高效电转化率条件的探索

对影响 DNA电转化效率的主要因素进行探索 .结果表明 :在相同的电场强度、电阻和电容条件下 ,电脉冲时间的长短对电转化效率有较大影响 ,电脉冲时间太长或太短均使转化效率降低 ;用对数生长早中期的细菌制备感受态细胞 ,经液氮速冻后储存于 - 70℃ ,能获得高转化效率 .

人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选

目的 构建人丙型肝炎病毒 (HCV)特异性噬菌体抗体库 ,制备人源抗HCV单克隆抗体 (mAb)。方法 用常规RT PCR法 ,直接从 5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中 ,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因 ,与噬菌体载体pComb3连接 ,构建噬菌体抗体Fab库。对抗体库进行 5轮吸附 -洗脱 -扩增的亲和选择后 ,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体。结果 RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因 ,并以此构建成容量为 1 2× 10 7的噬菌体抗体库。经 5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集 ,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达 96 %。结论 抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备 ,为HCV感染的诊断。

荧光探针杂交-聚合酶链反应检测沙门菌的研究及应用

目的 建立一种快速检测沙门菌的荧光探针杂交 聚合酶链反应 (PCR)方法。方法 利用TaqDNA聚合酶的 5’ 3’核酸外切酶活性降解特异性杂交于模板上的荧光标记探针 ,导致荧光强度的改变 ,通过检测荧光强度分析PCR扩增产物。结果 选用 13株常见致病性沙门菌和 7株非沙门菌进行特异性分析 ,所有沙门菌的荧光△RQ值介于 3～ 8之间 ,而所有非沙门菌的荧光△RQ值均小于 1;在敏感性分析中 ,采用菌落CFU计数法 ,最低限度可检测到每PCR扩增体系中含 2 .2 5CFU的沙门菌 ;与传统细菌培养鉴定方法对照 ,对 4 0份各种标本进行沙门菌的检测 ,结果该方法的特异性为 10 0 % ,敏感性为 93.1% ,两种方法的符合率为 95 %。结论 用荧光探针杂交 PCR检测沙门菌 ,是一种快速。

国内外课堂教学行为研究之比较

课堂教学行为的研究,内容主要集中在教师行为和师生互动行为上,方法以“过程———结果法”尤为盛行,但也表现出对象理解的片面、方法使用的不恰当等问题。与此相应,课堂教学行为研究必然走向:对课堂教学行为认识的澄清,现实基础上的课堂教学行为改造、研究方法的多元化等。

KIR及其HLA配体基因多态性与人类肿瘤的相关性

天然杀伤(NK)细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)及人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配体的多态性与感染性疾病、自身免疫病、生殖系统疾病和肿瘤等多种疾病的发生相关。本文重点介绍KIR及其配体HLA基因与白血病、黑色素瘤、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌等肿瘤的相关性研究进展,以及该领域新发现的意义、研究中存在的问题和今后研究方向的展望。

PCR扩增人外周血淋巴细胞抗体基因的探讨

采用ＲＴ－ＰＣＲ法，以一组人抗体重链和轻链简并引物，直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Ｆｄ和κ轻链基因．结果提示：用Ｔｒｉｚｏｌ试剂提取细胞总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇ（ｄＴ）引导合成ｃＤＮＡ第一链，再经ＰＣＲ扩增的方法，是值得优先采用的方法．细胞总ＲＮＡ的提取不必追求高纯度，少量外周血即足以满足构建抗体库所需，简并引物可获得良好的扩增效果。

轮状病毒RNA基因图谱变异分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对轮状病毒(RV)标准株进行RNA基因图谱分析,发现人轮状病毒(HRV)Wa株在MA104细胞上连续传5代后,其RNA基因图谱由原来的4:2:3:2模式变为4:3:3:2模式。继续分别在CV-1、MA104细胞上传代后,基因图谱进一步演变为4:3:4:2模式。经比较电泳、病毒空斑纯化,初步证实RVWa有变异林存在。目前尚未见RV标准株变异的报告,有待进一步研究。同时对多个RV标准株及1939年南京市区婴幼儿秋季腹泻的RV流行株进行基因图谱分析,发现不同的人RV及牛RV标准株有相同的基因图谱;不同实验室来源的同一标准株有不同的基因图谱。此外,尚证实HRV是1989年南京市区婴幼儿秋季腹泻的主要病源,总检出率45.1％,电泳长型为流行优势株89.2％。本文尚对RV RNA基因图谱变异的原因及意义进行了讨论。

教学行为研究的教学论意义

教学行为研究是教学研究的微观研究,它是对教学中师生的行为进行的具体深入的研究,其目的是要通过探究师生教学行为的规律来提高教学行为的效率。它从属于教学论,又是对教学论的具体和深入,对加强教学理论与实践的联系、教学主体性的张扬和教学评价的客观性有着重要的意义。

探究性教学的应然走向

探究性学习作为一种学习方式有着与众不同的实践价值取向;主体作用重儿童的自主性,学习过程重学生在生活世界的过程体验和感悟,学习结果既重知识的获得又重精神的培养。探究性教学是基于探究性学习方式的教学,与此相应,探究性教学理应走向:知识获得同时的科学技能掌握、科学精神和情感培养的教学目的,教学生活化的过程取向,多维的评价方式。

社会因素对心理健康的影响研究进展

国内外有关民族、文化、生活环境、社会支持、社会阶层、经济收入不均、社会资本等社会因素对心理健康影响的相关研究表明这些社会因素都与心理健康之间有明显关联,不同的社会因素对心理健康的影响程度各不相同。有关社区环境因素与心理健康之间的关系正成为国外社会流行病学的研究热点,国内这方面研究较少,值得深入探索。

辅助噬菌体扩增与定量条件的研究

对辅助噬菌体扩增、定量及保存条件进行研究。结果显示：分区划线接种辅助噬菌体可获得分隔良好的噬斑；大肠杆菌ＸＬ１－ｂｌｕｅ易发生变异，单个菌落接种于１０ｍｌＳＢ培养基，经３７℃１７０ｒ·ｍｉｎ１振荡培养４～７ｈ之间的细菌，应通过微量菌斑形成实验鉴定敏感性后，再用于测定辅助噬菌体滴度，均可形成分隔良好的噬斑，不必精确测定细菌ＯＤ６００值，该菌液４℃储存可使用１星期不影响结果。辅助噬菌体应保存于－２０℃。

5’-非编码区型特异性引物检测HCV基因型

我们探索建立一种 HCV基因分型方法 ,用 5’非编码区 (5’NCR) 1,2 ,3,1b型特异性引物 ,应用逆转录套式 PCR,对 HCV RNA阳性血清进行分型。对 6 5份 HCV RNA阳性血清的分型率为 90 .8% (5 9/6 5 )。 5 9例中混合感染 7例 ,1型 5 0例 ,其中 1b亚型 46例 ;3型 2例。从而认为 :所用的型特异性引物可成功地对 HCV基因分型 ,分型结果证实南京市 HCV流行优势株为 1b亚型。

多元社会中教学研究的新视点

当今世界是一个全球化的时代 ,全球化必然导致一系列新的理念的产生。理解、尊重、民主、合作、开放、个性化等一连串的问题成为人们走向未来的思路 ,成为一种多元的时代精神。当这种时代精神具体地渗透到教学及其研究领域的时候 。

强化课堂教学言语效力 提高课堂教学质量

课堂教学话语形式是课堂教学言语的一个重要组成要素，它作为对课堂教学言语行为结果的完成和实现，可从相对静态的角度反映出课堂教学言语的基本情况。因此，在协调课堂教学话语形式的基本成分（即口语、书面语、身势语）之间的配合的基础上，应加强课堂教学话语形式与课堂教学言语行为之间的协调，并以社会学、心理学、美学、系统论等为基础进行多方调控，以利于充分发挥课堂教学言语的综合效益。

试析民族地区基础教育教学质量观——基于对阿坝州中小学校的考察与反思

少数民族地区基础教育质量有其特定的内涵。本文在对阿坝州中小学校的考察与反思中,明确了四川民族地区教学质量观的特征:文化性、适应性和功利性;思考了四川民族地区实现其基础教育教学质量观的问题:转变观念、改变投入方式、加强教师建设、课程与地方文化结合。

应用PCR从丙型肝炎患者外周血B淋巴细胞扩增抗体基因

用常规RT PCR法 ,以 1组人抗体重链和轻链简并引物 ,直接从 5名丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd基因和κ轻链基因。结果提示 ,用Trizol试剂提取细胞总RNA ,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链 ,再经PCR扩增的方法 ,是值得优先采用的方法。细胞总RNA的提取不必追求高纯度 ,少量外周血即足以满足构建抗体库所需 ,简并引物可获得良好的扩增效果 。

艰难梭菌荚膜抗吞噬作用的观察

观察了毒力菌株和无毒菌株在小鼠体内的抗吞噬表现，以探讨该菌荚膜的局部侵袭作用。实验显示毒力菌株ＶＰＩ１０４６３有明显的抗吞噬作用，而无毒菌株Ａ３１８和ＣＤＣ２７９无此能力，对实验中发现的两种吞噬方式作了讨论。

民族地区基础教育教学质量观——基于对阿坝州中小学的考察与反思

有人把西部文化的根本特色概括为：恬淡平和，易于满足；刻苦耐劳，质朴淳厚；不求发展、不求创新；封闭自足，留恋故土；亲近自然，拥抱人道。并且认为，从根本上说这是一种“优秀文化”，在西部大开发中，应该注意“保留”和“维护”自己这种很有“特色”的文化。

教育研究个性探

教育研究是对教育的研究 ,教育研究的个性是由教育的个性决定的 ,教育具有关系的主体性、内容的文化融通性、过程的多样复杂性和结果的完美创造性 ,相应的教育研究也从其个性化的问题和个性化的追求方面凸显出其个性品质 :教育研究问题来源的多样性、问题存在的主观性、研究结果的指导性、研究追求的执着性。

树状DNA杂交技术在HCV检测中的应用

目的 建立一种敏感性、特异性、重复性较好的 ,适于病原体群体筛查的检验方法。方法 通过RT PCR DDH ,RT nested PCR和HCVRNA DDH 3种方法检测HCV核酸 ,推断RT PCR DDH技术检测病毒核酸的特异性、敏感性和稳定性。结果 4 7份ELISA检测HCV抗体阳性血清标本 ,RT nested PCR检出阳性标本 33例 (70 .2 1% ) ,RT PCR DDH检出阳性标本 39例 (82 .98% )。结论 RT PCR DDH技术在逆转录病毒核酸检测的应用中具有较好的特异性、敏感性和稳定性 ,而且成本较低 ,操作安全简便 。