心力衰竭与心肌肾上腺素受体

心力衰竭与心肌肾上腺素受体张寄南苏恩本（南京医科大学一附院心内科，南京２１００２９）ＡｂｓｔｒａｃｔＩｎｈｕｍａｎｈｅａｒｔ，ａｌｐｈａｌ－，ｂｅｔａｌａｎｄｂｅｔａ２ａｄｒｅｎｃｅｐｔｏｒｓ（ＡＲ）ｅｘｅｒｔａｐｏｗｅｒｆｕｌｉｎ－ｏｔｒｏｐｉｃ...

中西医结合治疗扩张型心肌病的临床观察

目的 :观察中西医结合治疗扩张型心肌病的疗效。方法 :对 32 0例临床诊断扩张型心肌病患者随机分为两组 ,治疗组 164例 ,用中西医结合治疗 (黄芪、生脉、牛磺酸、泛葵利酮及强心、利尿、扩血管等 ) ,对照组 156例 ,用常规治疗 (极化液、泛葵利酮及强心、利尿、扩血管等 )。结果 :治疗组临床症状的好转明显高于对照组 (P <0 0 1) ,心功能改善优于对照组 (P <0 0 5)。随访中两组死亡总数基本相似 ,但治疗 3～ 6个月内对照组死亡人数明显多于治疗组。而治疗组中坚持治疗 1年者 ,1年后的死亡人数明显低于治疗 3～ 6个月者 (分别为 1例及 11例 )。结论 :在目前对扩张型心肌病无明显特效药物治疗的情况下 ,采用中西医结合治疗不失为一种可取的药物治疗手段。

曲美他嗪对慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢及超微结构的影响

目的研究曲美他嗪对异丙肾上腺素诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法72只雄性SD大鼠随机分为对照组(14只)和模型组(58只),模型制备采用皮下多点注射异丙肾上腺素法,4周后模型组大鼠死亡12只,再将存活的46只模型组大鼠随机分为未治疗组(M组,16只)、曲美他嗪治疗组(T组,15只)和培哚普利治疗组(P组,15只)。治疗5周后行二维心脏超声检查和病理形态学观察,并测定心肌组织能量代谢相关指标。结果与M组比较,T组大鼠LVEF、左心室短轴缩短率均提高;光镜和电镜下观察T组和P组心肌损伤程度较M组明显减轻。T组与P组大鼠心肌二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷、ATP/ADP和总腺苷含量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。T组大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATPase活性与对照组和P组比较差异无统计学意义。结论曲美他嗪能够改善心力衰竭大鼠心肌能量代谢、病理和超微结构,并且有改善大鼠心功能的趋势。

黄芪总皂甙对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤及肌浆网钙泵的影响

目的:观察黄芪总皂甙(AS)及黄芪注射液(AI)对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌损伤的保护作用及其对心肌肌浆网钙泵的影响。方法:腹腔接种柯萨奇B3亲心肌病毒株建立小鼠VMC模型,分成模型组、AS组、AI组及正常对照组,分别观察各组小鼠死亡率、心肌病理变化、血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量及心肌肌浆网钙泵(SERCA)活力等指标。结果:模型组死亡率高于对照组(P=00042)、AS组及AI组(P<005);cTnI含量显著高于对照组(P<0001),也高于AS组(P<0025)及AI组(P<005)。AS及AI组的心肌坏死和炎症等病理改变则轻于模型组(P<001)。模型组心肌SERCA活力显著低于对照组(P<0001),AS组(P<001)及AI组(P<005)。结论:AS和AI对VMC小鼠心肌损害具有不同程度的保护作用,AS是黄芪治疗VMC的有效成分;改善VMC小鼠心肌SERCA的活力,可能是黄芪及AS保护感染病毒小鼠心肌免受损害的作用机制之一。

黄芪总皂苷对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用

目的研究黄芪总皂苷(astragalosides,AS)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致大鼠心肌损伤的影响及机制。方法用AS(5mg·kg-1·d-1×7d,ip)或曲美他嗪(10mg·kg-1·d-1×7d,ip)等治疗ISO(5mg·kg-1·d-1×2d,sc)心肌损伤大鼠,观察心肌组织病理改变并测定心肌组织乳酸、丙二醛及高能磷酸化物ATP,ADP和AMP含量。结果AS组心肌组织病理分级接近曲美他嗪对照治疗组,心肌乳酸和丙二醛含量较模型组显著降低(分别为P<0·05,P<0·01),ATP含量增加(P<0·05),ADP含量降低(P<0·05),AMP含量有增加趋势,以上治疗指标与曲美他嗪组比较无显著差异(P>0·05)。结论AS可拮抗ISO引起的大鼠心肌损伤,其机制与改善心肌能量代谢、抑制脂质过氧化有关。

肺癌细胞株APC基因启动子甲基化对其转录的影响

背景与目的:抑癌基因家族性腺瘤样结肠息肉病易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)启动子区的高甲基化在很多肿瘤中被发现,与这些肿瘤的发生发展相关。本实验室在肺癌患者肿瘤组织中检测到APC甲基化率达47%,为了研究其在肺癌细胞株中的甲基化情况,并进一步了解甲基化对其转录的影响,本研究检测了3株肺癌细胞的抑癌基因APC启动子甲基化状态及其对该基因转录水平的影响。方法:提取3株肺癌细胞株(肺腺癌细胞株SPC-A1、小细胞肺癌细胞株NCI-H446、大细胞肺癌细胞株NCI-H460)的DNA,以经转甲基处理和未做处理的脐带血DNA为阳性、阴性对照,亚硫酸氢盐化学修饰后,用甲基化特异性基因扩增(methylation specific-polymerase chain reaction,MSP)和甲基化基因芯片对APC基因启动子1ACpG岛甲基化进行研究,并用实时荧光定量PCR(real time-polymerase chain reaction)技术,以Sybr-GreenⅠ为荧光染料,β-actin基因为内参照,检测mRNA转录;对甲基化阳性的NCI-H460细胞,分别用1、5、10、15μmol/L的5′-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-2-deoxycytidine,5-aza-dC)试剂进行脱甲基化,提取RNA,荧光定量检测其转录变化。结果:SPC-A1和NCI-H446细胞APC甲基化阴性,NCI-H460细胞APC甲基化阳性;甲基化芯片检测NCI-H460细胞在APC启动子1A5个CpG位点均存在甲基化(687、707、714、719、726),SPC-A1和NCI-H446甲基化阴性,荧光定量结果NCI-H460的APC转录较SPC-A1和NCI-H446有明显的下降,仅为二者平均的30.04%;经5-aza-dC脱甲基化作用后,NCI-H460细胞的APC表达增加了约5～10倍,其中10μmol/L浓度作用下,APC表达增加最多。结论:肺癌细胞株NCI-H460中存在APC基因高甲基化,5-aza-dC脱甲基化试剂可以激活其转录。

黄芪总皂甙对培养大鼠心肌细胞钙超载的影响

目的:研究黄芪总皂甙是否对培养大鼠心肌细胞钙超载产生影响,为研究和开发中药的新成分提供理论依据。方法:异丙肾上腺素干预培养大鼠(1～3d的SD乳大鼠80只)心肌细胞造成心肌细胞钙超载的模型,同时用黄芪总皂甙、维拉帕米和美托洛尔分别作用于细胞72h。分为异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)组,黄芪总皂甙1(astragaosides1,AS1)组,AS2组,ISO+AS1组,ISO+AS2组,ISO+美托洛尔(metoprolol,M)组,ISO+维拉帕米(verapamil,V)组及正常对照组(control,C)组。检测肌细胞内游离钙离子浓度和肌质网的钙负荷,测定心肌细胞内脂质过氧化物丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)的含量和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性。结果:异丙肾上腺素引起心肌细胞游离钙离子浓度和肌质网钙负荷明显增加(分别增加89%和116%)。黄芪总皂甙可浓度依赖性的抑制异丙肾上腺素的作用,从低浓度(10mg/L)到高浓度(100mg/L)。与ISO组比较,ISO+AS1组与ISO+AS2组可使细胞内的钙离子浓度分别降低37%和50%(169.2±24.2),(132.6±29.2),(267.6±82.0)nmol/L,t=2.57,P<0.05;t=3.81,P<0.01,使肌质网钙负荷分别降低23%和35%(P>0.05;t=2.48,P<0.05),但是黄芪总皂甙的这种作用不如维拉帕米,美托洛尔可基本阻断异丙肾上腺素的作用。

经皮冠状动脉腔内成形术前后血清肌钙蛋白I的变化

目的：通过动态观察血清心肌肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎＩ）及肌酸激酶ＭＢ同工酶（ＣＫ－ＭＢ）的变化，以评价经皮冠状动脉腔内成形术对心肌的可能影响。方法：对５９例行经皮冠状动脉腔内成形术的冠心病患者，分别测定其术前，术后６、１２、２４、４８和７２小时的血清ｃＴｎＩ及ＣＫ－ＭＢ水平，并进行分组比较。结果：１８例患者术前血清ｃＴｎＩ正常，术后６小时升高，１２～２４小时达峰值，４８～７２小时渐降至正常；３１例患者术前、术后血清ｃＴｎＩ均正常；１０例患者术前、术后血清ｃＴｎＩ均高于正常值。全部病例中仅３例患者ＣＫ－ＭＢ增高。血清ｃＴｎＩ升高与球囊扩张总时间及扩张次数有关。结论：经皮冠状动脉腔内成形术可能会造成心肌微小损伤，ｃＴｎＩ为监测心肌损伤的可靠而灵敏指标。

芪参益气浸膏对异丙肾上腺素致大鼠慢性心力衰竭治疗作用研究

目的:观察芪参益气浸膏对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(CHF)的治疗作用和对心肌能量代谢的影响方法:142只雄性SD大鼠随机分为对照组和CHF组,模型制备采用皮下多点注射ISO法,4周后CHF组再随机分为模型组和芪参益气浸膏高、中、低3个治疗组及曲美他嗪治疗组。平均治疗5周后进行心脏超声检查,并测定心肌组织中高能磷酸化合物的含量和肌浆网Ca2+依赖型ATP酶(SERCA)活性。结果:芪参益气浸膏显著提高心衰大鼠左室短轴缩短率(FS%)(36.35±3.80vs31.48±5.98,P<0.05),左室射血分数也有改善趋势,心肌ATP和总腺苷(TAN)含量比模型组分别提高了19%和31%,与正常对照组无统计学差异(P>0.05)。芪参益气浸膏组和曲美他嗪组心肌SERCA活性显著高于模型组。结论:芪参益气浸膏有改善ISO诱导慢性心衰大鼠心功能的趋势,这种作用可能与心肌能量代谢的改善有关。

降防保心中药复方对肾血管性高血压大鼠肾素-血管紧张素系统的影响

降防保心中药复方（ＪＦ）能降低肾血管性高血压大鼠（ＲＨＲ）的血压，使增高的ＲＨＲ的左室重／体重比得以回降。ＲＨＲ左室心肌中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）水平显著降低；血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活力在肺组织中显著下降。

血管紧张素原基因M235T多态性与冠心病关系的研究

目的 探讨中国苏皖地区人群血管紧张素原 (AgT)基因型的分布及其与冠心病(CHD)的关系。方法 应用突变基因分离聚合酶链 (MS PCR)技术 ,对 10 6例CHD患者、5 6例冠状动脉造影正常者以及 30名健康献血员AgT基因M2 35T多态性进行检测。 结果 病例组和对照组AgT基因型总体分布无显著差异 ,而病例组T等位基因频率 ( 0 788)显著高于对照组 ( 0 6 98) (P <0 0 5 )。结论 AgT基因M2 35T多态性中T等位基因是中国苏皖地区人群CHD发病的危险因素之一。

α受体和儿茶酚胺所致心肌损害发生机理关系的实验研究

新西兰免78只分成8组。试验组、M组和对照组分别静滴去甲肾上腺素(NE)1毫克/公斤、美索克新明或生理盐水。其余5组在NE之前分别给予酚妥拉明(R组)、心得安(P组)、美多心安(MP组)、育亨宾(Y组)以及(口派)唑嗪(PR组)。以半定量方法分析心肌病理损害程度,并测定心肌中糖酵解中间产物11项以及能量代谢产物。结果发现NE组心肌损害显著(P<0.01);P组、MP组、Y组和M组心肌损害类似于NE组;R组和PR组则较NE组减轻(P<0.01)。NE组和MP组心肌尚有明显的代谢障碍,而R组则较接近正常。提示NE所致心肌损害中α受体,尤其α_1受体起了主要作用。作者等对其发生机理进行讨论,并提出新的假设。

人心肌肌钙蛋白I的纯化及鉴定

目的 提取和纯化人心肌肌钙蛋白I。方法 心室肌经匀浆、离心、盐析提取 ,CMSephadexC 5 0柱层析 ,DEAESephadexA 5 0柱层析制备人cTnI ;经 (cTnI)活性检测、SDS PAGE、westernblot鉴定。结果 从 6 5 g湿重心肌中获得 4 .1mgcTnI ,分子量约为 2 4 0 0 0 ,纯度约为 84 %。结论 纯化的cTnI可被cTnI单克隆抗体特异识别 ,本实验从人心肌中成功制备cTnI。

肌浆网钙泵测定及其在高血压心肌中的变化

探讨直接利用心肌匀浆测定肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的方法，并观察左室肥厚时肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的变化。采用ｐ－硝苯基磷酸（ｐ－ＮＰＰ）法建立ＳＤ大鼠心肌匀浆肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶检测的最佳条件；取６周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）及对照组饲养２４周，观察血压、左室肥厚及心肌肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力。结果在心肌匀浆中建立了肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力测定的最佳条件；并发现ＳＨＲ左室肥厚时肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力较对照组明显下降（Ｐ＜０．０１）。

肾素血管紧张素系统基因多态性与冠心病关系的研究

目的 :探讨中国苏皖地区人群血管紧张素转换酶 ( ACE)和血管紧张素原 ( AGT)基因型的分布及其与冠心病的关系。方法 :应用聚合酶链反应技术 ,对 10 6例冠心病患者、5 6例冠状动脉造影正常者以及 3 0名健康献血员 ACE插入 /缺失 ( I/ D)多态性及AGTM2 3 5 T多态性进行检测。结果 :ACE基因型分布及等位基因频率在病例组及对照组间差异无显著性。病例组和对照组 AGT基因型总体分布差异亦无显著性 ,而病例组 T等位基因频率 ( 0 .778)显著高于对照组 ( 0 .698,P<0 .0 5 )。联合分析 ACE DD型及 AGTTT型罹患冠心病的相对风险 ,其比数比 ( OR)为 3 .61,高于单基因 ACE DD型 ( 1.2 3 )及 AGT TT型 ( 1.77)。结论 :AGTM2 3 5 T基因多态性中 T等位基因是中国苏皖地区人群冠心病发病的危险因素之一。同时具有 ACE DD型及 AGT TT型发生冠心病的相对风险显著高于单基因 ACE DD型及单基因 AGT TT型。

实时荧光定量PCR检测血浆结核分枝杆菌DNA的初步临床应用

目的评价实时荧光定量PCR技术检测血浆(或血清)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)DNA的技术。方法建立实时荧光定期量PCR方法测定血浆MTBDNA,分别检测临床确诊的55例结核病患者血清43份,血浆25份以及非结核肺部疾病患者血清18份,健康体检血清18份和健康体检者血浆11份的MTBDNA含量。结果18例非结核肺疾病患者血清、18例健康体检者血清以及11例健康体检者血浆MTBDNA全部阴性。55例初诊结核患者中10例(18.2%)治疗前血浆(或血清)MTBDNA阳性,在痰涂片阴性的18例结核患者中,血浆(或血清)MTBDNA阳性检出率为27.8%(5/18),其特异性达100%。结论本研究证实了结核患者血浆(或血清)循环MTBDNA的存在,其定量检测对痰涂片阴性及无痰患者的结核病诊断有重要参考价值。

转基因食品安全的生态伦理学探析

转基因食品已经存在了十几年,但人们对它安全的争议仍然颇多.与此同时,转基因作物种植面积又在逐年扩大.转基因食品应该如何发展?笔者从生态伦理学角度,以生态化生存模式为背景,在重新认识转基因食品安全及发展问题的基础上,探讨相应对策.

血清cTnI对病毒性心肌炎诊断价值的研究

目的 分别观察多种病毒感染后血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)变化 ,结合心电图 (ECG)及临床特征 ,阐述其对病毒性心肌炎 (VMC)心肌损伤的诊断价值。方法与结果 VMC患者 180例ELISA双抗夹心法定量测定血清cTnI ,升高 97例 (5 4% ) ,其中重症 19例、有病毒感染史与ECG改变 2 7例血清cTnI均增高。 19例丙型病毒性肝炎患者 ,8例血清cTnI增高。 5 0例带状疱疹病毒感染者 2 0例血清cTnI增高 ,且与临床严重度有关 ,其中 17例ECG呈多样性表现。 6 5例VMC且cTnI持续增高者在病程 1、3、6、9、12个月时转阴率分别为 47 7%、5 2 3%、90 8%、92 3 %、98 5 %。

中国肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白I基因突变类型的研究

目的研究中国肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因突变类型。方法肥厚型心肌病患者58例,男36例,女22例,年龄10～77岁,平均(46±18)岁。正常对照100例,男60例,女40例,年龄10～68岁,平均(33±12)岁。聚合酶链反应(PCR)扩增肥厚型心肌病患者及正常对照组cTnI基因5、7及8号外显子,结合单链构型多态性及直接测序法分析结果。结果未见国外已报道的cTnI基因突变类型(Pro82Ser,Arg145Gly,Arg145Gln,Arg162Trp,ΔAAG183,Asp196Asn,Gly203Ser,Ser199Asn,Lys206Gln,8号外显子缺失33bp),但在7号外显子发现一新的Arg145Trp突变。此外,在7号外显子尚见179位密码子GAG→GAA多态性。结论所研究的肥厚型心肌患者群未发现国外报道的cTnI基因突变类型。与国外比较,中国肥厚型心肌病cTnI基因突变类型可能具有不同的特点。