基于模式病毒评价商品化消毒剂对非洲猪瘟病毒的消杀效果

为了解常用商品化消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的消杀效果,为其消毒剂的筛选提供参考。该研究利用伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)与ASFV病毒理化特征的相似性,以PRV作为替代标识毒株,建立了消毒剂细胞评价模型,于体外检测了3种市售消毒剂对生长在BHK-21细胞中PRV的灭活效果。分别从3类消毒剂的不同方面对消毒剂抗病毒作用的影响进行消杀效果的评估。研究显示,有效含量为0.125 g·L^(-1)的戊二醛癸甲溴铵溶液,以及有效含量为0.5 g·L^(-1)的过氧乙酸溶液和二氯异氰脲酸钠,在室温作用30 min,均可有效灭活PRV。其中,过氧乙酸综合评价最优;戊二醛癸甲溴铵性价比最高,但所需消杀时间较长,受低温影响比较严重。该研究可为养殖场防控ASFV的感染提供消毒剂筛选的理论依据,并对ASFV的消毒标准提供参考。

慢病毒介导的稳定表达鸭干扰素-γ细胞株的构建

干扰素-γ是一种具有抗病毒活性和免疫调节能力的细胞因子之一。为了建立稳定表达鸭干扰素-γ(duIFN-γ)的细胞系,本研究优化并合成了duIFN-γ基因,插入到慢病毒表达载体plenti-GIII-CMV-GFP-2A-Puro,获得重组质粒plenti-IFN,将plenti-IFN与辅助质粒共转染包装细胞293T,筛选出了携带duIFN-γ基因的重组慢病毒rlenti-IFN,将该病毒感染中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞,利用有限稀释法和抗性加压筛选法,筛选出了30个具有嘌呤霉素抗性基因的单克隆细胞系。利用RT-qPCR荧光定量法对这些单克隆细胞的duIFN-γ mRNA水平进行检测,筛选出了duIFN-γ mRNA水平最高的1个单克隆细胞,对其进行扩大培养,获得了1株稳定细胞系。Western blot检测结果表明,duIFN-γ稳定表达于该细胞系中。本研究获得了1株稳定表达duIFN-γ蛋白的细胞系,该研究为开展duIFN-γ生物学功能研究、建立duIFN-γ检测方法及生产廉价鸭(禽)用干扰素奠定了基础。

夜间痛、抑郁症对全膝关节置换术后功能的影响

为了探索全膝关节置换术(total knee artarthroplasty, TKA)对伴随夜间痛或抑郁症的终末期膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)患者膝关节功能及生活质量的影响。通过回顾性分析2018年1月至2020年6月于邯郸市中心医院骨五科行初次TKA手术的195名患者资料。根据术前是否伴随夜间痛、抑郁症将患者分为夜间痛组(A组)、无夜间痛组(B组),抑郁症组(C组)、无抑郁症组(D组),研究了各组术前、术后6周、3月、1年患者的夜间痛发病率、疼痛程度、抑郁症发病率;术前、术后1年各组膝关节功能状态、生活质量。使用VAS评分(visual analog scale, VAS)评估疼痛程度,流调中心抑郁量表(center for epidemiological studies depression scale, CESD)评估抑郁程度,西安大略麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index, WOMAC)和简明健康量表(12-item short form survey, SF-12)评估膝关节功能、生活质量。结果表明术前患者膝关节夜间痛的发生率为63.6%,抑郁症的发病率为17.9%。术前A组WOMAC,SF-12评分显著低于B组,差异有统计学意义,术后1年差异无统计学意义。术前C组WOMAC, SF-12评分显著低于D组,差异有统计学意义,术后1年差异无统计学意义。可见终末期KOA患者夜间痛、抑郁症发病率较高,伴随较差的膝关节功能及生活质量,TKA可以改善上述不适。

鸭瘟病毒gG基因缺失株的构建及其免疫保护效果研究

鸭瘟病毒(DEV)是引起鸭高致死率的重要病原。为探究gG基因对DEV疫苗株免疫保护效果的影响,本研究在本实验室已构建的DEV疫苗株细菌人工染色体感染性克隆pDEV-EF1的基础上,通过“Red E/T两步重组”技术,构建DEV gG基因缺失的感染性克隆pDEV-ΔgG,对其进行酶切、PCR及测序鉴定。将p DEV-EF1和pDEV-ΔgG分别转染CEF细胞,待两组细胞均出现荧光后,收获细胞培养物反复冻融3次后,连续传至20代,每隔5代采用PCR及测序鉴定,分析p DEV-ΔgG的遗传稳定性,并采用western blot进一步鉴定,结果显示,正确构建gG基因缺失株,且能在CEF上稳定传代,命名为rDEV-ΔgG。将rDEV-ΔgG和亲本病毒rDEV-EF1接种CEF,测定体外生长曲线和测定蚀斑形成能力。结果显示,rDEV-ΔgG和rDEV-EF1的病毒滴度在24 h~72 h呈上升趋势,均在72 h时达到高峰,且二者的病毒滴度无显著差异;rDEV-ΔgG感染CEF后形成的蚀斑较亲本病毒rDEV-EF1产生的蚀斑面积减小27.37%。将r DEV-ΔgG以不同剂量免疫30日龄麻鸭2周后,进行DEV攻毒试验,观察各组鸭的临床症状,统计各组麻鸭的存活率,攻毒后1 d到9 d采集各组鸭肛拭子,并在攻毒后2 d、4 d、6 d和8 d各组分别随机剖杀3只麻鸭,取其各脏器组织,经荧光定量PCR分别检测各组麻鸭各脏器病毒载量及排毒情况。攻毒试验结果显示,1.0×10^(5)TCID_(50)和1.0×10^(4)TCID_(50)rDEV-ΔgG免疫的麻鸭在强毒攻击下的保护率较相同剂量rDEV-EF1免疫的麻鸭均下降17%。各脏器病毒载量结果显示,在攻毒后2 d麻鸭胸腺的病毒载量最高,其次是脾脏,在攻毒后4 d,麻鸭食道、泄殖腔、胸腺病毒载量较高。泄殖腔排毒结果显示,攻毒后1 d~4 d泄殖腔排毒量持续升高,并攻毒后4 d各组麻鸭的排毒量达到峰值。本研究比较了gG基因缺失病毒rDEV-ΔgG和亲本病毒rDEV-EF1的生物学特性和免疫保护效果差异,为明确gG在DEV基因组中的功能提供研究基础。

PVP治疗骨质疏松性椎体压缩骨折术后24 h疗效分析

为了探讨影响经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)治疗骨质疏松性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fractures,OVCF)术后24 h手术效果的影响因素,通过回顾性分析2015年1月—2022年1月邯郸市中心医院骨五科行PVP治疗的351名OVCF患者,根据Macnab量表将术后24 h手术效果分类,将患者分为满意组(A)和不满意组(B),分析患者骨折时间、术前VAS(visual analogue scale)评分、抑郁症病史等相关因素,将有统计学意义的变量进行二元Logistic回归分析。结果表明:两组比较,患者骨折时间、术前VAS评分、有无抑郁症病史均存在显著性差异(P<0.05)。Logistic回归分析显示骨折时间长、术前VAS评分低、有抑郁症病史为PVP术后24 h患者不满意的独立危险因素。可见PVP术后手术效果与患者骨折时间、术前VAS评分、有无抑郁症病史有关;骨折时间≤3周、术前VAS评分≥7分、无抑郁症的患者手术效果好,患者满意度更高。

牛膝多糖调控转移相关蛋白1/核因子-κB通路对类风湿关节炎大鼠踝关节破坏的影响实验研究

目的:探究牛膝多糖对类风湿关节炎(RA)大鼠踝关节破坏的影响及可能机制。方法:将40只大鼠随机分为对照组、RA组、牛膝多糖组及低表达转移相关蛋白1(MTA1)组,每组10只。肉眼观察大鼠踝关节变化,进行关节炎评分。HE染色与番红O-固绿染色检测大鼠滑膜炎症、骨侵蚀和软骨损伤情况。免疫荧光染色检测大鼠滑膜组织MTA1、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠滑膜组织MTA1、NF-κB mRNA表达水平。Western blot检测大鼠滑膜组织MTA1、NF-κB蛋白表达水平。结果:与对照组比较,RA组大鼠踝关节增粗,关节炎评分增加且在21 d后显著升高,踝关节滑膜增生,滑膜炎症评分、骨侵蚀评分和软骨损伤评分升高,滑膜组织MTA1、NF-κB蛋白及mRNA表达水平增加(均P<0.05)。与RA组比较,牛膝多糖组大鼠踝关节变小,关节炎评分降低,踝关节滑膜厚度减少,滑膜炎症评分、骨侵蚀评分和软骨损伤评分降低,滑膜组织MTA1、NF-κB蛋白及mRNA表达水平减少(均P<0.05)。与RA组比较,低表达MTA1组大鼠滑膜组织MTA1、NF-κB蛋白表达减少,骨侵蚀评分减少(均P<0.05)。结论:牛膝多糖可通过下调MTA1/NF-κB通路改善RA大鼠踝关节破坏。

经单侧横突-椎弓根入路经皮椎体成形术治疗老年腰椎骨质疏松性椎体压缩骨折的疗效观察

目的探讨经单侧横突-椎弓根(unilateral transverse process-pedicular,UTPP)入路经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)治疗老年骨质疏松性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF)的临床特点。方法收集2020年1月至2022年1月于邯郸市中心医院骨五科行经单侧椎弓根(unilateral transpedicular,UTP)及UTPP入路PVP治疗老年腰椎OVCF患者共133例。记录两组的研究术后VAS评分(visual analogue scale,VAS)、ODI评分(Oswestry disability index,ODI)、手术时间、骨水泥注入量、骨水泥分布特点、骨水泥分布优秀率、骨水泥渗漏率、椎体前缘高度和Cobb角等指标。结果完整随访患者124例至术后12个月。两组患者的术后1 d、6个月、12个月的VAS评分、ODI评分均较术前降低,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者手术时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);UTPP组骨水泥注入量大于UTP组,骨水泥分布优秀率高于UTP组,骨水泥渗漏率低于UTP组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后1 d的椎体前缘高度和Cobb角比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论经单侧横突-椎弓根入路较经椎弓根入路PVP骨水泥弥散充分,骨水泥渗漏率低,止疼效果好,可实现患者早期下地、提高患者生活质量。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗和鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒病(Ⅰ群4型)三联灭活疫苗联合免疫效果研究

为评价重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗和鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒病(Ⅰ群4型)三联灭活疫苗混合后的联合免疫效果,试验将120只11日龄健康商品代黄羽肉鸡随机分成4组,设混苗联合免疫组、分点免疫组和单苗免疫组,分别接种疫苗,检测免疫前和免疫后14、21、28和35 d鸡血清中特异性抗体水平,评估两种疫苗混合后联合免疫的安全性和免疫效果。结果显示:免疫后1周内各组鸡精神、食欲、呼吸等生理活动均无异常;混苗联合免疫组免疫后14 d,6种病原抗体滴度均升高,免疫后21 d均达到理想水平,免疫后28 d抗体滴度均高于5 log2;混苗联合免疫组抗体水平和抗体消长规律与其他组基本一致。研究表明,两种禽流感疫苗混合后联合免疫的安全性和免疫效果与单苗免疫相当,无干扰现象,可减少鸡群应激,节省人工,为养禽场免疫程序优化提供参考。

酸性离子液体萃取-氧化模拟油品脱硫研究

以酸性离子液体N-羧甲基吡啶硫酸氢盐([CH2COOHPy]HSO4)为萃取剂和催化剂,过氧化氢为氧化剂,用于模拟油品(二苯并噻吩溶于正辛烷配制而成)萃取-氧化脱硫反应,考察过氧化氢用量、离子液体用量、反应温度和反应时间对脱硫率的影响。研究结果表明,当氧硫摩尔比(H2O2/S)为6,在10 mL模拟油品中加入0.6 mL离子液体,50℃下反应40 min,脱硫率可达99.7%。离子液体循环再生使用5次,脱硫率没有明显下降。

改进制备过程对WO_3/ZrO_2固体超强酸结构和酸性的影响

为制备高活性固体超强酸催化剂,改进了WO3/ZrO2固体超强酸的浸渍制备过程;用BET、XRD、NH3-TPD和SEM方法分别对以有、无醇化处理载体制得的催化剂进行了表征。结果表明,Zr(OH)4载体经醇化处理后,载体表面容纳较多的分散态钨活性组分,制得催化剂比表面积增大,高温焙烧后仍保持一定的四方晶相ZrO2(t),呈现出较高的总酸量和酸强度,且粒度较小,疏松分散,用于柴油催化氧化脱硫反应表现出较高的催化活性。

模拟油品氧化脱硫及反应动力学研究

在H2O2/WO3/ZrO2氧化体系中对以甲苯为溶剂、二苯并噻吩(DBT)为模型含硫化合物的模拟油品(硫的质量分数为1 540×10-6)进行了氧化脱硫研究,考察了反应温度、反应时间、氧化剂加入量、催化剂用量对DBT转化率的影响。实验结果表明,在反应温度50℃,反应时间90 min,氧化剂加入量油/H2O2的体积比为20∶1和催化剂用量0.02 g/mL的适宜氧化脱硫条件下,96%以上的DBT氧化为容易分离脱除的二苯并噻吩砜(DBTOs);同时研究了DBT氧化反应动力学,得知DBT氧化反应为一级反应,表观活化能Ea为55.37 kJ/mol,指前因子A为3.35×107 min-1。

改性WO_3/ZrO_2固体超强酸催化合成乙酰水杨酸

采用共沉淀法制备WO3/ZrO2及Ce、Mn改性WO3/ZrO2固体超强酸,通过XRD、Raman等方法对改性前后催化剂进行表征,并将其分别用于乙酰水杨酸合成反应考察催化性能,结果表明Ce改性WO3/ZrO2固体超强酸催化效果最好。以Ce改性WO3/ZrO2固体超强酸作为催化剂对乙酰水杨酸合成工艺进行优化,考察反应时间、反应温度、反应物配比及催化剂用量对酰化反应的影响。最佳反应条件下乙酰水杨酸收率达94.69%,且催化剂回收容易,重复使用多次仍具有较高活性。

超声强化过氧化氢／三氯乙酸催化氧化柴油深度脱硫研究

选择H2O2一三氯乙酸作为催化氧化脱硫反应体系,砜类氧化产物用极性溶剂从柴油中萃取分离,研究了剂油体积比、有机酸用量、氧化反应温度、氧化反应时间等工艺参数对脱硫率的影响。在此基础上,引入功率超声为反应提供能量,并考察了超声频率、超声功率、超声时间等因素对脱硫效果的影响,从而确定最佳操作条件为,反应温度70℃,反应时间60min,三氯乙酸与过氧化氢体积比为1∶1,氧化剂与柴油体积比为1∶10,超声频率40kHz,超声功率200W,超声时间30min。萃取后柴油脱硫率可达97.5%,脱硫油收率94.0%。

WO_3/ZrO_2固体超强酸催化氧化柴油深度脱硫研究

采用WO3/ZrO2固体超强酸作为催化剂,研究了H2O2/WO3/ZrO2体系催化氧化柴油深度脱硫性能,考察了氧化剂用量、催化剂用量、反应温度、反应时间等工艺参数对脱硫率的影响;在此基础上,引入功率超声进一步强化反应,并考察了超声频率、超声功率、超声时间等因素对脱硫效果的影响。实验结果表明,在反应温度60℃,反应时间90 min,氧化剂加入量V(H2O2)∶V(柴油)=1∶10,催化剂用量15 g/L柴油的最佳氧化脱硫条件下,氧化柴油经萃取后脱硫率可达91.0%。超声强化后,氧化反应时间缩短为40 min,柴油脱硫率提高至95.6%。

鹅与番鸭溃疡性胃肠炎病原的分离鉴定

从患以胃肠道出血、溃疡为主要特征的急性、败血性传染病发病死亡的鹅和番鸭病料中各分离到 1株病毒 ,DQ和DQ M。病毒分离物对鸡胚、番鸭胚、鹅胚和番鸭均具有极强的致病性。血清学实验结果表明 ,DQ和DQ

超声促进浸渍法制备WO_3/ZrO_2固体超强酸催化剂

以Zr(OH)4为载体,分别采用超声浸渍法和常规浸渍法制备得到WO3/ZrO2固体超强酸催化剂,并用BET、XRD、NH3-TPD和SEM等方法对催化剂进行表征。结果表明,与常规浸渍法相比,超声浸渍法制得催化剂比表面积较大,载体表面容纳较多的分散态钨活性组分,高温焙烧后仍保持高比例的四方晶相ZrO2(t),呈现出较高的总酸量和酸强度。且超声浸渍法制得催化剂粒度较小,疏松分散,用于柴油催化氧化脱硫反应表现出很高的催化活性。

氧化-萃取耦合模拟油品深度脱硫研究

以分别溶有苯并噻吩(BT)和二苯并噻吩(DBT)的正辛烷溶液为模拟油品(硫含量均为1 540μg/g),以WO3/ZrO2固体超强酸为催化剂,H2O2为氧化剂,N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为萃取溶剂,考察氧化-萃取耦合工艺参数对BT和DBT脱除率的影响,确定模拟油品氧化-萃取耦合脱硫的最佳工艺条件,并探讨氧化-萃取耦合脱硫机理。结果表明,在氧化-萃取耦合脱硫优化条件下,即耦合脱硫温度60℃,耦合脱硫时间90 min,氧化剂用量V(油)∶V(H2O2)=33.3∶1,催化剂用量0.02 g/mL油,萃取溶剂用量V(溶剂)∶V(油)=1∶1,此时BT和DBT脱除率分别达到92.40%和97.46%。

猪α干扰素在毕赤酵母中的高效表达和纯化

为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素(PoIFNα)在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究。将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaBⅠ和EcoRⅠ位点,构建了表达转移载体pPIC9k/PoIFNα;经酶切和测序鉴定,转移载体构建正确。pPIC9k/PoIFNα以限制性内切酶SalⅠ线性化后电转化毕赤酵母GS115菌株,经抗性筛选获得4拷贝PoIFNα基因的重组菌株GS115/PoIFNα;重组菌株经BMMY培养基诱导后上清中有目的蛋白,表达量达136mg/L。表达产物经过SP-Sepharose阳离子交换层析,可以得到纯度较高的rPoIFNα,纯化产物在MDBK细胞上抑制VSV的活性高达2.27×108U/mg。

WO_3/ZrO_2固体超强酸改性及在酯化反应中应用研究

为进一步提高WO3/ZrO2固体超强酸催化活性和稳定性,采用共沉淀法分别制备Ce和Mn改性WO3/ZrO2催化剂。通过XRD、Raman等方法对改性前后催化剂进行表征,由相应图谱分析Ce和Mn引入对催化剂晶型结构和表面性质的影响;并将改性后催化剂用于丙酸和正丁醇的酯化反应考察其催化性能,同时确定合成丙酸正丁酯的最佳工艺条件。结果表明,Ce或Mn的引入能更好地抑制焙烧时ZrO2晶粒长大,使晶粒粒度更加细化,但是没有改变WO3/ZrO2催化剂的物相结构;与WO3/ZrO2相比,Ce或Mn掺杂后催化剂活性明显提高。

用于氯苯硝化的固体超强酸催化剂的制备及性能研究

将环境友好的WO3/ZrO2固体超强酸催化剂用于氯苯液相单硝化反应,提出绿色硝化工艺路线。用共沉淀法制备WO3/ZrO2固体超强酸催化剂,通过XRD,TG-DSC,BET和NH3-TPD方法研究了催化剂制备过程中条件改变对WO3/ZrO2结构的影响,并考察了该催化剂对氯苯液相单硝化反应的催化性能。结果表明,WO3/ZrO2固体超强酸的催化活性与氧化钨含量、焙烧温度及晶相结构密切相关。在氧化钨含量为20%(wt)时,经973 K高温焙烧,WO3/ZrO2固体超强酸显示较高的催化活性,单硝基氯苯产率为75.6%,对/邻比为3.73。