Surfactin的结构、生物合成及其在生物防治中的作用

Surfactin是由多种芽孢杆菌产生的一种脂肽,其由一个环七肽头基通过内脂键与链长12-17个碳原子的β-羟基脂肪酸连接组成,是一种非常有效的生物表面活性剂,并具有重要的生物学功能。本文介绍了surfactin家族的结构和生物合成模式,surfactin是由非核糖体肽合成酶催化合成,这种机制赋予了surfactin家族成员的结构多样性;综述了surfactin在植物病害生防中的作用及机制。已有的研究表明surfactin在生物防治中的作用机制主要有以下4种方式:(1)损伤病原菌细胞膜,引起细胞膜裂解或渗透压失衡;(2)抑制病原体繁殖;(3)诱导植株系统抗性;(4)促进生防菌株的定殖或生物膜的形成。进一步总结了利用基因工程技术研究surfactin的最新进展,以指导surfactin的生物合成及其新衍生物开发。Surfactin的高度结构多样性,使其具有丰富的物理化学特性,这些特性可以与多种生物活性联系在一起,将在不同的领域有更广泛应用。随着对surfactin生物合成研究的日益深入,将会有更多高性能和广阔应用前景的新型脂肽被研发,这为surfactin的进一步研究和生防应用提供依据。

二甲基亚砜辅助分离酵母细胞壁中β-葡聚糖的工艺探索

酵母β-葡聚糖(yeastβ-glucan)是一种难溶于水、酸、碱等常用溶剂的多糖,因传统的制备工艺复杂、烦琐且产品产量低或纯度不高,导致其产业化困难。作者用碱法结合二甲基亚砜(DMSO)辅助分离对酵母β-葡聚糖的生产制备工艺进行了探索和优化。结果显示:在0.7 g/dL NaOH中80℃处理2.6 h进行碱法除杂,除杂率最大为71.84%;在料液比为30 mg∶1 mL、体积分数80%的DMSO、80℃下分离纯化β-葡聚糖30 min,得到的β-葡聚糖产品纯度达到95.84%。通过薄层色谱和傅里叶红外光谱对产品进行鉴定,表明此产品是由葡萄糖单体聚合而成,呈β构型;抗炎试验表明,此产品具有一定的生物活性。该研究旨在简化生产工艺、扩大生产规模、提高产品质量,以期为工业化生产提供依据。

基于药效团模型的PPAR激动剂的筛选及活性研究

目的筛选具有PPARδ激动活性的化合物。方法通过构建PPARδ药效团模型对Top Science数据库中的780万个小分子进行筛选,并采用对接分析通过化合物与受体之间的结合作用模式及其靶点选择性进行筛选;通过分子动力学模拟的方法,确定苗头化合物,进而通过体外活性实验获得PPARδ激动剂。结果通过计算机虚拟筛选获得了24个潜在PPARδ激动剂,分子对接结果表明,化合物3、5、9为潜在的PPARδ选择性激动剂。体外激动活性实验表明化合物3、5、9具有一定的PPARδ激动活性。结论与化合物3、5相比,化合物9拥有更强的体外激动活性(EC_(50)=17.66μmol·L^(-1)),后续可进行结构迭代优化,为进一步开发PPARδ激动剂奠定了基础。

定点突变提高细胞色素P450 BM-3吲哚羟基化能力

为进一步提高细胞色素P450BM-3(A74G/F87V/L188Q)对吲哚的羟基化能力,根据酶结构与功能的关系,以突变酶E435T为基础,在168位点引入D168L突变,获得了吲哚羟基化能力得到显著提高的突变酶D168L/E435T。突变酶对吲哚的Km为1.72 mol·L-1(父本2.09 mol·L-1),转化数(kcat)为28.15min-1(父本4.04min-1),表明D168L定点突变可以略微提高酶对底物的亲和力,但主要的效应是促进了底物的转化速率,这两个效应的综合表现是使酶的催化效率(kcatKm-1)比父本酶提高了8.48倍。此外,产物中副产物靛玉红的比例也降低为1.2%(父本7.3%),这说明该突变酶催化吲哚的区域选择性上也更有利于靛蓝的生成。

初中生物教学中的职业理想教育研究

职业理想教育是一种帮助学生选择未来职业的教育过程,青少年时期是职业教育开展的最佳时期。处于青春期的初中生有着朦胧的人生理想,对其进行职业理想教育有助于促进学生掌握相应知识技能,并启蒙职业生涯规划。然而此时的初中生,其人生观和世界观还不够成熟,尚难以正确处理理想与现实的关系,所以,教师对初中学生职业理想的正确引导就显得尤为重要。

TTC-CaCO_3复合平板法快速筛选丙酮酸高产菌株

设计出一种用于快速筛选丙酮酸高产菌株的方法。这是一种理性化筛选方法。其原理是菌落产生的丙酮酸与碳酸钙反应形成可溶性的丙酮酸钙而出现透明圈,比较透明圈直径可以直观的选择出产酸较多的菌株;TTC与ADH作用而显色,颜色的深浅与ADH活性呈正比,这样可监测丙酮酸向乙醇的转化,筛选出低转化率的菌株。通过此方法,筛选出产酸多、ADH酶活力弱、发酵副产物少的目的菌株。

高效液相色谱法研究怀山药啤酒中的山药素类成分

建立一种有效的高效液相色谱方法,以期对怀山药啤酒中的山药素类成分进行分析.测定方法为:色谱柱为Cosmosil 5C_(18)-PAQ型(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(体积比60∶40),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为274nm,柱温30℃.在选定的色谱条件下,最终得到了稳定、效果较好的怀山药啤酒的液相色谱图,并检测到怀山药啤酒中含有山药素Ⅰ衍生物成分,其平均回收率为87.71%.

一个有利于细胞色素P450BM-3催化吲哚合成靛蓝的三位点突变酶:D168L/E435T/V445A

为进一步提高P450 BM-3催化吲哚合成靛蓝的能力,在前期获得的突变酶D168L/E435T基础上引入V445A突变,获得突变酶D168L/E435T/V445A,该突变酶与D168L/E435T及V445A相比,对吲哚的亲和力分别降低41.5%及35.8%,转化数(kcat)分别提高1.61倍及1.31倍,催化效率(kcatKm-1)分别提高1.53倍及1.47倍;该突变酶对电子的耦合率也提高至24.7%,较D168L/E435T提高39.5%,较V445A提高64.7%,说明该突变酶在电子的利用率上有明显改善;此外,该突变酶催化副产物靛玉红的比例大幅降低,降低为D168L/E435T的41.7%及V445A的30.6%,说明该突变酶催化吲哚的区域选择性上也更加有利于靛蓝形成。

乳糖诱导剂促进P450 BM-3在大肠杆菌中可溶性表达的研究

P450 BM-3是一种具有工业化应用潜力的单加氧酶,可催化饱和脂肪酸羟基化。为提高其在大肠杆菌宿主中的可溶性表达水平,采用乳糖作为诱导剂对P450 BM-3的诱导表达条件进行研究。结果发现：在大肠杆菌的OD600达到0.7~1.5时,添加2.0 g/L的乳糖、30℃诱导10 h可获得最佳诱导效果。与IPTG的诱导效果对比发现：采用乳糖作诱导剂时,菌体生物量提高1.09倍,目标蛋白量提升2.13倍,蛋白包涵体的比例则降低至10%。研究结果表明：乳糖可显著提升P450BM-3在大肠杆菌中的重组表达水平,并且能够促进p450 BM-3的可溶性表达。

啤酒酵母来源甘露聚糖的环境友好型提取工艺研究

采用酵母自溶-热水浸提法提取酵母细胞壁中的甘露聚糖,确定了酵母自溶工艺条件为:3%NaCl、pH 5.5、50℃下自溶处理24 h;自溶因素的重要性次序为:NaCl浓度>自溶液pH>自溶温度.确定了酵母细胞壁甘露聚糖的热水浸提的条件,即:热水温度90℃,浸提8 h.最终浸提液中甘露聚糖浓度可达到52.1 mg/L.以废啤酒酵母为原料制备甘露聚糖可减少环境污染,并提高产品附加值,增加企业收益,取得良好的经济效益.

微生物菌种选育技术的发展与研究进展

微生物育种是运用遗传学原理和技术对某种具有特定生产目的的菌株进行改造,以提高产品的产量和质量。本文介绍了微生物育种技术的发展历程及应用概况。

TTC在黄酒酵母选育中的应用

TTC在筛选发酵能力强的酵母的同时也能对酵母起着纯化和复壮的作用 ,本实验用TTC显色剂筛选得到一株产酒精能力较强的酵母LJ2 # ,同原始菌相比 ,它细胞大小均一 ,形状规则 ,生长速度快 ,在同样的发酵条件下 ,它的发酵速度快 ,对原料的利用率高 ,产酒精能力强 ,但其代谢途径并没有改变 。

心电图对急性下壁心肌梗死患者梗死相关血管判断的价值

目的探讨心电图(ECG)对急性下壁心肌梗死患者梗死相关血管(IRA)判断的价值。方法筛选2002年7月～2004年7月我院心内科住院的急性下壁心肌梗死患者60例,回顾性分析其症状发作后24小时内ECG改变。结果Ⅰ导联ST段抬高,ST段抬高Ⅲ导联>Ⅱ导联,导联V4RST段抬高≥0.5mm,V1和V2导联ST段抬高或压低,aVR导联ST段压低。5项标准可用于判断急性下壁心肌梗死患者的IRA,而aVR导联ST段压低为一项新的标准。结论aVR导联ST段压低为判断急性下壁心肌梗死患者梗死相关血管(IRA)的新标准。

碳纳米管修饰电极差示脉冲阳极溶出伏安法测定腺嘌呤

在HAc NaAc缓冲溶液中,玻碳电极上修饰的少量碳纳米管对腺嘌呤的氧化起增强作用.研究了腺嘌呤在修饰电极上的伏安行为,优化了电氧化的最佳条件,并对其进行含量测定.方法的线性范围为2.0×10-8～1.0×10-5mol/L,检出限为1.0×10-9mol/L.用于模拟样品中痕量腺嘌呤的测定,结果满意.

西瓜啤酒制作工艺的研究

以西瓜汁和大麦芽为主要原料,采用啤酒独特的低温发酵工艺酿制西瓜啤酒。通过单因素试验和响应面分析试验,以感官评分为评价标准,结合理化指标研究了西瓜汁添加量、西瓜汁添加时间和原麦汁浓度对西瓜啤酒品质的影响。确定了西瓜啤酒的最佳发酵工艺条件为:西瓜汁添加量14.0%,在发酵的第4.5天添加西瓜汁,原麦汁浓度11.2°P。在此条件下,进行了400 L发酵罐的验证试验,获得了一种具有西瓜清爽口感和啤酒典型口感的西瓜果味啤酒。

枯草芽孢杆菌B_(1-41)对小麦纹枯病菌的抑制作用

从小麦根际土壤分离得到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1-41拮抗菌株,室内测定其带菌培养液对小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)抑制效果为72%,盆栽试验中,其防治效果为60.3%,高于井冈霉素处理的51%的效果。试验表明,该菌株可以造成病菌菌丝发生畸变和菌丝细胞壁瓦解。

传统发酵江米甜酒中风味香气成分的组成分

以江米为原料 ,采用民间传统甜酒曲作为发酵剂制备江米甜酒。采用热脱附%D气相色谱 /质谱仪(TCT -GC/MS)测定其挥发性香气成分的组成。结果表明 :在江米甜酒中共检测出挥发性香气成分 5 2种 ,在这些化合物中 ,醇和酯是两类主要的香气组分 ,其中酯的种类最多 ,共 17种 ,占总数的 33% ;其次是醇 ,共 11种 ,占总数的 2 1%。其中含量排在前 10位的成分依次是 :异丁醇、2 -甲基丁酸、棕榈酸、乙醇、丙醇、乙酸乙酯、乳酸、11-十六烯酸、肉豆蔻酸和甲酸乙烯酯 ,占总数的 75 % 。

GC-MS法分析西瓜精酿啤酒中的风味物质

为了研究分析西瓜精酿啤酒中的风味物质,采用静态-顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法,对西瓜精酿啤酒及普通精酿啤酒中的风味物质进行了对比分析。结果表明,从西瓜精酿啤酒中共分离出48种物质,确定了其中的36种物质;从普通精酿啤酒中共分离出42种物质,确定了其中的41种物质。与普通精酿啤酒确定风味成分相比,己酸乙酯、癸醛、可卡醛、壬酸乙酯、癸酸乙酯等11种物质仅在西瓜精酿啤酒中检出,这些成分赋予了西瓜精酿啤酒独有风味。

柴油降解细菌的分离及其降解能力初探

从含油土壤中,筛选出能以0#柴油为惟一碳源的2株柴油降解菌,经鉴定分别为假单胞菌(Pseudomonoussp.)和芽孢杆菌(Bacillussp.)。通过其降解能力的测试,假单胞杆菌属细菌A8的降解能力较强;在含油浓度ρ=10g/L的摇瓶试验中,培养7d后其除油率分别为18%和31%。在含油浓度1%的土壤中,2株菌均能正常生长和繁殖,接种30d除油率分别为35%和48.3%。

西瓜酒发酵工艺的研究

以西瓜汁为原料,通过对固定化酵母和游离酵母发酵方法的对比实验,结果表明,在7d的发酵时间内,前者在发酵速度、酒精度、口感等方面优于后者。通过正交实验,固定化酵母发酵的最优条件是:初始糖度25%、温度20℃、pH5。在此条件下,可酿出酒精度13.8%Vol,具有西瓜果香和酒的醇香的干白西瓜酒。