关性分析探究其有效成分与酶抑制活性间的关系。方法:运用大孔吸附树脂,建立青钱柳不同浓度乙醇洗脱液中相同化学成分量变化矩阵(X矩阵);分析各乙醇洗脱部位体外α-葡萄糖苷酶抑制作用,构建效应矩阵(Y矩阵);通过偏最小二乘回归法(Partialleastsquaresregression,PLS)预测潜在的活性成分与亲和超滤法(Affinity ultrafiltration,AUF)所筛选的化合物进行比对并通过分子对接进行验证。结果:青钱柳50%乙醇总提取物IC50值为14.8μg/mL,经大孔树脂吸附后的10%~80%浓度乙醇洗脱液IC50为5.4~204.1μg/mL。通过AUF法与相关性分析在正、负离子模式下共鉴定出10种青钱柳潜在的活性成分,其中鉴定出8种三萜类化合物、2种黄酮类化合物。进一步的分子对接结果表明,上述10种活性成分与α-葡萄糖苷酶对接的结合能小于-7.0 kcal·mol^(-1),其中熊果酸内酯的结合能最低(-10.0 kcal·mol^(-1))。结论:AUF与相关性分析相结合能快速筛选出青钱柳提取物中潜在的α-葡萄苷酶抑制剂,本研究结果可为进一步明确青钱柳活性成分奠定基础,为其活性成分质量控制研究、功能性食品开发的深入研究提供依据。

葛根芩连汤对高脂饮食喂养的胰岛素抵抗大鼠心脏能量代谢的影响

目的高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠心脏中3种腺苷酸含量,并探究葛根芩连汤(GQD)对胰岛素抵抗模型(IR)大鼠的心脏能量代谢及游离脂肪酸(FFA)影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组和IR造模组。造模组采用60%的高脂饲料连续喂养13周,复制IR模型。IR模型复制成功后,分为模型对照组,罗格列酮组(阳性药组,5 mg·kg^(-1))以及GQD低、中、高剂量组(1.65,4.96,14.86 g·kg^(-1)),每天1次,连续灌胃给药16周,同时继续以高脂饲料喂养。采用HPLC法检测GQD干预后大鼠心脏中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)含量,ELISA法检测心脏组织FFA水平。结果(1)IR大鼠经GQD干预16周后,3个剂量的GQD均可显著降低IR指数(P<0.01);(2)3种腺苷酸含量测定方法学考察各项指标均符合规定;(3)与正常对照组比较,模型组的ATP、ADP、AMP均显著降低,FFA水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,阳性药组可以显著升高ATP含量(P<0.01),GQD低、中剂量组的ATP、ADP含量显著升高(P<0.05),且FFA含量降低(P<0.05),GQD高剂量组ATP含量显著升高并FFA含量降低(P<0.05)。结论GQD可能通过调节IR大鼠的心脏能量代谢并降低其FFA含量,从而减轻脂质代谢紊乱,恢复脂质和能量平衡,改善IR。

草酸二甲酯加氢合成乙二醇反应的研究

在微型管式反应器中,采用Cu/SiO2催化剂,在温度190～210℃、压力1～3MPa、草酸二甲酯(DMO)与氢气的摩尔比(氢酯比)40～120、DMO空速6.0～25.0mmol/(g.h)的条件下,对DMO加氢制乙二醇的反应进行了研究。实验结果表明,高温、高压、高氢酯比和低DMO空速都能提高DMO的转化率和乙二醇的收率,但同时也增加了副产物的选择性。较适合的反应条件为:压力2MPa,温度205～210℃,氢酯比80～100,DMO空速10.0mmol/(g.h)。动力学研究表明,DMO加氢反应符合Langmuir-Hinshelwood吸附反应动力学模型,表面反应为速率控制步骤,氢气不解离吸附,由此得到了相应的动力学方程及参数。统计检验结果表明,该模型对DMO加氢反应高度适定。

复方葛根芩连汤多效应成分分类整合药代动力学研究

目的:以葛根芩连汤为模型药物,探讨中药复方多效应成分分类整合药代动力学研究方法。方法:SD大鼠灌胃给予20 mL/kg葛根芩连汤,用HPLC-ESI-MS/MS检测11个有效成分的血药浓度。并将这些成分归为黄酮类和生物碱类两类化合物,自定义权重系数,计算葛根芩连汤总黄酮类与总生物碱类化合物在大鼠体内综合血药浓度,建立分类整合药动学研究模型,并用统计矩法得到葛根芩连汤中总黄酮类、总生物碱类化合物在大鼠体内整合药代动力学参数。结果:分类整合的总黄酮类、总生物碱类血浆浓度药时曲线都符合灌胃给药的药物处置规律,整合药动学参数t1/2、AUC0-∝分别为6.08 h、30.00 mg.h.L-1和28.86 h、1.07 mg.h.L-1。结论:分类整合药动学研究模型符合经典药动学模型特征,所获参数能够最大程度上表征中药复方同类成分整体的体内处置规律,为建立中药复方药代动力学研究提供了一种研究方法。

UHPLC-Q-TOF/MS技术分析葛根醇提液中化学成分

目的采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)法对葛根醇提液中各成分进行分析和鉴定。方法色谱分离采用Poroshell 120 EC-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1);采用双电喷雾离子源(Dual ESI),在正负离子模式下采集数据;一级质谱提供精确的分子量信息,误差限制在5×10-6以内,得到该分子量最为精确的元素组成;二级质谱提供化合物的裂解碎片信息,将该化合物的特征碎片离子与相关数据库和相关文献中报道的相关化合物信息进行比对,推测其可能的化学结构。结果在葛根醇提液中发现71个成分,主要为异黄酮类成分,另包含有机酸和甾醇类等成分,其中8个化合物尚未有相关文献报道,结构需进一步确认。结论该研究丰富了葛根中成分化学结构信息,为葛根药效物质研究奠定了基础。

HPLC法同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量

目的建立运用HPLC法同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸含量的方法。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB—C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈（A）-0．1％甲酸（B），梯度洗脱0～30min，5％→20％A；30～40rain，20％→25％A；40～60rain，25％→29％A；60～65min，29％→32％A；流速：1mL·min^-1；检测波长：330nm；柱温：30℃；进样量：20μL。结果绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸分别在0．0280～0．448μg（r=0．9998）、0．0164—0．262μg（r=0．9999）、0．113—1．81μg（r=0．9999）范围内呈良好的线性关系；平均回收率（n=6）分别为103．4％（RSD=2．77％）、98.3％（RSD=2．58％）、95.2％（RSD=2．49％）。结论该法简便快速，重复性好，准确可靠，可用于同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量．

RP-HPLC法测定白附片中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱

目的:测定白附片中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱3种脂溶性生物碱含量。方法:用反相离子对HPLC法,使用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-5 mmol·L-1NaH2PO4溶液,磷酸调至pH4.5(52∶50),内含7 mmol·L-1十二烷基磺酸钠(SDS);检测波长:235 nm;流速:1.0 mL·min-1;结果:以上3种生物碱可以完全分离,准确测定。结论:该方法准确度高,可应用于白附片中生物碱的含量测定。

干姜对大鼠尿液内源性代谢物的影响

目的通过基于液质联用的代谢组学方法,探讨干姜对大鼠尿液内源性物质的影响。方法 20只SD大鼠分为正常对照组和干姜组,干姜组ig给予干姜水提物0.72g·kg-1,每天1次,连续30d,分别于第0,1,8,15,22,29天收集大鼠尿样。经液相色谱分离,三重四极杆质谱对尿液中内源性代谢物进行全扫描分析,采用主成分分析(PCA)法降维,正交信号校正和偏最小二乘法判别分析法(OSC-PLS-DA)分析采集的质荷比和丰度值数据,测定大鼠体内内源性物质含量。结果质荷比和丰度值数据均值主成分分析结果显示,第8天干姜对大鼠尿液中物质代谢影响最大。对第8天数据进行OSC-PLS-DA分析,与正常对照组相比,干姜组大鼠尿液中磷脂酸和神经酰胺-1-磷酸等物质含量显著下降,孕烯醇酮硫酸和鞘磷脂物质含量明显上升。结论干姜对正常大鼠机体代谢有明显的影响,神经酰胺-1-磷酸等10种物质被判定为可能生物标志物。

麻杏石甘汤对大肠杆菌内毒素致热大鼠作用的血浆代谢组学研究

目的:研究麻杏石甘汤对内毒素(LPS)致热模型大鼠血浆中内源性物质的影响。方法:25只大鼠随即分为空白组、致热模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组5只。模型组及高、中、低剂量组动物分别以20μg.kg-1体重的剂量尾静脉注射10μg.mL-1内毒素溶液,空白组同法给予生理盐水(NS)。造模后6h内测量大鼠体温,6 h后,心脏取血。血浆预处理后,HPLC/MS/MS检测血浆中物质,PCA,OSC-PLS分析数据,分析潜在生物标记物。结果:各剂量组的最大体温上升高度ΔTmax与模型组比较差异均有显著性(P<0.05);在前两个主成分得分散点图中,中剂量、高剂量麻杏石甘汤对LPS致热大鼠血浆中内源性物质的影响较低剂量的影响要大,苹果酸,L-phenylalanine等物质在各组实验动物体内发生了相应的变化。结论:实验剂量麻杏石甘汤明显影响LPS致热大鼠血浆中内源性物质状态,苹果酸,L-phen-ylalanine可能是麻杏石甘汤对LPS致热大鼠血浆中内源性物质的影响的生物标记物。

微波密闭消解-乙醇增敏-串联质谱(ICP-MS/MS)法测定生物样品中的硒

为减少生物样品在消解过程中Se的挥发损失,增加测定灵敏度,提高精密度,消除质谱法测定过程中的干扰,保证测定准确度,采用微波密闭消解-乙醇增敏-串联质谱(ICP-MS/MS)法测定生物样品中的硒。生物样品经微波密闭消解后,在MS/MS模式下,在线引入含有7%乙醇的Rh内标溶液,用乙醇增敏,提高仪器信号灵敏度,通过Se^(+)与O_(2)反应形成SeO^(+),实现质量转移消除了Se的质谱干扰。对同位素的选择、干扰因素分析和消除、乙醇的增敏效果、仪器条件等进行了讨论。结果表明,方法检出限为0.004μg/g,以国家一级标准物质进行精密度和准确度实验,相对标准偏差为2.5%~6.6%,测定平均值和标准物质认定值的ΔLogc在±0.05以内,相对误差RE在±10%以内,测定值与标准值相吻合。方法在富硒区域调查、富硒农产品及食品检测等工作中具有较好应用前景。

加强急诊患者静脉输液安全护理管理的思考

静脉输液是临床上使用频率最高的给药途径之一,也是用药的重要途径。随着我国医疗改革的深化、人们对健康的认识逐步提高和人口老龄化进程加剧,急诊静脉输液患者人数逐年增多,特别是近年来,由于生活节奏加快和工作压力加大,不同年龄病人呈上升趋势。因此,加强急诊患者输液安全显得尤为重要。笔者认为,在健全急诊医疗环境的条件下,急诊护士必须严格执行操作规程和查对制度,熟练掌握护理对策,以确保输液安全。

阳离子树脂交换分离-ICP-MS法测定枸杞和藜麦中的痕量碘

样品用艾氏卡熔剂分解,水提取,用强酸性阳离子交换树脂静态吸附分离除去大量的Na^+、Ca^(2+)等阳离子后,直接在ICP-MS上测定痕量碘。通过实验得到方法检出限(10 s)为:0.017μg/g,用国家一级生物标准物质进行验证实验,测定值与标准值相符,方法精密度(RSD,n=12)为:0.27%~2.31%,RE:0.35%~4.92%,样品加标回收率为:95.6%~103.9%。

双黄连注射剂中半抗原物质ELISA检测方法的研究

目的:研究双黄连注射剂中半抗原物质的ELISA检测方法。方法:将双黄连注射剂与正常动物血清体外孵育制备完全抗原,免疫动物获得针对双黄连中过敏性半抗原的特异性抗体,ELISA法检测其效价显示,血清稀释至1∶128时仍为阳性,按优化条件用间接竞争ELISA法测定血清特异性并绘制抑制曲线。结果:得到回归方程I=13.362lgC+50.503,相关系数r=0.9663,检测限为0.93μg/ml,半数抑制浓度IC50=0.92mg/ml。结论:本文建立的方法可以很好地用于双黄连注射剂中半抗原物质检测。

正交设计法优化黄连总生物碱的提取工艺

目的:考察黄连总生物碱的最佳提取工艺。方法:采用酸性染料比色法测定黄连中总生物碱的含量,通过正交设计方法,以总生物碱的得率为考察指标,优选总生物碱的提取工艺。结果:总生物碱最佳提取工艺为65%乙醇回流提取4次,每次1h,液料比为12∶1。结论:优选得到的工艺使生物碱的提取效率高,稳定性好。

LC/MS/MS测定大鼠尿液中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法学研究

目的:建立一种快速测定大鼠尿液中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的定量方法。方法:用三重四级杆串联质谱(MS/MS)作为HPLC的检测器,其中MS/MS使用了多反应检测(MRM)扫描方式。分别选择304.2→134.2和288.2→244.2离子对m/z作为MRM检测的离子对;流动相:甲醇-水(85∶15),内含5mol/L甲酸铵;色谱柱:Agilent Zorbax XDB-C18,以测定大鼠尿液中吴茱萸碱和吴茱萸次碱为例,对此方法进行了应用。结果:方法的线性范围为吴茱萸碱=5.615-1437.5ng/ml(r=0.999),检测限1.87ng/ml,吴茱萸次碱=10.26-1314.25ng/ml(r=0.998),检测限5.13ng/ml。结论:此法灵敏、准确,可用于含茱萸碱和吴茱萸次碱的药物代谢研究。

36例热射病病人的临床观察与护理

热射病是一种致命性急症，指因高温引起的人体体温调节功能失调，体内热量过度积蓄，从而引发神经器官受损。典型表现为高热及各种程度的意识障碍，如谵妄，癫痫和昏迷等[1]，具有发病急、病死率高、伤残率高的特点，是中暑最严重的类型。该病包括两种类型，非劳力型热射病（经典型热射病）多见于年老或者儿童及伴有慢性基础疾病者；劳力型热射病则以中青年为主要人群，多在高温和（或）高湿条件下大量运动时，由于体液和血钠的丢失过多，补液不足所发生。

素质教育引导下的大学生就业能力探索

大学生是知识型社会的中坚力量,如何树立大学生正确的世界观、人生观、价值观,提高大学生的就业能力是目前素质教育的题中应有之义。本文粗浅地论述了素质教育对于大学生的进步意义,同时提出了提升大学生就业能力的有效途径,以就教与方家。

在思想政治教育中融入德育的路径探析

本文针对当前高校德育工作面临的困境,提出了在思想政治教育中融入德育的有效路径。要坚定马克思主义理想信念;弘扬集体主义精神;开展多样化的思想政治教育形式,渗透德育导向;将“以人为本”植入德育,夯实思想政治教育基础。