禽偏肺病毒的研究进展

禽偏肺病毒病是由禽偏肺病毒(avian metapneumovirus,aMPV)引起的一种以急性上呼吸道感染、产蛋和蛋壳质量下降为特征的疾病。aMPV可感染鸡、鸭、鸽等多种禽类,在全世界范围内广泛流行,给养禽业带来了巨大的经济损失。本文从病毒基因组结构及其编码蛋白、流行现状、致病特性、病毒感染诱导的宿主免疫应答以及其诊断技术与疫苗等方面对aMPV进行综述,为今后该疾病的诊断和预防提供科学依据。

江西地方鸡禽白血病流行与净化现状

为了解江西地方鸡禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)分子流行情况,2016—2023年对江西省8个地方品种鸡进行样品采集,通过对74224份血浆样品病毒分离与遗传进化分析。结果显示:J亚群ALV(ALV-J)和K亚群ALV(ALV-K)是鸡群中主要的ALV亚群,但致病性强的ALV-J阳性率及其在分离株中的占比逐年下降,致病性较弱的K亚群毒株在分离株中占比逐年递增,尤其是在进行ALV净化的鸡场中,ALV-J阳性率明显下降,表明禽白血病净化对控制ALV的流行有重要意义。在参照国际禽白血病净化“金标准”的基础上,结合江西地方品种鸡的特点,制定ALV净化方案,并在2018—2023年对3个地方鸡保种核心群开展了禽白血病净化,经过3~5个世代的ALV净化,各品种鸡群ALV阳性率均显著下降,净化效果明显。

CeO_(2)@AC合成及其光催化性能研究

分别以Ce(NO_(3))_(3)·6H_(2)O、活性炭(AC)为铈源和碳源,利用氨水调节反应体系pH,室温下使Ce^(3+)形成氢氧化铈并沉积在活性炭表面,经陈化、过滤、洗涤、干燥等步骤得到催化剂前驱物,前驱物经煅烧后得到CeO_(2)@AC.分别采用X射线粉末衍射(XRD)、紫外-可见分光光度计(UV-Vis)、红外光谱(FT-IR)和拉曼(Raman)光谱等技术对产物结构性能进行表征.用罗丹明B(RhB)溶液的光催化降解效率评价CeO_(2)@AC的光催化活性,并考察煅烧温度、活性炭用量及催化体系pH对光催化效率的影响.结果表明:产物为立方萤石结构CeO_(2);当煅烧温度为600℃,碳掺杂量为5%,pH=4时,合成催化剂对RhB的光催化效果最好;合成产物CeO_(2)@AC的光催化效率高于以商用CeO_(2)和活性炭为合成材料的光催化效率.该研究可为相关材料合成及其应用提供借鉴.

宋代隐逸观的调和与演变

宋代隐逸名目繁多,隐逸形式多样。宋代隐逸观的冲突,主要在“小隐”和“大隐”间展开。而二者争论的焦点,主要集中在隐居形式和隐居目的两个方面。二者争论的过程中,调和求中的“中隐”观大肆发展。“中隐”,最初是指一种兼得仕隐佳趣的隐逸方式,宋人则将其发展成一种形而上的具有普遍指导意义的行为准则即“道隐”。“道隐”观的出现,与宋代理学的兴盛以及儒、释、道三教合一的发展趋势有关。对“道”的重视,使得宋人论“隐”时从“形隐”向“心隐”过渡的痕迹明显。宋人讲“心隐”时,多追求适性之乐,“孔颜乐处”“曾点气象”等内圣之学遂成为隐者的致力方向。

不同中草药提取物对山麻鸭鸭腹膜炎的体内外抑菌作用

本研究利用黄连、连翘、地榆三种中草药醇提取液对患大肠杆菌性腹膜炎的山麻鸭进行体外和体内实验,探讨其作用效果。对患腹膜炎的山麻鸭进行病原分离鉴定,导致此次疫情暴发的病原为禽源性大肠杆菌,并建立山麻鸭大肠杆菌性鸭腹膜炎模型。使用黄连、连翘、地榆三种中草药醇提取液进行体内外抑菌研究。结果表明:黄连、连翘、地榆的醇提取液MIC分别为125mg/mL、1 000mg/mL、3.91mg/mL,地榆的醇提取液体外抑菌效果最好。将三种中草药醇提取液灌服患大肠杆菌性鸭腹膜炎的山麻鸭,结果表明:地榆对鸭腹膜炎治愈率最高(70%),其次是黄连(65%),连翘(50%)效果较差,本试验结果为防控禽大肠杆菌病提供参考依据。

新现猪Delta冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用

【目的】猪Delta冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是近年来新发现的可引起猪只,特别是新生仔猪腹泻的冠状病毒,其引发的腹泻具有较高的发病率和死亡率,是造成新生仔猪死亡的重要原因之一。试验拟建立新现PDCoV RT-PCR检测方法,并调查当前江西腹泻猪群中PDCoV的感染情况。【方法】通过对Gen Bank数据库中PDCoV全基因组序列的比对分析,找出保守序列,用Primer 3.0在线软件设计1对扩增PDCoV核衣壳(N)蛋白基因片段的特异性引物,基于该引物建立PDCoV RT-PCR检测方法;用建立的方法检测腹泻猪粪便及肠道样品,挑选阳性扩增产物进行克隆、测序;用本试验获得的PDCoV序列与其他国家或地区的PDCoV序列以及猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)共同构建进化树,分析PDCoV各毒株及其与PEDV和TGEV之间的进化关系;以PEDV、TGEV、猪库布病毒(PKoV)、猪星状病毒(PAstV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)RNA为模板验证引物的特异性;构建PDCoV核衣壳蛋白基因片段重组质粒,并以系列稀释的重组质粒为模板确定所建立的PDCoV RT-PCR方法的敏感性;应用建立的RT-PCR方法调查249份2012—2015年江西省猪群腹泻样品中PDCoV的存在情况,随机抽取一定数量的RT-PCR阳性扩增产物进行克隆、测序进一步验证反应的特异性。【结果】1以腹泻猪粪便样品RNA为模板,应用所设计的特异性引物扩增出了329 bp的单一条带,与预期目的片段大小一致,扩增产物经克隆后测序,将获得的序列与NCBI Gen Bank数据库序列进行比对,比对结果表明试验所获得的序列与数据库中PDCoV序列的同源性高达99.1%,证明所扩增的序列属于PDCoV;2将8条本试验获得的PDCoV N基因片段序列与18株其他国家或地区的PDCoV毒株以及PEDV、TGEV的相应N基因片段序列构建进化树,结果表明26条PDCo V序列属于同一个分支,而PEDV和TGEV则分别属于不同的分支。试验获得的PDCoV序列与韩国PDCoV毒株KNU14-04亲缘关系最近,同源性高达99.1%;与两株香港毒株HKU 15-44和HKU 15-155亲缘关系相对较远;3本试验建立的RT-PCR方法特异性强,仅能扩增出PDCoV,而对PEDV、TGEV、PKoV、PAstV、PRRSV及CSFV核酸无交叉扩增现象;4所建立的RT-PCR方法灵敏度高,将含扩增片段的重组质粒以1.0×106拷贝/μL为起始浓度依次10倍稀释至1.0×101拷贝/μL作为模板验证方法的灵敏度,结果表明所建立的方法对PDCoV最低可检出量为1.0×103拷贝/μL;5应用建立的RT-PCR方法检测了249份2012—2015年采集自江西省各地区的腹泻母猪粪便及腹泻仔猪粪便/肠道样本,结果显示腹泻样本中PDCoV的检出率为31.33%(78/249),母猪粪便中PDCoV的检出率(27.78%)稍低于仔猪粪便及肠道样品PDCoV的检出率(31.92%),最早可从2012年的样品中检测出PDCoV。【结论】试验成功建立了检测新现PDCoV的RT-PCR方法;应用所建立的RT-PCR方法检测了249份2012—2015年江西地区猪群临床腹泻样品中PDCoV存在情况,结果表明PDCoV是一种普遍存在于腹泻猪群中的病毒;研究建立的RT-PCR方法对猪群PDCoV的临床诊断和流行病学调查等具有应用价值。

以原核表达的猪δ冠状病毒N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法的建立

为建立检测血清中猪δ冠状病毒(PDCoV)抗体的间接ELISA方法,本研究根据PDCoV的N基因序列设计特异性引物,扩增出N蛋白全基因序列,将其克隆至低温表达载体p Cold I中并转入BL21,诱导表达获得大小约为41 ku的可溶性目的蛋白;western blot试验表明所表达的蛋白具有反应活性。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立了PDCoV间接ELISA抗体检测方法。结果表明,本研究建立的ELISA方法阴阳性临界值为0.316,与猪流行性腹泻病毒等6种猪常见病原阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,重复性和稳定性均较好。应用建立的间接ELISA方法,对收集自江西各地区282份猪血清进行检测,阳性率为12.8%(36/282),表明PDCoV在我省猪群中普遍存在。本实验建立的PDCoV抗体捕获间接ELISA为临床上猪群PDCoV感染监测和流行病学调查提供了实验依据。

新现猪圆环病毒3型及圆环病毒2型双重PCR检测方法的建立与应用

根据GenBank数据库中的新现猪圆环病毒3型(PCV-3)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的OFR2基因设计了2对扩增PCV-3和PCV-2的特异性引物,通过优化各反应条件,建立同时检测PCV-3和PCV-2的双重PCR方法。敏感性和特异性结果显示,该方法对PCV-3和PCV-2的最低核酸检测量均为1.0×103拷贝/μL,而对猪伪狂犬病毒(PRV)、猪delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)的扩增结果均为阴性。应用所建立的双重PCR检测了临床上256份样品,结果表明,PCV-3和PCV-2感染的阳性率分别为0.78%(2/256)和86.3%(221/256),仅有1份样品为PCV-3和PCV-2混合感染,混合感染阳性率为0.39%(2/256)。试验结果表明,本研究建立的PCR方法敏感、特异,适于临床样品检测,为猪群中PCV-3和PCV-2的临床快速诊断和流行病学调查提供了一种工具。

六朝扬州地记之物类记述及其文学性探论

六朝时期,咏物文学兴起,地记中的物类记述,与咏物诗、咏物赋等文体一道,成为六朝体物文学的重要文学载体。地记物类记述的繁荣,与当时思想多元化、"博通"风气盛行以及地域大交流的局面有关。地记中的物类记述,具有较强的地域性特色,其所记各物类除了具有较强的实用性外,又具有较强的文学性特征。作为一种独立文体,地记中的物类记述与咏物诗、咏物赋等在所记物类内容选择、语言形式、行文结构上等皆有较大差异。

魏晋南北朝区域人物传探论——兼与胡宝国先生商榷

区域人物传创作发端于东汉时期,其最初是朝廷体察各区域风俗、人情的手段。此时的区域人物传多记本朝人物,且贤愚并录。至魏晋南北朝时期,受史学发展、史官制度设置、人物品评风气等时代背景的影响,区域人物传创作迅猛发展。此时区域人物传的发展亦与发达地区门阀世族间的互相抗衡有重要关系。各区域人物传多产生在当时的经济、政治、军事重心,而非如胡宝国先生所说产生于落后地区。与东汉时期区域人物传相比,魏晋六朝区域人物传专意于"述美"人物,其所记人物范围亦不再局限于一朝,所记人物类型也渐趋多元化。唐代开始,图经、方志逐步定型,区域人物传也多并入方志之中而不再独立成书。

唐前《南岳记》《衡山记》数种考论与辑补

唐前关于南岳衡山的地记作品有徐灵期《南岳衡山记》、宗测《衡山记》、释灌顶《南岳记》、李明之《衡山记》等数种。唐宋各家类书、文集注等所引又有佚名《南岳记》、佚名《衡山记》数条。此数种地记,对南岳衡山相关知识的记录具有较重要的学术价值,但诸家地记或散佚严重,或作者存疑,对此数种地记进行重新考证、辑补是有必要的。此数种地记作者多为佛教、道教人士,其所记内容也多与此时的佛、道教生活有关。并且,此数种地记对唐宋以后南岳相关志书的形成产生了重要影响。

六朝地记研究述评

六朝地记是六朝时期史部文献的一种重要类型,其数量众多,种类多样,在方志学的发展历史上具有重要地位。六朝地记多亡佚于宋元时期。唐刘知几《史通》首开六朝地记理论研究之先河,元陶宗仪《说郛》则首次对六朝地记进行系统辑佚。清代以降,对六朝地记的辑佚、研究工作不断进行,近年来关于地记的研究、整理亦呈水涨船高之势。各家辑佚为我们研究六朝地记提供了扎实的文献基础,在此基础上进行的地记理论研究,则涉及地记的起源、名称、性质等多个方面。

《武陵记》数种及其辑本考论

《武陵记》,今存作者可考者有黄闵《武陵记》及伍安贫《武陵记》两种。唐宋时期二书亡佚,其部分条目待类书征引以及各史书、文集注而得以保存。元代开始,《武陵记》辑佚之作间出,元陶宗仪《说郛》,清王谟《汉唐地理书钞》、陈运溶《麓山精舍丛书》以及今人刘纬毅《汉唐方志辑佚》等书皆辑《武陵记》。各家辑佚水平不一,并多有讹、漏之处。对各书所引《武陵记》以及各家辑本进行考证,可厘清《武陵记》相关条目的真伪与归属问题。现存《武陵记》各条目,除具有较重要的舆地价值与史料价值外,亦具有较强的文学性。

东晋南朝山水记的文学转向及其地位和影响

东晋南朝山水记从地记中脱胎而来,其发展大致经历了州郡记-区域性山水记-单篇山水记三个阶段。山水记的发展过程中,其文本形态经历了从偏重征实性的地学散文到偏重艺术性的文学散文的转向。释慧远《游庐山记》开辟了山水记以游踪为主线写山水的新模式;谢灵运等人的山水记首开山水记中用"序"的先例;释慧远及其周围僧团创作的《庐山记》系列作品,又开山水游记"同题共作"的先河。东晋南朝山水记已经具备了游记文学的常见文体要素,并对后代山水游记产生了重要影响。东晋南朝山水记可视为中国古代游记文学的开端,是游记文学发展史上的重要一环。

“以类相从”与“见微知著”——关于两部中古赋史的比较

程章灿《魏晋南北朝赋史》与王琳《六朝辞赋史》是研究魏晋南北朝辞赋史的两部巨著,程著注重辞赋的类型化分析,王著则以作家作品分析见长,二书在叙述视角、叙述方法、行文结构上存在一些差异,但在书写过程中,二书亦有许多相似之处,如广博宏富的学术视角、客观的写史态度等。二书的论述,能够形成互补态势,为我们了解魏晋南北朝时期的赋史全貌奠定基础。

《南雍州记》三种及其辑本考述

南雍州,东晋时侨置襄阳,所治包括今湖北、河南部分地区。《南雍州记》,今所见有王韶之作、郭仲产作、鲍至作三种。王韶之《南雍州记》,史志皆不载,《说郛》辑得六条,黄奭《汉学堂丛书》所辑六条与《说郛》同,应即直接从《说郛》中摘录而成。郭仲产《南雍州记》与鲍至《南雍州记》史志皆有著录,二书约亡于宋元之交。今存《南雍州记》各家辑本均存在漏辑、误辑的情况。《说郛》《汉学堂丛书》所辑王韶《南雍州记》六条作者皆存疑,王谟、黄惠贤、刘纬毅各家所辑《南雍州记》亦均存在误辑、漏辑、重辑等问题。

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及药敏试验

2015年3月,江西省上饶市万年县某规模化养猪场部分肥猪出现体温升高、呼吸困难、咳嗽等症状,部分发病猪出现死亡,病死率为35%,疑似猪传染性胸膜肺炎放线杆菌感染。用TSA及鲜血培养基进行了胸膜肺炎放线杆菌的分离和纯化,经培养特性、染色镜检、生化试验及16SrDNA PCR鉴定等证明了分离菌为生物Ⅰ型胸膜肺炎放线杆菌。毒力基因检测表明该菌具有ApxⅣ毒力基因。药敏试验结果显示,分离菌对头孢哌酮、诺氟沙星高度敏感,对青霉素G耐药。

安徽地区六朝地记考述

六朝时期,地记蓬勃发展,成为史部文献的一种重要类型。其中记述安徽地区的六朝地记,可考知者有八种,皆已散佚,前人辑佚多不完整。对这些地记的作者、成书年代、亡佚时间进行考证,可以厘清一些流传条目的真伪。受六朝时期尚文风气的影响,这些地记具有较浓重的文学性。古代安徽的六朝地记,为我们了解该地区历史、地理等情况提供了第一手材料,具有重要的史料价值。

猪毛尾线虫的检测及其ITS序列分析

毛尾线虫俗称鞭虫,为肠道常见寄生线虫,可感染人和多种动物。2015年11月,江西某猪场育肥猪出现腹泻症状,粪便带黏液和血液,部分病猪死亡;剖检发现猪肠道内充满了线状虫体;依据发病猪症状和虫体、虫卵的分析,初步确定该病为猪毛尾线虫病。采用通用引物扩增分离线虫的基因组内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS),结果显示分离虫体的ITS序列与猪毛尾线虫ITS序列的核苷酸同源性高达99.8%,从基因水平进一步证实了该病原为猪毛尾线虫;系统进化分析表明其与18条来自不同地区毛尾线虫的ITS序列相似性均>93.5%,其中,与湖南益阳地区的猪毛尾线虫(AM993005)亲缘关系最近。试验结果为建立猪毛尾线虫的分子生物学诊断方法奠定了基础。

猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的建立与应用

为了解中国猪群中猪诺如病毒感染情况,本研究根据猪诺如病毒保守的RNA依赖性RNA多聚酶(RNA Dependent RNA Polymerase,RDRP)基因序列设计了一套巢式RT-PCR引物,用该引物从猪粪便样品中扩增出与预期目的产物大小一致的条带,经克隆、测序后获得的序列与GenB ank数据库序列比对,证明所扩增的序列属于猪诺如病毒,表明本研究成功建立了猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法。该检测方法具有高特异性和敏感性,应用该方法检测某猪场健康育肥猪粪便样品,阳性率为54.5%。通过RDRP基因进行核苷酸同源比对发现本文获得的猪诺如病毒Wuning 1株属于GII群诺如病毒,与美国猪诺如病毒毒株OH-QW101/03/US、中国猪诺如病毒毒株Norovirus pig/GII/Ch6/China/2009核苷酸序列同源性最近。值得注意的是猪诺如病毒Wuning1毒株与武汉人诺如病毒毒株E2120/CHN/2010核苷酸同源性高达77.1%,说明猪诺如病毒Wuning 1毒株与武汉人诺如病毒基因组上亲缘性较近。本研究成功建立了一种检测猪诺如病毒的巢式RT-PCR方法,并应用于临床猪粪便样品的检测,为猪诺如病毒的诊断与监测提供了可供借鉴的方法、为猪诺如病毒的进化、分子病毒学及与人诺如病毒关系的深入研究提供依据。