单细胞测序揭示心脏移植物中树突状细胞和B细胞的抗原提呈特性

目的探讨心脏移植物中树突状细胞(DC)和B细胞的抗原提呈特性。方法将BALB/c小鼠的心脏移植到C57BL/6J小鼠腹腔内,术后5 d(急性排斥反应早期)提取并流式分选心脏移植物中的CD45+细胞,进行单细胞RNA测序。以心脏移植物中的DC和B细胞的亚群为主要对象,通过生物信息学分析和流式细胞术,研究其在心脏移植后变化趋势、抗原提呈能力及其与T细胞之间的胞间通讯情况。采用基因本体(GO)功能富集差异分析佐证细胞亚群特异性功能和细胞亚群注释可信度。结果生发中心样B细胞(GC-L B)是急性排斥反应期心脏移植物中增幅最大、比例高达87%的B细胞亚群,经典DC(cDC)2是心脏移植急性排斥期间唯一大量增多的DC亚群,占44%,是心脏移植后与T细胞的胞间通讯中占据最高通讯强度的DC亚群;单核样DC(moDC)与记忆性B细胞(MBC)是未心脏移植中T细胞输入信号的主要发出者,而在心脏移植后急性排斥反应期中,转变为cDC2与GC-L B;其中MBC与GC-L B分别是心脏移植前后的主要T细胞输入信号来源。结论在未移植心脏和移植心脏指向T细胞的胞间通讯中,与DC相比,B细胞均占据更高的通讯数量和权重,推测在心脏移植急性排斥反应早期,B细胞的抗原提呈活动比DC更加活跃,强度更大。

小鼠肾移植模型:3种创新术式

目的:小鼠肾移植模型手术难度大,成功率低,难以掌握,本研究拟改良并探索新型小鼠肾移植模型,为移植免疫基础研究提供借鉴。方法:分别建立小鼠腹部缝合法原位肾移植模型、腹部套管法原位肾移植模型和颈部套管法异位肾移植模型共57对供受体。供受体采用BALB/c小鼠或C57BL/6小鼠;供受体均选用8~12周龄、体重20~25 g的雄性无特定病原级小鼠。总结和比较3种模型的技术特点和手术时间、并发症、病理学检查等术后早期指标。结果:成功建立3种不同手术方式的小鼠肾移植模型。3组小鼠供肾热缺血时间比较差异无统计学意义(P=0.5104),腹部缝合组的供体手术总时间与腹部套管组和颈部套管组比较最短[(18.3±3.6)min vs(26.2±4.7)min和(22.8±2.5)min;均P<0.0001]。冷缺血时间比较3组差异有统计学意义(P<0.0001),腹部套管组、颈部套管组及腹部缝合组分别为(88.8±6.7)、(60.8±4.1)及(43.3±5.0)min。受体由于吻合方式不同,颈部套管用时最短[(17.6±2.7)min],腹部套管用时最长[(38.8±5.4)min]。受体的总手术时间比较差异有统计学意义(P<0.0001),腹部缝合组、颈部套管组及腹部套管组分别为(44.0±6.9)、(64.1±5.2)及(80.0±6.0)min。在并发症发生方面,32只腹部缝合组中6只发生术中出血,其中1只因为动脉内膜损伤出血,5只为血管开放后出血;6只小鼠发生输尿管并发症,包括输尿管膀胱吻合口狭窄、坏死以及肾盂积水;2只小鼠术后发生腹腔感染。腹部套管组未发生术中出血,但6只出现动脉轻度狭窄,5只静脉狭窄,4只动脉损伤,4只动脉血栓,2只输尿管并发症,没有小鼠在术后发生感染。在颈部套管组中,13只小鼠均未发生术中出血、动脉内膜损伤、动脉/静脉狭窄以及血栓,5只发生输尿管并发症,包括输尿管坏死和感染,是颈部套管组最主要的并发症。3组小鼠在移植后7 d肾功能保持稳定;苏木精-伊红和过碘酸希夫染色显示3种手术方式的移植物在急性排斥反应方面差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:3种术式均能成功建立小鼠肾移植模型,在近期移植物生存期和排斥反应方面未见明显差别。改良后的腹部缝合法以及腹部套管法在研究应用中各有优势,首创的小鼠颈部套管法异位肾移植模型的制备相对简单、小鼠创伤较小,可为异种移植、二次移植及局部淋巴引流探索等研究提供更多选择,但供肾摘取难度大,输尿管感染发生率高,远期存活还需更多模型验证。本研究为不同研究需求下选择小鼠肾移植模型的类型提供了重要借鉴意义。

尸体供肾结石对肾移植短期疗效的影响

目的:移植供肾短缺是终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)患者获得肾移植机会的最主要障碍,而目前打破这种障碍的策略主要为扩大供肾来源和充分利用可获得的肾脏。全球肾结石的发病率呈上升态势且影响了约10%的成年人,其中也包括移植肾供者。然而,目前关于利用患有肾结石的尸体器官供者肾进行移植的研究较少。本研究旨在探究尸体器官供者的结石供肾被用于移植的安全性及其对肾移植短期临床疗效的影响。方法:选取于2016年至2020年期间由中南大学湘雅二医院完成尸体器官捐献且年龄至少10岁的520名供者,以及在同一医院接受这些供者供肾移植且为单肾移植的945名成年受者。根据器官捐献前是否存在结石将供者分为无肾结石(D^(-))组和肾结石(D^(+))组;根据供者和供肾是否存在结石将受者分为供者/供肾无结石(D^(-)K^(-))组、供肾无结石/供者肾结石(D^(+)K^(-))组和供者结石/供肾结石(D^(+)K^(+))组。回顾性分析这些供者和受者的基本资料和临床资料。比较不同供者组之间的移植肾弃用情况;比较不同受者组之间术后1年移植肾和受者生存率、移植肾功能以及并发症的发生情况。结果:在520名供者中,9.6%(50名)的供者在器官捐献前患有肾结石。总共获取1040个肾脏,总的供肾弃用率为4.4%(46/1040),而D^(+)组的供肾弃用率约为7%。在D^(+)组供者中,12%的供者肾存在被弃用的现象,比例显著高于D^(-)组(5.1%,P<0.05)。受者的总体移植肾功能延迟恢复(delayed graft function,DGF)发生率为7.5%(71/945),而D^(-)K^(-)组、D^(+)K^(-)组及D^(+)K^(+)组之间的DGF发生率差异无统计学意义(7.5%vs 6.5%vs 8.2%,P>0.05)。在移植肾和受者1年生存率方面,8名受者发生移植肾失功,19名受者发生移植肾带功能死亡,D^(-)K^(-)组、D^(+)K^(-)组及D^(+)K^(+)组之间差异无统计学意义(P>0.05)。然而,与D^(-)K^(-)组相比,术后1年时D^(+)K^(+)组受者的血肌酐水平明显偏高[(139.2±62.46)μmol/L vs(117.19±51.22)μmol/L,P<1218 Short-term outcome of kidney transplantation from deceased donors with nephrolithiasis TAN Liang,et al©Journal of Central South University(Medical Science).All rights reserved.0.05],而估计肾小球滤过率明显偏低[(56.67±23.31)mL/(min·1.73 m^(−2))vs(66.86±21.90)mL/(min·1.73 m^(−2)),P<0.05]。0.4%(4/945)的受者在术后1年内发生移植肾或移植输尿管结石,接受D^(+)组供肾移植受者的泌尿系结石的发生率明显高于接受D^(-)组供肾移植的受者(2.2%vs 0.2%,P<0.05);在术后1年时,接受D^(+)组供肾移植的受者和接受D^(-)组供肾移植的受者之间尿路感染和输尿管狭窄的发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:经过严格评估,来自患有肾结石尸体器官供者的肾脏可被安全用于肾移植,并且可获得较为理想的短期效果。然而,供者患有肾结石会增加供肾被弃用的风险,在降低移植肾功能的同时也增加了受者发生泌尿系结石的风险。此外,对于患有肾结石尸体器官供者供肾移植的长期疗效需要长期随访研究来进一步验证。

中美人体器官移植医师培训比较

2016年中国国家卫生计生委为加强人体器官移植医师队伍建设,规范人体器官移植医师培训和管理工作,持续改进和提高人体器官移植技术水平和医疗质量,保障医疗安全,依据《执业医师法》及《人体器官移植条例》制订了《人体器官移植医师培训与认定管理办法(试行)》和《人体器官移植医师培训基地基本要求》[1]。通过这两个文件规定了移植医师培训基地的资质要求及移植医师培训内容及认定标准。

异种间产生自体功能性胰岛

胰腺移植是一种成熟的治疗糖尿病的方法。我们之前的实验结果显示,大鼠胰腺可以从小鼠体内通过大鼠多能干细胞与小鼠囊胚的异种重构获得。虽然通过这种方法获得的是大鼠来源且有功能的胰腺,但是这些胰腺都是小鼠胰腺大小,在这些胰腺中提取不出足够的胰岛用于治疗大鼠模型的糖尿病。本篇文章中,我们反向设计了实验,把小鼠多能干细胞注射到Pdx-1缺乏的大鼠囊胚内,获得了大鼠胰腺大小的且来源于小鼠多能干细胞的胰腺。随后,我们从这些胰腺中提取胰岛并移植到了链唑霉素诱导的糖尿病小鼠中。

湖南省公民逝世后器官捐献与移植工作介绍

在我国政府和中国红十字会的推动下,我国人体器官捐献制度不断完善优化,人体器官捐献观念逐渐被社会广泛认可和接受。湖南省卫生健康委员会和湖南省红十字会一道,积极完善相关工作政策,提升管理能力,全省器官移植事业发展初见成效。

成人供肾双肾移植的临床疗效

目的探讨成人供肾双肾移植(DKT)的临床疗效。方法回顾性分析2016年9月至2020年12月中南大学湘雅二医院收治的13例成人供肾DKT手术供受者的病例资料。13例供者年龄(53.5±12.4)岁, 体质量指数(BMI)(24.3±2.8)kg/m^(2), 3例有糖尿病史, 8例有高血压病史。13例中, 11例符合美国器官共享联合网络(UNOS)双肾移植标准, 6例符合Remuzzi评分双肾移植标准, 入院时和获取供肾前血清肌酐(SCr)分别为(132.9±54.1)μmol/L和(228.7±112.4)μmol/L。13例受者年龄(39.3±8.9)岁, BMI(20.2±2.4)kg/m^(2)。所有受者均接受ABO血型相合的肾移植, 2例双肾分别放置于双侧髂窝。12例移植肾开放血运后颜色鲜红、充盈迅速, 输尿管立即可见尿液流出, 1例双肾颜色偏暗, 血管搏动弱。记录受者围手术期移植肾功能恢复时间(从手术当天至SCr自然降至正常范围的时间)、移植肾功能延迟恢复(DGF)、急性排斥(AR)、输尿管并发症、手术切口并发症情况, 以及受者末次随访时的SCr、估算肾小球滤过率(eGFR)、尿蛋白和移植物结局。采用单因素logistic回归分析评估影响受者结局的危险因素。结果本组13例受者中, 10例出院时SCr降至正常范围内, 移植肾功能恢复时间(13.8±13.0)d;3例出院时SCr分别为300.0、149.0、152.5 μmol/L。4例发生DGF, 4例发生AR;并发症分别为输尿管狭窄1例, 尿瘘1例, 术后切口裂开1例, 分别予抗排斥、置入双J管、持续导尿维持膀胱空虚治疗和切口二次缝合, 出院前均治愈。术后中位随访28(15.5, 31.0)个月, 10例移植物功能良好, 2例出现移植肾功能不全, 1例移植肾失功。除移植肾失功患者外, 末次随访时SCr(144.2±101.3)μmol/L, eGFR(52.9±21.2)ml/min;4例末次随访尿蛋白阳性。单因素分析结果显示, 供者的年龄、BMI、糖尿病史、高血压病史、入院时SCr均与DGF和移植肾功能损伤无明显相关性(P>0.05)。结论成人供肾DKT的近期和中期效果良好。

外周血相关指标与肾移植术后BK病毒感染患者预后的相关性

目的探讨肾移植术后BK病毒感染患者预后与外周血相关指标的相关性。方法回顾性分析2018年8月至2021年8月中南大学湘雅二医院收治的131例肾移植术后首次感染BK病毒患者的病例资料,男93例(71.0%),女38例(29.0%)。年龄(37.5±11.3)岁。尸体供肾移植109例(83.2%),亲属供肾移植22例(16.8%)。肾移植术后首次感染BK病毒时间为(188.7±16.6)d。血清肌酐(127.5±39.5)μmol/L。血、尿BK病毒同时阳性25例(19.1%),仅尿BK病毒阳性106例(80.9%)。131例感染BK病毒后的治疗方案中,70例调低他克莫司血药浓度,12例将他克莫司换为环孢素,49例不详。25例血BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量为5.6(2.4,12.3)×10^(3)拷贝/ml,感染时白细胞计数(WBC)(5.8±2.0)×10^(9)/L,血红蛋白(Hb)(122.0±22.4)g/L,血小板计数(PLT)(187.1±63.1)×10^(9)/L,中性粒细胞计数(NEUT)(3.9±1.7)×10^(9)/L,淋巴细胞计数(LYM)(1.5±0.8)×10^(9)/L,单核细胞计数(MONO)(0.4±0.2)×10^(9)/L,中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)2.2(1.7,3.5),衍生中性粒细胞与淋巴细胞比值(dNLR)1.7(1.3,2.6),血小板与淋巴细胞比值(PLR)121.3(86.3,227.3),单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)0.2(0.1,0.4),淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)4.7±2.6。106例尿BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量为20.4(0.4,2570.0)×10^(5)拷贝/ml,感染时WBC 6.6(4.8,9.1)×10^(9)/L,Hb(129.0±24.5)g/L,PLT 188.0(147.3,226.5)×10^(9)/L,NEUT 4.6(3.0,6.6)×10^(9)/L,LYM(1.7±0.8)×10^(9)/L,MONO 0.4(0.3,0.5)×10^(9)/L,NLR 2.8(1.9,3.9),dNLR 2.1(1.5,3.0),PLR 120.5(87.0,163.2),MLR 0.2(0.1,0.4),LMR 4.5(2.8,6.7)。根据70例调低他克莫司血药浓度患者治疗前后血、尿BK病毒DNA载量变化情况(分组原则优先考虑血BK病毒DNA载量,其次是尿BK病毒DNA载量),将患者分为BK病毒升高组和BK病毒下降组,比较两组治疗后WBC、Hb、PLT、NEUT、LYM、MONO、NLR、dNLR、PLR、MLR、LMR、他克莫司血药浓度及变化差值、血肌酐及变化差值的差异。结果25例血BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量与NLR(r=0.5062,P=0.0098)、dNLR(r=0.5738,P=0.0027)相关,与WBC(r=-0.0185,P=0.9302)、Hb(r=0.0912,P=0.6646)、PLT(r=-0.3931,P=0.0519)、NEUT(r=0.2438,P=0.2401)、LYM(r=-0.3035,P=0.1402)、MONO(r=-0.3279,P=0.1096)、PLR(r=0.1054,P=0.6161)、MLR(r=0.0738,P=0.0.7257)、LMR(r=-0.0738,P=0.7257)无相关性。106例尿BK病毒阳性患者BK病毒DNA载量与WBC(r=0.0222,P=0.8209)、Hb(r=-0.0323,P=0.7423)、PLT(r=0.0847,P=0.3881)、NEUT(r=0.0417,P=0.6713)、LYM(r=0.0010,P=0.9916)、MONO(r=0.0224,P=0.8196)、NLR(r=0.0170,P=0.8623)、dNLR(r=-0.0013,P=0.9892)、PLR(r=0.0387,P=0.6934)、MLR(r=-0.0070,P=0.9433)、LMR(r=0.0070,P=0.9433)均无相关性。70例中,BK病毒上升组37例,BK病毒下降组33例,两组的年龄[(38.4±12.0)岁与(39.0±9.0)岁]、性别[男/女:23/14例与27/6例]、血型[A+/B+/AB+:22/13/2例与26/6/1例]、捐献类型[亲属捐献/尸体捐献:29/8例与27/6例]、治疗后血肌酐[123.0(98.4,140.5)μmol/L与132.0(107.1,162.4)μmol/L]、治疗后血肌酐变化差值[0(-15.7,10.5)μmol/L与-2.0(-9.1,15.0)μmol/L]、治疗后他克莫司血药浓度[(6.7±2.0)ng/ml与(6.5±1.5)ng/ml]、治疗后他克莫司浓度变化差值[-1.4(-3.8,0.6)ng/ml与-1.2(-2.2,1.3)ng/ml]差异均无统计学意义(P>0.05)。BK病毒上升组和BK病毒下降组的MONO差异有统计学意义[0.3(0.2,0.5)×10^(9)/L与0.4(0.3,0.6)×10^(9)/L,P=0.033],两组间WBC[6.6(4.1,8.8)×10^(9)/L与6.8(5.4,8.9×10^(9)/L]、Hb[(133.2±25.3)g/L与(131.6±20.6)g/L]、PLT[185.0(151.0,231.5)×10^(9)/L与196.0(149.0,234.0)×10^(9)/L]、NEUT[4.3(2.4,6.4)×10^(9)/L与4.2(3.1,5.5)×10^(9)/L]、LYM[1.7(1.1,2.2)×10^(9)/L与1.8(1.1,2.3)×10^(9)/L]、NLR[2.5(1.9,3.8)与2.4(1.9,3.7)]、dNLR[2.0(1.5,2.8)与1.9(1.4,2.5)]、PLR[114.9(85.1,159.4)与111.3(77.1,159.6)]、LMR(4.6±2.6与5.2±2.4)、MLR[0.2(0.2,0.4)与0.2(0.2,0.4)]差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在感染BK病毒的肾移植受者中,血BK病毒DNA载量与外周NLR、dNLR呈正相关。MONO升高与BK病毒感染预后好转相关。

同卵双生子间活体肾移植的诊治

同卵双生子同胞间活体肾移植术后效果较好,但鲜有报道。2019年10月至2021年2月中南大学湘雅二医院收治2例受者,分别接受其孪生姐妹的肾脏行肾移植。2例受体的原发病分别为急进性肾小球肾炎1例,糖尿病肾病1例。2例术后均接受他克莫司/环孢素+吗替麦考酚酯+甲泼尼松龙三联抗排斥治疗。术后分别随访3.0年和1.5年,移植肾功能均良好。